1、黄酮类化合物（Flavonoids）南京医科大学药学院南京医科大学药学院范范 君君 婷婷E-mail:本本 章章 内内 容容 第一节第一节 概述概述第二节第二节 结构类型结构类型第三节第三节 理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应第四节第四节 提取与分离提取与分离第五节第五节 黄酮类化合物波谱解析黄酮类化合物波谱解析第六节第六节 生物活性生物活性 蜂胶蜂胶蜜蜂从植物芽孢或树干上采集的树脂（树胶），混蜜蜂从植物芽孢或树干上采集的树脂（树胶），混入其上腭腺、蜡腺的分泌物加工而成的一种具有芳香气味的胶状入其上腭腺、蜡腺的分泌物加工而成的一种具有芳香气味的胶状固体物，用以堵塞蜂巢缝隙。一个固体物，用以堵
2、塞蜂巢缝隙。一个5 56 6万只的蜂群一年只能生产万只的蜂群一年只能生产蜂胶蜂胶70-11070-110克，被誉为克，被誉为“紫色黄金紫色黄金”。是自然界存在的一类具有是自然界存在的一类具有多方面生理和药理作用的物质。多方面生理和药理作用的物质。蜂胶中含的蜂胶中含的黄酮类化合物黄酮类化合物其品种和数量都非常丰富，有关科其品种和数量都非常丰富，有关科研人员从各种不同的蜂胶中，分离和鉴定的黄酮类化合物就有桷研人员从各种不同的蜂胶中，分离和鉴定的黄酮类化合物就有桷皮素等皮素等7070余种。余种。蜂胶作为蜂胶作为保健食品保健食品主要有免疫调节的功效。还有辅助抗氧化、主要有免疫调节的功效。还有辅助抗氧化
3、、调节血脂、血压、血糖、辅助保护胃粘膜等保健功能。调节血脂、血压、血糖、辅助保护胃粘膜等保健功能。第一节第一节 概述概述OO12345678OO1234567819521952年以前，黄酮类化合物主要是指基本母年以前，黄酮类化合物主要是指基本母核为核为2-2-苯基色原酮苯基色原酮的一系列化合物。的一系列化合物。现在的黄酮类化合物则泛指现在的黄酮类化合物则泛指两个苯环（两个苯环（A与与B环）环）通过通过中央三碳链中央三碳链相互连接而成的一类化合物。相互连接而成的一类化合物。ABC6O5432187654321黄酮类化合物的生物合成途径黄酮类化合物的生物合成途径经经乙酸乙酸-丙二酸途径和莽草酸途径
4、（复合）丙二酸途径和莽草酸途径（复合）基本骨架是由三个基本骨架是由三个丙二酸单酰辅酶丙二酸单酰辅酶A和和 一个一个桂皮酰辅酶桂皮酰辅酶A生物合成而产生的。生物合成而产生的。3丙二酰辅酶丙二酰辅酶A 1桂皮酰辅酶桂皮酰辅酶AOHOOO OHHH糖糖醋酸-丙二酸途径莽草酸途径RCH2COCoACoAOOCOHx 3OHOOH查耳酮OOOHOO本本 章章 内内 容容 第一节第一节 概述概述第二节第二节 结构类型结构类型第三节第三节 理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应第四节第四节 提取与分离提取与分离第五节第五节 黄酮类化合物波谱解析黄酮类化合物波谱解析第六节第六节 生物活性生物活性BAC6O543
5、2187654321黄酮类化合物的苷元的结构类型根据黄酮类化合物的苷元的结构类型根据:第二节第二节 结构类型结构类型 黄酮类黄酮类 黄酮醇类黄酮醇类 二氢黄酮类二氢黄酮类 二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类OOOOOHOOOOOH结构类型结构类型 异黄酮类异黄酮类 二氢异黄酮类二氢异黄酮类 查耳酮类查耳酮类 花色素类花色素类OOOOOHOOOH+结构类型结构类型 黄烷黄烷-3-醇类醇类 黄烷黄烷-3,4-二醇类二醇类 二氢查耳酮类二氢查耳酮类 橙酮类橙酮类OOHOOHOHOHOOOCH 结构类型结构类型高异黄酮类高异黄酮类 苯骈色原酮类（口山酮类）苯骈色原酮类（口山酮类）OOOOOOHOOHOHOHlu
6、teolin 木犀草素，存在于忍冬藤、菊花、浮萍中，木犀草素，存在于忍冬藤、菊花、浮萍中，具有抗菌作用。具有抗菌作用。1.1.黄酮类（黄酮类（flavones）抗菌成分主要有抗菌成分主要有:黄芩为清热解毒类中药，黄芩为清热解毒类中药，黄芩苷黄芩苷(baicalin)次黄芩素次黄芩素(wogonin)等等OOOOOHO黄芩素(黄色)OOOHHOHO黄芩酶黄芩苷COOHHOOHOHOOOOHHOO槐米中含有槐米中含有:2.黄酮醇类（黄酮醇类（flavonols）芦丁芦丁槲皮素槲皮素 槐米为豆科植物槐树的花蕾。槐米为豆科植物槐树的花蕾。在二千年前我国即作药用，在二千年前我国即作药用，神神农本草经农本
7、草经将愧实列为上品。其将愧实列为上品。其中，中，芦丁芦丁是有效成分，可用于治是有效成分，可用于治疗毛细血管脆性引起的出血症，疗毛细血管脆性引起的出血症，并用于高血压的辅助治疗剂。并用于高血压的辅助治疗剂。RUTINOOOHHOOHOHOrutinoseOOOHHOOHOHOHQUERCETIN槲皮素槲皮素(quercetinquercetin)具有抗炎、止咳祛痰等作用。槲具有抗炎、止咳祛痰等作用。槲皮素片用于治疗支气管炎。此外还有降低血压、增皮素片用于治疗支气管炎。此外还有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉、增加冠脉
8、血流量等作用。扩张冠状动脉、增加冠脉血流量等作用。芦丁芦丁(rutinrutin)是槲皮素的是槲皮素的3 3O O芸香糖苷芸香糖苷。用于治疗毛用于治疗毛细管脆弱引起的出血病，并用作高血压的辅助治疗细管脆弱引起的出血病，并用作高血压的辅助治疗剂。剂。OCH3OOOOOHOCH3rutinose O橙皮苷(hesperidin),具有Vp样作用3.二氢黄酮类二氢黄酮类(flavanones)OCH3OHOHOHOOOHOOHOCH2OHOOHOH柚皮柚皮苷苷甘草苷(liquiritin),具有溃疡抑制作用OOOglcHOOOHOOHOHOOCH2OHOHOCH3水飞蓟素(SILYBIN)4二氢黄酮
9、醇类二氢黄酮醇类(flavanonols)水飞蓟素水飞蓟素是二氢黄酮醇与苯丙素衍生物缩合成是二氢黄酮醇与苯丙素衍生物缩合成的的黄酮木脂素类黄酮木脂素类成分。成分。具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝炎及肝硬具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝炎及肝硬化，代谢中毒性肝损伤。化，代谢中毒性肝损伤。取代基7,4-二OH4-OH,7-glc7,4-二OH,8-C-glc化合物名称大豆素大豆苷葛根素OOHOOH 主要存在于豆科、鸢尾科等植物中。主要存在于豆科、鸢尾科等植物中。如如葛根葛根主要含有下列几种异黄酮类成分。主要含有下列几种异黄酮类成分。5异黄酮类异黄酮类(isoflavones)大豆素具有类似罂粟碱的
10、解痉作用。大豆素具有类似罂粟碱的解痉作用。大豆苷、葛根素及大豆素大豆苷、葛根素及大豆素均能缓解高血压患者的头均能缓解高血压患者的头痛等症状。痛等症状。OOOHHO大豆素大豆素己烯雌酚HOOH大豆素(dadzein)OOHOOH大豆素大豆素(daidzein)等异黄酮具有雌性激素样作等异黄酮具有雌性激素样作用，可能与它们与用，可能与它们与己烯雌酚己烯雌酚结构类似。结构类似。葛根素葛根素 葛根总黄酮具有扩冠、增加冠脉流量及降低心肌耗葛根总黄酮具有扩冠、增加冠脉流量及降低心肌耗氧量等作用。氧量等作用。OOHOOHgl u紫檀素OOOOCH3O6二氢异黄酮类二氢异黄酮类豆科豆科植物紫檀植物紫檀查耳酮6
11、54321654321O7查尔酮类（查尔酮类（chalcones）OHHOOOHO邻羟基查耳酮二氢黄酮 其邻羟基衍生物可视为二氢黄酮的异构体，二者可其邻羟基衍生物可视为二氢黄酮的异构体，二者可相互转化。相互转化。二氢黄酮的吡酮环芳香性低，在碱的作用二氢黄酮的吡酮环芳香性低，在碱的作用下易开环生成下易开环生成6-6-羟基查耳酮，由无色转为深羟基查耳酮，由无色转为深黄色，后者经酸化又能转化为原来的二氢黄酮。黄色，后者经酸化又能转化为原来的二氢黄酮。菊科植物红花菊科植物红花红花所含的色素红花所含的色素-红花苷红花苷是第一个发现的是第一个发现的查查耳酮类耳酮类植物成分。植物成分。SO2氧化酶异构化醌式
12、红花苷(红色)红花苷(carthamone)(黄色)新红花苷(neo-carthamin)(无色)OHOOOOglcOHOHOHOHOOglcOHOOHOHOOglcOH 红花红花在在开花初期开花初期，花冠呈淡黄色；，花冠呈淡黄色；开花中期开花中期，花冠呈深黄色；，花冠呈深黄色；开花后期开花后期或采收干燥过程中由于酶的作用，或采收干燥过程中由于酶的作用，氧化成红色。氧化成红色。8.二氢查耳酮类二氢查耳酮类 二二氢查耳酮在氢查耳酮在植物界分布极少，如蔷植物界分布极少，如蔷薇科梨属植物根皮和苹果种仁中含有的薇科梨属植物根皮和苹果种仁中含有的梨根苷。梨根苷。OHOHOOHOglc梨根苷梨根苷矢车菊苷
13、元(兰色)花青素母核OHOOHOHOHO9花色素类花色素类(anthocyanidins)是使花、叶、果、茎等呈现蓝、紫、红是使花、叶、果、茎等呈现蓝、紫、红等颜色的色素。以苷的形式存在于细胞液中，等颜色的色素。以苷的形式存在于细胞液中，经水解可生成苷元经水解可生成苷元花色素及糖。花色素及糖。(+)儿茶素(-)表儿茶素OHOOHOHHOHHOHHOHOOHOHOHOHH10黄烷黄烷-3-醇醇(flavan-3-ols)及及 黄烷黄烷-3，4-二醇二醇(flavan-3,4-diols)类类主要存在于主要存在于含鞣质的木本植物含鞣质的木本植物中。中。如儿茶素为中药儿茶中的主要成分，有四个光学异构
14、体，如儿茶素为中药儿茶中的主要成分，有四个光学异构体，但在植物中主要有但在植物中主要有异构体两个，儿茶素和表儿茶素异构体两个，儿茶素和表儿茶素。这类化合物在植物界中分布很广，在含这类化合物在植物界中分布很广，在含鞣质的木本植物和蕨类植物中更为多见，鞣质的木本植物和蕨类植物中更为多见，如：无色矢车菊素。如：无色矢车菊素。OOHHOOHOHOHHOH无色矢车菊素无色矢车菊素较少见，黄花波斯菊花中含有较少见，黄花波斯菊花中含有硫磺菊素硫磺菊素(sulphuretin)11.橙酮类化合物橙酮类化合物OCHOHOOHOH123456712345612苯骈色原酮类苯骈色原酮类(xanthanes)又称为双
15、苯吡酮类或口山酮类，又称为双苯吡酮类或口山酮类，母核由苯环和色原酮的母核由苯环和色原酮的2 2，3 3位骈合而成，位骈合而成，是一种特殊类型的黄酮类化合物。是一种特殊类型的黄酮类化合物。OO 常分布在龙胆科、藤黄科、百合科植物常分布在龙胆科、藤黄科、百合科植物当中，如：存在于石苇、芒果叶和知母当中，如：存在于石苇、芒果叶和知母叶中具有止咳去痰作用的异芒果素。叶中具有止咳去痰作用的异芒果素。OOHOHOOHOHHOCH2OHHOOH异异芒果素芒果素13.高异黄酮类（高异黄酮类（Homoisoflavones）OO高异黄酮类高异黄酮类 基本母核为基本母核为3-3-苄基色原酮苄基色原酮14.其他黄酮
16、类其他黄酮类 包括双黄酮类，黄酮木脂体类，包括双黄酮类，黄酮木脂体类，生物碱型黄酮等。生物碱型黄酮等。OOOHCH3OOCH3OOOHHOOH银杏素银杏素OOOHHOHNCH3榕碱榕碱OOOHOOHOHOCH3CH2OHOH水飞蓟素水飞蓟素n天然黄酮类化合物多和糖形成苷而存在，天然黄酮类化合物多和糖形成苷而存在，并且由于糖的种类、数量、连接位置及连并且由于糖的种类、数量、连接位置及连接方式不同，组成了各种各样的接方式不同，组成了各种各样的黄酮苷黄酮苷类。类。结构类型结构类型黄酮苷类黄酮苷类n组成黄酮苷的糖类主要有组成黄酮苷的糖类主要有 单糖、双糖类、三糖类和酰化糖类单糖、双糖类、三糖类和酰化糖
17、类。中文名中文名英文名英文名缩写缩写D-葡萄糖葡萄糖D-glucoseD-GlcD-半乳糖半乳糖D-galactoseD-GalD-甘露糖甘露糖D-mannoseD-ManD-葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸D-glucuronic acidD-GluAD-半乳糖醛酸半乳糖醛酸D-galacturonic acidD-GalAL-鼠李糖鼠李糖L-rhamnoseL-RhaL-阿拉伯糖阿拉伯糖L-arabinoseL-AraD-木糖木糖D-xyloseD-Xyl中文名中文名英文名英文名芸香糖芸香糖rutinose-L-Rha-(16)-D-Glc新橙皮糖新橙皮糖neohesperidose -L-Rha-(
18、12)-D-Glc槐糖槐糖sophorose-D-Glc-(12)-D-Glc龙胆双糖龙胆双糖gentiobiose-D-Glc-(16)-D-Glc1.母核命名母核命名 类型为母核，前面加上取代基的位置，名称类型为母核，前面加上取代基的位置，名称OOHOOHOHOH34575，7，3，4-四羟基黄酮四羟基黄酮5,7,3,4-tetrahydroxyflavone结构类型结构类型黄酮类化合物命名黄酮类化合物命名2.苷命名（苷元苷命名（苷元+糖）糖）OOOOHglc7，4-二羟基黄酮二羟基黄酮-7-O-D-葡萄糖苷葡萄糖苷7,4-dihydroxy-flavone-7-O-D-glucoside
19、OOOOHOOOCH37,4-二羟基黄酮二羟基黄酮-7-芸香糖苷芸香糖苷7,4-dihydroxyflavone-7-O-L-rhamnosyl(16)-D-glucoside本本 章章 内内 容容 第一节第一节 概述概述第二节第二节 结构类型结构类型第三节第三节 理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应第四节第四节 提取与分离提取与分离第五节第五节 黄酮类化合物波谱解析黄酮类化合物波谱解析第六节第六节 生物活性生物活性 理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应（一）性状（一）性状（二）旋光性（二）旋光性（三）溶解性（三）溶解性（四）酸碱性（四）酸碱性（五）显色反应（五）显色反应 理化性质与颜色反应理
20、化性质与颜色反应性状性状形态：形态：黄酮类化合物多为黄酮类化合物多为晶性固体晶性固体，少数为，少数为无定形粉末无定形粉末。颜色：颜色：与与 分子中是否存在交叉共轭体系分子中是否存在交叉共轭体系 助色团的类型数目助色团的类型数目 取代位置取代位置 有关有关 色原酮部分原本无色，但在色原酮部分原本无色，但在2 2位引入苯环位引入苯环后，即形成后，即形成交叉共轭体系，且通过电子的转移，重排，使共轭链交叉共轭体系，且通过电子的转移，重排，使共轭链延长，而表现出颜色。延长，而表现出颜色。OOOOOO 黄酮、黄酮醇及苷类黄酮、黄酮醇及苷类 灰黄灰黄-黄色黄色 查耳酮查耳酮 黄黄-橙黄色橙黄色 二氢黄酮、二
21、氢黄酮醇二氢黄酮、二氢黄酮醇 无色无色 异黄酮异黄酮 微黄色微黄色 其中，其中，黄酮、黄酮醇及苷类、查耳酮黄酮、黄酮醇及苷类、查耳酮等因分子中等因分子中存在交叉共轭体系，在存在交叉共轭体系，在7,47,4位引入位引入-OH,OCH-OH,OCH3 3等供等供电子基团电子基团则促进电子移位、重排，使化合物颜色加则促进电子移位、重排，使化合物颜色加深。深。花色苷及其苷元花色苷及其苷元的颜色随的颜色随pHpH的不同而改变：呈现的不同而改变：呈现红红（pH7pH8.5pH8.5）理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应旋光性旋光性游离苷元中，除游离苷元中，除二氢黄酮、二氢黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷
22、、黄烷醇、双黄酮黄烷、黄烷醇、双黄酮有旋光外，其余无旋有旋光外，其余无旋光性。光性。苷类由于结构中引入苷类由于结构中引入糖糖的分子，均有旋光的分子，均有旋光性，且多为左旋。性，且多为左旋。二氢黄酮二氢黄酮黄酮苷元黄酮苷元难溶或不溶于难溶或不溶于H2O 易溶易溶MeOH、EtOH等溶剂，易溶稀碱液等溶剂，易溶稀碱液黄酮、黄酮醇、查耳酮黄酮、黄酮醇、查耳酮难溶于水难溶于水（属平面型分子）（属平面型分子）二氢黄酮及醇二氢黄酮及醇对水有一定溶解度对水有一定溶解度（属非平面分子）（属非平面分子）花色素花色素亲水性较强，水溶度较大亲水性较强，水溶度较大（离子）（离子）黄酮苷黄酮苷易溶于水、易溶于水、MeO
23、H、EtOH等溶剂等溶剂 （苷元引入（苷元引入OH多，则水中溶解度大）多，则水中溶解度大）理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应溶解性溶解性 理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应酸碱性酸碱性 酸性：酸性：分子中多分子中多Ar-OH显酸性显酸性 （可溶于碱性水溶液、吡啶等溶剂中）（可溶于碱性水溶液、吡啶等溶剂中）由于由于Ar-OH数目、位置不同，酸性强弱也不同数目、位置不同，酸性强弱也不同以黄酮为例：以黄酮为例：7,4-二二-OH 7或或4-OH 一般酚一般酚-OH 5-OH（溶（溶NaHCO3）（溶）（溶Na2CO3）（）（溶不同浓度溶不同浓度NaOH）（可用于提取、分离及鉴定工作）（可用于提取
24、、分离及鉴定工作）碱性碱性：-吡喃酮环上吡喃酮环上1-位氧原子，因有未共用电子位氧原子，因有未共用电子对对显微弱的碱性显微弱的碱性可与强无机酸（可与强无机酸（H2SO4、HCl）等生成）等生成烊烊盐盐，但极不稳定，加水即可分解。但极不稳定，加水即可分解。OOOOHClClHOH2+-所生成的盐极不稳定，加水后即可分解。黄酮盐（呈不同的 可用于鉴别）C-H2SO4颜色 还原反应还原反应 与金属盐类试剂的络合反应与金属盐类试剂的络合反应 硼酸显色反应硼酸显色反应 碱性试剂显色反应碱性试剂显色反应理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应显色反应显色反应1.还原反应还原反应 (1)盐酸盐酸镁粉反应（镁粉反
25、应（HCl-Mg）黄酮、黄酮醇及二氢黄酮、二氢黄酮醇类黄酮、黄酮醇及二氢黄酮、二氢黄酮醇类样品/EtOHMg粉HCl+浓橙红紫紫红红色色查耳酮橙酮儿茶素大多数异黄酮HCl-Mg不不 呈呈 色色理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应显色反应显色反应 （2）四氢硼钠反应（）四氢硼钠反应（NaBH4）二氢黄酮类NaBH4+红红紫紫色色其它黄酮类不呈色OOOHHONaBH4OOHHOOHH-H2OHOHOHHO+OHOHHO+OOOHOOOHOHOH 常可与金属类试剂反应，生成有色络合物。常可与金属类试剂反应，生成有色络合物。（1）铝盐）铝盐 （2）铅盐）铅盐 （3）锆盐）锆盐 （4）镁盐）镁盐 （5）
26、氯化锶）氯化锶 （6）三氯化铁反应）三氯化铁反应黄酮类化合物分子结构中多具有下列结构：黄酮类化合物分子结构中多具有下列结构：2.金属盐类试剂的络合金属盐类试剂的络合反应反应理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应显色反应显色反应（1）铝盐）铝盐 可用于定性及定量分析可用于定性及定量分析样品+1%AlCl3或硝酸铝络络合合物物（黄色）max 415 nm（有荧光）样品+1 1%醋醋酸酸铅铅或碱式醋酸铅/H2O黄黄 红红色色 沉沉淀淀（2）铅盐）铅盐（3）锆盐）锆盐（ZrOCl2）OOOHOOOHOOOZrClOOOZrClOOH2OOH22%ZrOCl2黄绿色络合物2%枸橼酸2%枸橼酸不变不变褪色褪
27、色观察颜色2%枸橼酸甲醇液黄色1ml2%ZrOCl210ml甲醇溶样品0.5-1mg黄色不褪黄色褪去2%枸橼酸黄色锆络合物 锆盐3-OH,4=O5-OH,4=OOOHOHOOOHOHZrOClH2O稳定稳定（4）镁盐）镁盐样样品品+醋醋酸酸镁镁/M Me eO OH H呈呈色色可可滴滴在在滤滤纸纸上上二氢黄酮二氢黄酮二氢黄酮醇二氢黄酮醇天蓝色荧光天蓝色荧光C5-OH色泽更明显色泽更明显黄酮黄酮黄酮醇黄酮醇异黄酮异黄酮黄 橙黄 褐色褐色（5）氯化锶（）氯化锶（SrCl2）（邻二酚羟基）+SrC12氨性 MeOH 液绿色绿色样品棕色棕色黑色黑色沉淀沉淀样品+显色显色Ar-OHFeCl3H2O或醇液
28、（6）三氯化铁反应）三氯化铁反应OOOHOHO+硼 酸硼 酸H+亮黄色亮黄色3.硼酸显色反应硼酸显色反应COHCCO理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应显色反应显色反应有无机酸或有机酸存在有无机酸或有机酸存在 在草酸存在下，显黄色并带绿色荧光。在草酸存在下，显黄色并带绿色荧光。在枸橼酸丙酮存在条件下，只显黄色而在枸橼酸丙酮存在条件下，只显黄色而无荧光。无荧光。具有下列结构（具有下列结构（5-5-羟基黄酮，羟基黄酮，2-2-羟基查耳酮羟基查耳酮）观察样品用碱性试剂处理后的观察样品用碱性试剂处理后的色变情况。色变情况。1.1.二氢黄酮类易在碱液中开环，转变成相应异构二氢黄酮类易在碱液中开环，转变成
29、相应异构体体查耳酮类化合物，显橙查耳酮类化合物，显橙-红色。红色。4.碱性试剂显色反应碱性试剂显色反应理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应显色反应显色反应2.黄酮醇类黄酮醇类在碱液中先呈黄色，通入空气后在碱液中先呈黄色，通入空气后变为棕色，据此可与黄酮类区别。变为棕色，据此可与黄酮类区别。3.黄酮类化合物当分子中有黄酮类化合物当分子中有邻二酚羟基邻二酚羟基取代取代或或3,4-二羟基取代时，在碱液中不稳定，很二羟基取代时，在碱液中不稳定，很快氧化，由黄色快氧化，由黄色深红色深红色绿棕色沉淀。绿棕色沉淀。OOOHOHOHOMeOHOOHOHOHOMeOH-H+橙皮素橙皮素开环橙皮橙皮（二氢黄酮）（
30、二氢黄酮）查尔酮查尔酮盐酸盐酸-镁粉反应：镁粉反应：黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇阳性黄酮醇阳性四氢硼钠反应：四氢硼钠反应：二氢黄酮阳性二氢黄酮阳性AlCl3反应：反应：判断分子中是否有判断分子中是否有3-OH,5-OH和邻和邻二酚羟基二酚羟基醋酸镁反应：醋酸镁反应：二氢黄酮可产生天蓝色荧光二氢黄酮可产生天蓝色荧光ZrOCl2+柠檬酸：柠檬酸：判断判断3-OH或或5-OH硼酸显色反应：硼酸显色反应：5-OH黄酮或黄酮或2-OH查耳酮查耳酮碱性试剂显色反应：碱性试剂显色反应：黄酮醇类化合物黄酮醇类化合物理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应显色反应显色反应本本 章章
31、 内内 容容 第一节第一节 概述概述第二节第二节 结构类型结构类型第三节第三节 理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应第四节第四节 提取与分离提取与分离第五节第五节 黄酮类化合物波谱解析黄酮类化合物波谱解析第六节第六节 生物活性生物活性药 材 EtOH提取药 渣 乙醇液回收乙醇浸 膏回收液提取分离提取分离提取提取浸 膏加水水溶液分别用不同极性溶剂萃取石油醚、氯仿、石油醚 氯 仿 乙酸乙酯正丁醇水（极性小）（苷元等）（极性大的苷元）（黄酮苷类）（多糖、蛋白质等）（分步萃取）乙酸乙酯、正丁醇 2.碱提取酸沉淀法碱提取酸沉淀法样品样品OH-提取液提取液过滤过滤H+沉淀沉淀（黄酮类）（黄酮类）提取分离提
32、取分离提取提取适用于含酚羟基的化合物，如适用于含酚羟基的化合物，如槐米中芦丁的提取槐米中芦丁的提取。注意事项：注意事项：酸碱度不宜过大酸碱度不宜过大 邻二酚羟基的保护：碱性条件下，邻二酚羟基邻二酚羟基的保护：碱性条件下，邻二酚羟基易被氧化，加硼砂保护易被氧化，加硼砂保护 石灰乳的加入可除去果胶、粘液等水溶性酸性石灰乳的加入可除去果胶、粘液等水溶性酸性杂质杂质 3.离子交换树脂法离子交换树脂法注意：应用此法主要目的是除杂质。黄酮H2O洗除水溶性杂质液洗出黄酮类化合物水水甲醇甲醇提取分离提取分离提取提取注意：应用此法主要目的是除杂质。分离分离 1.柱色谱法柱色谱法 （硅胶、氧化铝、纤维粉、（硅胶、
33、氧化铝、纤维粉、聚酰胺、葡聚糖凝胶）聚酰胺、葡聚糖凝胶）2.pH梯度萃取法梯度萃取法 3.铅盐沉淀法铅盐沉淀法 提取分离提取分离分离分离硅胶柱色谱硅胶柱色谱 出柱先后顺序：出柱先后顺序：若母核结构相同，而若母核结构相同，而-OH取代数目不同，则取代数目不同，则-OH多的后出柱多的后出柱 易形成分子内氢键的易形成分子内氢键的-OH，其极性变小先出柱，其极性变小先出柱如：邻二如：邻二-OH 间二间二-OH （Rf值）值）一般出柱顺序：一般出柱顺序：苷元苷元 单糖苷单糖苷 双糖苷双糖苷 多糖苷多糖苷提取分离提取分离分离分离氧化铝柱色谱氧化铝柱色谱 通常情况下，要求在分子的结构中通常情况下，要求在分子
34、的结构中 无酸性基团，或无酸性基团，或Ar-OH被甲基化。被甲基化。纤维粉柱色谱纤维粉柱色谱 其分离原理同纸层色谱。其分离原理同纸层色谱。提取分离提取分离分离分离聚酰胺吸附物质的原理如下图：聚酰胺吸附物质的原理如下图：NNOOHHNNOOHHOHOO固定相固定相移动相移动相聚酰胺柱色谱聚酰胺柱色谱提取分离提取分离分离分离聚酰胺对化合物吸附力的影响因素：聚酰胺对化合物吸附力的影响因素：形成氢键的基团越多，则吸附力越强；形成氢键的基团越多，则吸附力越强；（Ar-OH、-COOH、醌基、硝基、醌基、硝基等）等）易形成分子内氢键，则吸附力减弱；易形成分子内氢键，则吸附力减弱；（邻二邻二-OH、3-OH
35、 4-酮基、酮基、5-OH 4-酮基等酮基等）芳香核、共轭双键多者芳香核、共轭双键多者吸附力大。吸附力大。提取分离提取分离分离分离 聚酰胺柱色谱在分离黄酮类化合物时聚酰胺柱色谱在分离黄酮类化合物时 有下述规律：有下述规律：提取分离提取分离分离分离 不同类型黄酮化合物的出柱先后顺序：不同类型黄酮化合物的出柱先后顺序：异黄酮异黄酮 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 黄酮黄酮 黄酮醇黄酮醇 OOOHOHOHOHOOOHOHOHOOOHOHOHOHOOOHOHOH提取分离提取分离分离分离 苷元相同，出柱一般先后顺序（甲醇苷元相同，出柱一般先后顺序（甲醇/水）：水）：叁糖苷叁糖苷 双糖苷双糖苷 单糖苷单糖苷 苷元苷
36、元 查耳酮往往比相应的黄酮类化合物难于洗脱查耳酮往往比相应的黄酮类化合物难于洗脱。OHOOHOHOHOOOHOHOH查尔酮黄酮提取分离提取分离分离分离 在聚酰胺柱上，常用的洗脱溶剂如下：在聚酰胺柱上，常用的洗脱溶剂如下：水水 甲醇甲醇 丙酮丙酮 氢氧化钠氢氧化钠/H2O 甲酰胺甲酰胺 二甲基甲酰胺二甲基甲酰胺 尿素尿素/H2O （洗脱能力：弱（洗脱能力：弱 强）强）提取分离提取分离分离分离水甲醇丙酮氢氧化钠溶液甲酰胺二甲基甲酰胺尿素水溶液弱强浓度小大破坏氢键缔合都含有酰胺基与待分离的物质竞争与聚酰胺聚酰胺形成氢键缔合 作用机理：作用机理：分离游离黄酮时分离游离黄酮时吸附作用吸附作用 （取决于游
37、离（取决于游离Ar-OH的数目，的数目，Ar-OH少则先出柱）少则先出柱）分离黄酮苷分离黄酮苷时时分子筛起主导作用分子筛起主导作用 （分子量大的先出柱）（分子量大的先出柱）（5）葡聚糖凝胶柱色谱）葡聚糖凝胶柱色谱提取分离提取分离分离分离 常用洗脱溶剂：常用洗脱溶剂：碱性水溶液（碱性水溶液（0.1mol/L NH4OH）（含盐水溶液（含盐水溶液0.5mol/L NaCl等）等）醇及含水醇醇及含水醇 其它溶剂其它溶剂 含水丙酮、甲醇含水丙酮、甲醇-氯仿等。氯仿等。提取分离提取分离分离分离 （二）分离（二）分离 1.柱色谱法柱色谱法 （硅胶、氧化铝、纤维粉、（硅胶、氧化铝、纤维粉、聚酰胺、葡聚糖凝胶
38、）聚酰胺、葡聚糖凝胶）2.pH梯度萃取法梯度萃取法 3.铅盐沉淀法铅盐沉淀法 提取分离提取分离分离分离 适用于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。适用于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。混合物/乙醚5%NaHCO35%NaHCO3萃取乙醚酸化回收EtoAcEtoAc5%NaCO35%NaCO3乙醚0.2%NaOH碱液乙醚（一般Ar-OH）4%NaOH碱液乙醚（3，5-OH）（无-OH）（4-7二-OH）（4、7-OH）提取分离提取分离分离分离 （二）分离（二）分离 1.柱色谱法柱色谱法 （硅胶、氧化铝、纤维粉、（硅胶、氧化铝、纤维粉、聚酰胺、葡聚糖凝胶）聚酰胺、葡聚糖凝胶）2.pH梯度萃取法梯度萃取法
39、3.铅盐沉淀法铅盐沉淀法 提取分离提取分离分离分离 根据分子中某些特定官能团进行分离。根据分子中某些特定官能团进行分离。混合物/乙醇Pb(Ac)2水溶液乙醇沉淀（具邻二-OH）H2S 过滤通入硫化铅沉淀或丙酮溶液溶30%乙醇中中性性滤液回收邻二酚羟基碱碱式式Pb(OH)Ac滤液沉淀脱铅（单-OH 或C3、C5-OH）（不具邻二-OH）提取分离提取分离分离分离从柠檬果皮中分离降血压有效成分从柠檬果皮中分离降血压有效成分P b C O3生成 硅胶层析凝胶层析铅盐沉淀法有机溶剂萃取223化合物L-1L-11分别反复进行SiO CC(Wakogel-C-300)并用CHCl -MeOH-HOAc-H
40、O(70:15:12:3)或(60:20:15:5)洗脱或反复重复结晶 Fr.O-R(pH9的氨水洗脱部分)Fr.I-P(pH7的水洗脱部分)Fr.A-H(pH5的酸水洗脱部分)水层凝胶过滤(TSKgel-HW-40)n-BuOH提取物(4.26g,粗黄酮类)6mol/LHCl调pH 5.3n-BuOH提取(500ml5)滤液3加20g NaHCO 饱和水溶液,搅拌1hr,静置,过滤黄色铅盐沉淀溶于1500ml水中，加220gPb(OH)Ac饱和水溶液水溶性部分 (134.47g)n-BuOH提取物 (38.55g)Hexane提取物 (3.6g)依次用Hexane,n-BuOH提取滤液273
41、,338259,277,351216,273,335258,274,357L-4L-2L-3L-1OHOO HOO HC H3OO C H3OglcO C H3OHOO HOglcOrhaO HOHOO C H3O HOOglcrhaO C H3O HOHOglcO HOO HglcOHOO C H3O HOOglcrhaO C H3O H从柠檬果皮中分离降血压有效成分284,340270,336258,27 ,344275,330,412270,330271,338282,330L-10L-8L-6L-11L-9L-7L-5OHOOO HO HO C H3OO C H3glcOHOOO Hg
42、lcOrhaO HOglcOO HOrhaO HO HOglcOOO HO HrhaO HOHOOO HOglcrhaO HOHOOO HOglcO C H3OglcOO HOrhaO HO H从柠檬果皮中分离降血压有效成分本本 章章 内内 容容 第一节第一节 概述概述第二节第二节 结构类型结构类型第三节第三节 理化性质与颜色反应理化性质与颜色反应第四节第四节 提取与分离提取与分离第五节第五节 黄酮类化合物波谱解析黄酮类化合物波谱解析第六节第六节 生物活性生物活性 黄酮类化合物的检识黄酮类化合物的检识 目前主要采用的方法有：目前主要采用的方法有：与与标准品或与文献标准品或与文献对照对照PC或或
43、TLC得到的得到的 Rf或或hRf值（值（Rf 100）分析对比样品分析对比样品,在甲醇溶液中，加入酸、在甲醇溶液中，加入酸、碱或金属盐类试剂后得到的碱或金属盐类试剂后得到的UV光谱光谱 1H-NMR 13C-NMR MS 一、层析在黄酮类鉴定中的作用一、层析在黄酮类鉴定中的作用1.纸层析纸层析(PC)苷类成分可采用双向展开，第一相展开采苷类成分可采用双向展开，第一相展开采用醇性溶剂，如用醇性溶剂，如BAW系统（正丁醇：系统（正丁醇：醋酸：醋酸：水水4：1：5上层）；第二相展开用水性溶剂，上层）；第二相展开用水性溶剂，如氯仿：醋酸：水（如氯仿：醋酸：水（3：6：1）苷元则多采用醇性溶剂。苷元则
44、多采用醇性溶剂。花色苷及其苷元，可用含盐酸或醋酸的花色苷及其苷元，可用含盐酸或醋酸的溶剂。溶剂。2.薄层层析薄层层析(TLC)）硅胶薄层）硅胶薄层 用于弱极性黄酮较好。用于弱极性黄酮较好。常用甲苯：甲酸甲酯：甲酸（常用甲苯：甲酸甲酯：甲酸（5：4：1）；苯：甲醇）；苯：甲醇（95：5）或苯：甲醇：冰醋酸（）或苯：甲醇：冰醋酸（35：5：5）等。）等。）聚酰胺层析）聚酰胺层析 适用范围广，可分离含游离酚羟基或其苷类。适用范围广，可分离含游离酚羟基或其苷类。常用展开系统：乙醇：水（常用展开系统：乙醇：水（3：2）；丙酮：水（）；丙酮：水（1：1）等。等。显色剂：紫外光；显色剂：紫外光；2%三氯化铝
45、甲醇液；三氯化铝甲醇液；1%FeCl3/1%K3Fe(CN)6(1:1)混合液。混合液。黄酮类化合物波谱解析黄酮类化合物波谱解析 在黄酮类化合物结构分析中的应用在黄酮类化合物结构分析中的应用 主要有：主要有：（一）紫外光谱（一）紫外光谱（UV）（二）核磁共振（二）核磁共振1H-NMR （三）核磁共振（三）核磁共振13C-NMR （四）质谱（四）质谱（MS）OOROOR 多数黄酮类化合物在紫外（多数黄酮类化合物在紫外（UV）谱中主要由两）谱中主要由两个吸收带组成。个吸收带组成。苯甲酰基系统苯甲酰基系统 桂皮酰基系统桂皮酰基系统 (benzoyl)(cinnamoyl)Band II Band I
46、 220280 nm 300400 nm波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱OOR 黄酮类化合物结构中的交叉共轭体系黄酮类化合物结构中的交叉共轭体系苯甲酰基系统苯甲酰基系统 桂皮酰基系统桂皮酰基系统 (benzoyl)(cinnamoyl)Band II Band I 220280 nm 300400 nm波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱黄酮类化合物在黄酮类化合物在MeOH溶液中的溶液中的紫外（紫外（UV）光谱特征）光谱特征 黄酮及黄酮醇类黄酮及黄酮醇类 查耳酮及橙酮类查耳酮及橙酮类 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱 黄酮及黄酮醇类黄酮及
47、黄酮醇类木犀草素（黄酮类）槲皮素（黄酮醇类）OOR74引入供电基(-OH、-OMe)AB吸收带向红位移BandIBandII波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱 黄酮类在黄酮类在MeOH中中B环氧代对环氧代对Band I的影响的影响OOOHOHOHOOOHOHOHOHOOOHOHOHOHOH3,5,7-3,5,7,4-3,5,7,3,4-三羟基黄酮四羟基黄酮五羟基黄酮高良姜素山奈酚槲皮素359367370红移红移红移红移波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱 黄酮类在黄酮类在MeOH中中A环氧代对环氧代对Band II的影响的影响OOOHOOOHOHOOOHOHOH7-5,7-5,6,7-羟基黄酮二羟基
48、黄酮三羟基黄酮252262274红移红移波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱Band I黄酮黄酮醇（3-O被取代）黄酮醇（3-OH游离）328357304350352385波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱黄酮类化合物在黄酮类化合物在MeOH溶液中的溶液中的紫外（紫外（UV）光谱特征）光谱特征 黄酮及黄酮醇类黄酮及黄酮醇类 查耳酮及橙酮类查耳酮及橙酮类 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱 查耳酮及橙酮类查耳酮及橙酮类 波谱特征：波谱特征：带带 I 强强主峰主峰 带带 II 弱弱次强峰次强峰2,3,4-三羟基查耳酮三羟基查耳酮O23456234
49、56查耳酮OCH27O1234561234567橙酮波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱3,4-3,4-二羟基橙二羟基橙酮酮 查耳酮类查耳酮类 Band II230 270 nm 主峰主峰 Band I 340 390 nm 有时分裂为有时分裂为 Ia（340390）Ib（300320）环上引入氧取代基环上引入氧取代基（同黄酮及黄酮醇类）（同黄酮及黄酮醇类）使带使带 I 红移（红移（2-OH影响最大）影响最大）2-OH甲基化或苷化甲基化或苷化使带使带I紫移紫移1520nm波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱 橙酮类橙酮类 常出现常出现34个吸收峰个吸收峰 主峰（主峰（Band I）370 430 nm
50、天然来源的橙酮天然来源的橙酮 388 413 nm波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱黄酮类化合物在黄酮类化合物在MeOH溶液中的溶液中的紫外（紫外（UV）光谱特征）光谱特征 黄酮及黄酮醇类黄酮及黄酮醇类 查耳酮及橙酮类查耳酮及橙酮类 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇7-羟基异黄酮羟基异黄酮OOOOOOOH波谱解析波谱解析紫外光谱紫外光谱4,7-二羟基二氢黄酮二羟基二氢黄酮 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇共同特点：共同特点：带带 I 弱弱B环不能与吡喃酮环
