1、革兰氏阳性球菌 1球菌(coccus)革兰氏阳性球菌革兰氏阴性球菌兽医临床重要的革兰氏阳性球菌葡萄球菌属链球菌属2第一节 葡萄球菌属(Staohylococcus)3分布自然界及人、畜、禽的体表与体内。致病情况多数是非致病菌,少数有致病性。后者主要引起化脓性感染,故又称化脓性球菌。亦可引起食物中毒。重要的葡萄球菌本属分为37个种,较重要有:金黄色葡萄球菌猪葡萄球菌4金黄色葡萄球菌(S.aureus)一、主要生物学特性(一)形态与染色球菌,直径0.71m革兰氏阳性无芽孢,无鞭毛,多数无荚膜葡萄串状或双球及短链状排列5电镜下的葡萄球菌电镜下的葡萄球菌6(二)生长要求及培养特性常用普通琼脂或血琼脂3
2、7 培养。普通琼脂形成湿润、光滑、隆起、边缘整齐、直径12mm的圆形菌落,颜色金黄色。7血琼脂致病性菌株菌落周围形成完全透明的溶血环(溶血),非致病菌无此作用。8(三)生化特性不同菌株生化反应不同。致病菌株在厌氧条件下分解甘露醇产酸,非致病菌无此作用。9(四)抗原构造 1、多糖抗原 存在于荚膜中,分11个型,临床分离株多为5型和8型。2、蛋白抗原 即葡萄球菌蛋白A(SPA),存在于细胞壁上,具有种特异性,无型特异性。90%以上的金黄色葡萄球菌菌株都含有SPA,Cowan株含量最高(推算每个菌细胞上含80000个SPA分子),其他葡萄球菌不含SPA。10SPA 的生物学活性 与IgG结合 激活补
3、体 激活B细胞 抗吞噬作用 SPA的免疫原性 抑制ADCC SPA具有良好佐剂的作用11SPA的应用 协同凝集试验 用作免疫吸附剂 标记SPA的应用 制备抗IgG抗体12二、致病性与毒力因子(一)毒力因子1、溶血毒素 分为、四种,其中以溶血毒素为主。13溶血毒素(毒素)成分为蛋白质,分子量为34000,不耐热,6530min可被破坏。溶解多种动物和人的红细胞,也能破坏白细胞、血小板和巨噬细胞。作用平滑肌,使平滑肌收缩,导致局部缺血、麻痹、坏死。与牛羊的坏疽性乳腺炎有关。注射到家兔皮下,引起皮肤坏死,静脉注射可使家兔死亡。类毒素可用于葡萄球菌感染的预防和治疗。142、肠毒素成分是蛋白质,耐热抗酸
4、,能经受100 30min或胃蛋白酶的水解。该毒素可引起人类、猫、猴、仔猪的食物中毒。根据抗原性差异,肠毒素分20多个型,其中A、B、最常见,其次为D型。153、凝固酶多数致病菌株能产生凝固酶,此酶能使含有抗凝剂的动物血浆凝固。该酶有助于细菌抗吞噬和抗其他杀菌物质的作用,同时也使感染局限化。164、耐热核酸酶100作用15min不失去活性,该酶由致病菌株产生。感染部位组织细胞和白细胞崩解时释放出核酸,使渗出液粘性增加,此酶能迅速分解核酸,有利于细菌扩散。17葡萄球菌还可产生毒素与酶:溶纤维蛋白酶透明质酸酶杀白细胞素卵磷脂酶磷酸酶脂酶毒素休克综合症毒素表皮剥脱毒素18(二)所致疾病1、葡萄球菌病
5、 多由伤口感染引起,主要表现为化脓性炎症,如创伤感染、脓肿、蜂窝织炎、乳房炎、关节炎、皮炎等,有时也可引起败血症或脓毒败血症等。雏鸡、仔兔的葡萄球菌病可出现暴发流行,大量死亡。192、食物中毒被葡萄球菌肠毒素污染的食物或饲料能引起人和动物的食物中毒,表现急性胃肠炎症状。其发病率多于沙门氏菌和肉毒梭菌食物中毒的总和。因此,该菌在公共卫生上是一个重要的细菌。20皮肤充血、出血,关节滑膜囊肿大皮肤充血、出血,关节滑膜囊肿大关关 节节 肿肿 大大关节腔内有灰白色脓汁关节腔内有灰白色脓汁关节肿大、出血关节肿大、出血2122232425手部化脓感染26痈、毛囊炎27三、微生物学诊断(一)病料采集 根据不同
6、的病型采集不同的标本,如脓汁、渗出液、血液、乳汁、可疑食物、呕吐物或粪便等。28(二)细菌学检查病料涂片革兰氏染色镜检分离纯培养鉴定29致病性葡萄球菌鉴定要点 菌落颜色 溶血试验 凝固酶试验 分解甘露醇试验 耐热核酸酶试验 动物试验30(三)肠毒素检查发生食物中毒时,从剩余食物或呕吐物分离细菌,然后进行肠毒素检查。方法:动物接种 ELISA DNA探针技术31第二节 链球菌属(Streptococcu)32概述 一类链状排列的G球菌,有60多种。分布在自然界及动物体表、消化道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜、乳汁等部位。有些是非致病菌,有些可致人或动物的各种化脓性疾病、肺炎、乳腺炎、败血症等。33一、
7、主要特性(一)形态球形或卵圆形,直径0.51m,常排列成链状或成双。革兰氏阳性。无鞭毛、不形成芽胞。多数有荚膜。343536(二)培养 生长要求链球菌多数为兼性厌氧菌,少数为厌氧菌。最适生长温度37,最适pH7.47.6。致病菌对营养要求较高,普通培养基中生长不良,需添加血液、血清、葡萄糖等。37培养特性血琼脂形成灰白色,表面光滑,边缘整齐,直径0.11.0mm的小菌落。多数致病菌菌落周围形成溶血环。血清肉汤呈轻度浑浊,管底有粘性、絮状沉淀。38(三)分类 型溶血链球菌菌落周围形成12mm宽的不透明草绿色溶血环(溶血)。这种细菌致病力不强,多为条件致病菌。型溶血链球菌 菌落周围形成24mm宽的
8、完全透明的溶血环(溶血)。这类菌致病力强,常引起人及动物各种疾病。型链球菌 菌落周围无溶血环,此类菌无致病性。39二、致病性(一)毒力因子致病性链球菌可以产生多种毒素或酶,是其致病的主要物质。包括:链球菌溶血素致热外毒素(红疹毒素)链激酶(溶纤维蛋白酶)链道酶(链球菌DNA酶)透明质酸酶等40(二)所致疾病1、无乳链球菌 停乳链球菌 牛、羊乳房炎 乳房链球菌2、马链球菌马亚种 马腺疫3、马链球菌兽疫亚种 多种家畜的炎症 及败血病4、猪链球菌 致猪脑膜炎、关节炎、肺炎、心内膜炎、流 产和局部脓肿415、化脓链球菌 人的化脓性炎症、猩红热、扁桃腺炎、产褥热、败血症、风湿病及肾小球肾炎等,也可引起牛
9、乳腺炎。6、肺炎链球菌 为人类大叶性肺炎或脑膜炎的病原体,亦可致幼畜(犊牛、羔羊、仔猪)肺炎、胃肠炎或败血症。42三、微生物学诊断1、病料采集脓汁、乳汁、血液、组织脏器等。2、涂片镜检 见G成对或链状排列的球菌,可作初步诊断。3、分离培养 用血琼脂或血清琼脂平板,得到的纯培养物,进行溶血试验、生化试验和动物试验(接小白鼠)进行鉴定。43四、马链球菌兽疫亚种旧称兽疫链球菌。该菌普遍存在于动物的黏膜,尤其是马属动物的皮肤、上呼吸道黏膜、扁桃体及生殖道处,致多种家畜的炎症及败血症。该菌对营养要求较高,在含血清的培养基中生长较好,血琼脂上呈轻微的溶血。根据M蛋白抗原性差异,至少分15个血清型44马链球
10、菌兽疫亚种所致动物疾病 马 创伤感染、败血症、子宫炎、流产、关节炎、腹膜炎、幼驹脐带炎 牛 乳腺炎、子宫炎 猪 败血症、关节炎、流产 羊 败血症、心包炎、胸膜炎、肺炎 鸡 败血症45五、马链球菌马亚种 旧称马腺疫链球菌,是马腺疫的病原体。该病是马、骡、驴的一种急性传染病,其特征为颌下淋巴结呈急性化脓性炎症。病原菌存在于病马的鼻液和脓肿及脓汁内,有时健康马的扁桃体及上呼吸道黏膜也存在马腺疫链球菌。可通过污染的饲料、饮水、用具等经消化道感染,也可通过飞沫经呼吸道感染,还可通过创伤及交配感染。46(一)形态脓汁或液体培养中的菌呈长链、短链或成对排列,有些菌株有荚膜。(二)培养营养要求较高,需在加血液或血清的培养基培养在血平板上形成透明、闪光、微隆起、有粘性的露滴状菌落,菌落周围有明显的溶血环。47(三)致病性自然条件下感染马、驴、骡等动物,尤其是一岁左右的动物最易感。(四)微生物学诊断 1、涂片镜检 2、分离鉴定48