1、主要内容n自身抗体的概念n自身抗体的分类n自身抗体的命名n自身抗体的检测方法n常见的自身抗体自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/20221自身抗体的概念n各种原因造成的机体B细胞产生的针对自身组织成分的抗体，称为自身抗体（autoantibodies）。n自身抗体可以是生理性的，如针对衰老或死亡的自体细胞，机体产生少量的自身抗体，以便被脾、肝及单核吞噬细胞系统的巨噬细胞吞噬，维持机体内环境的生理稳定；n自身抗体也可以是病理性的，引起自身免疫病。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/20222自身抗体的分类n按照自身抗原在体内分布的不同可分为：n器官/组织特异性自身抗体n非器官/组织特
2、异性自身抗体n按照检测自身抗体所用的基质不同可分为：细胞抗体（以游离的细胞为实验基质）o细胞非特异性自身抗体，如抗核抗体o细胞特异性自身抗体，如ANCA、抗血小板抗体、抗红细胞抗体组织抗体（以动物组织切片为实验基质）自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/20223自身抗体的命名n以首先被检测到该抗体的患者名字的缩写命名：如抗Sm、抗Ro、抗La抗体n以相关疾病的名字的缩写命名：如抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B抗体n以抗原的化学性质进行分类命名：如抗DNA、抗RNP抗体n以抗原的部位进行命名：如抗板层素抗体、抗核膜抗体。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/20224自身抗体的检
3、测方法n对流免疫电泳、免疫双扩散n免疫荧光检测法n免疫印记法n酶联免疫吸附检测法（ELISA）n放射性核素法n酶免疫斑点技术n免疫沉淀法自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/20225抗核抗体(ANA)抗dsDNA抗体抗dsDNA抗体抗Sm抗体抗RNP抗体抗SSA抗体抗SSB抗体间接免疫荧光方法金标法免疫双扩散法ANA(anti-nuclear antibodies)自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/20226抗Sm抗体抗RNP抗体抗SSA抗体抗SS B抗体抗Scl-70抗体抗Jo-1 抗体抗核糖体抗体免疫印记法 ENA(extractable nuclear antigen)自身
4、抗体的实验室检测和临床意义10/20/20227抗核抗体(ANA)抗平滑肌抗体(SMA)抗线粒体抗体(AMA)间接免疫荧光法 自身抗体自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/20228病人血清(一抗)玻片二抗荧光抗体荧光显微镜下阅片ANAHep-2细胞dsDAN抗体短膜虫SMA大鼠胃组织AMA大鼠肾组织间接免疫荧光法底物自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/20229病人血清金标记的抗体dsDNA抗原阴性阳性金标法自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202210抗原1:41:161:321:64病人血清标准抗体免疫双扩散琼脂板自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202211不
5、同分子量的抗原病人血清酶标抗体显色剂判断结果免疫印记法自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202212抗Sm抗体13.5,28,29KD抗RNP抗体22,32,70KD抗SSA抗体52KD抗SS B抗体45,47KD抗Scl-70抗体68-70KD抗Jo-1 抗体55KD抗核糖体抗体15,16.5,38KD自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202213间接免疫荧光法n细胞核阳性n核仁阳性n细胞浆阳性n分裂期细胞阳性自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202214细胞核阳性n细胞核均质型（Homogeneous）：抗dsDNA、组蛋白抗体、核小体抗体n细胞核周边型（Membr
6、anous）：板层素抗体n细胞核颗粒型（Speckled）：n粗颗粒：抗Sm、RNP抗体n细颗粒：抗SSA、SSB抗体自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202215抗dsDNA抗体荧光模式：绿蝇短膜虫：动基体均质的或边缘亮度增强的荧光。Hep-2细胞：细胞核的均质型荧光。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202216抗dsDNA抗体n自身抗原：位于DNA脱氧核糖磷酸框架上。n临床意义：对系统性红斑狼疮（SLE）特异性高。抗体滴度与疾病活动性存在相关性，因此抗体滴度的检测可为监控治疗提供有用的依据。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202217抗RNP/Sm抗体荧光模式：
7、Hep-2片：细胞核粗颗粒，核仁阴性。肝组织切片：同上。荧光法不能区分抗RNP和抗体Sm。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202218抗RNP/Sm抗体n自身抗原：抗原RNP和Sm属于一组小核糖核蛋白（snRNP），由低分子量的RNA和多种蛋白质组成，RNA中尿苷（U-RNA）含量较高。n临床意义：高滴度的抗RNP抗体为 混合结缔组织病（MCTD）的特征，发生率为95100%。也可出现于SLE，但总是与抗Sm抗体同时出现。抗Sm抗体对SLE具有高度特异性，发生率为2040%。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202219抗SSASSB抗体荧光模式Hep-2片：细胞核呈细颗粒荧
8、光，核仁不发光。肝组织片：细颗粒荧光。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202220抗SSASSB抗体n自身抗原：SSA抗原是一个小核糖核蛋白，由一个RNA分子和两种不同的蛋白质组成。蛋白质的分子量为52KD和60KD。抗体直接针对蛋白质的抗原决定簇。SSB抗原是分子量为48kD的磷酸化蛋白。n临床意义；最常见于干燥综合征（SS）,也见于SLE、原发性胆汁性肝硬化（PBC），偶见于慢活肝。抗SSA抗体在新生儿红斑狼疮的发生率几乎为100%。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202221核仁阳性(Nucleolar)n核仁荧光增强，核浆均质型-Scl-70抗体。n核仁均质型-PM
9、-Scl及其他抗原抗体。n核仁细颗粒型-原纤维蛋白抗体。n核仁粗颗粒型-RNA多聚酶-1抗体。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202222抗Scl-70抗体荧光模式：Hep-2片：细胞核几乎均质的荧光，核仁荧光加强而且也为均质型，胞浆无荧光。肝组织片；细胞核颗粒或均质型荧光，常见到细胞核荧光。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202223抗Scl-70抗体n自身抗原：为DNA拓扑异构酶1，分子量为100KD。在DNA双链的复制和转录中起作用。n临床意义：2570%的系统性硬化症（PSS）弥漫型患者阳性，局限型硬皮病患者阴性。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/20222
10、4细胞浆阳性n胞浆均质型-抗核糖体抗体 细颗粒-抗Jo-1抗体 n胞浆颗粒型 粗颗粒-AMA抗体 滴状点状-溶酶体抗体 核周颗粒-高尔基体抗体n胞浆纤维型 细纤维-波形蛋白抗体 环状纤维-原肌球蛋白抗体 针状纤维-肌动蛋白抗体自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202225抗核糖体抗体荧光模式：Hep-2：胞浆细颗粒到均质状、非常致密的荧光。肝组织片：岛状荧光。临床意义：SLE的特异性抗体，与精神症状有关。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202226抗Jo-1抗体荧光模式：Hep-2：胞浆颗粒到细块状荧光。肝组织片：胞浆中弱荧光。自身抗原：组氨酰tRNA合成酶。临床意义：见于P
11、M，发生率2535%。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202227抗线粒体抗体荧光模式：Hep-2：胞浆内粗的颗粒型荧光。大鼠肾组织切片：肾小管明显荧光，肾小球荧光较弱。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202228抗线粒体抗体n自身抗原：位于真核细胞线粒体膜的内面。线粒体自身抗原为2-氧酸脱氢酶复合体的亚单位，为一组自身抗原，其中与PBC有关的包括：n（1）丙酮酸脱氢酶复合体（PDC）n（2）支链2-氧酸脱氢酶复合体（BCOADC）n（3）a-酮戊二酸脱氢酶复合体（OGDC）自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202229抗线粒体抗体n临床意义：AMA-M2对PBC具
12、有诊断意义。nAMA亚型与疾病的相关性：nAMA-1：梅毒、干燥综合征nAMA-2：PBCnAMA-3：药物性红斑狼疮nAMA-4：PBC与AIH重叠nAMA-5：SLE、自身免疫性溶血性贫血nAMA-6：异烟肼引起的药物性肝炎nAMA-7：AIHnAMA-8：AIH、闭塞性血栓性血管炎nAMA-9：药物性肝炎nAMA-10：SLE自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202230分裂期细胞阳性n染色体阳性-染色体相关抗体，相关疾病？n纺锤体纤维阳性-纺锤体纤维抗体，如燕麦细胞型支气管肺癌n中间体阳性-中间体抗体，相关疾病？n细胞两极阳性-中心粒抗体，相关疾病？n着丝点阳性-抗着丝点抗体自
13、身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202231抗着丝点抗体(ACA)荧光模式：Hep-2：细胞核细的、相同大小的颗粒荧光，分裂期颗粒荧光带状位于细胞中间。肝组织片：分布于细胞核的1020个颗粒，荧光弱，易被忽略。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202232抗着丝点抗体n自身抗原：着丝粒中的三种不同的蛋白质：着丝点蛋白A、B、C，主要抗原为着丝点蛋白B。n临床意义：对进行性系统性硬化症亚型（CREST综合征）有诊断意义。阳性率8095%。还可见于PBC、SS等。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202233器官/组织特异性自身抗体n抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）n抗平滑
14、肌抗体n抗角蛋白抗体n抗肝肾微粒体抗体n抗肝细胞膜抗原抗体n抗可溶性肝抗原抗体n抗肝特异性蛋白抗体自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202234抗中性粒细胞胞浆抗体（胞浆型）cANCAn荧光模式：n猴肝：肝血窦区粒细胞强荧光，而肝细胞阴性。甲醛固定的中性粒细胞：胞浆内粗大到细的荧光颗粒。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202235抗中性粒细胞胞浆抗体（胞浆型）n自身抗原：为丝氨酸蛋白酶-蛋白酶3（PR3）。该靶抗原为可溶性蛋白，存在于正常中性粒细胞的嗜苯胺蓝颗粒中。n临床意义：cANCA可见于多种系统性血管炎。主要见于Wengeners肉芽肿，约占ANCA阳性率的8095%。
15、cANCA被认为是活动性Wengeners肉芽肿和微多动脉炎的特异和敏感的标志性抗体。还见于Churg-Strauss综合征。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202236抗中性粒细胞胞浆抗体（核周型）pANCAn荧光模式：n乙醇固定的中性粒细胞：细胞核周围平滑的带状荧光，细胞核阴性。n猴肝：肝血窦区粒细胞强荧光，而肝细胞阴性。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202237抗中性粒细胞胞浆抗体（核周型）n自身抗原：主要抗原为髓过氧化物酶（MPO），其他抗原还有白细胞弹性蛋白酶，组织蛋白酶G、溶菌酶及乳铁蛋白等。n临床意义：见于多种系统性血管炎。可见于Wengeners肉芽肿、微
16、多动脉炎、Churg-Strauss综合征、炎性肠病、自免肝、系统性风湿病（RA、SLE、SS、PM/DM）。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202238抗平滑肌抗体（SMA）荧光模式：大鼠胃组织，呈现肌膜、黏膜肌层和肌膜腺体间收缩纤维的明显细胞浆荧光。大鼠肾组织，肾小管细胞内原纤维、肾小球膜细胞及血管肌层的荧光。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202239抗平滑肌抗体（SMA）n自身抗原：主要的靶抗原为肌动蛋白，肌动蛋白可以单体（G-肌动蛋白）或聚合体（F-肌动蛋白）形式存在于微丝中，F-肌动蛋白自身抗原与自免肝关系密切，而G-肌动蛋白自身抗原则与酒精性肝硬化有关。n临床
17、意义：见于自身免疫性肝炎、PBC、酒精性肝硬化。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202240抗角蛋白抗体（AKA）荧光模式：大鼠食管，仅限于上皮角质层的较强的线性分层的均质荧光。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202241抗角蛋白抗体（AKA）n自身抗原：丝聚蛋白（filaggrin）为AKA的靶抗原。n临床意义：见于RA，阳性率3659%，特异性9599%。还是一个潜在的预后标志，高抗体滴度可能预示着较严重的RA类型。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202242抗肝肾微粒体抗体（LKM）有三种荧光模式：LKM-1：肝细胞胞浆明显荧光，呈细颗粒到均质状，肾脏近近端
18、肾小管有荧光。LKM-2：门静脉周围的肝组织荧光比其他部位强，肾脏近近端肾小管有荧光。LKM-3：肝和肾均为阴性，灵长类睾丸间质细胞荧光明显。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202243抗肝肾微粒体抗体（LKM）n自身抗原：nLKM-1：细胞色素P450 D6，为50KD蛋白。nLKM-2：细胞色素P450同工酶，药物替尼酸的结合部位nLKM-3：UDP葡萄糖醛酸基转移酶，为55KD蛋白。n临床意义：自免肝按血清学分型可分为三型n型：出现ANA、SMA、肝细胞膜抗体（LMA抗体）为特征。n型：以出现LKM抗体为特征。n型：以出现可溶性肝抗原抗体（SLA抗体）为特征。nLKM-1为型自
19、免肝的血清学标志。LKM-3抗体见于1015的慢性丁型肝炎患者。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202244抗肝细胞膜抗原抗体（LMA）荧光模式：肝细胞膜的线性荧光。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202245抗肝细胞膜抗原抗体（LMA）n自身抗原：肝细胞膜抗原，可能为26KD蛋白。n临床意义：为非疾病特异性，最常发生于病毒性及原发性自身免疫性肝炎型，在非肝病患者，其发生率较低。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202246抗可溶性肝抗原抗体（SLA）荧光模式：猴肝组织上，肝细胞明显荧光，呈细颗粒到均质溶解状。大鼠肾组织为阴性。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202247抗可溶性肝抗原抗体（SLA）n自身抗原：主要的靶抗原为肝细胞角蛋白。n临床意义：型自免肝的血清学标志。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202248抗肝特异性蛋白抗体（LSP）荧光模式：猴肝细胞明显的颗粒状荧光。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202249抗肝特异性蛋白抗体（LSP）n自身抗原：肝特异性膜脂蛋白，为43KD蛋白。n临床意义：常发生于病毒性及原发性自身免疫性肝炎型，在非肝病患者，其发生率较低。自身抗体的实验室检测和临床意义10/20/202250
