1、四糖尿病的生物化学检四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖测测定血液中的葡萄糖含量测定含量测定2022-10-19四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定1.1.无机化学法:无机化学法:所用试剂均为无机化学试剂所用试剂均为无机化学试剂氧化亚铜法(又称氧化亚铜法(又称Folin-WuFolin-Wu法)法)原理原理 葡萄糖葡萄糖+还原碱性铜盐(还原碱性铜盐(CuCu)CuO+CuO+磷钼酸磷钼酸 钼蓝钼蓝 四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定铁氰化钾法铁氰化钾法 操作简便试剂易得,费用低操作简便试剂易得,费用低 特异性差特异性差 谷胱甘肽谷胱甘肽 葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸 尿酸
2、尿酸 VitC VitC 已淘汰。已淘汰。四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定2.2.有机化学方法:有机化学方法:利用糖的羰基与有机试剂反应测糖。利用糖的羰基与有机试剂反应测糖。HultmenHultmen使用邻甲苯胺试剂(使用邻甲苯胺试剂(OtoluidineOtoluidine,O-TO-T)测定血糖。)测定血糖。原理原理 血清血清 +冰醋酸冰醋酸 +邻甲苯胺邻甲苯胺 (葡糖糖)(葡糖糖)5 5羟甲基羟甲基2 2呋喃甲醛呋喃甲醛+邻甲苯胺邻甲苯胺 蓝色的醛亚胺(蓝色的醛亚胺(SchiffSchiff碱)碱)四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定3.3.生物化学法:生物
3、化学法:主要是酶法主要是酶法葡萄糖氧化酶法(葡萄糖氧化酶法(Glucose OxidaseGlucose Oxidase,GODGOD)原理原理 葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶葡萄糖葡萄糖 葡萄糖酸葡萄糖酸+过氧化氢过氧化氢H H2 2O O2 2+4-+4-氨基安替比林氨基安替比林+酚酚 O O2 2+有色化合物有色化合物 其颜色深浅同血糖浓度呈正比。其颜色深浅同血糖浓度呈正比。四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定葡萄糖氧化酶法特点:葡萄糖氧化酶法特点:操作简便,特异性较高操作简便,特异性较高 推荐方法推荐方法 溶血(胆色素溶血(胆色素0.34mol/L0.34mol/L)VitC 5
4、mg/L VitC 5mg/L以上以上 左旋多巴(左旋多巴(0.5mol/L0.5mol/L)谷胱苷肽谷胱苷肽 100mg/L 100mg/L本法本法第一步是特异反应第一步是特异反应,第二步特异性差第二步特异性差,误差往往发生在反应的第二步。误差往往发生在反应的第二步。四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定葡萄糖葡萄糖+ATP G6P +ADP+ATP G6P +ADP G6P+NADP 6-G6P+NADP 6-磷酸葡萄糖酸磷酸葡萄糖酸+NADPHNADPH NADPH NADPH的生成速率与葡萄糖浓度成正比,的生成速率与葡萄糖浓度成正比,在波长在波长340nm340nm监测吸光度
5、升高速率,计算血监测吸光度升高速率,计算血清中葡萄糖浓度。清中葡萄糖浓度。四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定 己糖激酶法的特点己糖激酶法的特点 参考方法参考方法 试剂盒贵试剂盒贵 轻度溶血轻度溶血 脂血、黄疸、脂血、黄疸、VitC VitC NaF NaF、肝素、肝素、EDTAEDTA、草酸盐、草酸盐 但从红细胞中释放出来的有机磷酸酯但从红细胞中释放出来的有机磷酸酯和一些酶能消耗和一些酶能消耗NADPNADP,有干扰。,有干扰。葡萄糖脱氢酶法葡萄糖脱氢酶法四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定(二)(二)测定尿中葡萄糖测定尿中葡萄糖 临床初判断作为过筛临床初判断作为过筛
6、 正常人正常人2424小时尿糖小时尿糖 0.5g 0.5g 尿糖试验尿糖试验 ()1.1.班氏试剂:班氏试剂:CuSOCuSO4 4 GluGlu Cu Cu砖红色砖红色2.2.尿尿10A10A:干酶试剂、折光仪比色:干酶试剂、折光仪比色四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定(三)(三)口服葡萄糖耐量试验口服葡萄糖耐量试验(Oral (Oral glucose tolerance test ,OGTTglucose tolerance test ,OGTT)一种葡萄糖负荷试验,了解机体对葡萄一种葡萄糖负荷试验,了解机体对葡萄糖的调节作用。糖的调节作用。空腹血糖浓度空腹血糖浓度6 67
7、mmol/L7mmol/L,+OGTT+OGTT OGTT OGTT 试验前准备:试验前准备:a a 试验前三天,每日食物中糖试验前三天,每日食物中糖 150g150g b b 影响试验药物停用影响试验药物停用3d3d c c 试验前病人试验前病人101016h16h未进食未进食 d d 坐位取血坐位取血5min5min后饮后饮250ml250ml含含75g75g无水葡无水葡 萄糖水,以后每隔萄糖水,以后每隔30min30min取血一次,共取血一次,共 四次,历时四次,历时2h2h。四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定1.1.正常糖耐
8、量正常糖耐量(1 1)空腹静脉血浆葡萄糖)空腹静脉血浆葡萄糖6mmol/L7.8mmol/L7.8mmol/L 峰值超过峰值超过10mmol/L10mmol/L并出现糖尿并出现糖尿 延迟(延迟(2 2小时后)回复到空腹水平小时后)回复到空腹水平 判断指标是服葡萄糖后判断指标是服葡萄糖后2 2小时的血浆葡小时的血浆葡萄糖值增高。萄糖值增高。四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定3.3.糖耐量受损糖耐量受损 轻度耐量能力下降轻度耐量能力下降(1 1)空腹血浆葡萄糖)空腹血浆葡萄糖7.8mmol/L7.8mmol/L(2 2)口服葡萄糖后)口服葡萄糖后3030、6060、90min90min的血浆的血浆 葡萄糖葡萄糖 11mmol/L11mmol/L(3 3)2h2h值在值在8 811mmol/L11mmol/L 称为亚临床或无症状的糖尿病称为亚临床或无症状的糖尿病 1/31/3恢复正常恢复正常 1/31/3仍为糖耐量受损仍为糖耐量受损 1/31/3明确糖尿病明确糖尿病四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定2022-10-19四糖尿病的生物化学检测测定血液中的葡萄糖含量测定