1、真菌感染与实验室诊断进展科室讲机会来了！机会来了！念珠菌念珠菌曲霉菌曲霉菌国内国内:广谱抗生素应用广谱抗生素应用ICU皮质激素皮质激素糖尿病糖尿病静脉插管静脉插管+600%+300%+300%Martin et al,NEJM 2003;348:154678798081828384858687888990919202468Aspergillus spp.Candida spp.All otherPrevalence at Autopsy%Groll et al,J Infect 1996;33:23-32.中华医学杂志中华医学杂志2003年年3月第月第83卷第卷第5期期百分比（）真菌Corne
2、t m et al.J Hosp infect.2002;514:288-296MB80 微生物快速动态测定系统4th Trends in Medical Mycology.（13）D葡聚糖检测（G试验）血培养、骨髓培养2次生长同一种酵母菌；可疑感染10 20 pg/ml 25例ICU患者的尸体解剖研究曲霉是继念珠菌之后的第二常见真菌病原体卡氏肺孢子菌无法体外培养Clinical Infectious Diseases 2008;46:87885 EORTC/MSG定义：Clin Infect Dis 1998;26:781-805;Andriole VT.非白念珠菌和霉菌不断增加侵袭性曲霉患
3、者在血液科和ICU最为常见Senn et al.美国大多数研究限于念珠菌菌血症 阳性结果代表存在侵袭性真菌感染Epidemiology and Outcomes of Candidemia in 2019 PatientsClinical Infectious Diseases 2009;48:1695703美国美国PATH网络：侵袭性真菌病数据库网络：侵袭性真菌病数据库念珠菌血症念珠菌血症2019例例(2004-2008)念珠菌血症菌种比例念珠菌血症菌种比例大部分患者为非粒缺患者大部分患者为非粒缺患者(占占92.7%)Epidemiology and Outcome of Invasive
4、Fungal Infection in Adult Hematopoietic Stem Cell Transplant RecipientsClinical Infectious Diseases 2009;48:26573John Bartlett.2009 ICAAC.美国美国PATH网络：侵袭性真菌病数据库网络：侵袭性真菌病数据库成人成人HSCT患者的侵袭性真菌病患者的侵袭性真菌病(2004-2007)共共234例患者发生例患者发生250次侵袭性真菌感染次侵袭性真菌感染(确诊或临床诊断确诊或临床诊断)Clinical Infectious Diseases 2008;46其他微生物、动
5、物及人的细胞不含该成份 25例ICU患者的尸体解剖研究Microbiol.O Marchetti.46:10091013Microbiol.阳性结果代表存在侵袭性真菌感染（13）D葡聚糖检测（抗真菌药物治疗后）The lancet,2003,3:230-240 阳性结果代表存在侵袭性真菌感染采用不染色湿片如KOH涂片或Gram染色涂片。只有2例（8）是真正的假丝酵母菌肺炎MB80 微生物快速动态测定系统 不能检测隐球菌和接合菌；虽然经过治疗，免疫抑制患者的死亡率仍达90%1,3-Beta-D-glucan antigenemia for early diagnosis of IFIs in n
6、eutropenic patients with acute leukemia.曲霉菌半乳甘露聚（GM）Diagnosis of invasive aspergillosis using a galactomannan assay-a meta-analysis.The lancet,2003,3:230-240The lancet,2003,3:230-240用于对系统性真菌病的诊断筛查；用于侵袭性真菌感染的早期诊断84%(78-88%)烟曲霉、构巢曲霉等数种曲霉卡氏肺孢子菌无法体外培养110例ICU患者纳入分析，其中中性粒细胞减少患者仅占22%1,3D葡聚糖检测诊断侵袭性真菌感染(G试验)
7、最简单也是最有用的实验室诊断方法可疑感染10 20 pg/ml微生物培养技术 人类口腔正常定植菌，正常人2055痰中可分离出假丝酵母菌属真菌直接涂片的诊断价值 最简单也是最有用的实验室诊断方法MB80 微生物快速动态测定系统主机反应器，数据处理分析软件，计算机，打印机，电子恒温加热仪等4th Trends in Medical Mycology.O Marchetti.白念珠菌仍然是最常见的致病菌 10例（40）假丝酵母菌培养阳性The lancet,2003,3:230-240Ostrosky-Zeichner et al.美国PATH网络：侵袭性真菌病数据库烟曲霉烟曲霉黄曲霉黄曲霉重要的真
8、菌感染的表现John R.Wingard，IDSA，2005b b1,6glucansb b1,3PPL bilayerchitinergosterolb b1,3 glucansynthasemannoproteins凝固蛋白原凝固蛋白动态浊度法动态浊度法凝固酶凝固酶原活化因子G因子G1-3-D-葡聚糖全过程全过程2小时内完成，可及时小时内完成，可及时提供结果，指导临床提供结果，指导临床Clin.Infect.Dis.2005.41:654659.J.Clin.Microbiol.2005.43:59575962J.Clin.Microbiol.2008.46:10091013酵母菌、丝状真
9、菌细胞壁成分；美国大多数研究限于念珠菌菌血症Andriole VT.美国FDA已批准，欧洲部分国家已注册假丝酵母菌肺炎少见早于临床症状2天，早于确诊9天；敏感度为55%100%Clin Infect Dis 2001;32:358-366;Paterson DL,Singh N.Microbiol.Epidemiology and Outcomes of Candidemia in 2019 Patients82%(70-90%)肺活检标本真菌培养阳性和/或组织病理学检查病变组织中发现真菌；混合型真菌感染的发病率也逐年上升1,3D葡聚糖检测诊断侵袭性真菌感染(G试验)The lancet,20
10、03,3:230-240G试验检测不同念珠菌属的敏感度（60pg/ml）阳性结果代表存在侵袭性真菌感染组织匀浆可能会破坏毛霉菌，“假阴性”可疑感染10 20 pg/ml其他真菌感染（侵袭性曲霉菌病）的研究资料少Med.Mycol.2006.44:51635172J.Clin.Microbiol.2008.46:10091013J.Clin.Microbiol.2005.43:2993051.Senn et al.1,3-Beta-D-glucan antigenemia for early diagnosis of IFIs in neutropenic patients with acute
11、 leukemia.Clinical Infectious Diseases 2008;46:878852.Ostrosky-Zeichner et al.Multicenter clinical evaluation of the(1-3)beta-D-glucan assay as an aid to diagnosis of FIs.Clinical Infectious Diseases 2005;41:6549O Marchetti.New Developments and Challenges in Diagnostics of Invasive Fungal Infections
12、.4th Trends in Medical Mycology.Ostrosky-Zeichner et al.Multicenter clinical evaluation of the(1-3)beta-D-glucan assay as an aid to diagnosis of IFIs.Clinical Infectious Diseases 2005;41:6549G试验检测不同念珠菌属的敏感度近似（试验检测不同念珠菌属的敏感度近似（60pg/ml,近平滑念珠菌稍低）近平滑念珠菌稍低）G试验检测不同念珠菌属的敏感度（试验检测不同念珠菌属的敏感度（60pg/ml）Diagnosis
13、 of invasive aspergillosis using a galactomannan assay-a meta-analysis.Clin Infect Dis,2006;42:141727O Marchetti.New Developments and Challenges in Diagnostics of Invasive Fungal Infections.4th Trends in Medical Mycology.O Marchetti.New Developments and Challenges in Diagnostics of Invasive Fungal I
14、nfections.4th Trends in Medical Mycology.Galactomannan in bronchoalveolar lavage fluid-a tool for diagnosing aspergillosis in ICU patients.Am J Resp Crit Care Med,2008;177:27-34BAL GM阈值阈值0.5敏感度敏感度 88%特异度特异度 87%血血GM阈值阈值0.5敏感度敏感度 42%特异度特异度 78%110例例ICU患者纳入分析，其中中性粒细胞减少患者仅占患者纳入分析，其中中性粒细胞减少患者仅占22%上气道念珠菌定植
15、常见，气道分泌物（痰和BALF）培养阳性不能作为侵袭性感染的证据。不仅检测曲霉菌，还可以检测念珠菌、镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢属等；假丝酵母菌肺炎少见 EORTC/MSG定义：对于确诊IPA，阳性率为85.1,3-Beta-D-glucan antigenemia for early diagnosis of IFIs in neutropenic patients with acute leukemia.阳性结果代表存在侵袭性真菌感染国内侵袭性真菌感染的发病情况Microbiol.（高危患者则需要给予抗真菌治疗）。真菌直接涂片的诊断价值46:10091013支气管肺泡灌洗液半乳甘露聚糖检测快速
16、:24hr可以报告结果（高危患者则需要给予抗真菌治疗）。mannoproteinsSenn et al.其他真菌感染（侵袭性曲霉菌病）的研究资料少国内侵袭性真菌感染的发病情况可疑感染10 20 pg/ml用于侵袭性真菌感染的早期诊断PCR种特异种特异-PCRPCR非特异非特异 PCRPCR杂交杂交Standart singlenestedPCR-EIAReal-time标本标本全血全血血浆血浆血清血清BALBAL最低检测范围最低检测范围4-10 cfu/ml25-100 fg DNA原位杂交原位杂交目的基因目的基因多拷贝基因多拷贝基因Dr.Maschmeyer G.in 2nd Trends
17、in Medical Mycology,23-26 October 2005,Berlin,Germany.气道分泌物中分离出假丝酵母菌意义如在无菌体液的直接镜检中发现真菌，常可确立深部真菌病的诊断。新鲜尿液见到大量菌丝及孢子 25例ICU患者的尸体解剖研究敏感性100%，特异性65%;in 2nd Trends in Medical Mycology,23-26 October 2005,Berlin,Germany.4-10 cfu/mlLatex agglutination 15ng/ml（13）D葡聚糖检测（G试验）3连续2次采血进行G试验真菌直接涂片的诊断价值 10例（40）假丝酵母菌培养阳性GMtest,Gtest临床诊断46:10091013有意义的真菌培养标本GMtest,Gtest临床诊断Aspergillus其他真菌感染（侵袭性曲霉菌病）的研究资料少用于侵袭性真菌感染的早期诊断
