1、 右图为植物体细胞杂交过程示意图。右图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答：据图回答：（1 1）步骤是）步骤是 ，最，最常用的方法是常用的方法是 。（2 2）步骤一般常用的化学试剂）步骤一般常用的化学试剂是是 ，目的是，目的是 。(3)(3)在利用杂种细胞培育成为杂种植在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段株的过程中，运用的技术手段是是 ，其中步骤相当于，其中步骤相当于 ，步骤相当于，步骤相当于 。（4 4）植物体细胞杂交的目的是获得新）植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植株。使的杂种植株。使能够在新能够在新的植物体上有所表现，其根本原因是的植物体上有所表现，其根本原因是。去掉
2、细胞壁，分离原生质体去掉细胞壁，分离原生质体酶解法酶解法聚乙二醇（聚乙二醇（PEG）诱导植物原生质体融合诱导植物原生质体融合植物组织培养植物组织培养脱分化脱分化再分化再分化远缘杂交亲本远缘杂交亲本的遗传特征的遗传特征杂种植株获得双亲的遗传物质杂种植株获得双亲的遗传物质 （5 5）若远源杂交亲本）若远源杂交亲本A A和和B B都是二倍体，则杂种植株为都是二倍体，则杂种植株为倍体。倍体。（6 6）从理论上讲，杂种植株的育性）从理论上讲，杂种植株的育性。若运用传统有性杂交方法能否实现？。若运用传统有性杂交方法能否实现？。并说明现由并说明现由 。因此，这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于因此，
3、这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于。（7 7）利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种过程中，遗传物质的传递是否遵）利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种过程中，遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？循孟德尔的遗传规律？为什么？。四四可育可育不能不能因为不同种生物之间存在生殖隔离因为不同种生物之间存在生殖隔离克服远缘杂交不亲和的障碍，大大克服远缘杂交不亲和的障碍，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围扩展了可用于杂交的亲本组合范围不遵循。因为在生物进行有性生殖的过程中，才遵循孟德尔的遗传不遵循。因为在生物进行有性生殖的过程中，才遵循孟德尔的遗传规律，而植物体细胞杂交育种的过程不属
4、于有性生殖规律，而植物体细胞杂交育种的过程不属于有性生殖 学习目标学习目标 熟悉植物组织培养的基本过程。熟悉植物组织培养的基本过程。理解细胞分化概念及脱分化，再分化理解细胞分化概念及脱分化，再分化。课题重点与难点课题重点与难点 课题重点：植物组织培养的基本过程课题重点：植物组织培养的基本过程。课题难点：植物组织培养过程中使用课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。细胞分化，脱分化，再的无菌技术。细胞分化，脱分化，再分化。分化。活动活动1：什么是细胞分化？什么是细胞分化？细胞分化的原因和结果？细胞分化的原因和结果？愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？愈伤组织是怎样形成的？有什么特点？脱分化、再
5、分化？脱分化、再分化？组织培养的过程？组织培养的过程？以及组织培养的理论基础以及组织培养的理论基础？一、细胞的分化与全能性1.1.细胞分化：细胞分化：个体发育中，细胞在形态、结构和个体发育中，细胞在形态、结构和 生理功能上出现生理功能上出现稳定性稳定性差异的过程。差异的过程。特定时空下基因的选择性表达。特定时空下基因的选择性表达。形成各种组织器官。形成各种组织器官。结果：结果：原因：原因：定义：定义：脱分化（去分化）再分化 愈伤组织愈伤组织是通过细胞分裂细胞分裂形成的，其细胞排列疏松疏松而无规则而无规则，高度液泡化液泡化呈无定形无定形状态的薄壁薄壁细胞。2.植物组织培养的理论基础：细胞全能性：
6、具有某种生物全套细胞全能性：具有某种生物全套遗传信息遗传信息的任何一个活细胞，都具有发育成的任何一个活细胞，都具有发育成完整个完整个体体的能力，即每个生物细胞都具有的能力，即每个生物细胞都具有全能性全能性。细胞全能性表达条件：细胞全能性表达条件：离体离体一定的营养物质、激素和其他外界条件一定的营养物质、激素和其他外界条件二、植物组织培养的基本过程二、植物组织培养的基本过程 离体器官、组织或细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 植物体 活动活动2：影响组织培养的因素？影响组织培养的因素？菊花组织培养应注意的问题？菊花组织培养应注意的问题？三、影响植物组织培养的因素：三、影响植物组织培养的因素：
7、不同植物的组织培养难度不同不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同 大量元素：大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等1、外植体的选取、外植体的选取2、培养基的配制、培养基的配制(MS培养基培养基)3、不同植物激素浓度，使用顺序、不同植物激素浓度，使用顺序和使用量和使用量使用顺序 实验结果 先生长素，后细胞分裂素 有利于分
8、裂但不分化 先细胞分裂素，后生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率提高 生长素细胞分裂素比值结果 比值高时 促根分化，抑芽形成 比值低时 促芽分化，抑根形成 比值适中 促进愈伤组织生长 4、消毒、消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因：在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因：5、pH、温度、光照、温度、光照菊花：菊花：pH=5.8 温度控制在温度控制在1822 每日光照每日光照12h 活动活动3：用自己的话把菊花组织培养的操作流程给用自己的话把菊花组织培养的操作流程给描述出来描述出来?（提示：（提示：怎样配制怎样配制MS培养基培养基?外外植体消毒应如何进行植体消毒应如何进
9、行?接种、培养、移栽时接种、培养、移栽时应注意什么问题应注意什么问题?）制备制备MS固体固体培养基培养基外植体消毒外植体消毒 接种接种 培培 养养栽栽 培培四、实验操作四、实验操作 移移 栽栽冲洗冲洗酒精酒精无菌水冲洗无菌水冲洗氯化汞氯化汞无菌无菌水冲洗至少三次之上水冲洗至少三次之上流水冲洗流水冲洗酒精酒精无菌水冲洗无菌水冲洗氯化汞氯化汞无菌水冲洗至少三次之上无菌水冲洗至少三次之上思思 考考 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯、接种的无菌操作（酒精、酒精灯灼烧）灼烧）4、无菌箱中的培养；、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。本课题内容小结菊花菊花组织组织培养培养基础知识基础知识实验操作实验操作植物体的组植物体的组织培养织培养影响组织培养影响组织培养的因素的因素细胞分化细胞分化细胞全能性细胞全能性组织培养过程组织培养过程营养营养激素激素环境条件环境条件MS固体培养基制备固体培养基制备外植体消毒外植体消毒接种接种培养培养移栽移栽栽培栽培
