1、缺血再灌注损伤专业缺血再灌注损伤专业基础知识基础知识掌握掌握：缺血再灌注损伤的概念缺血再灌注损伤的概念 白细胞的作用白细胞的作用钙超载钙超载自由基的作用自由基的作用再灌注损伤的机制再灌注损伤的机制熟悉熟悉：缺血再灌注损伤的原因及条件缺血再灌注损伤的原因及条件 缺血再灌注损伤时机体的功能代谢变化缺血再灌注损伤时机体的功能代谢变化了解了解：缺血再灌注损伤防治的病理生理基础缺血再灌注损伤防治的病理生理基础缺血再灌注损伤专业基础知识219551955年，年，SewellSewell报道，在结扎狗冠状动脉后，报道，在结扎狗冠状动脉后，如突然解除结扎，恢复血流，部分动物立即发如突然解除结扎，恢复血流，部分
2、动物立即发生心室纤颤而死亡生心室纤颤而死亡 溶栓疗法溶栓疗法器官移植器官移植体外循环体外循环PTCA冠脉搭桥冠脉搭桥治疗手段的改进治疗手段的改进缺血再灌注损伤专业基础知识3心脏介入手术经皮冠状动脉腔内经皮冠状动脉腔内成形术（成形术（PTCA）放置支架放置支架PTCAPTCA结合支架治疗冠心病患者，成功率较高，长期生存率较高结合支架治疗冠心病患者，成功率较高，长期生存率较高 缺血再灌注损伤专业基础知识4冠脉支架置入前后19671967年，年，Bulkley Bulkley 和和HutchinsHutchins发现冠脉血管发现冠脉血管再通后的病人发生再通后的病人发生心肌心肌细胞反常性坏死细胞反常性
3、坏死。缺血再灌注损伤专业基础知识5患者：男，58岁，上午8时，起床后感到胸闷，30min后突感 胸前区剧烈绞痛，9时入急诊病房。查体：血压75/50mmHg，意识淡漠，心率65次/min，律齐。心电图示度房室传导阻滞。冠状动脉造影：右冠状动脉上段85%狭窄，中段78%狭窄。入院治疗：立即给予阿托品、多巴胺、低分子右旋糖酐等进 行扩冠治疗。上午10时静脉点滴尿激酶。10.30分患者 出现阵发性心室颤动（室颤），立即给予除颤，到下 午13时反复发生室性心动过速、室颤，共计6次。到下 午16时，经给予利多卡因、小剂量异丙肾上腺素后心 律转为窦性，血压平稳，意识清楚。病例分析病例分析缺血再灌注损伤专业
4、基础知识6第一节第一节 概述概述一、缺血再灌注损伤一、缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury，IRI）缺血基础上恢复血流后组织损伤反而加重，缺血基础上恢复血流后组织损伤反而加重，甚至发生不可逆损伤的现象。甚至发生不可逆损伤的现象。缺血再灌注损伤专业基础知识7二、二、缺血再灌注损伤专业基础知识8三、三、缺血再灌注损伤条件缺血再灌注损伤条件缺血时间的长短缺血时间的长短侧支循环的形成情况侧支循环的形成情况需氧程度需氧程度再灌注的条件再灌注的条件缺血再灌注损伤专业基础知识9pH反常（反常（pH paradox）在再灌注时迅速纠正缺血组织的酸中毒，反而会加重缺血在再灌注时
5、迅速纠正缺血组织的酸中毒，反而会加重缺血细胞损伤，称为细胞损伤，称为pH值反常。值反常。O2反常（反常（Oxygen paradox）低氧溶液灌注组织器官一定时间后，再恢复正常氧供应，低氧溶液灌注组织器官一定时间后，再恢复正常氧供应，组织损伤反而更趋严重，称为氧反常。组织损伤反而更趋严重，称为氧反常。Ca2+反常（反常（Calcium paradox）无钙溶液灌流大鼠心脏后，再用含钙溶液进行灌流，心肌无钙溶液灌流大鼠心脏后，再用含钙溶液进行灌流，心肌细胞的损伤反而加重，称为钙反常。细胞的损伤反而加重，称为钙反常。缺血再灌注损伤专业基础知识10第二节第二节 缺血再灌注损伤专业基础知识11一、自由
6、基生成增多一、自由基生成增多（一）概念与分类（一）概念与分类自由基自由基外层电子轨道上含有单个不配对电子的原子、原子团或分子的总称。缺血再灌注损伤专业基础知识12自由基分类氧自由基、脂性自由基、氯自由基等氧自由基氧自由基（Oxygen free radical，OFR）由氧诱发的自由基称为由氧诱发的自由基称为氧自由基，包括氧自由基，包括 超氧阴离子超氧阴离子O-2和羟自由基和羟自由基OH 脂性自由基脂性自由基（Lipid radicals）氧自由基与多聚不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的氧自由基与多聚不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的链式反应后生成的中间代谢产物。包括烷自由基链式反应后生成的中间代谢产物。
7、包括烷自由基（L）、烷氧自由基（）、烷氧自由基（LO）烷过氧自由基（）烷过氧自由基（LOO）缺血再灌注损伤专业基础知识13活性氧活性氧（reactive oxygen species,ROS）由氧形成的、化学性质较基态氧活泼的含氧代谢物质，由氧形成的、化学性质较基态氧活泼的含氧代谢物质，包括氧自由基（包括氧自由基（超氧阴离子超氧阴离子O-2和羟自由基和羟自由基OH）和和非自由基，如单线态氧（非自由基，如单线态氧（1O2）和过氧化氢（）和过氧化氢（H2O2）缺血再灌注损伤专业基础知识14O O2 2线线粒粒体体9899%H H2 2O O12%NADPHNADPH氧化酶氧化酶黄嘌呤氧化酶黄嘌呤氧
8、化酶P450P450细胞色素单加氧酶细胞色素单加氧酶超氧阴离子超氧阴离子 O O2 2-.-.羟自由基羟自由基 OH OH单线态氧单线态氧 1 1O O2 2SODSODH H2 2O O2 2谷胱甘肽过氧化物酶（谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PXGSH-PX）过氧化氢酶（过氧化氢酶（CATCAT）髓过氧化物酶（髓过氧化物酶（MPOMPO）清清除除（二）自由基的代谢（二）自由基的代谢缺血再灌注损伤专业基础知识15在血红蛋白、肌红蛋白、儿茶酚胺及黄嘌呤在血红蛋白、肌红蛋白、儿茶酚胺及黄嘌呤氧化酶等氧化过程中也会生成氧化酶等氧化过程中也会生成超氧阴离子超氧阴离子O-2。O-2可以在可以在Fe3或或C
9、u2的催化下与的催化下与过氧化氢生成羟自由基过氧化氢生成羟自由基OH，这种由金属，这种由金属离子催化的反应称为离子催化的反应称为Fenton反应反应。缺血再灌注损伤专业基础知识16（三）氧自由基生成增多的机制（三）氧自由基生成增多的机制 1.黄嘌呤氧化酶途径黄嘌呤氧化酶途径 2.中性粒细胞途径中性粒细胞途径 3.线粒体功能受损线粒体功能受损 4.儿茶酚胺增加和氧化儿茶酚胺增加和氧化缺血再灌注损伤专业基础知识171、黄嘌呤氧化酶途径黄嘌呤氧化酶途径OH缺血再灌注损伤专业基础知识182、中性粒细胞途径、中性粒细胞途径吞噬过程中，吞噬过程中，激活的激活的PMN耗氧量显著增加，耗氧量显著增加，摄入摄入
10、O2的的70%90%在在NADPH和和NADH氧化酶氧化酶的催化下，接受电子形成氧自由基的催化下，接受电子形成氧自由基。缺血缺血再灌注期再灌注期组织重新获得氧气供应，激活的中性粒组织重新获得氧气供应，激活的中性粒细胞耗氧量显著增加，产生大量氧自由基，称为细胞耗氧量显著增加，产生大量氧自由基，称为呼吸爆发（氧爆发）呼吸爆发（氧爆发）缺血再灌注损伤专业基础知识193、线粒体途径线粒体途径 缺血细胞线粒体内钙离子沉积，影缺血细胞线粒体内钙离子沉积，影响细胞色素氧化酶系传递电子的能力响细胞色素氧化酶系传递电子的能力，恢复血液灌注后，弥散到组织内的，恢复血液灌注后，弥散到组织内的氧部分经单电子还原生成氧
11、自由基。氧部分经单电子还原生成氧自由基。缺血再灌注损伤专业基础知识204、儿茶酚胺增加和氧化、儿茶酚胺增加和氧化l各种应激情况下，儿茶酚胺分泌增加，一各种应激情况下，儿茶酚胺分泌增加，一方面起到代偿作用，另外一方面，儿茶酚方面起到代偿作用，另外一方面，儿茶酚胺氧化产生氧自由基造成细胞损害胺氧化产生氧自由基造成细胞损害缺血再灌注损伤专业基础知识21（四）自由基的损伤作用（四）自由基的损伤作用1.膜脂质过氧化作用增强膜脂质过氧化作用增强2.抑制蛋白质的功能抑制蛋白质的功能3.破坏核酸和染色体破坏核酸和染色体缺血再灌注损伤专业基础知识22(1)(1)破坏膜的正常结构破坏膜的正常结构脂质脂质过氧化过氧
12、化膜不饱和膜不饱和脂肪酸脂肪酸不饱和脂肪酸不饱和脂肪酸/蛋白质比例失调蛋白质比例失调膜液态性膜液态性流动性流动性膜通透性膜通透性CaCa2+2+内流内流1.膜脂质过氧化作用增强膜脂质过氧化作用增强 (enhanced lipid peroxidation of membrane)缺血再灌注损伤专业基础知识23(2)(2)间接抑制膜蛋白功能间接抑制膜蛋白功能脂质之间交联脂质之间交联(-)(-)钙泵、钠泵钙泵、钠泵NaNa2+2+/Ca/Ca2+2+交换蛋白交换蛋白胞内胞内NaNa2+2+、CaCa2+2+钙超载、细胞肿胀钙超载、细胞肿胀缺血再灌注损伤专业基础知识24(3)(3)促进自由基及其它生
13、物活性物质生成促进自由基及其它生物活性物质生成膜脂质膜脂质过氧化过氧化磷脂酶磷脂酶C C磷脂酶磷脂酶D D膜磷脂分解膜磷脂分解花生四烯酸花生四烯酸脂氧合酶脂氧合酶白三烯白三烯过氧化物过氧化物环氧合酶环氧合酶前列腺素内过氧化物前列腺素内过氧化物OHOH.血栓素血栓素A A2 2前列腺素前列腺素自由基自由基(+)(+)(4)(4)减少减少ATPATP生成（线粒体）生成（线粒体）缺血再灌注损伤专业基础知识25例：例：肌纤维蛋白对肌纤维蛋白对CaCa2+2+反应性反应性心肌收缩力心肌收缩力肌浆网钙转运蛋白受损肌浆网钙转运蛋白受损钙调节异常钙调节异常2.抑制蛋白质的功能抑制蛋白质的功能染色体畸变，核酸碱
14、基的羟化，染色体畸变，核酸碱基的羟化，DNADNA的断裂的断裂（羟自由基）（羟自由基）3.破坏核酸和染色体破坏核酸和染色体自由基使细胞结构蛋白和酶的巯基氧化，自由基使细胞结构蛋白和酶的巯基氧化，形成形成二硫键二硫键；或使氨基酸残基；或使氨基酸残基氧化氧化，蛋白，蛋白和酶发生交联形成聚合物损伤蛋白功能和酶发生交联形成聚合物损伤蛋白功能缺血再灌注损伤专业基础知识26 各种原因引起的细胞内钙含量各种原因引起的细胞内钙含量异常增多并导致细胞结构损伤和功异常增多并导致细胞结构损伤和功能代谢障碍。能代谢障碍。二、钙超载（二、钙超载（calcium overloadcalcium overload）缺血再灌
15、注损伤专业基础知识27Na Na+-Ca -Ca 2+2+载体载体Ca2+2+B Pr线粒体线粒体肌浆网肌浆网Ca 2+2+Ca 2+2+Ca2+泵Ca2+Ca2+Ca2+e：10-3MCaCa2+2+ii：1010-7-7M MVOCROC细胞内细胞内CaCa2+2+的稳态调节的稳态调节缺血再灌注损伤专业基础知识281.1.生物膜损伤致细胞内钙超载生物膜损伤致细胞内钙超载(2)(2)线粒体及肌浆网膜损伤线粒体及肌浆网膜损伤(1)(1)细胞膜损伤细胞膜损伤缺血缺血膜外板与糖被膜分离膜外板与糖被膜分离CaCa2+2+(+)(+)磷脂酶磷脂酶膜磷脂降解膜磷脂降解自由基自由基膜脂质过氧化膜脂质过氧化
16、膜通透性膜通透性细胞内钙超载的机制细胞内钙超载的机制缺血再灌注损伤专业基础知识29缺血缺血 胞内胞内pH 再灌注再灌注 Na+-H+交换交换 胞内胞内Na+Na+-Ca2+交换交换 细胞外细胞外Ca2+内流内流 钙超载钙超载 ATPATP含量下降含量下降细胞内钙超载的机制细胞内钙超载的机制PKC对对Na+/Ca2+交换蛋白的间接激活交换蛋白的间接激活缺血再灌注损伤专业基础知识301去甲肾上腺素去甲肾上腺素GqPLCP1IP3Ca2+Ca2+肌浆网肌浆网DGPKCH+Na+Ca2+肌丝肌丝PKC对对Na+/Ca2+交换蛋白的间接激活交换蛋白的间接激活缺血再灌注损伤专业基础知识31缺血再灌注损伤专
17、业基础知识33三、三、白细胞的作用白细胞的作用 （一）（一）再灌注时白细胞增多的机制再灌注时白细胞增多的机制内皮释放内皮释放粘附分子粘附分子白细胞释放白细胞释放趋化介质趋化介质白细胞白细胞内皮细胞内皮细胞白三烯、血小板活化因子、补体、激肽整合素整合素选择素选择素缺血再灌注损伤专业基础知识34 2.2.微血管损伤微血管损伤(无复流现象无复流现象 no-reflow phenomenon)no-reflow phenomenon)细胞损伤细胞损伤微血管通透性微血管通透性自自由基、粒细胞由基、粒细胞血液流变学改变血液流变学改变白细胞粘附聚集、白细胞粘附聚集、血流缓慢血流缓慢微血管口径的改微血管口径的
18、改变变内皮细胞肿胀内皮细胞肿胀缩血管物质缩血管物质扩血管物质扩血管物质缺血再灌注损伤专业基础知识35IRIIRI的主要发病机制的主要发病机制再灌注再灌注中性粒细胞中性粒细胞无复流无复流致炎因子致炎因子氧自由基氧自由基钙超载钙超载细胞损伤细胞损伤缺血缺血O O2 2CaCa2+2+细胞坏死细胞坏死缺血损伤恢复缺血损伤恢复缺血再灌注损伤专业基础知识36第三节第三节 缺血再灌注损伤时机体缺血再灌注损伤时机体 的功能代谢变化的功能代谢变化心脏心脏脑脑其他器官（肺、肠、肾、骨骼肌）其他器官（肺、肠、肾、骨骼肌）缺血再灌注损伤专业基础知识37一、心肌缺血再灌注损伤一、心肌缺血再灌注损伤1.再灌注性心律失常
19、再灌注性心律失常(reperfusion arrhythmia)在心肌缺血再灌注过程中在心肌缺血再灌注过程中出现的心律失常。出现的心律失常。发生率：发生率：50-80%，室性心律失常多见室性心律失常多见缺血再灌注损伤专业基础知识38心肌并未因缺血发生不可逆损伤，但在心肌并未因缺血发生不可逆损伤，但在再灌注血流恢复后一段时间内，心肌出现再灌注血流恢复后一段时间内，心肌出现可逆性的收缩功能降低，称为心肌顿抑。可逆性的收缩功能降低，称为心肌顿抑。2.心肌顿抑心肌顿抑(myocardial stunning)缺血再灌注损伤专业基础知识39缺血再灌注损伤专业基础知识403.再灌注对心肌代谢的影响再灌注对
20、心肌代谢的影响 (Influence of reperfusion on myocardium metabolism)线粒体受损线粒体受损能量合成能量合成再灌注再灌注底物冲走底物冲走高能磷酸高能磷酸化合物化合物4.再灌注对心肌超微结构的影响再灌注对心肌超微结构的影响 缺血再灌注损伤专业基础知识41二、脑的缺血再灌注损伤二、脑的缺血再灌注损伤脑代谢异常脑代谢异常脂质过氧化损伤脂质过氧化损伤水肿、坏死水肿、坏死神经递质改变神经递质改变缺血再灌注损伤专业基础知识421.小肠小肠黏膜屏障通透性黏膜屏障通透性 菌血症或内毒素血症菌血症或内毒素血症2.2.急性肾功能衰竭急性肾功能衰竭三三、其他器官、组织的
21、缺血再灌其他器官、组织的缺血再灌注损伤注损伤缺血再灌注损伤专业基础知识431 1、尽量缩短脏器缺血时间，控制再灌、尽量缩短脏器缺血时间，控制再灌注条件注条件2 2、改善缺血组织代谢（磷酸己糖、改善缺血组织代谢（磷酸己糖、外源性外源性ATPATP等）等）第四节第四节 防治的病理生理基础防治的病理生理基础缺血再灌注损伤专业基础知识443 3、l清除自由基及活性氧清除自由基及活性氧l减轻钙超载：钙拮抗剂减轻钙超载：钙拮抗剂 Na Na+/Ca/Ca2+2+、Na Na+/H/H+交换抑制剂交换抑制剂l中性粒细胞抑制剂（抗中性粒细胞代谢药中性粒细胞抑制剂（抗中性粒细胞代谢药物：羟基脲）物：羟基脲）l其
22、它药物：其它药物：细胞保护剂细胞保护剂 扩管扩管 稳膜等稳膜等l缺血预处理缺血预处理缺血再灌注损伤专业基础知识45复习思考题复习思考题l 1试述线粒体在缺血试述线粒体在缺血-再灌注损伤发生再灌注损伤发生中的作用。中的作用。2为什么说氧自由基产生过多和细胞为什么说氧自由基产生过多和细胞内钙超载互为因果关系？内钙超载互为因果关系？3试述缺血试述缺血-再灌注时通过黄嘌呤氧化再灌注时通过黄嘌呤氧化酶途径引起氧自由基增多的机制。酶途径引起氧自由基增多的机制。缺血再灌注损伤专业基础知识46 4试分析白细胞在发生缺血试分析白细胞在发生缺血-再灌注损再灌注损伤中的作用。伤中的作用。5.心肌缺血损伤和再灌注损伤的表现有心肌缺血损伤和再灌注损伤的表现有何不同？何不同？6.为什么脑细胞更易受活性氧损伤？为什么脑细胞更易受活性氧损伤？7.试述缺血试述缺血-再灌注区再灌注区ATP生成能力下降生成能力下降的机制。的机制。缺血再灌注损伤专业基础知识47
