1、尿液蛋白质检查幻灯片一、尿液微量白蛋白的测定v尿微量白蛋白在糖尿病肾病中的应用v尿微量白蛋白在心血管疾病中的应用v尿微量白蛋白在炎症方面的应用v其他二、Bence-Jones protein：v实质是免疫球蛋白轻链或其聚合物，单聚体分子量为2.3万。v凝溶蛋白：pH4.55.5，56条件加热出现白色混浊及凝固，100 煮沸以后混浊消失或明显减退，再冷却时又可重新凝固。v蛋白电泳时可在2至球蛋白区带间的某个部位出现M区带。检测方法：q对甲苯磺酸沉淀筛选实验：灵敏度3mg/Lq热沉淀法验证q乙酸纤维素膜电泳或者聚丙烯酰胺凝胶电泳：M带q免疫固定电泳：区带电泳别离蛋白后，立即将浸有特异抗L链血清的薄
2、膜条直接放到预计出现异常蛋白带的位置上，使之产生抗原抗体的复合物反响。q免疫扩散实验：用特异的L链血清进展免疫扩散实验。临床意义：多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症三、2-microglobulin四、尿液血红蛋白、肌红蛋白及其代谢产物检查五、TammHorsfall protein六、尿液酶测定尿液酶的来源：血液的酶：淀粉酶、溶菌酶肾实质的酶：肾小管刷状缘-GT、AAP、LAP、ALP、-GLU、溶菌体NAG、ACP、-葡萄糖醛酸苷酶、胞浆LDH及线粒体AST尿路及生殖系统的酶：前列腺ACP、NAG、精液LDH、hyaluronic acid、肿瘤细胞尿液酶测定时尿液标本的处理方法：尿液通常为
3、弱酸性，且蛋白质浓度较低，不利于尿酶活力的保存，因此必须及时测定和处理。大局部尿酶活性比血浆酶活性低，在测定时适当加大标本用量或延长酶作用时间。尿液中含有较高浓度的低分子物质，如尿素、尿酸、肌酐、硫酸盐、磷酸盐等，他们可能是某些酶的抑制剂，因此必须对尿液标本进展预处理：超滤法、透析法、凝胶过滤法1.N-乙酰-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-D-glucosaminidase,NAG NAG是一种位于溶酶体内的酸性水解酶，存在于所有组织中，以前列腺和肾近球肾小管溶酶体含量最高。临床应用：各种肾脏疾病：急慢性肾功能不全、肾病综合症肾移植排斥反响：早期诊断药物性肾损害：其他系统疾病：糖尿病肾病
4、、高血压肾病2.-葡萄糖苷酶-glucosdiase,-GLU -GLU主要存在于肾小管上皮细胞刷状缘，在血清中的含量极低，且分子量大9万，不易通过肾小球，因而尿中的-GLU主要来自肾小管上皮细胞。测定：用麦芽糖做底物，经-GLU的水解作用生成葡萄糖，再用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成率。临床意义：肾小管损伤的敏感指标3.谷氨酰转移酶-glutamyl transferase，-GT-GT广泛存在于人体各组织中，以肾、肝、胰等组织含量最高。尿中-GT浓度较高，原尿无需预先浓缩。用-谷氨酰对硝基苯胺做底物，测定游历的对硝基苯胺量。临床意义：-GT常作为药物性肾损害的诊断指标。-GT在急性肾炎、肾盂肾炎、肾结石时升高 -GT在慢性肾衰、肾癌时降低。
