1、免疫球蛋白和抗体免疫球蛋白和抗体 一、抗体的发现和研究历史：一、抗体的发现和研究历史：18891889年：年：感染感染 动物血清动物血清 凝集反应凝集反应（凝集素）（凝集素）18901890年年(Behring):(Behring):白喉类毒素白喉类毒素 免疫免疫 动物血清动物血清中和毒素中和毒素(抗毒素抗毒素)2免疫球蛋白和抗体并发现在血清蛋白中主要是并发现在血清蛋白中主要是 -球蛋白（丙种球蛋白）球蛋白（丙种球蛋白）具有抗体活性。具有抗体活性。(antibody(antibody，Ab)Ab)凝集素凝集素抗毒素抗毒素溶菌素溶菌素沉淀素沉淀素19301930年发现：年发现：3免疫球蛋白和抗体
2、白蛋白白蛋白球蛋白球蛋白abg gabg gabg g未免疫动物血清未免疫动物血清免疫动物血清免疫动物血清免疫动物血清免疫动物血清+抗原处理吸收抗原处理吸收后后4免疫球蛋白和抗体 二、抗体的概念二、抗体的概念(重点重点)抗体（抗体（antibody,Ab)antibody,Ab)：动物机体受到抗原物质动物机体受到抗原物质刺激后，由刺激后，由B B淋巴细胞转化为浆细胞而产生的，能与淋巴细胞转化为浆细胞而产生的，能与相应抗原发生特异性反应的免疫球蛋白。相应抗原发生特异性反应的免疫球蛋白。将抗体介导的免疫称为将抗体介导的免疫称为体液免疫体液免疫,将含有抗体的将含有抗体的血清称为血清称为抗血清抗血清或
3、或免疫血清免疫血清。5免疫球蛋白和抗体 三、免疫球蛋白的概念三、免疫球蛋白的概念(重点重点)19641964年世界卫生组织召开会议，将年世界卫生组织召开会议，将具有抗体具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称为统称为免疫免疫球蛋白球蛋白（immunoglobulinimmunoglobulin，简称简称IgIg ）。）。免疫球蛋白除分布于体液中之外，还可存在免疫球蛋白除分布于体液中之外，还可存在于于B B细胞膜上。细胞膜上。6免疫球蛋白和抗体 免疫球蛋白可分为免疫球蛋白可分为两种两种类型：类型：分泌性分泌性IgIg ：存在于血清、体液以及分泌液中，具有：存在
4、于血清、体液以及分泌液中，具有抗体的各种功能。抗体的各种功能。膜型膜型IgIg ：位于：位于B B淋巴细胞的表面，即膜表面免疫球淋巴细胞的表面，即膜表面免疫球蛋白（蛋白（mIgmIg），是），是B B淋巴细胞的抗原识别受体（淋巴细胞的抗原识别受体（BCRBCR）。）。7免疫球蛋白和抗体 抗体的化学本质是抗体的化学本质是免疫球蛋白免疫球蛋白，但并非所有免疫，但并非所有免疫球蛋白都具有球蛋白都具有抗体的活性抗体的活性。IgAbAb=Ig Ig AbIgIg与与AbAb的关系的关系抗体抗体=生物学功能上的概念生物学功能上的概念 IgIg=化学结构上的概念化学结构上的概念8免疫球蛋白和抗体 四、抗体的
5、分类四、抗体的分类（一）根据所对应的抗原分：（一）根据所对应的抗原分：9免疫球蛋白和抗体（二）根据（二）根据有无抗原刺激分有无抗原刺激分：10免疫球蛋白和抗体（三）根据与抗原反应的性质分：（三）根据与抗原反应的性质分：11免疫球蛋白和抗体（四）根据根据抗原性分：（四）根据根据抗原性分：主要根据重链的不同主要根据重链的不同12免疫球蛋白和抗体一、免疫球蛋白的单体分子结构一、免疫球蛋白的单体分子结构 由由两条相同两条相同的较大的的较大的重链重链和和两条相同两条相同的较的较小的小的轻链轻链4 4条肽链通过轻链与重链之间的条肽链通过轻链与重链之间的二硫键二硫键连接起来构成的连接起来构成的“Y Y”字形
6、的分子结构。字形的分子结构。13免疫球蛋白和抗体14免疫球蛋白和抗体（一）重链和轻链（一）重链和轻链 1 1重链（重链（heavy chainheavy chain，H H链）链）由由450-550450-550个氨基酸残基组成，分子量个氨基酸残基组成，分子量55-75KD55-75KD，有有4-54-5个链内二硫键组成的环肽，两重链之间由一个链内二硫键组成的环肽，两重链之间由一对或两对以上的二硫键互相连接。对或两对以上的二硫键互相连接。根据根据IgIg重链抗原性的差异，重链抗原性的差异，IgIg可分为可分为5 5类：类：IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE和和IgDIgD，
7、相应相应H H链为链为、链，链，不同免疫球蛋白的差别就由重链所决定。不同免疫球蛋白的差别就由重链所决定。15免疫球蛋白和抗体 2 2轻链（轻链（light chainlight chain，L L链）链）由由214214个氨基酸残基组成，分子量为个氨基酸残基组成，分子量为24KD24KD，有，有两个由链内二硫键组成的环肽，在羧基端靠二硫两个由链内二硫键组成的环肽，在羧基端靠二硫键分别与两条重链连接。键分别与两条重链连接。各类免疫球蛋白的轻链都相同，均可分为：各类免疫球蛋白的轻链都相同，均可分为：KappaKappa（）与）与lambdalambda（）2 2个型。个型。16免疫球蛋白和抗体 （
8、二）可变区和恒定区（二）可变区和恒定区 1 1、H H链：链：N N端开始的最初端开始的最初110110个氨基酸为个氨基酸为可变区可变区（VHVH），之后一直到），之后一直到C C端的氨基酸称为端的氨基酸称为恒定区恒定区（CHCH）。在）。在VHVH中有中有3 3个区域的氨基酸变异最大，称个区域的氨基酸变异最大，称为为高（超）变区高（超）变区（HVRHVR），其余的氨基酸变化较小，），其余的氨基酸变化较小，称为称为骨架区骨架区。2 2、L L链：链：N N端开始的端开始的109109个氨基酸为个氨基酸为可变区可变区(VL(VL），），其余的为其余的为恒定区（恒定区（CLCL），在在VLVL中也
9、有中也有3 3个高变区个高变区。17免疫球蛋白和抗体18免疫球蛋白和抗体（三）功能区（三）功能区 1 1、基本含义、基本含义 免疫球蛋白的多肽链分子可折叠形成免疫球蛋白的多肽链分子可折叠形成几个由链内二硫键连接成的环状球形结构，此即其几个由链内二硫键连接成的环状球形结构，此即其IgIg的的功能区（或结构域功能区（或结构域），每一功能区约有），每一功能区约有110110个个氨基酸组成，其顺序具有高度的同源性。氨基酸组成，其顺序具有高度的同源性。2 2、L L链功能区链功能区 有两个，即有两个，即VLVL和和CLCL，分别位于可变，分别位于可变区和恒定区。区和恒定区。3 3、H H链功能区链功能区
10、 IgGIgG、IgAIgA、IgDIgD有有4 4个个（V V区区1 1个，个，VHVH，C C区区3 3个，个，CH1CH1、CH2CH2和和CH3CH3）；）；IgMIgM、IgEIgE有有5 5个个（增加（增加一个一个CH4CH4）。）。19免疫球蛋白和抗体20免疫球蛋白和抗体 4 4、功能区作用、功能区作用 （1 1）VHVH和和VL:VL:特异性识别特异性识别和结合抗原，和结合抗原，由由VHVH和和VLVL内的内的高变区构成抗体分子的抗原高变区构成抗体分子的抗原结合点。结合点。（2 2）CH1CH1和和CL:CL:同种异型同种异型的遗传标记的遗传标记。（3 3）IgGIgG的的CH
11、2CH2和和IgMIgM的的CH3 CH3 是抗体分子的补体结合点，是抗体分子的补体结合点，与补体的活化有关。与补体的活化有关。（4 4）CH3/CH4:CH3/CH4:细胞结合细胞结合位点，位点，是同免疫活性细胞是同免疫活性细胞（如巨噬细细胞、（如巨噬细细胞、B B细胞、细胞、NKNK细胞）的细胞）的FCFC受体的结合部位。受体的结合部位。21免疫球蛋白和抗体 二、免疫球蛋白的特殊分子结构二、免疫球蛋白的特殊分子结构 （一）绞链区（一）绞链区 1 1、含义、含义 在两条重链之间二硫键连接处附近的重链恒在两条重链之间二硫键连接处附近的重链恒定区，即定区，即CH1CH1尾部和尾部和CH2CH2头
12、部的小段肽链；与抗体分子头部的小段肽链；与抗体分子的构型变化有关的构型变化有关,称为称为绞链区绞链区。2 2、功能、功能 含有丰富的含有丰富的脯氨酸脯氨酸，因此易伸展弯曲，当因此易伸展弯曲，当抗体与抗原结合时，该区可转动，一方面使可变区的抗体与抗原结合时，该区可转动，一方面使可变区的两个抗原结合点尽量与抗原结合，另一方面可使抗体两个抗原结合点尽量与抗原结合，另一方面可使抗体分子变构，使补体结合位点暴露出来分子变构，使补体结合位点暴露出来。且易被且易被木瓜蛋木瓜蛋白酶、胃蛋白酶白酶、胃蛋白酶等水解。等水解。22免疫球蛋白和抗体23免疫球蛋白和抗体（二）（二）J J链和分泌成分链和分泌成分 1 1
13、、J J链链 即连接链即连接链 是一条多肽链，富含半胱氨酸是一条多肽链，富含半胱氨酸;由浆细胞合成由浆细胞合成;以二硫键的形式共价结合到以二硫键的形式共价结合到IgIg的重链上的重链上;在在IgMIgM和分泌型和分泌型IgAIgA单体之间起连接作用。单体之间起连接作用。24免疫球蛋白和抗体 2 2、分泌成份（、分泌成份（SC)SC)（1 1）是二聚体）是二聚体IgAIgA上的一个辅助成分；上的一个辅助成分；（2 2）由上皮细胞合成，化学本质为糖蛋白）由上皮细胞合成，化学本质为糖蛋白（3 3）以共价形式结合到）以共价形式结合到IgAIgA分子，并一起被分泌分子，并一起被分泌到粘膜表面，又称分泌片
14、（到粘膜表面，又称分泌片（secretory piece,secretory piece,SPSP）；）；（4 4）可抵抗外分泌液中的蛋白水解酶对二聚体）可抵抗外分泌液中的蛋白水解酶对二聚体IgAIgA的降解。的降解。25免疫球蛋白和抗体26免疫球蛋白和抗体（三）单体、双体（三）单体、双体和五聚体和五聚体 1 1、单体、单体 由一对由一对L L链和链和H H链组成的基链组成的基本结构。本结构。2 2、双体、双体 分泌型的分泌型的IgAIgA由由J J链连接的两链连接的两个单体。个单体。3 3、五聚体、五聚体 IgMIgM是是由由J J链和二硫键连链和二硫键连接的五个单体。接的五个单体。27免疫
15、球蛋白和抗体 （一）木瓜蛋白酶酶切结果（一）木瓜蛋白酶酶切结果 木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶可将可将H H链铰链区二硫键的近链铰链区二硫键的近N N端切断，端切断，得到大小相近的得到大小相近的3 3个片段；其中有两个相同的片段，个片段；其中有两个相同的片段，称称抗原结合片段（抗原结合片段（FabFab），另一个为另一个为FCFC片段片段，可形成，可形成蛋白结晶。蛋白结晶。三、免疫球蛋白的水解片段与生物学活性三、免疫球蛋白的水解片段与生物学活性28免疫球蛋白和抗体（二）胃蛋白酶酶切结果（二）胃蛋白酶酶切结果 胃蛋白酶胃蛋白酶可将可将H H链从铰链区二硫键的近链从铰链区二硫键的近C C端切端切断，得到一个
16、具有双价活性的断，得到一个具有双价活性的F(ab)F(ab)2 2片片段和若段和若干个小分子多肽碎片干个小分子多肽碎片（pFcpFc）。）。F(ab)2F(ab)2片段与片段与抗原结合可发生凝集和沉淀反应，抗原结合可发生凝集和沉淀反应，pFcpFc片段失去片段失去生物学活性。生物学活性。29免疫球蛋白和抗体30免疫球蛋白和抗体一、免疫球蛋白的种类一、免疫球蛋白的种类 免疫球蛋白可区分为类、亚类、型、亚型等。免疫球蛋白可区分为类、亚类、型、亚型等。（一）类（一）类 免疫球蛋白免疫球蛋白类类的区分是依据其的区分是依据其重链重链C C区的理化特性及区的理化特性及抗原性抗原性的差异，在同种系所有个体内
17、的免疫球蛋白可分为的差异，在同种系所有个体内的免疫球蛋白可分为IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、IgEIgE、IgDIgD五大类五大类(class),(class),重链分别称为重链分别称为,链链。（二）亚类（二）亚类 同一种类免疫球蛋白，又可根据其同一种类免疫球蛋白，又可根据其重链恒定区的微细重链恒定区的微细结构、二硫键的位置与数目及抗原特性结构、二硫键的位置与数目及抗原特性的不同，进一步分的不同，进一步分为为亚类亚类（subclasssubclass）。如人的）。如人的IgGIgG有有IgG1IgG1、IgG2IgG2、IgG3IgG3和和IgG4IgG4四个亚类。四个亚类。第三节
18、第三节 免疫球蛋白的种类与抗原决定簇免疫球蛋白的种类与抗原决定簇31免疫球蛋白和抗体（三）型（三）型 根据轻链恒定区的抗原性不同，各类免疫根据轻链恒定区的抗原性不同，各类免疫球蛋白的轻链分球蛋白的轻链分为为和和两个型两个型（typetype），任），任何种类的免疫球蛋白均有两型轻链分子。何种类的免疫球蛋白均有两型轻链分子。（四）亚型（四）亚型 根据根据型轻链型轻链N N端恒定区上氨基酸排列顺序端恒定区上氨基酸排列顺序的差异，免疫球蛋白又的差异，免疫球蛋白又可分为若干亚型可分为若干亚型（subtypesubtype），），型轻链无亚型。型轻链无亚型。（五）亚群（五）亚群 根据免疫球蛋白根据免疫球
19、蛋白V V区的一级结构特点，可将区的一级结构特点，可将免疫球蛋白免疫球蛋白分为分为3 35 5个亚群个亚群（subgroupsubgroup）。）。32免疫球蛋白和抗体 二、免疫球蛋白的抗原决定簇（血清型）二、免疫球蛋白的抗原决定簇（血清型）（一）同种型决定簇（一）同种型决定簇 指在同一种属动物所有个体指在同一种属动物所有个体的的IgIg分子共同具有的抗原特异性标志，为分子共同具有的抗原特异性标志，为种属型种属型标志标志。即是说在同一种动物不同个体之间同时存。即是说在同一种动物不同个体之间同时存在不同类型的免疫球蛋白，不表现出抗原性，只在不同类型的免疫球蛋白，不表现出抗原性，只是在异种动物之间
20、才表现出抗原性。同种型抗原是在异种动物之间才表现出抗原性。同种型抗原决定基存在于决定基存在于Ig CIg C区，表现在全部区，表现在全部IgIg的类、亚类、的类、亚类、型、亚型分子上。型、亚型分子上。33免疫球蛋白和抗体（二）同种异型决定簇二）同种异型决定簇 指免疫球蛋白在同一种动指免疫球蛋白在同一种动物不同个体之间呈现出的抗原性，为物不同个体之间呈现出的抗原性，为个体型标志个体型标志。同种异型抗原决定基广泛存在于同种异型抗原决定基广泛存在于Ig CHIg CH和和CLCL区。区。34免疫球蛋白和抗体（三）独特型决定簇（三）独特型决定簇 由抗体分子的可变区呈现出的抗原性就称为免由抗体分子的可变
21、区呈现出的抗原性就称为免疫球蛋白（抗体）的疫球蛋白（抗体）的独特型独特型(重点重点)，或称个体基因或称个体基因型型，可变区内的抗原决定簇称为，可变区内的抗原决定簇称为独特型决定簇独特型决定簇，是，是每个免疫球蛋白分子所特有的抗原特异性标志。每个免疫球蛋白分子所特有的抗原特异性标志。其其中单个的抗原决定簇，又称为中单个的抗原决定簇，又称为独特位独特位。独特型在异种、同种异体乃至同一个体内均可独特型在异种、同种异体乃至同一个体内均可刺激产生相应的抗体，这种抗体称为刺激产生相应的抗体，这种抗体称为抗独特型抗体抗独特型抗体。35免疫球蛋白和抗体36免疫球蛋白和抗体 一、免疫球蛋白一、免疫球蛋白V V区
22、的功能：区的功能：主要是识别和结合特异性抗原主要是识别和结合特异性抗原37免疫球蛋白和抗体（一）（一）激活补体激活补体 IgG1-3IgG1-3和和IgMIgM与相应抗原与相应抗原结合后，可因构型改变而结合后，可因构型改变而使其使其CH2/CH3CH2/CH3功能区内的功能区内的补体结合点暴露，从而激补体结合点暴露，从而激活补体活补体经典途径经典途径。IgG4IgG4、IgAIgA和和IgEIgE的凝聚物的凝聚物可激活补体可激活补体旁路途径旁路途径。二、免疫球蛋白二、免疫球蛋白C C区的功能区的功能38免疫球蛋白和抗体 1.1.调理作用调理作用(重点重点)IgGIgG与细菌等颗粒性抗原结合后，
23、与细菌等颗粒性抗原结合后，可通过其可通过其FcFc段与巨噬细胞和中性粒细胞表面相应段与巨噬细胞和中性粒细胞表面相应IgG FcIgG Fc受体结合，促进吞噬细胞对细菌等颗粒抗原受体结合，促进吞噬细胞对细菌等颗粒抗原的吞噬，此即抗体的调理吞噬作用。的吞噬，此即抗体的调理吞噬作用。（二）结合（二）结合FcFc受体受体 39免疫球蛋白和抗体2.2.抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（ADCCADCC）(重点重点).IgGIgG与肿瘤或病毒感染的靶细胞结合后，可通过与肿瘤或病毒感染的靶细胞结合后，可通过其其FcFc段与段与NKNK细胞、巨噬细胞和中性粒细胞表面相应细胞、巨噬细胞
24、和中性粒细胞表面相应IgG FcIgG Fc受体结合，增强受体结合，增强NKNK细胞和触发吞噬细胞对靶细细胞和触发吞噬细胞对靶细胞的杀伤作用，此即胞的杀伤作用，此即ADCCADCC效应。效应。40免疫球蛋白和抗体3.3.介导介导I I型超敏反应型超敏反应 IgEIgE引起引起I I型超敏反应型超敏反应41免疫球蛋白和抗体（三）穿过胎盘和粘膜（三）穿过胎盘和粘膜 IgGIgG、sIgAsIgA42免疫球蛋白和抗体 一、一、IgGIgG 人和动物中人和动物中含量最高含量最高的免疫球蛋白，的免疫球蛋白，占血清总占血清总IgIg的的75%75%80%80%，半衰期约，半衰期约20202323天；天；主
25、要由脾脏和淋巴结中的浆细胞产主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞产 生，大部分存在于血液中（生，大部分存在于血液中（45%45%50%50%），），其余存在于组织液和淋巴液中；其余存在于组织液和淋巴液中；IgGIgG是是惟一可通过人和兔胎盘的抗体惟一可通过人和兔胎盘的抗体，在新生动物，在新生动物抗感染中起重要作用。抗感染中起重要作用。IgGIgG是动物自然感染和人工主动免疫后，机体所产是动物自然感染和人工主动免疫后，机体所产生的主要抗体，生的主要抗体，是动物机体抗感染免疫的主力是动物机体抗感染免疫的主力，大多数抗，大多数抗菌、抗病毒抗体和抗菌素都为菌、抗病毒抗体和抗菌素都为IgGIgG类，因而也是类，
26、因而也是血清学诊断血清学诊断和疫苗免疫后监测的主要抗体和疫苗免疫后监测的主要抗体；IgGIgG还参与抗肿瘤免疫，同时也是引起还参与抗肿瘤免疫，同时也是引起型、型、型型变态反应及自身免疫病的抗体变态反应及自身免疫病的抗体。IgGIgG通过经典途径活化补体，具有调理吞噬、介导通过经典途径活化补体，具有调理吞噬、介导ADCCADCC、结合、结合SPASPA和结合链球菌和结合链球菌G G蛋白的作用。蛋白的作用。43免疫球蛋白和抗体 动物机体初次免疫后动物机体初次免疫后产生最产生最 早早的免疫球蛋白；但含量仅占血清的免疫球蛋白；但含量仅占血清 IgIg的的10%10%左右，左右，主要由脾脏和淋巴结中的浆
27、主要由脾脏和淋巴结中的浆 细胞产生，一般不能通过血管壁，细胞产生，一般不能通过血管壁，主要分布于血液中；主要分布于血液中；IgMIgM是是5 5个单体组成的五聚体个单体组成的五聚体 （pentamerpentamer）,又称为又称为巨球蛋白巨球蛋白（macroglobulinmacroglobulin）。）。IgMIgM在体内产最早，但持续时间短，不是抗感染在体内产最早，但持续时间短，不是抗感染免疫的主力，但对免疫的主力，但对早期抗感染免疫和早期血清学诊断早期抗感染免疫和早期血清学诊断十十分重要，并且分重要，并且IgMIgM有多个抗原结合部位，其单个的杀菌、有多个抗原结合部位，其单个的杀菌、溶
28、菌、溶血、促进吞噬及凝集作用，均较溶菌、溶血、促进吞噬及凝集作用，均较IgGIgG高；高；IgMIgM同样具有抗肿瘤作用，也是同样具有抗肿瘤作用，也是型型型变态反型变态反应及自身免疫病的抗体应及自身免疫病的抗体。膜表面膜表面IgMIgM是是BCRBCR的主要成分。只表达的主要成分。只表达mIgMmIgM是未成是未成熟熟B B细胞的标志，记忆细胞的标志，记忆B B细胞表面的细胞表面的mIgMmIgM逐渐消失。逐渐消失。二、二、IgMIgM44免疫球蛋白和抗体 IgAIgA以单体和二以单体和二 聚体两种分子形式存在聚体两种分子形式存在,单体单体存在于血清中，称存在于血清中，称 为血清型为血清型Ig
29、A,IgA,占血清占血清IgIg 的的10%10%20%20%，二聚体为分泌型二聚体为分泌型IgA,IgA,是由呼吸道、消化道、是由呼吸道、消化道、泌尿生殖道等部位粘膜固有层中的浆细胞所产生。主要存泌尿生殖道等部位粘膜固有层中的浆细胞所产生。主要存在于呼吸道、消化道、生殖道的外分泌液及初乳、唾液、在于呼吸道、消化道、生殖道的外分泌液及初乳、唾液、泪液等分泌物中。泪液等分泌物中。分泌型分泌型IgAIgA是是参与粘膜局部免疫参与粘膜局部免疫的主要抗体，在传的主要抗体，在传染病预防接种中，经滴鼻、点眼、饮水及喷雾途径免疫，染病预防接种中，经滴鼻、点眼、饮水及喷雾途径免疫，均可产生分泌型均可产生分泌型
30、IgAIgA，从而建立相应的粘膜免疫力。，从而建立相应的粘膜免疫力。婴幼婴幼儿和幼畜禽从母乳中可获得儿和幼畜禽从母乳中可获得sIgA sIgA 产生产生自然被动免疫自然被动免疫，新新生儿和幼畜禽易患呼吸道、胃肠道感染可能与生儿和幼畜禽易患呼吸道、胃肠道感染可能与IgAIgA合成不合成不足有关。足有关。三、三、IgA46免疫球蛋白和抗体 IgEIgE产生部位与分泌型产生部位与分泌型IgAIgA相似，是血清中含量最低的相似，是血清中含量最低的IgIg。IgEIgE的重链多一个功能区的重链多一个功能区CH4CH4，此区是细胞结合的部位，此区是细胞结合的部位，因而它是一种亲细胞性抗体。因而它是一种亲细
31、胞性抗体。结合在肥大细胞和嗜碱性细胞上的结合在肥大细胞和嗜碱性细胞上的IgEIgE与抗原结合后，能与抗原结合后，能引起这些细胞脱颗粒，释放组织氨等活性介质，从而引起引起这些细胞脱颗粒，释放组织氨等活性介质，从而引起I I型过敏反应型过敏反应。IgEIgE在抗寄生虫感染在抗寄生虫感染中具有重要作用，研究表明，蠕虫、中具有重要作用，研究表明，蠕虫、血吸虫和旋毛虫等寄生虫病以及某些真菌感染后，均可诱导血吸虫和旋毛虫等寄生虫病以及某些真菌感染后，均可诱导机体产生大量的机体产生大量的IgEIgE抗体。抗体。五、五、IgDIgD IgD IgD在个体发育的任何时候产生，在血清中浓度极低，平在个体发育的任何
32、时候产生，在血清中浓度极低，平均约均约0.03mg/ml0.03mg/ml，且极不稳定，容易降解，半衰期仅，且极不稳定，容易降解，半衰期仅3 3天；天；主要作为成熟主要作为成熟B B细胞膜上的抗原特异性受体，是细胞膜上的抗原特异性受体，是B B细胞分细胞分化发育成熟的标志化发育成熟的标志，成熟，成熟B B细胞活化后，或者变成记忆细胞活化后，或者变成记忆B B细胞细胞时，时，mIgDmIgD逐渐消失。逐渐消失。对防止免疫耐受有一定作用对防止免疫耐受有一定作用四、四、IgEIgE47免疫球蛋白和抗体各类免疫球蛋白的生物学活性各类免疫球蛋白的生物学活性 免疫球蛋白免疫球蛋白IgGIgGIgAIgAI
33、gMIgMIgDIgDIgEIgE重链名称重链名称重链功能区数目重链功能区数目4 44 45 54 45 5主要存在形式主要存在形式单体单体单体、双体单体、双体五聚体五聚体单体单体单体单体分子量分子量(KD)(KD)146-170146-170160160，400400970970175175188188碳水化合物（碳水化合物（%）4 41010121218181212血清浓度血清浓度(mg/dl)(mg/dl)1150115030030021021050501501500.3-40.3-40.0020.002血清总血清总Ig(%)Ig(%)757510105-105-10110.0010.0
34、01外分泌液外分泌液-+-经典途径活化补体经典途径活化补体+-+-代替途径活化补体代替途径活化补体+?+半衰期（天）半衰期（天）20-2320-235.85.85.15.12.82.82.52.5合成部位合成部位脾、淋巴结浆细脾、淋巴结浆细胞胞粘膜相关淋巴粘膜相关淋巴样组织样组织脾、淋巴结浆细脾、淋巴结浆细胞胞扁桃体、脾浆扁桃体、脾浆细胞细胞粘膜固有层浆粘膜固有层浆细胞细胞通过胎盘通过胎盘+-免疫作用免疫作用抗菌、抗病毒、抗菌、抗病毒、抗毒素、自身抗抗毒素、自身抗体体粘膜局部免疫粘膜局部免疫作用，抗菌、作用，抗菌、抗病毒，免疫抗病毒，免疫排除功能排除功能早期防御作用，早期防御作用，溶菌，溶血，
35、溶菌，溶血，SmIgMSmIgM，天然血，天然血型抗体，类风湿型抗体，类风湿因子因子确切功能目前确切功能目前不清楚不清楚抗寄生虫感染，抗寄生虫感染，I I型超敏反应型超敏反应48免疫球蛋白和抗体 一、多克隆抗体（第一代抗体）一、多克隆抗体（第一代抗体）（一）概念（一）概念(重点重点).).采用传统的免疫方法，将抗原物质经不同途采用传统的免疫方法，将抗原物质经不同途径注入动物体内后，经数次免疫后采取动物血液，径注入动物体内后，经数次免疫后采取动物血液，分离出血清，由此获得的抗血清即为分离出血清，由此获得的抗血清即为多克隆抗体多克隆抗体（polyclonal antibody,PcAbpolycl
36、onal antibody,PcAb），该抗血清是），该抗血清是一种多克隆的混合抗体，具有高度的异质性，即一种多克隆的混合抗体，具有高度的异质性，即针对同一抗原决定簇的抗体仍是由不同针对同一抗原决定簇的抗体仍是由不同B B细胞克细胞克隆产生的不同质的抗体所组成。隆产生的不同质的抗体所组成。（二）基本制备过程（二）基本制备过程 抗原制备抗原制备动物免疫动物免疫检测血清抗体检测血清抗体效价效价血清分离与保存。血清分离与保存。第六节第六节 抗体的人工制备抗体的人工制备49免疫球蛋白和抗体50免疫球蛋白和抗体 二、单克隆抗体（第二代抗体）二、单克隆抗体（第二代抗体）(重点重点).).（一）概念（一）概
37、念 由一个由一个B B细胞分化增殖的子代细胞细胞分化增殖的子代细胞（浆细胞）克隆、产生的针对单一抗原决定簇的（浆细胞）克隆、产生的针对单一抗原决定簇的抗体，或者说是由一个识别一种抗原表位的抗体，或者说是由一个识别一种抗原表位的B B细细胞克隆产生的同源抗体，胞克隆产生的同源抗体，称为单克隆抗体称为单克隆抗体（McAbMcAb）。）。51免疫球蛋白和抗体（二）优点（二）优点 1.1.有高度的有高度的单一性、均一性单一性、均一性；2.2.纯度高纯度高，制备时不需纯化抗原就可得到纯抗体；，制备时不需纯化抗原就可得到纯抗体；3.3.效价高效价高；4.4.产量高产量高，且可连续生产特异性强；，且可连续生
38、产特异性强；5.5.特异性强特异性强，少或无血清交叉反应。，少或无血清交叉反应。52免疫球蛋白和抗体（三）制备单克隆抗体的基本原理（三）制备单克隆抗体的基本原理（1 1）DNADNA合成的合成的2 2条途径条途径 主要途径：可被主要途径：可被氨基喋呤氨基喋呤(A)(A)所阻断所阻断 旁路途径：利用旁路途径：利用次黄嘌呤次黄嘌呤(H)(H)和和胸腺嘧啶核苷胸腺嘧啶核苷(T)(T)l 次黄嘌呤次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)(HGPRT)l 胸腺嘧啶核苷激酶胸腺嘧啶核苷激酶(TK)(TK)。所需要的酶所需要的酶53免疫球蛋白和抗体（2 2）所用的细胞）所用的细胞54
39、免疫球蛋白和抗体55免疫球蛋白和抗体（3 3）所用培养基）所用培养基56免疫球蛋白和抗体（三）基本制备过程（三）基本制备过程 制备抗原制备抗原 免疫动物免疫动物 免疫脾细胞和骨髓瘤免疫脾细胞和骨髓瘤细胞的制备细胞的制备 细胞融合细胞融合 杂交瘤细胞的选择杂交瘤细胞的选择培养培养 杂交瘤细胞的的筛选杂交瘤细胞的的筛选 杂交瘤细胞的杂交瘤细胞的克隆化克隆化 单克隆抗体的检定单克隆抗体的检定 杂交瘤细胞系杂交瘤细胞系的建立的建立 单克隆抗体的大量制备（动物体内诱单克隆抗体的大量制备（动物体内诱生法和体外培养法）生法和体外培养法）57免疫球蛋白和抗体58免疫球蛋白和抗体单克隆抗体的大量生产单克隆抗体的
40、大量生产59免疫球蛋白和抗体 单克隆和多克隆抗体的比较和用途单克隆和多克隆抗体的比较和用途1 1、用于免疫学检测，辅助、用于免疫学检测，辅助临床诊断，用于各种病原临床诊断，用于各种病原体以及肿瘤的诊断体以及肿瘤的诊断2 2、McAbMcAb用于亲和层析，分用于亲和层析，分离微量可溶性抗原离微量可溶性抗原特异性特异性敏感性敏感性均一性均一性McAbPcAb低低差差无无高高强强有有3 3、标记的、标记的McAbMcAb用于基础研用于基础研究，了解细胞分化等究，了解细胞分化等4 4、制备生物导弹用于肿瘤、制备生物导弹用于肿瘤、移植等的临床治疗。移植等的临床治疗。特异性特异性敏感性敏感性均一性均一性M
41、cAbPcAb低低差差无无高高强强有有3 3、标记的、标记的McAbMcAb用于基础研用于基础研究，了解细胞分化等究，了解细胞分化等4 4、制备生物导弹用于肿瘤、制备生物导弹用于肿瘤、移植等的临床治疗。移植等的临床治疗。60免疫球蛋白和抗体 三、基因工程抗体（第三、基因工程抗体（第3 3代抗体）代抗体）自自19751975年单克隆抗体杂交瘤技术问世以来，年单克隆抗体杂交瘤技术问世以来，单克隆抗体在医学中被广泛地应用于疾病的诊断单克隆抗体在医学中被广泛地应用于疾病的诊断及治疗。及治疗。但目前绝大数单克隆抗体是鼠源的，临床重但目前绝大数单克隆抗体是鼠源的，临床重复给药时体内产生抗鼠抗体，使临床疗效
42、减弱或复给药时体内产生抗鼠抗体，使临床疗效减弱或消失。消失。因此，医学临床上最理想的单克隆抗体应是因此，医学临床上最理想的单克隆抗体应是人源的人源的,但人但人-人杂交瘤技术目前尚未突破。人杂交瘤技术目前尚未突破。61免疫球蛋白和抗体 随着随着DNADNA重组技术以及其他分子生物学技术的重组技术以及其他分子生物学技术的发展，人们通过基因工程技术对发展，人们通过基因工程技术对IgIg分子进行切割，分子进行切割，拼接或修饰来制备的新型抗体分子，拼接或修饰来制备的新型抗体分子，称为基因工称为基因工程抗体程抗体(重点重点).).基因工程抗体是按人类设计所重新组装的新基因工程抗体是按人类设计所重新组装的新型抗体分子，可保留或增加天然抗体的特异性和型抗体分子，可保留或增加天然抗体的特异性和主要生物学活性，去除或减少无关结构（如主要生物学活性，去除或减少无关结构（如FcFc片片段），从而克服单克隆抗体在临床应用方面的缺段），从而克服单克隆抗体在临床应用方面的缺陷陷 研究成功的基因工程抗体有研究成功的基因工程抗体有：嵌合抗体、重构抗嵌合抗体、重构抗体、单链抗体等。体、单链抗体等。62免疫球蛋白和抗体
