1、免疫学检测免疫学预防免疫学治疗诊断疾病、研究发病机制、监测病情、评价疗效测抗原、抗体；-（体液免疫）（体液免疫）免疫细胞数目、功能 细胞免疫细胞免疫 （一）抗原抗体反应的原理（一）抗原抗体反应的原理影响因素：影响因素：电解质；温度；酸碱度 原理：原理：v抗原抗体反应是高度特异性的、一对一的反应抗原抗体反应是高度特异性的、一对一的反应。v体外，可以用一个已知的抗原（或抗体）来检测体外，可以用一个已知的抗原（或抗体）来检测另一个未知的抗体（或抗原）另一个未知的抗体（或抗原）。检测抗原抗体的体外试验检测抗原抗体的体外试验1、利用已知抗原检测未知抗体、利用已知抗原检测未知抗体（1）检测病原微生物的相应
2、抗体以辅助诊断疾病：）检测病原微生物的相应抗体以辅助诊断疾病：伤伤寒病、流行性乙型脑炎、寒病、流行性乙型脑炎、AIDS病等。病等。（2）检测自身抗体）检测自身抗体诊断自身免疫病：诊断自身免疫病：SLE、类风、类风湿性关节炎等湿性关节炎等2、利用已知抗体检测未知抗原、利用已知抗体检测未知抗原（1）鉴定病原菌：诊断疾病）鉴定病原菌：诊断疾病（2）检测肿瘤相关抗原：检测甲胎蛋白以诊断肝癌）检测肿瘤相关抗原：检测甲胎蛋白以诊断肝癌（3）检测血型抗原、）检测血型抗原、HLA抗原：鉴定血型，亲子鉴定抗原：鉴定血型，亲子鉴定（4）检测药物半抗原：）检测药物半抗原：确认运动员是否服用兴奋剂确认运动员是否服用兴
3、奋剂抗原抗体反应的类型抗原抗体反应的类型v凝集反应凝集反应（agglutination reaction)v沉淀反应沉淀反应(precipitation reaction)v免疫标记技术免疫标记技术（一）（一）凝集反应凝集反应(agglutination)颗粒性颗粒性Ag 与相应与相应 Ab结合后，出现肉眼可见结合后，出现肉眼可见的凝集物。的凝集物。v直接凝集反应直接凝集反应 颗粒性颗粒性Ag直接与待检直接与待检Ab，反应出现的凝集，反应出现的凝集现象。现象。v玻片法玻片法 如如:ABO血型鉴定血型鉴定1.单向扩散单向扩散2.双向免疫扩散双向免疫扩散（二）（二）沉淀反应沉淀反应可溶性可溶性Ag
4、 加相应加相应Ab在电介质参与下，出现沉淀物。在电介质参与下，出现沉淀物。原理示意图AbAg模拟图模拟图染色标本图染色标本图1.1.抗原抗体双向自由扩散抗原抗体双向自由扩散2.242.24小时出结果小时出结果3.3.呈现沉淀线或弧呈现沉淀线或弧v 敏感度高，可以定性，定量或定位检测。敏感度高，可以定性，定量或定位检测。v三大标记技术三大标记技术:v同位素同位素;v荧光素荧光素;v酶酶 免疫标记技术免疫标记技术用标记物标记抗体或抗原进行抗原抗体反应借以提高免用标记物标记抗体或抗原进行抗原抗体反应借以提高免疫学诊断的敏感性疫学诊断的敏感性荧光素荧光素：异硫氰酸荧光素（黄：异硫氰酸荧光素（黄绿色荧光
5、）、藻红蛋白、绿色荧光）、藻红蛋白、罗丹罗丹明（红色荧光）明（红色荧光）放射性同位素：放射性同位素：125I、131I酶酶：辣根过氧化物：辣根过氧化物酶、硷性磷酸酶酶、硷性磷酸酶免疫荧光检测法（免疫荧光检测法（IFA）放射免疫检测法（放射免疫检测法（RIA）酶免疫检测法（酶免疫检测法（EIA）酶免疫测定法酶免疫测定法(enzyme immunoassay，EIA)原理原理:酶催化底物的高效性与酶催化底物的高效性与Ag-Ab反应反应的的特异性相结合，催化酶底物显色，判断特异性相结合，催化酶底物显色，判断结果。既可定性也可定量，其敏感度高。结果。既可定性也可定量，其敏感度高。(ng-pg/ml)标
6、记酶标记酶:(HRP)；底物；底物:邻苯二胺邻苯二胺(OPD)，二氨基联苯胺二氨基联苯胺(DAB)。待测A待测 B待测 C底物包被乙肝 Ag一抗:人抗病毒抗体(IgG)二抗二抗:羊抗人IgG抗体-辣根过氧化物酶抗同种型表位的抗体抗同种型表位的抗体检测类型与方法检测类型与方法v 凝集反应凝集反应 v 沉淀反应沉淀反应v 免疫标记技术免疫标记技术血清学试验免疫学预防疫苗的基本要求疫苗的基本要求v 安全v 有效v 实用疫苗疫苗：用于人工主动免疫的生物制品 （细菌、病毒、螺旋体、类毒素等）人工免疫v 人工主动免疫 (artifical active immunization)v 人工被动免疫 (art
7、ifical passive immunization)v 计划免疫 (planed immunization)主动免疫主动免疫v死疫苗死疫苗：选用免疫原性强的病原体，经人工培养：选用免疫原性强的病原体，经人工培养后，用理化方法灭活制成。后，用理化方法灭活制成。伤寒、乙脑、霍乱、百日咳、狂犬病伤寒、乙脑、霍乱、百日咳、狂犬病 流脑斑疹伤寒、流脑斑疹伤寒、钩端螺旋体等疫苗钩端螺旋体等疫苗v减毒活疫苗减毒活疫苗：用人工变异或从自然界筛选获得的：用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活病原体制成的制剂。减毒或无毒的活病原体制成的制剂。卡介苗（卡介苗（BCG）、麻疹、）、麻疹、脊髓灰质炎疫苗等脊髓
8、灰质炎疫苗等v类毒素类毒素：0.30.4甲醛处理细菌的甲醛处理细菌的外毒素，使其失去毒性保留免疫原性，外毒素，使其失去毒性保留免疫原性，即成类毒素。即成类毒素。如：白喉、破伤风类毒素如：白喉、破伤风类毒素人工被动人工被动免疫法免疫法v概念概念：给机体注入抗体等制剂，从而获得特异性的免疫力给机体注入抗体等制剂，从而获得特异性的免疫力的方法。的方法。v特点特点：立即生效，维持时间短，用于治疗或紧急预：立即生效，维持时间短，用于治疗或紧急预 防。防。v免疫血清种类：免疫血清种类：1）抗毒素）抗毒素 2）丙种球蛋白）丙种球蛋白 3）人特异性）人特异性Ig计划免疫计划免疫v概念：根据某些特定传染病的疫情
9、监测和人群免疫状况分析，有计划地进行人群预防接种，以提高人群免疫力，达到控制直至消灭传染病地措施。v 免疫程序：儿童基础免疫 特殊人群免疫v 亚单位疫苗：亚单位疫苗：提取病原体中可刺激机体产生保护性免疫的抗提取病原体中可刺激机体产生保护性免疫的抗原成分制成的疫苗。原成分制成的疫苗。如：流感、霍乱亚单位疫苗如：流感、霍乱亚单位疫苗v基因工程疫苗：基因工程疫苗：-用基因工程技术，将目的基因通过人工方法表达，用基因工程技术，将目的基因通过人工方法表达，制备成具有免疫原性的疫苗。制备成具有免疫原性的疫苗。新型疫苗v重组抗原疫苗：重组抗原疫苗：用基因工程的技术将用基因工程的技术将 编码有效免疫原的基因插
10、入载体，编码有效免疫原的基因插入载体，再导入宿主细胞，使之表达大量病原体抗原，提起纯化成再导入宿主细胞，使之表达大量病原体抗原，提起纯化成疫苗。疫苗。如：如：HbsAg疫苗疫苗vDNA疫苗：疫苗：将编码有效抗原的基因插入到质粒将编码有效抗原的基因插入到质粒DNA当中，建成重当中，建成重组质粒，在导入机体组织细胞，达到免疫接种目的。它既组质粒，在导入机体组织细胞，达到免疫接种目的。它既是载体又能表达有效蛋白抗原的重组质粒，称为是载体又能表达有效蛋白抗原的重组质粒，称为DNA疫疫苗。苗。v转基因植物疫苗：转基因植物疫苗：将目的基因导入食用植物细胞基因组中，将目的基因导入食用植物细胞基因组中，植物可
11、食用部分稳定表达目的基因产物，人和动物摄食获植物可食用部分稳定表达目的基因产物，人和动物摄食获得免疫。得免疫。免疫学治疗（immunotherapy)概述v免疫治疗：人为地调节机体的免疫功能以达到治疗疾病的治疗方法v分类：特异性免疫治疗 主动免疫治疗 被动免疫治疗 非特异性免疫治疗 细胞因子 免疫制剂B B细胞活化的双信号细胞活化的双信号抗原提呈细胞抗原提呈细胞 Ab（IgM/IgG/IgE)Th1、Th2、Tc/CTL体液免疫细胞免疫正常免疫应答超敏反应超敏反应第一信号：抗原信号第一信号：抗原信号第二信号：协同刺激信号；第二信号：协同刺激信号；细胞因子参与调控及效应细胞因子参与调控及效应完全
12、抗原：完全抗原：半抗原半抗原载体载体B细胞细胞表位表位T细胞表位细胞表位免疫原性免疫原性BCRTCRTITD异种抗原、异种抗原、自身抗原等自身抗原等补体补体FcR巨噬细胞HVR分分五类五类，每，每类各有不同类各有不同分二型分二型Fab调理、调理、ADCCAgPRRs-PAMPMHC II细胞因子，细胞因子，免免疫调节、炎症疫调节、炎症;抗肿瘤抗肿瘤 存在同种型、同种存在同种型、同种异型、独特型表位异型、独特型表位四肽链的基本结构，每部分（功能域）功能各不相同CR补体三条激活途径补体三条激活途径 经典途径经典途径 旁路途径旁路途径 MBL途径途径主要激活物质主要激活物质 AgAb复活物复活物 某
13、些细菌、真菌某些细菌、真菌 细菌甘露聚糖残基细菌甘露聚糖残基 MBL起始分子起始分子 C1q C3 MASP参与成分参与成分 C1C9 C3、C5C9 MASP、C2C9 B、D因子因子C3转化酶转化酶 C4b2b C3bBb C4b2bC5转化酶转化酶 C4b2b3b C3bnBb C4b2b3b 生物学作用生物学作用 再次感染或感染再次感染或感染 初次感染或感染初次感染或感染 同旁路途径同旁路途径 后期参与特异性免疫后期参与特异性免疫 早期发挥菲特异免疫早期发挥菲特异免疫 MAC、小片断的炎症介质作用、小片断的炎症介质作用 Class IIClass IIIClass I DP DQ DR
14、 C4B C4A B1 C2 HSP TNF B C A E F MIC G H 多态性、共显性、单倍体按功能功能分抗原的加工和提呈/I、二类途径将抗原表位分离并送将抗原表位分离并送至细胞表面的过程。至细胞表面的过程。免疫功能相关基因免疫非相关基因给经典HLA基因提供帮助其产物与免疫无关经典经典HLA基因基因功能、分布功能、分布白细胞分化抗原白细胞分化抗原白细胞分化抗原、CD分子、黏附分子细胞因子细胞因子细胞因子；细胞因子；IL、TNF、IFN、趋化因子、趋化因子、CSF及其代表性细胞因及其代表性细胞因子功能。子功能。B细胞细胞B细胞亚群及其功能；细胞亚群及其功能；表面信号分子表面信号分子T细
15、胞细胞T细胞亚群及其功能；细胞亚群及其功能；阳性选择阳性选择-MHC 限制性；限制性；阴性选择：自身耐受性；阴性选择：自身耐受性；表面信号分子表面信号分子B细胞应答细胞应答B2细胞接受二种信号活化，产生抗体；不同的细胞细胞接受二种信号活化，产生抗体；不同的细胞因子可调控不同的抗体产生；不同时期接受相同抗因子可调控不同的抗体产生；不同时期接受相同抗原产生抗体的规律不同（类别转换、亲和力成熟原产生抗体的规律不同（类别转换、亲和力成熟等）。等）。T细胞应答细胞应答双信号活化双信号活化;CD4+T分化为分化为Th1、Th2;CD8+T分化为分化为Tc超敏反超敏反应应 类型AbIgEIgG,IgMIgG,IgM补体+细胞 肥大细胞嗜碱性粒细胞嗜酸性粒细胞MNK中性粒细胞肥大细胞嗜碱性粒细胞血小板Th1 CTL M机制机制代表性疾病代表性疾病
