1、血栓和止血实验检查第一节第一节 血栓与止血的筛选检验血栓与止血的筛选检验一、一期止血缺陷的筛选检验一、一期止血缺陷的筛选检验二、二期止血缺陷的筛选检验二、二期止血缺陷的筛选检验三、纤溶活性增强的的筛选检验三、纤溶活性增强的的筛选检验四、抗凝物质检验四、抗凝物质检验2血栓和止血实验检查一期止血的筛查检验一期止血的筛查检验 出血时间测定出血时间测定 血小板计数血小板计数 束臂试验束臂试验 血块收缩试验血块收缩试验 毛细血管抵抗力试验毛细血管抵抗力试验 3血栓和止血实验检查 血小板计数血小板计数（platelet count,PC或或plt）正常值正常值：（100300）109/L危险PC20109
2、/L可引起自发性出血可引起自发性出血4血栓和止血实验检查出出 血血 时时 间间 测测 定定 bleeding time，BT一、原理：一、原理：测定在皮肤受特定条件外伤后，出血自然停测定在皮肤受特定条件外伤后，出血自然停止所需的时间即为出血时间。此过程反映了毛细止所需的时间即为出血时间。此过程反映了毛细血管与血小板的相互作血管与血小板的相互作 用，包括内皮下组织与血用，包括内皮下组织与血小板粘附（通过小板粘附（通过vWF 的作用）、血小板的聚集和的作用）、血小板的聚集和释放等反应，以释放等反应，以 及及PGI2与与TXA2的动态平衡。的动态平衡。5血栓和止血实验检查二、方法二、方法 Ivy法、
3、出血时间测定器法（卫生部推荐方法）法、出血时间测定器法（卫生部推荐方法）三、试剂与器材：三、试剂与器材：1、血压计，秒表，干净滤纸、血压计，秒表，干净滤纸 2、出血时间测定器、出血时间测定器 6血栓和止血实验检查四、操作：四、操作：1、血压计袖带缚于测定上肢的上臂，加压并维血压计袖带缚于测定上肢的上臂，加压并维 持在持在40mmHg,儿童减半。儿童减半。2、在肘前窝下、在肘前窝下5cm处的尺侧做局部消毒处的尺侧做局部消毒 后，将测定器垂直贴于皮肤表面，按下按后，将测定器垂直贴于皮肤表面，按下按 钮，同时启动秒表，移开测定器。钮，同时启动秒表，移开测定器。3、每隔、每隔30s,用干净滤纸吸去流出
4、的血液，直用干净滤纸吸去流出的血液，直 至流血自然停止，并记录秒表读数。至流血自然停止，并记录秒表读数。7血栓和止血实验检查五、参考值五、参考值：2.5-9.5 min六、临床意义六、临床意义：延长：延长：1、出血时间延长见于血小板减少症、出血时间延长见于血小板减少症 2、血小板功能异常血小板功能异常 3、血管性血友病、血管性血友病 4、血管壁异常、血管壁异常 5、某些严重的凝血因子缺乏、某些严重的凝血因子缺乏 缩短：高凝状态和血栓性疾病缩短：高凝状态和血栓性疾病8血栓和止血实验检查血小板检测血小板检测一、血小板生存时间检测一、血小板生存时间检测二、血小板相关抗体检测二、血小板相关抗体检测三、
5、血小板粘附试验三、血小板粘附试验四、血小板聚集试验四、血小板聚集试验五、血小板第五、血小板第3因子有效性检测因子有效性检测六、血小板膜糖蛋白检测六、血小板膜糖蛋白检测七、血小板活化指标检测（血浆七、血小板活化指标检测（血浆-TG、PF4、血、血 小板小板P选择素检测选择素检测）9血栓和止血实验检查诱聚剂诱聚剂PPPPPPPRPPRP血血 小小 板板 聚聚 集集 试试 验验platelet aggregation tset，PAgT10血栓和止血实验检查11血栓和止血实验检查临床意义：临床意义：血小板无力症、巨大血小板综合症、血小板血小板无力症、巨大血小板综合症、血小板贮存池病、低（无）纤维蛋白
6、原血症、肝硬化、贮存池病、低（无）纤维蛋白原血症、肝硬化、使用血小板抑制剂等。使用血小板抑制剂等。高凝状态、血栓形成性疾病、糖尿病、口服高凝状态、血栓形成性疾病、糖尿病、口服避孕药、人工瓣膜移植术、吸烟等。避孕药、人工瓣膜移植术、吸烟等。聚集率减低聚集率减低聚集率增高聚集率增高12血栓和止血实验检查质量控制：质量控制：1.采血要顺利，避免组织液混入，抗凝剂使用合理（不用采血要顺利，避免组织液混入，抗凝剂使用合理（不用 EDTA抗凝）抗凝）2.采集后采集后3h内室温下完成内室温下完成 3.试验前十天停用一切抑制血小板聚集的药物；试验前禁食试验前十天停用一切抑制血小板聚集的药物；试验前禁食 高脂类
7、食物高脂类食物 4.注意注意PRP：8001000r/min离心离心10min PLT(200400)X109/L PPP：3000r/min离心离心20min PLT20X109/L13血栓和止血实验检查 血血 小小 板板 粘粘 附附 试试 验验 platelet adhension test,PAdT原理：原理：受检者血液一定速度通过一定量玻璃珠的塑料受检者血液一定速度通过一定量玻璃珠的塑料管，测定通过玻璃珠前后血液中血小板数的差值，管，测定通过玻璃珠前后血液中血小板数的差值，即为粘附于玻珠和塑料管的血小板数，由此可计算即为粘附于玻珠和塑料管的血小板数，由此可计算出其占血小板总数的百分比，
8、即为血小板粘附率。出其占血小板总数的百分比，即为血小板粘附率。方法：玻球法、玻璃滤器法、玻珠法方法：玻球法、玻璃滤器法、玻珠法14血栓和止血实验检查临床意义：临床意义：血管性血友病、巨大血小板综合症、血小板血管性血友病、巨大血小板综合症、血小板无力症、肝硬化、无力症、肝硬化、MDS、急性白血病、服用抗血、急性白血病、服用抗血小板药物等小板药物等 见于血栓前状态和血栓性疾病、妊高症、口见于血栓前状态和血栓性疾病、妊高症、口服避孕药等服避孕药等粘附率减低粘附率减低粘附率增高粘附率增高15血栓和止血实验检查二期止血缺陷的筛选检验二期止血缺陷的筛选检验 全血凝固时间测定全血凝固时间测定 活化部分凝血活
9、酶时间测定活化部分凝血活酶时间测定 血浆凝血酶原时间测定血浆凝血酶原时间测定16血栓和止血实验检查活活 化化 部部 分分 凝凝 血血 活活 酶酶 时时 间间 测测 定定 activated partial thromboplastin time，APTT一、原理一、原理17血栓和止血实验检查APTT Ca2+脑磷脂脑磷脂白陶土白陶土 Ca2+脑磷脂脑磷脂部分凝部分凝血活酶血活酶18血栓和止血实验检查 二、操作二、操作 （一）（一）APTT手工法手工法(试管法）试管法）血浆血浆0.1mlAPTT试剂各试剂各0.1ml +CaCl20.1ml （混匀计时）（混匀计时）结果观察：缓慢倾斜试管，观察液
10、体流动状态，流动结果观察：缓慢倾斜试管，观察液体流动状态，流动 停止停止计时停止停止计时 参考值参考值 2545s45s (二）二）仪仪器法器法 3737水浴水浴5min37温浴19血栓和止血实验检查APTTAPTT延长延长缩短缩短因子因子VIII、IX、XI活性减低活性减低高凝状态高凝状态三、临床意义三、临床意义 肝素抗凝监测肝素抗凝监测20血栓和止血实验检查APTT纠正试验纠正试验 于患者血浆中分别加入于患者血浆中分别加入1/4 的正常新鲜血的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆、正常血清，再作浆、硫酸钡吸附血浆、正常血清，再作APTT试验。试验。硫酸钡吸附血浆硫酸钡吸附血浆 VIII、XI、XI
11、I 正常血清正常血清 IX、XI、XII 新鲜血浆新鲜血浆 VIII、IX、XI、XII 21血栓和止血实验检查凝血酶原时间测定凝血酶原时间测定Prothrombin time，PT一、原理一、原理 Ca2+脑磷脂脑磷脂PT组织因子组织因子Ca2+磷脂磷脂23血栓和止血实验检查 1、直接报告患者及正常对照的、直接报告患者及正常对照的PT秒数秒数 2、报告凝血酶原时间比值（、报告凝血酶原时间比值（PTR）PTR=受检者受检者PT（秒）（秒）/正常对照正常对照PT（秒）（秒）3、报告国际标准化比值（、报告国际标准化比值（INR）INR=PTRISI二、报告方式二、报告方式24血栓和止血实验检查PT
12、PT延长延长缩短缩短因子因子II、V、VII、X、Fg活性减低活性减低高凝状态高凝状态三、临床意义三、临床意义 口服双香豆素类抗凝药物监测口服双香豆素类抗凝药物监测25血栓和止血实验检查当当Hct Hct 增高增高55%55%或或25%40mg/L，见于，见于原发性纤溶症、原发性纤溶症、DIC、M3、应用链激酶等、应用链激酶等溶栓治疗时。溶栓治疗时。32血栓和止血实验检查血浆血浆D-二聚体测定二聚体测定D-Dimer一、原理：一、原理：1、胶乳凝集法、胶乳凝集法 2、ELISA法法二、临床意义：二、临床意义：1、DIC时呈阳性或明显增高，另见深静脉时呈阳性或明显增高，另见深静脉血栓、心梗、肺栓
13、塞、重症肝炎等血栓、心梗、肺栓塞、重症肝炎等 2、可作为原发纤溶和继发纤溶鉴别的重要、可作为原发纤溶和继发纤溶鉴别的重要依据。依据。33血栓和止血实验检查34血栓和止血实验检查生理性抗凝蛋白检验生理性抗凝蛋白检验一、抗凝血酶检测一、抗凝血酶检测 1、血浆抗凝血酶活性检测、血浆抗凝血酶活性检测 2、血浆抗凝血酶抗原检测、血浆抗凝血酶抗原检测二、蛋白二、蛋白C检测检测 1、血浆蛋白、血浆蛋白C活性检测活性检测 2、血浆蛋白、血浆蛋白C抗原检测抗原检测三、血浆蛋白三、血浆蛋白S抗原检测抗原检测四、组织因子途径抑制物检测四、组织因子途径抑制物检测35血栓和止血实验检查病理性抗凝物质检验病理性抗凝物质检
14、验一、复钙交叉试验一、复钙交叉试验二二、凝血酶时间检测及甲苯胺蓝纠正试验、凝血酶时间检测及甲苯胺蓝纠正试验三、普通肝素和低相对分子质量肝素检测三、普通肝素和低相对分子质量肝素检测四、凝血因子四、凝血因子抑制物检测抑制物检测五、狼疮抗凝物质的筛选试验和确诊试验五、狼疮抗凝物质的筛选试验和确诊试验36血栓和止血实验检查凝血酶时间测定及甲苯胺蓝纠正试验凝血酶时间测定及甲苯胺蓝纠正试验 thrombin time,TT一、原理一、原理:凝血酶凝血酶TT37血栓和止血实验检查二、结果判断：二、结果判断：正常人凝血酶时间一般在正常人凝血酶时间一般在16-18s，超过正常，超过正常对照对照3s或在或在20s
15、以上视为延长；如正常对照在以上视为延长；如正常对照在20s以上，则超过以上，则超过5s为延长。为延长。加甲苯胺蓝后加甲苯胺蓝后TT明显缩短，与未加甲苯胺明显缩短，与未加甲苯胺蓝的蓝的TT比较相差比较相差5s以上，视为纠正。以上，视为纠正。38血栓和止血实验检查TTTT延长延长血浆抗凝物质增多血浆抗凝物质增多纤维蛋白原异常纤维蛋白原异常甲苯胺蓝能纠正甲苯胺蓝能纠正甲苯胺蓝不能纠正甲苯胺蓝不能纠正 链激酶、尿激酶溶栓治疗监测指标链激酶、尿激酶溶栓治疗监测指标 39血栓和止血实验检查纤维蛋白原异常纤维蛋白原异常 高纤维蛋白原血症为心脑血高纤维蛋白原血症为心脑血管血栓形成的独立危险因素。管血栓形成的独立危险因素。量增高增高严重肝病严重肝病营养不良营养不良DIC减低减低老年人、慢性感染老年人、慢性感染肿瘤、应激、肿瘤、应激、口服避孕药期间等口服避孕药期间等40血栓和止血实验检查
