1、XXXXXXXXXX2021-03-30123主要内主要内容容一、一、新冠核酸检新冠核酸检测测相关依相关依据据新冠疫情国家相关规定新冠疫情国家相关规定：关于做好新冠疫情常态化防控工作的指导意见（国发明电202014 号）新冠防控方案（第七版）新冠诊疗方案（第八版）实验室建设和检测实验室建设和检测：医疗机构临床基因扩增实验室管理办法（卫办医政发2010194号）医疗机构新冠核酸检测工作手册（试行 第二版）（联防联控机制医疗发2020313号）新冠实验室生物安全指南（第二版）关于进一步加强集中隔离点新冠核酸样本采集检测工作的通知（联防联控机制医疗发2020311 号）4二、实验室质量控二、实验室质
2、量控制制实验室要求质量控制（一）实验室要（一）实验室要求求1、实验室基本要求：符合病原微生物实验室生物安全管理条例具备经过卫生健康行政部门审核备案的生物安全二级及 以上实验室条件 具备基因扩增检验实验室条件。试剂准备间核酸提取核酸提取间间核酸扩增间产物分析间缓冲缓冲间间缓冲缓冲间间缓缓冲冲间间缓冲缓冲间间原则上设4个区个区域域，各区域在物理空间上必须是完全相互独立完全相互独立，无论是在空间 上还是在使用中，应当始终处于完全分隔状态，不能有空气的直接相不能有空气的直接相通通。人员流动严格按照单一方向，试剂准备区人员流动严格按照单一方向，试剂准备区核酸提取间核酸提取间扩增区扩增区 扩增产物分析扩增
3、产物分析区区 不同工作区域内的设备、物品不得混不同工作区域内的设备、物品不得混用用 不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色不同的工作区域使用不同的工作服（例如不同的颜色）（一）实验室要求（一）实验室要求合理分合理分区区标本接收人员的个人防护：按采样人员防护装备执标本接收人员的个人防护：按采样人员防护装备执行行样本双签收：标本运送人员样本双签收：标本运送人员+接收人接收人员员采样人员防护装备采样人员防护装备：N95N95及以上防护口及以上防护口罩罩护目护目镜镜防护服、乳胶手套、防水靴防护服、乳胶手套、防水靴套套每采一个人应当进行严格手每采一个人应当进行严格手 消消 毒或更换手毒或更换手套
4、套1 1、采样、采样收收样样！注意检查标本是否泄注意检查标本是否泄漏漏若有泄漏，及时进行消毒处理并重新采若有泄漏，及时进行消毒处理并重新采样样在新冠疫苗接种点及相邻区域内在新冠疫苗接种点及相邻区域内不得开展不得开展人员新冠核酸检测的人员新冠核酸检测的采采样工作样工作。新冠疫苗接种当天，所有受种者和接种点工作人员新冠疫苗接种当天，所有受种者和接种点工作人员不得开展不得开展核酸检核酸检测测 采样采样。负责新冠疫苗接种点医护人员等工作人员在离开接种区域前要严格负责新冠疫苗接种点医护人员等工作人员在离开接种区域前要严格按按 要求做好个人防护用品处理、要求做好个人防护用品处理、手部清洁和消毒手部清洁和消
5、毒。原则上，在接种点工作的医护人员原则上，在接种点工作的医护人员不得从事不得从事新冠核酸采样和检测工作新冠核酸采样和检测工作；如必须从事采样检测工作，应在离开接种点如必须从事采样检测工作，应在离开接种点2424小时后方可开展，采小时后方可开展，采样样 前须严格更换新的个人防护用品，严格手清洁和消毒前须严格更换新的个人防护用品，严格手清洁和消毒。试剂盒开试剂盒开封封立即取出阳性对照和阴性立即取出阳性对照和阴性对对照照 放置核酸提取间（如传递窗放置核酸提取间（如传递窗）所有试剂充分解冻，混匀离心后分所有试剂充分解冻，混匀离心后分装装个人防护（本区域专用实验服个人防护（本区域专用实验服）2 2、试剂
6、准备、试剂准备间间主要功能主要功能：贮存试剂、试剂的贮存试剂、试剂的分分 装和扩增反应体系装和扩增反应体系的的 制制备备 离心管、带滤芯的离心管、带滤芯的吸吸 头等消耗品的贮存头等消耗品的贮存和和 准准备备吸取标吸取标本本实验结束后处理实验结束后处理：消毒实验消毒实验台台 面面 和仪器和仪器表表 面面更换手更换手套套医疗废物即医疗废物即清清加样枪切加样枪切勿勿 插插 进管进管内内加阴性对照加阴性对照和和室室 内弱阳性内弱阳性质质控控品品先加样本核先加样本核酸酸和和 试剂阴性试剂阴性对对照照封膜或盖封膜或盖管管最后加阳性对最后加阳性对照照核酸加样（生物安全二级实验室（生物安全二级实验室）提取核提
7、取核酸酸样本盖子拧样本盖子拧紧紧充分震荡、离充分震荡、离心心生物安全生物安全:人员防护按照生物安全三人员防护按照生物安全三 级级 实验室防护水实验室防护水平平 在生物安全二级实验室开展，在生物安全二级实验室开展，双人操双人操作作 吸取样本在安全柜内操吸取样本在安全柜内操作作 核酸加样在安全柜内操核酸加样在安全柜内操作作 离开安全柜更换手离开安全柜更换手套套3 3、核酸提取、核酸提取间间主要功能主要功能：标本转运桶的开标本转运桶的开启启 标本的灭活（适用时标本的灭活（适用时）核酸提取及其加入至扩核酸提取及其加入至扩增增 反应管（板）反应管（板）等等个人防护：本区域专用实验个人防护：本区域专用实验
8、服服核对扩增程核对扩增程序序确保反应板或管密确保反应板或管密封封离心、上离心、上机机 结果判定严格按照试剂盒说明书进结果判定严格按照试剂盒说明书进行行 扩增结束后扩增结束后，严禁开严禁开盖盖，及时清理反应板及时清理反应板，按一般医疗废弃物处，按一般医疗废弃物处理理4 4、核酸扩增、核酸扩增间间主要功能主要功能：核酸扩核酸扩增增（一）实验室要求（一）实验室要求检测要检测要求求 实验室应当将重点人员样本和一般健康筛查人群样本分区存 放、分批检测 在检测过程中，由于样品盖的打开、核酸提取的振动和离心 作用，可能产生气溶胶，存在感染和污染的风险。所有的实 验操作要轻柔，避免气溶胶的产生。生物安全柜每次
9、使用后应该用消毒剂消毒后紫外线照射至少 30min；核酸提取仪、荧光PCR等，离心机等设备每天用酒 精擦拭消毒；必要时用去核酸污染试剂擦拭上述设备，擦拭 完毕后必须用清水彻底清洁，以免出现假阴性。（二）质量控（二）质量控制制各新冠核酸检测机构应当加强实验过程质量控制，避免交叉污染，提高检测准确性。实验室严格分区，实验服及物品专区专用，切忌混用。（二）质量控（二）质量控制制1、人员培训：采样和检测人员生物安全培训 采样人员采样技术培训 检测人员核酸检测技术培训 线上、线下、手把手、现场（二）质量控（二）质量控制制2、试剂、设备性能验证：在用于临床标本检测前，实验室应对由提取试剂、提取仪、扩增试剂
10、、扩 增仪等组成检测系统进行必要的性能验证，性能指标包括但不限于仪器的 精密度（至少要有重复性）、试剂的灵敏度和最低检测限。建议选用高灵敏的试剂（检测限500 拷贝/ml）。关于加强新冠肺炎患者出院核酸检测工作的通知（联防联控机制医疗发关于加强新冠肺炎患者出院核酸检测工作的通知（联防联控机制医疗发202137202137号号）（二）质量控（二）质量控制制3、规范室内质控：每批检测至少有1 份弱阳性质控品（通常为检出限的1.53倍）、3 份阴性 质控品（生理盐水）。质控品随机放在标本中，参与从提取到扩增的全过程。4、常规性参加室间质评：实验室应常态化参加国家或广东省疾控中心组织的室间质评。不按要
11、求参加室间质评的，或室间质评结果不合格的，或检测结果质量问 题突出的，不得开展核酸检测。广东省新冠防控指挥办医疗救治组转发关于进一步加强集中隔离点新冠核酸样本采集检测工作的通知（粤卫医函2020151号）（二）质量控（二）质量控制制5、检测过程质量控制要点：试剂配制时，试剂盒阳性对照和阴性对照要提前取出放置在核酸提取间，待全部待测标本加样完毕并封装好后再取出。核酸提取时，应双人操作，在生物安全柜内用带滤芯的吸头吸取标本，加 样枪切勿插进管内。核酸加样时，先加标本核酸和阴性对照试剂，封膜或盖管，最后加阳性对 照，确保反应板或管密封后离心、上机。对于重要的标本，可用两种不同厂家的试剂同时检测。一旦
12、出现污染，立即停止所有实验，所有参与本次实验过程中的耗材和实 验全部扔掉。实验室通风！检测合格后方可重新开始实验。（二）质量控（二）质量控制制6、结果报告 隔离点隔离人员第14天解除隔离前，双试剂检测，省新冠病毒核酸检测 信息系统录入两条检测记录（二）质量控（二）质量控制制6、结果报告（二）质量控（二）质量控制制6、结果报告三三.实验室生物安实验室生物安全全实验室检实验室检测测 安全管安全管理理实验室医实验室医疗疗 废物管废物管理理实验室污实验室污染染 处处理理实验室生物安实验室生物安全全重要参考依据：实验室生物安全管理参照新型冠状病毒实验 室生物安全指南（第二版）（国卫办科教函202070
13、号）医疗废物管理条例（中华人民共和国国务 院第380 号令）执行。（一）实验室检测安全管（一）实验室检测安全管理理1、基本要求：核酸检测应在生物安全风险评估的基础上，采取适当的个体防护 措施，包括双层手套、一次性帽子、N95口罩、面罩/眼罩、鞋套/靴套、隔离衣/防护服等。2.实验前安全要求：应使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行桌面、台面及地面消毒。消 毒液需每天新鲜配制。转运至实验室的标本转运桶应在生物安全柜内开启，开启前，须使 用75%酒精或0.2%含氯消毒剂喷洒消毒。（一）实验室检测安全管（一）实验室检测安全管理理3.核酸提取和检测安全要求：标本进行核酸提取和检测时应在生物安全柜内进行
14、操作。有产生气溶胶风险的操作须在生物安全柜内进行。每次实验操作完毕离开生物安全柜前，需脱掉外层手套，更换新手套。4.实验结束后清洁要求：实验室空气清洁：紫外照射2 小时以上，必要时可采用核酸 清除剂等试剂清除实验室残留核酸。工作台面清洁：0.2%含氯消毒剂或75%酒精。生物安全柜消毒：紫外灯照射30 分钟。转运容器消毒：0.2%含氯消毒剂或75%酒精擦拭或喷洒。塑料或有机玻璃材质物品清洁：0.2%含氯消毒剂或过氧乙酸 或过氧化氢擦拭或喷洒。（二）实验室医疗废物管（二）实验室医疗废物管理理医疗废物的处理是控制实验室安全的关键环节，必须充分掌握 生物安全废弃物的分类，并严格执行相应的处理程序。1、
15、废液的处理：普通污水排入实验室污水处理系统，处理达标后进行排放。感染性废液需采用化学消毒（0.55 含氯消毒剂处理）或物 理消毒（紫外照射30分钟以上），彻底消毒灭活排入实验室 水处理系统，处理达标后排放。隔离点污水：关于进一步加强对隔离场所（酒店）消毒和 监测管理工作的通知（粤疾控函2020660号）（二）实验室医疗废物管（二）实验室医疗废物管理理2、固体废物的处理：分类收集，收集容器应当不易破裂、防渗漏、耐湿耐热、可密封 实验室内的潜在感染性废物不允许堆积存放，应当及时进 行压力蒸汽灭菌处理。废物处置之前，应当存放在实验室内指定的安全位置。小型固体废物如检测耗材、个人防护装备等均需使用双层
16、 防渗漏专用包装袋打包密封后经过压力蒸汽灭菌处理，再 转运出实验室。（三）实验室污染的处（三）实验室污染的处理理1、清理污染物时遵循活病毒生物安全操作要求：采用压力蒸汽灭菌处理，并进行实验室换气等，防止 次生危害。2、标本污染生物安全柜造成局限污染时：立即用吸水纸覆盖，并使用0.55%含氯消毒剂进行喷 洒消毒。消毒液需要现用现配，24 小时内使用。（三）实验室污染的处（三）实验室污染的处理理3、标本倾覆造成实验室污染时：保持实验室空间密闭，避免污染物扩散。立即使用润湿有0.55%含氯消毒剂的毛巾覆盖污染区。必要时（如大量溢撒时）可用过氧乙酸加热熏蒸实验室，剂量为2g/m，熏蒸过夜；或20g/L 过氧乙酸消毒液用气溶胶喷雾器喷雾，用量8ml/m，作用12 小时；或用高锰酸钾-甲醛熏蒸：高锰酸钾8g/m，放入耐热耐腐蚀容器（陶罐或玻璃容器），后加入甲醛（40%）10mL/m，熏蒸4 小时 以上。熏蒸时室内湿度60%80%。（四）实验室的管（四）实验室的管理理 提高防污染意识。严格遵守实验室规则。加强对实验人员的培训。做好实验准备工作。注意实验操作细节。妥善存放实验设备和试剂耗材。细节决定成败细节决定成败！
