1、也叫做植物克隆，从植物体分离出符合需要的组织、器官、细也叫做植物克隆，从植物体分离出符合需要的组织、器官、细胞或原生质体等，在无菌条件下，接种在含有各种营养物质及胞或原生质体等，在无菌条件下，接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养，以获得再生植株的技术。植物激素的培养基上进行培养，以获得再生植株的技术。植物组织培养植物组织培养定义定义一般流程一般流程外植体外植体愈伤组织愈伤组织植株植株脱分化脱分化再分化再分化不一定不一定同一株绿色开花植物不同部位的细胞，经培养获得的植株基因型一定相同？同一株绿色开花植物不同部位的细胞，经培养获得的植株基因型一定相同？长期培养的细胞全能性下降的原因一
2、、理论基础一、理论基础细胞的全能性细胞的全能性定义原因如何体现细胞的全能性细胞的全能性植物细胞在植株内为什么不能体现全能性？植物细胞在植株内为什么不能体现全能性？基因的选择性表达基因的选择性表达一、理论基础一、理论基础NoImage拟南芥拟南芥 NoImage烟草烟草 NoImage番茄番茄 NoImage小麦小麦玉米玉米NoImage水稻水稻NoImage容易再生出新植株，并能在多个世代中容易再生出新植株，并能在多个世代中保持细胞全能性保持细胞全能性的表达的表达较难再生，在多次继代培养后会较难再生，在多次继代培养后会丧失细胞全能性丧失细胞全能性的表达能力的表达能力1.1.（2018.4201
3、8.4浙江卷）浙江卷）取田间不同品种水稻的幼胚，先进行取田间不同品种水稻的幼胚，先进行_，然后接种到培养基中培养，幼胚发生，然后接种到培养基中培养，幼胚发生_形成愈伤组织，并进行继代培养。影响愈伤组织能否成功再生出植株的因素有：培养条件如光形成愈伤组织，并进行继代培养。影响愈伤组织能否成功再生出植株的因素有：培养条件如光照、温度、培养基配方如植物激素配比、以及照、温度、培养基配方如植物激素配比、以及_（答出（答出2 2点即可）点即可）愈伤组织继代的次数、水稻的基因型愈伤组织继代的次数、水稻的基因型消毒消毒 脱分化脱分化二、植物组织培养的途径二、植物组织培养的途径外植体外植体愈伤组织愈伤组织植株
4、植株脱分化脱分化再分化再分化？一般流程一般流程二、植物组织培养的途径二、植物组织培养的途径NoImageNoImage外植体中外植体中分生组织分生组织丛状苗丛状苗生生 根根植植 株株选修选修1 1 NoImageNoImage二二、植物组织培养的途径、植物组织培养的途径选修选修3 3 NoImage外植体外植体丛状苗丛状苗生生 根根植植 株株愈伤组织愈伤组织NoImageNoImageNoImageNoImage二二、植物组织培养的途径植物组织培养的途径外植体外植体单细胞单细胞胚状体胚状体植植 株株愈伤组织愈伤组织细胞团细胞团 球形胚球形胚 心形胚心形胚 NoImageNoImage选修选修3
5、 3 NoImageNoImage二二、植物组织培养的途径植物组织培养的途径必修必修1 1 NoImageNoImage外植体外植体单细胞单细胞胚状体胚状体植植 株株愈伤组织愈伤组织细胞团细胞团 球形胚球形胚 心形胚心形胚 NoImageNoImageNoImageNoImage二二、植物组织培养的途径植物组织培养的途径外植体中外植体中分生组织分生组织丛状苗丛状苗生生 根根植植 株株外植体外植体丛状苗丛状苗生生 根根植植 株株愈伤组织愈伤组织外植体外植体单细胞单细胞胚状体胚状体植植 株株愈伤组织愈伤组织细胞团细胞团 球形胚球形胚 心形胚心形胚 器官发生途径器官发生途径胚胎发生途径胚胎发生途径途
6、途径径NoImageNoImageNoImage 其它途径其它途径2.(2017112.(201711月浙江卷月浙江卷)回答与植物克隆和动物克隆有关的问题回答与植物克隆和动物克隆有关的问题:利用植物愈伤组织获得再生植株主要有两条途径利用植物愈伤组织获得再生植株主要有两条途径:一是由愈伤组织的细胞先分化产一是由愈伤组织的细胞先分化产生芽和根后再形成一个完整植株的生芽和根后再形成一个完整植株的_途径途径,二是由愈伤组织细胞产生胚状体二是由愈伤组织细胞产生胚状体后再萌发形成完整植株的胚胎发生途径。另外，也可不通过愈伤组织阶段而直接采用带后再萌发形成完整植株的胚胎发生途径。另外，也可不通过愈伤组织阶段
7、而直接采用带腋芽的茎段培养成丛状苗腋芽的茎段培养成丛状苗,再诱导生根获得再生植株再诱导生根获得再生植株,其原因是腋芽中存在其原因是腋芽中存在_。器官发生器官发生分生组织分生组织二二、植物组织培养的途径植物组织培养的途径外植体外植体愈伤组织愈伤组织植株植株脱分化脱分化丛状苗丛状苗生根生根单细胞单细胞胚状体胚状体分生组织分生组织四、应用四、应用（一）快速获得同质后代（一）快速获得同质后代 组培育苗法繁殖快，一年内，一个分生组织可以获得几万甚至几十万株组培育苗法繁殖快，一年内，一个分生组织可以获得几万甚至几十万株幼苗，且不占用地，不受环境的影响，为植物工厂的建立提供了技术保障。幼苗，且不占用地，不受
8、环境的影响，为植物工厂的建立提供了技术保障。NoImageNoImageNoImage（二）规模化生产次生代谢产物（二）规模化生产次生代谢产物四、应用四、应用大量培养特定细胞系（愈伤组织），可获得植物的次生代谢产物（如某些中药）大量培养特定细胞系（愈伤组织），可获得植物的次生代谢产物（如某些中药）NoImageNoImageNoImage紫草素紫草素紫草紫草 愈伤组织愈伤组织（活血化瘀）（活血化瘀）NoImageNoImageNoImageNoImageNoImage3.(2015.103.(2015.10浙江卷浙江卷)将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片，在含有目的基因的农杆菌溶液中将消毒后的矮牵牛
9、叶片剪成小片，在含有目的基因的农杆菌溶液中浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调节剂的浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调节剂的MSMS培养基培养基(含蔗糖、琼脂和抗生素，含蔗糖、琼脂和抗生素，下同下同)上，使叶小片先脱分化形成上，使叶小片先脱分化形成_。再将其转移至另一培养基诱导形成芽，。再将其转移至另一培养基诱导形成芽，芽切割后转移至芽切割后转移至_(A.LB(A.LB培养基培养基 B.MS B.MS培养基培养基+适宜浓度适宜浓度NAA C.MSNAA C.MS培培养基养基+适宜浓度适宜浓度BA D.NAA/BABA D.NAA/BA小于小于1 1的的MSMS培养基培养基)上生根，形成完
10、整植株。上生根，形成完整植株。愈伤组织愈伤组织B NoImage人工种皮：人工种皮：人工薄膜人工薄膜 人工胚乳人工胚乳 胚状体胚状体人工种子人工种子（三）获得人工种子（三）获得人工种子四、应用四、应用NoImage4.(2020.14.(2020.1浙江卷浙江卷)胎萌是指种子未脱离母体即发芽。下列关于种子胎萌和萌发的叙述胎萌是指种子未脱离母体即发芽。下列关于种子胎萌和萌发的叙述,错误的是（错误的是（）A.A.外施赤霉素合成抑制剂外施赤霉素合成抑制剂,种子萌发会受到抑制种子萌发会受到抑制 B.B.抑制与脱落酸合成相关酶的基因表达抑制与脱落酸合成相关酶的基因表达,会引起胎萌会引起胎萌 C.C.外施
11、脱落酸外施脱落酸,可抑制脱落酸受体缺失突变体发生胎萌可抑制脱落酸受体缺失突变体发生胎萌 D.D.离体的水稻成熟胚离体的水稻成熟胚,可在无激素的可在无激素的MSMS培养基上萌发培养基上萌发C（营养物质、抗生素、植物激素）（营养物质、抗生素、植物激素）植物细胞植物细胞A A植物细胞植物细胞B B去壁去壁去壁去壁原生质体原生质体A A原生质体原生质体B B融合融合融合的原生质体融合的原生质体ABAB再生细胞壁再生细胞壁杂种细胞杂种细胞ABAB脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织杂种植株杂种植株再分化再分化 原原生生质质体体融融合合植植物物组组织织培培养养如何去除细胞壁且不破坏如何去除细胞壁且不破坏细胞的生命
12、活性？细胞的生命活性？酶解法酶解法融合的原理及常用融合的原理及常用的融合方法？的融合方法？聚乙二醇（聚乙二醇（PEGPEG）、）、电刺激电刺激酶的酶的 专一性专一性生物膜的生物膜的 流动性流动性（四）原生质体培养（四）原生质体培养四、应用四、应用原生质体的获得原生质体的获得杂种细胞的形成杂种细胞的形成杂种植株的产生杂种植株的产生NoImage19781978年梅尔彻斯年梅尔彻斯(Melchers)(Melchers)等首次获得了马铃薯等首次获得了马铃薯和番茄的属间体细胞杂种和番茄的属间体细胞杂种“PomatoPomato”NoImage（四）原生质体培养（四）原生质体培养四、应用四、应用NoI
13、mage5.5.(2020.1(2020.1月浙江卷月浙江卷)回答与基因工程和植物克隆有关的问题：回答与基因工程和植物克隆有关的问题：(1)(1)为了获取某植物叶片无菌的原生质体为了获取某植物叶片无菌的原生质体,先将叶片经表面消毒并去除下表皮先将叶片经表面消毒并去除下表皮,再将其再将其置于经置于经_处理的较高渗透压的混合酶溶液中。酶解后处理的较高渗透压的混合酶溶液中。酶解后经多次离心获得原经多次离心获得原生质体。然后测定该原生质体的活性，可采用方法有生质体。然后测定该原生质体的活性，可采用方法有_。（答出（答出2 2点即可）点即可）(2(2)原生质体在培养过程中原生质体在培养过程中,只有重新形
14、成只有重新形成_后后,才可进行有丝分裂。多次才可进行有丝分裂。多次分裂形成的小细胞团可通过分裂形成的小细胞团可通过_或器官发生的途径再生植株。或器官发生的途径再生植株。NoImage过滤灭菌过滤灭菌 染色法染色法,渗透吸水失水、渗透吸水失水、观察细胞质的流动观察细胞质的流动细胞壁细胞壁 胚胎发生胚胎发生（四）原生质体培养（四）原生质体培养四、应用四、应用NoImage（五）培育转基因植物（五）培育转基因植物四、应用四、应用6.6.（2012017 7.1111浙江卷）利用植物克隆培育新品种浙江卷）利用植物克隆培育新品种,一方面可利用带有目的基因的一方面可利用带有目的基因的_侵染植株，或将目的基因通过侵染植株，或将目的基因通过_方法导入植物细胞、组织、器官方法导入植物细胞、组织、器官获得转基因植株，另一方面利用异源植株的获得转基因植株，另一方面利用异源植株的_进行融合产生杂种植株进行融合产生杂种植株,或利或利用异源植物在试管内进行用异源植物在试管内进行_,_,对其产生的胚进行培养产生杂种植株。对其产生的胚进行培养产生杂种植株。农杆菌农杆菌显微注射显微注射 原生质体原生质体受精受精010203理论基础培养途径应用植物组织培养植物组织培养
