1、项目七项目七 组培实例组培实例 蝴蝶兰的植物组织培养技术蝴蝶兰的植物组织培养技术 学习目标学习目标 了解蝴蝶兰的简介；了解蝴蝶兰的简介；了解蝴蝶兰组培的原因；了解蝴蝶兰组培的原因；掌握蝴蝶兰的组织培养技术。掌握蝴蝶兰的组织培养技术。兰花介绍兰花介绍一、蝴蝶兰简介一、蝴蝶兰简介 蝴蝶兰（蝴蝶兰（Phalaenopsis aphrodite Rchb.F.）别名蝶兰、）别名蝶兰、台湾蝴蝶兰，为兰科、蝴蝶兰属多年生草本植物。原产台湾蝴蝶兰，为兰科、蝴蝶兰属多年生草本植物。原产于亚热带雨林地区，分布在泰国、菲律宾、马来西亚、于亚热带雨林地区，分布在泰国、菲律宾、马来西亚、印度尼西亚以及中国台湾。印度尼
2、西亚以及中国台湾。蝴蝶兰是在蝴蝶兰是在1750年发现的，迄今已发现年发现的，迄今已发现70 多个原生种，多个原生种，大多数产于潮湿的亚洲地区。大多数产于潮湿的亚洲地区。蝴蝶兰为附生性兰花，其白色粗大的气生根露在叶片蝴蝶兰为附生性兰花，其白色粗大的气生根露在叶片周围，除了具有吸收空气中养分的作用外，还有生长周围，除了具有吸收空气中养分的作用外，还有生长和光合作用。新春时节，蝴蝶兰植株从叶腋中抽出长和光合作用。新春时节，蝴蝶兰植株从叶腋中抽出长长的花梗，并且开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花长的花梗，并且开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花迷们的青睐，素有迷们的青睐，素有“洋兰王后洋兰王后”之称。之称。
3、二、蝴蝶兰组培的原因二、蝴蝶兰组培的原因可以有效地保持母本的优良性状，变异率最低。可以有效地保持母本的优良性状，变异率最低。三、蝴蝶兰组培技术三、蝴蝶兰组培技术 1.外植体的选取与消毒外植体的选取与消毒将蝴蝶兰的花梗由植株上剪下，如果已开花的部份可将蝴蝶兰的花梗由植株上剪下，如果已开花的部份可以剪下，留下未开花的节，再将花梗裁剪适当长度，再以剪下，留下未开花的节，再将花梗裁剪适当长度，再将包覆在梗节生长点外的苞片，小心的剥除，勿伤及生将包覆在梗节生长点外的苞片，小心的剥除，勿伤及生长点，置入超音波震荡器中，以稀释的漂白水溶液消毒。长点，置入超音波震荡器中，以稀释的漂白水溶液消毒。如无震荡器时，
4、可置入装有稀释过的漂白水溶液的试管如无震荡器时，可置入装有稀释过的漂白水溶液的试管中，手动的大力摇晃试管，也可达到消毒的目的。中，手动的大力摇晃试管，也可达到消毒的目的。将震荡器或是试管中的花梗取出，置入无菌水中，摇晃将震荡器或是试管中的花梗取出，置入无菌水中，摇晃瓶身，可重覆此一动作瓶身，可重覆此一动作2-3 次，但需取出花梗，置入有无次，但需取出花梗，置入有无菌水的新瓶中，藉此洗净漂白水，洗净后，以镊子取出菌水的新瓶中，藉此洗净漂白水，洗净后，以镊子取出花梗，以酒精浓度花梗，以酒精浓度75%的酒精棉花擦拭花梗，以梗芽生的酒精棉花擦拭花梗，以梗芽生长点向下，酒精棉花擦拭由上而下单一方向擦拭，
5、切勿长点向下，酒精棉花擦拭由上而下单一方向擦拭，切勿以来回的方式擦拭梗芽生长点。以来回的方式擦拭梗芽生长点。将花梗两端切除：芽尖端切将花梗两端切除：芽尖端切90 度另一端则呈度另一端则呈45 度斜切。度斜切。再将切面为再将切面为45 度端插入培养基中。度端插入培养基中。塞子消毒后塞住瓶口，塞子消毒后塞住瓶口，瓶口处再以酒精灯消毒，覆盖上瓶口处再以酒精灯消毒，覆盖上铝箔纸避免感染。铝箔纸避免感染。新长出的株体新长出的株体消毒不彻底瓶内发霉消毒不彻底瓶内发霉2.培养基及培养条件培养基及培养条件 基本培养基为基本培养基为B5或或MS；愈伤组织诱导培养基；愈伤组织诱导培养基B5+KT 0.2 mgL-
6、1+NAA 1.5 mgL-1+椰子汁椰子汁150 gL-1；原球茎增殖培养基：；原球茎增殖培养基：B5+GA3 0.05 mgL-1+水解酪蛋白；壮苗培养基水解酪蛋白；壮苗培养基1/2MS+20%香蕉泥；生香蕉泥；生根培养基根培养基1/2MS+IBA 0.3 mgL-1。培养温度培养温度25-28，光照，光照10 h/d，光照度为，光照度为2 500 lx。3.愈伤组织及芽的诱导愈伤组织及芽的诱导 将灭过菌的外植体接种于培养基上，暗培养将灭过菌的外植体接种于培养基上，暗培养4-5 d后，转为光照培养后，转为光照培养15 d，根尖切口处膨大并产生绿色，根尖切口处膨大并产生绿色瘤状愈伤组织，瘤状
7、愈伤组织，30 d后将愈伤组织切下接种到增殖培后将愈伤组织切下接种到增殖培养基上，再培养养基上，再培养30 d后从愈伤组织表面绿色颗粒逐后从愈伤组织表面绿色颗粒逐渐形成芽点，进而分化出芽。待芽长到渐形成芽点，进而分化出芽。待芽长到1 cm以上时，以上时，将其分切接种于培养基中，继续长大形成壮苗。将其分切接种于培养基中，继续长大形成壮苗。蝴蝶兰芽的诱导蝴蝶兰芽的诱导5.生根与炼苗移栽生根与炼苗移栽 将具有将具有3-4 片叶，高约片叶，高约3-4 cm芽苗切下转移到培养基芽苗切下转移到培养基中。因苗在生根培养基中生长缓慢，约中。因苗在生根培养基中生长缓慢，约90 d转移转移1 次，生根率达次，生根
8、率达100%。移栽时，小心取出小苗，洗净。移栽时，小心取出小苗，洗净根部培养基，栽入消毒液浸泡过的水苔中。防阳光直根部培养基，栽入消毒液浸泡过的水苔中。防阳光直射，保持湿度射，保持湿度85%左右，温度左右，温度25-30 的环境，待的环境，待新根伸长、新叶长出时，每隔新根伸长、新叶长出时，每隔7 d喷喷1 次次0.5%KH2PO4溶液进行叶面追肥，成苗率溶液进行叶面追肥，成苗率95%以上。以上。思思 考考 题题1.蝴蝶兰进行组培的原因？蝴蝶兰进行组培的原因？2.蝴蝶兰如何进行组培快繁？蝴蝶兰如何进行组培快繁？3.蝴蝶兰如何进行生根培养？蝴蝶兰如何进行生根培养？4.蝴蝶兰如何进行炼苗移栽？蝴蝶兰如何进行炼苗移栽？
