1、南昌大学上饶医院南昌大学上饶医院 余毅英余毅英 医院消毒、灭菌是预防医院内感染医院消毒、灭菌是预防医院内感染的重要措施之一。的重要措施之一。消毒、灭菌效果的监消毒、灭菌效果的监测是评价其消毒、灭菌方法是否合理；测是评价其消毒、灭菌方法是否合理；消毒剂是否有效；消毒、灭菌效果是否消毒剂是否有效；消毒、灭菌效果是否达标的唯一手段，因而在医院消毒、灭达标的唯一手段，因而在医院消毒、灭菌工作中是必不可少的。菌工作中是必不可少的。监测项目监测项目 手术室空气微生物学监测手术室空气微生物学监测 物体表面微生物学监测物体表面微生物学监测 医务人员手微生物学监测医务人员手微生物学监测 医疗器械消毒灭菌效果监测
2、医疗器械消毒灭菌效果监测 压力蒸汽灭菌效果监测压力蒸汽灭菌效果监测 低温等离子灭菌效果监测低温等离子灭菌效果监测 使用中消毒液的监测使用中消毒液的监测手术室空气微生物学监测手术室空气微生物学监测监测频率：每月一次，每次各不同级别的手监测频率：每月一次，每次各不同级别的手 术间各做一个术间各做一个 每季度时，不仅要做不同级别的手每季度时，不仅要做不同级别的手 术间，还要做复苏室、无菌间、术间，还要做复苏室、无菌间、器械室、仪器间的空气培养器械室、仪器间的空气培养千级手术间：一室、二室或三室普通手术间：四室或五室采样时间采样时间 消毒后消毒后 操作前操作前1.采用洁净技术净化空气的房间（采用洁净技
3、术净化空气的房间（）洁净系统自净后、从事医疗活动前洁净系统自净后、从事医疗活动前2.未采用洁净技术净化空气的房间（未采用洁净技术净化空气的房间（、）消毒、通风换气后、操作前消毒、通风换气后、操作前3.怀疑空气与医院感染暴发有关时怀疑空气与医院感染暴发有关时采样方法采样方法沉降法沉降法 浮游菌法浮游菌法1.浮游菌法：可选择六级撞击式空气采样器或其他浮游菌法：可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器（日常监测很少使用）按采经验证的空气采样器（日常监测很少使用）按采样器使用说明书操作。样器使用说明书操作。2.沉降法：常用方法使用普通营养琼脂平沉降法：常用方法使用普通营养琼脂平（90mm）进
4、行采样。培养皿置）进行采样。培养皿置37温箱中培温箱中培养养24h，分别计数手术区、周边区的平均细菌菌，分别计数手术区、周边区的平均细菌菌落数。落数。操作方法操作方法 将平皿放置在采样点处 采样高度距离地面80-150cm,距墙1m（静态时）或放置在地面上（空态时）采样时将平皿盖打开，扣放于平板旁 采用洁净技术净化空气的房间暴露30min 未采用洁净技术净化空气的房间 类环境暴露15min 类环境暴露5min 采样后盖好平皿盖子采样后盖好平皿盖子 记录科室、房间、采样人、采样时间记录科室、房间、采样人、采样时间 将平皿倒置放于托盘内（附化验单）将平皿倒置放于托盘内（附化验单）采样平皿尽快送至实
5、验室培养采样平皿尽快送至实验室培养 若怀疑与医院感染有关时进行若怀疑与医院感染有关时进行目标微生物检测目标微生物检测平板暴露法采样注意事项平板暴露法采样注意事项 1、采样前关闭各门，无人走动的情况下静止、采样前关闭各门，无人走动的情况下静止10min后采样后采样 2、楼层平面：放置培养皿从总平面中最靠里的房间开始、楼层平面：放置培养皿从总平面中最靠里的房间开始 布置，依次向外布，最后人员撤出。布置，依次向外布，最后人员撤出。3、每间房间：从房间的最里面开始布置，最后布置门附、每间房间：从房间的最里面开始布置，最后布置门附 近的点，然后人员撤出。近的点，然后人员撤出。4、收取培养皿时顺序相反，从
6、最外边的房间开始收，每、收取培养皿时顺序相反，从最外边的房间开始收，每 间房间从最靠门的培养皿开始收，最先布置的皿最后间房间从最靠门的培养皿开始收，最先布置的皿最后 收，沉降时间略有差别。收，沉降时间略有差别。5、另外再布置、另外再布置1点作为对照皿。点作为对照皿。对照皿：对照皿：将皿盖拿开后，马上重新盖上，同样放置将皿盖拿开后，马上重新盖上，同样放置3030分钟收起培养除分钟收起培养除3030分钟沉降过程为带盖分钟沉降过程为带盖沉降外其余过程均一样。目的是模拟整个沉降外其余过程均一样。目的是模拟整个操作过程，看培养皿、培养基以及人员操操作过程，看培养皿、培养基以及人员操作过程是否对结果有影响
7、。作过程是否对结果有影响。培养皿放置位置：培养皿放置位置：一般放置在地面上（空态时），注意乱流一般放置在地面上（空态时），注意乱流洁净室应尽量避开高效送风口正下方，若洁净室应尽量避开高效送风口正下方，若有固定设备、仪器（如手术床等），可放有固定设备、仪器（如手术床等），可放置在设备仪器上（静态时）。置在设备仪器上（静态时）。百级手术间培养皿放置点百级手术间培养皿放置点手术区为百级，周边区为千级手术区为百级，周边区为千级共共13个培养皿，手术区个培养皿，手术区5个，周边区个，周边区8个个千级手术间培养皿放置点千级手术间培养皿放置点手术区为千级，周边区为万级手术区为千级，周边区为万级共共9个培养皿
8、，手术区个培养皿，手术区3个，周边区个，周边区6个个万级手术间培养皿放置点万级手术间培养皿放置点手术区万级，周边区十万级手术区万级，周边区十万级共共7个培养皿，手术区个培养皿，手术区3个，周边区个，周边区4个个三十万级手术间培养皿放置点三十万级手术间培养皿放置点面积面积30m2布放布放4点点面积面积30 m2布放布放2点点培养皿正确放置法培养皿正确放置法动态监测（了解）动态监测（了解）动态监测（回风口动态平板采样法）动态监测（回风口动态平板采样法）方法：方法：（1）沉降法：在手术开始、手术）沉降法：在手术开始、手术2小时和结束前抽检小时和结束前抽检34次。次。在每个回风口中部摆放在每个回风口中
9、部摆放3个直径为个直径为90mm平皿，暴露平皿，暴露30min 后，在后，在37下培养下培养24（48）小时，计算菌落数）小时，计算菌落数（2）动态采样器法：浮游菌菌落检测应在切皮、缝合、连）动态采样器法：浮游菌菌落检测应在切皮、缝合、连台台 手术之间、手术进行手术之间、手术进行4小时等，选择不少于小时等，选择不少于3次，测定次，测定细菌菌落总数细菌菌落总数 动态监测（了解）动态监测（了解）3)3)其它洁净用房在当日上午其它洁净用房在当日上午1010时和下午时和下午4 4时时各测各测1 1次，在每个回风口中部摆放次，在每个回风口中部摆放3 3个直径个直径为为9cm9cm的平皿，暴露的平皿，暴露
10、30min30min后，在后，在3737下培下培养养2424（4848）小时，计算菌落数。）小时，计算菌落数。记录记录 化验单：科室、手术间、采样人、采样时化验单：科室、手术间、采样人、采样时间间 培养皿：手术间、采样点位（需写明手术培养皿：手术间、采样点位（需写明手术区及周边区）区及周边区）对采样人员的要求对采样人员的要求 着无菌的工作服、戴口罩帽子着无菌的工作服、戴口罩帽子 操作前洗手或手卫生操作前洗手或手卫生 所带物品清洁后方可带入所带物品清洁后方可带入 手臂及头部不可越过打开的培养皿上方手臂及头部不可越过打开的培养皿上方 行动及放置动作要轻行动及放置动作要轻 尽量减少对空气流动状态的影
11、响尽量减少对空气流动状态的影响 每次采样人员不得超过每次采样人员不得超过2人人物体表面消毒效果的监测物体表面消毒效果的监测监测频率监测频率:每月一次，对应空气培养的每月一次，对应空气培养的手术间做物表监测手术间做物表监测 采样时间采样时间 消毒后消毒后1、在消毒处理后在消毒处理后2、怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。、怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。采样面积采样面积 被采物表表面被采物表表面 100cm2，取全部表面，取全部表面 被采物表表面被采物表表面 100cm2，取，取100cm2采样方法采样方法 用用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌
12、有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液（磷酸盐缓冲液（PBS）或生理）或生理盐水采样液的棉拭子盐水采样液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返支，在规格板内横竖往返各涂抹各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规个规格板面积。剪去手接触部分，将棉拭子放入装有格板面积。剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml无菌检验用洗脱液的试管中及时送检。无菌检验用洗脱液的试管中及时送检。门把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采门把手等小型物体用棉拭子直接涂抹物体表面采样样采样门把手时，则用浸有生理盐水的采样门把手时，则用浸有生理盐水的无菌棉拭子直接抹擦门把手无菌棉拭子直接抹擦门把手
13、记录记录 化验单：记录科室、手术间、何种物体表化验单：记录科室、手术间、何种物体表面、何种消毒剂、采样人、采样时间面、何种消毒剂、采样人、采样时间 试管：标明科室、手术间试管：标明科室、手术间 采样结束后送到实验室采样结束后送到实验室合格标准合格标准 结果报告形式：物体表面菌落总数：结果报告形式：物体表面菌落总数：cfu/cm2；小型物体表面用小型物体表面用cfu/件表示件表示 规定标准规定标准、类区域：细菌菌落总数类区域：细菌菌落总数5cfu/cm2 类区域：细菌菌落总数类区域：细菌菌落总数10cfu/cm2 注意：注意：不得检出致病微生物不得检出致病微生物 怀疑与医院感染暴发有关时，进行目
14、标微生物检怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物检测测 医务人员手微生物的监测医务人员手微生物的监测（外科手消毒效果监测）（外科手消毒效果监测）监测频率：每月一次，每次三双手，分别为监测频率：每月一次，每次三双手，分别为 不同手术科室医生的手不同手术科室医生的手 一季度时则为六双手，均为手术一季度时则为六双手，均为手术 室护士或麻醉师的手室护士或麻醉师的手采样时间及方法采样时间及方法 采样时间采样时间 医务人员洗手，手消毒处理自然晾干后医务人员洗手，手消毒处理自然晾干后 采样方法采样方法 被检人五指并拢，掌心向上，用浸有无菌生理盐被检人五指并拢，掌心向上，用浸有无菌生理盐水的无菌棉拭子在单手
15、指曲面从指根到指端来回水的无菌棉拭子在单手指曲面从指根到指端来回涂擦两次，并随之转动采样棉拭子（一只手涂抹涂擦两次，并随之转动采样棉拭子（一只手涂抹面积面积30 cm2），将装有），将装有10ml物表采样液的试管放物表采样液的试管放在酒精灯上消毒管口后，将拭子放入试管在酒精灯上消毒管口后，将拭子放入试管 中，同中，同时剪去被手污染的部位。时剪去被手污染的部位。手培养采样法手培养采样法可采用不污染管口及棉拭子头端情况下折断棉拭子，可采用不污染管口及棉拭子头端情况下折断棉拭子，还可用无菌剪剪去污染部分还可用无菌剪剪去污染部分记录记录 试管上标明科室、被采人试管上标明科室、被采人 化验单写明化验单写
16、明 科室、采样地点、被采人、采样人、科室、采样地点、被采人、采样人、采样时间采样时间结果判定结果判定 外科手消毒，监测的细菌菌落总数应外科手消毒，监测的细菌菌落总数应5cfu/cm2 卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应10cfu/cm2不得检出致病微生物不得检出致病微生物医疗器械消毒效果监测医疗器械消毒效果监测（腔镜、眼科器械）（腔镜、眼科器械）高度危险性医疗器械高度危险性医疗器械 进入正常无菌组织、脉管系统或有无菌体进入正常无菌组织、脉管系统或有无菌体液（如血液）流过，若被微生物污染将导液（如血液）流过，若被微生物污染将导致极高感染危险的器材如手术器械；穿刺致极
17、高感染危险的器材如手术器械；穿刺针；腹腔镜；活检钳；牙科器械；心导管；针；腹腔镜；活检钳；牙科器械；心导管；植入物等植入物等 消毒水平：达到灭菌消毒水平：达到灭菌 消毒效果：应无菌生长消毒效果：应无菌生长中度危险性医疗器械中度危险性医疗器械 直接、间接接触粘膜的器材如胃肠道内镜；直接、间接接触粘膜的器材如胃肠道内镜；气管镜；喉镜；体温表；呼吸机管道；麻气管镜；喉镜；体温表；呼吸机管道；麻醉剂管道；压舌板等醉剂管道；压舌板等 消毒水平：高水平消毒或中水平消毒消毒水平：高水平消毒或中水平消毒 消毒效果：菌落数应消毒效果：菌落数应20cfu/件或件或100cm2 氧气湿化瓶、吸引器、加温加湿罐等宜采
18、氧气湿化瓶、吸引器、加温加湿罐等宜采用高水平消毒用高水平消毒低度危险性医疗器械低度危险性医疗器械 仅与完整皮肤接触而不与粘膜接触的器材仅与完整皮肤接触而不与粘膜接触的器材如听诊器；血压计袖带；被褥；墙面等如听诊器；血压计袖带；被褥；墙面等 消毒水平：中水平消毒或低水平消毒或保消毒水平：中水平消毒或低水平消毒或保持日常清洁持日常清洁 消毒效果：菌落数应消毒效果：菌落数应20cfu/件或件或100cm2内窥镜消毒灭菌效果的监测内窥镜消毒灭菌效果的监测 采样时间采样时间 消毒灭菌后消毒灭菌后 使用前使用前采样方法采样方法 监测部位为内镜的内腔面监测部位为内镜的内腔面 方法一：用无菌注射器抽取方法一：
19、用无菌注射器抽取10ml无菌生理盐水从无菌生理盐水从待检内镜的活检口注入内镜，用无菌试管从活检待检内镜的活检口注入内镜，用无菌试管从活检出口收集注入的液体出口收集注入的液体2h内送检内送检 方法二：用浸有无菌生理盐水的无菌棉拭子来回方法二：用浸有无菌生理盐水的无菌棉拭子来回抹擦内窥镜的关节、齿缝处，将装有抹擦内窥镜的关节、齿缝处，将装有10ml物表采物表采样液的试管放在酒精灯上消毒管口后，将拭子放样液的试管放在酒精灯上消毒管口后，将拭子放入试管入试管 中，同时剪去被手污染的部位。中，同时剪去被手污染的部位。合格标准合格标准 灭菌内镜灭菌内镜 无任何细菌检出无任何细菌检出 消毒内镜消毒内镜 细菌
20、总数细菌总数20cfu/件件 压力蒸汽灭菌监测压力蒸汽灭菌监测 快速消毒快速消毒 监测频率：每周一次（每周一）监测频率：每周一次（每周一）生物监测生物监测物理监测物理监测 化学监测化学监测监测方法监测方法快速消毒锅快速消毒锅指示胶带指示胶带B-D试纸试纸单参数化学指示剂单参数化学指示剂爬行卡爬行卡化学指示卡化学指示卡压力蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌 化学监测化学监测生物监测综合了所有参数生物监测综合了所有参数是反映灭菌效果最重要的监测方法是反映灭菌效果最重要的监测方法压力蒸汽灭菌压力蒸汽灭菌-生物监测生物监测快速消毒锅监测快速消毒锅监测 目的：目的：监测消毒锅的灭菌效果是否达标监测消毒锅的灭菌效果是否
21、达标 方法：方法：将菌片放置在消毒锅内进行灭菌，结束后将菌片放置在消毒锅内进行灭菌，结束后用无菌持物钳夹取菌片放入有培养液的试管内。用无菌持物钳夹取菌片放入有培养液的试管内。记录：记录：试管上注明科室、日期时间、消毒锅名称、试管上注明科室、日期时间、消毒锅名称、采样人；化验单同上采样人；化验单同上 合格标准：合格标准：无菌生长无菌生长记录及合格标准记录及合格标准 记录记录 试管：标明日期、锅次、消毒锅名称试管：标明日期、锅次、消毒锅名称 化验单：同上化验单：同上 合格标准合格标准 无菌生长无菌生长使用中消毒液的监测使用中消毒液的监测（消毒液染菌量监测）（消毒液染菌量监测）监测频率：每季度一次监
22、测频率：每季度一次采样方法采样方法 用无菌注射器吸取消毒液用无菌注射器吸取消毒液1ml，加入，加入9ml相相应中和剂中，充分振荡混匀。应中和剂中，充分振荡混匀。注明科室、何种消毒剂、开启日期、批号、注明科室、何种消毒剂、开启日期、批号、采样人以及采样日期采样人以及采样日期 采样结束后送至实验室采样结束后送至实验室中和剂中和剂 醇类与酚类消毒剂和普通营养肉汤中和醇类与酚类消毒剂和普通营养肉汤中和 含氯、碘和过氧化物消毒剂用含氯、碘和过氧化物消毒剂用0.1%硫代硫硫代硫酸钠中和剂酸钠中和剂合格标准合格标准 灭菌剂染菌量灭菌剂染菌量 0cfu/ml 皮肤黏膜消毒剂染菌皮肤黏膜消毒剂染菌 10cfu/ml 消毒剂染菌量消毒剂染菌量 100cfu/ml怀疑与医院感染暴发相关时进行怀疑与医院感染暴发相关时进行目标微生物检测目标微生物检测谢谢聆听！谢谢聆听！
