1、多聚鳌合物酶法 HRP-多聚化合物-抗体 一、Epos法 Enhanced polymer one-step staining,组织抗原,一抗,HRP,多聚化合物骨架,EPOS 方法,原理：采用一种具有惰性的多聚 化合物作为骨架，将特异 性抗体和HRP，同时标记 在多聚合物分子上，形成 HRP-多聚化合物-特异 性抗体。,步骤：一步法 特点：快速，简便，特异性强， 敏感性高 但商品化种类不全， 价格昂贵,二、EnVision法（或PowerVison） Enhanced Labelled Polymer System 原理：HRP -多聚化合物-第二 抗体,组织抗原,一抗,二抗,酶,多聚化合物
2、骨架,第一步,第二步,PowerVision方法,特点： 敏感性高：（每个多聚鳌合物中含70个 HRP分子和10 个第二抗体） 特异性强： 复合物内无内源性Avidin和Biotin的干扰。,基本操作步骤,1. 抗原修复 2.内源性过氧化 物酶抑制 3. 正常血清封闭,4. 第一抗体 5. 多聚骨架复合物 6. 显色,实验步骤 1、石蜡切片脱蜡至水； 2、3%H2O2室温孵育10min，以消除内源性过氧化 物酶的活性；蒸馏水洗，PBS浸泡3X3min； 3、滴加适当比例稀释的鼠抗人胰岛素一抗工作液， 37 孵育45min； 4、 PBS洗，33min； 5、 滴加HRP标记羊抗小鼠Ig多聚体，37孵育25min； 6、 PBS洗，33min； 7、显色剂显色（DAB）； 8、自来水充分冲洗，封片。,结果： 胰岛内可见棕色着色的阳性细胞，阳性产物见于细胞质。,
