1、食品微生物感染疾病食品微生物感染疾病 IIFoodbrone Microbial Infections II黃顯宗黃顯宗東吳大學東吳大學M202第五部份：食品與病害教學目標教學目標n瞭解食品中微生物感染的疾病n腸炎弧菌以其他腸炎弧菌腸炎弧菌Vibrio parahaemolyticusn1950年在日本發現，首宗發現，272病人，20人死亡n最初命名為Pasteurella haemolyticus，1963年列為是弧菌n海水生，夏天多，冬天隱存於泥沙等附著物上；海產多帶有此菌，台灣許多非海產也有發現n 在日本約半數細菌性中毒的菌體引起，台灣也是非常重要n 臨床的VP菌95%以上是KP+食物中
2、的VP菌只有約1%是KP+n KP+是Kanagawa phenomenon指在Wagatsuma agar上有beta溶血，有耐熱的溶血素，TDH，Thermostable direct hemolysinn Thermolable hemolysin（tlh），菌種marker腸炎弧菌腸炎弧菌Vibrio parahaemolyticusn TDH可耐攝氏一百度的高溫，有心臟毒性，亦有腸毒性，腸毒性比霍亂毒素弱n 除TDH外，尚有許多種異型，不過耐熱性較差，如TDH-related hemolysin,TRHn 少數KP-可以引起腸炎n 尚有其他毒素如其他非耐熱溶血素、死亡毒素等n Lip
3、opolysaccharides(LPS)也具有毒性n Ureasen Type III secretion systemn 生長需要0.510%NaCl，3%最適，37度最適生長，有些可在低溫生長n 潛伏期1518小時或更短，症狀：發熱、腹痛、下痢或下血痢、嘔吐等腸炎弧菌腸炎弧菌Vibrio parahaemolyticus血清型血清型nOnKnO和K的連結TDH vs TRHn耐熱與不耐熱nTRH和 Urease的關係，地理分布第三型分泌系統第三型分泌系統nT3SS1nT3SS2alphatdh菌株nT3SS2betatrh菌株http:/ of O3:K6 in IndiaOkuda,1
4、997Frequency of O3:K6 in Foodborne Poisoning in Middle Taiwan during 1995 to 1999From C.S.Chiou%Characteristics of O3:K6Typing of Old O3:K6M R A3A3 A3 A3 A1 A1 A3 M M A2 A3Typing of New O3:K6M I5 I6 I7 I8 I1 I1 I4 I2 I3Genome of New O3:K6http:/www.biken.osaka-u.ac.jp/act/images/hondaB.pngMinimum spa
5、nning tree of 174 global strains Yangs lab,Beijing討論討論n1992開始有霍亂弧菌O139n1996開始有腸炎弧菌O3:K6n為何？V.vulnificus 創傷弧菌創傷弧菌n傷口感染，食用海產感染，海洋弧菌創傷弧菌http:/commons.wikimedia.org/wiki/File:Vibrio_vulnificus_01.png創傷弧菌Hsueh et al.,2004創傷弧菌Hsueh et al.,2004台灣每年感染病人數（cases）與百萬人口的盛行數（prevalence）創傷弧菌n存在於台灣的近海海域中n分離弧菌中，創傷弧
6、菌佔5.7n91屬於人類致病的biotype IHsueh et al.,2004創傷弧菌n 創傷弧菌為伺機性致病菌，具有強大的致病力n 傷口浸泡到海水而進入體內，食用未煮熟的海產而感染n 造成原發性敗血症，高燒及寒顫，很快導致休克。傷口感染會導致蜂窩組織炎，有時會有出血性水泡，並可能由表皮發炎向下層蔓延而導致筋膜發炎n 腸胃症狀方面症狀則是嘔吐、腹痛或腹瀉n 嚴重時會造成死亡，與海產有關的死亡案件中佔95%易感染者n酒精性肝硬化。n原有肝病（包括原因不明的肝硬化），以及慢性肝炎。n酗酒，但沒有肝病紀錄。n遺傳性血色(鐵)沉著病n有慢性疾病，包括糖尿病、風濕性關節炎、地中海型貧血、慢性腎衰竭、
7、淋巴瘤。創傷弧菌感染台美有別http:/ 創傷弧菌nV.damselaTCBS(Thiosulfate-Citrate-Bile Salts-Sucrose)Agarn弧菌檢驗的標準培養基nSucrose的利用與否http:/ 生化特性生化特性Popoff,1984n產生多種毒素n腸毒素，與霍亂毒素相似與其非相似者nHeat-stable enterotoxinsnHemolysins，如 AerolysinnProtease 協助毒性變成有活性AeromonasPlesiomonas shigelloidesn水生，水產食物常見，也發現在動物上n可生長在3%NaClnG-rods，polar
8、 flagella，facultatively anaerobicn常與水產食品中毒有關但認為是opportunistic pathogenCampylobacter jejunin早期名為Vibrio fetus，屬於動物病菌，1970年中期才有乳品與水污染中毒發生n主要是兩種C.jejuni，C.coli及大多數中毒為前者（95%）nG-，vibriod，microaerophilic，在21%O2下不長，最適生長溫度42度，生長範圍在2550度，菌體小，生長慢n禽類普遍可分離到n培養時空氣成份是5%O2、10%CO2、85%N2n在美國地區發生率高，幾乎與Salmonella、Shige
9、lla相當n潛伏期25天，症狀：發熱，下痢，腹痛，血便Campylobacter jejuniCampylobacter,Salmonella 和和 Aeromonas 發生率發生率Agger et al.,1985Yersinia enterocolitican以Montreal的統計Yersinia 2.8%Shigella 1.1%Salmonella 4.4%Campylobacter4.3%n80年代非常受到重視n主要寄存在動物上，特別是豬的扁桃腺、豬舌頭，在水中亦廣泛存在n食物的污染主要是乳品，肉品，但魚蝦海產、蔬菜等發現n可長在E.coli，Salmonella，Shigella
10、，等培養基上，分離困難，目前已發展alkaline處理，2次enrichment有效選擇性培養基等n引起腸胃炎，症狀：下痢，發熱，腹痛，嘔吐或類似Pseudoappendicitis、arthritis等，嚴重等，類似肺結核等侵害肺，脾，等內臟n有明顯的血型分布O:8在美國，加拿大西部、O:3則分布於其他區Yersinia enterocoliticaYersinia enterocolitica血清型血清型Swaminathan et al.,1982Yersinia enterocolitica 血清型分佈專一性降低中血清型分佈專一性降低中Bissett et al.,1990Yersin
11、ia enterocolitica 在其他檢體的檢在其他檢體的檢出出Bissett et al.,1990n1980 Zink發現致病是由於42 MDa的plasmid的存在，現已知4048 MDa的plasmid與致病性相關n對Ca需要nST耐熱腸毒素nAutoagglutination在tissue culture medium中培養，37度會自我凝集，22/25度不會。n由於表膜的P1蛋白質nCongo red，crystal violet的binding能力n以上的特性也是用作判別致病菌性的依據Yersinia enterocolitica 致病性致病性n關於致病的plasmid的分離
12、研究很多，與Y.pestis、Y.pseudotuberculosis致病plasmid有許多相同處nSereny test Yersinia enterocolitica 致病性致病性Listeria monocytogenesn李斯特菌是80年後期的熱門中毒菌n主要是在美國有幾大件中毒案，死亡慮高，歐洲的統計案件正增加中n本菌原本是動物的病菌（牛、羊等）n在環境，動物以及各食物的發現率很高，特別是畜產品，可以說很常見n傳統胞內感染疾病，研究胞內生長的工具Listeria monocytogenes食品檢出情形食品檢出情形美國爆發集體感染美國爆發集體感染n美國以外的國家（？）Wehr,198
13、7流行病學推估流行病學推估n英國估計每年每10萬人口會有0.3案例(case)n台灣應該每年會有69個病人（？）McLauchlin,1987加拿大感染增加情形加拿大感染增加情形Schlech et al.,1983n從前分離需要前cold enrichment數星期，目前已有很好的增菌與分離培養基，也有方便的鑑定套組n較易感染孕婦、胎兒、新生兒等症狀有死胎、流產、septicemia meningitis，meningoencephalitis等n毒素有溶血素 listeriolysin，能入侵白血球，在內繁殖n菌體不耐熱，控制不難n有其他非致病的Listeria菌，增加分離困難Listeria monocytogenes討論討論n為何李斯特菌和E.coli O157:H7沒有在台灣產生流行？請思考請思考n既然是豬有關，吃豬肉的地方如台灣，為何那麼少發生Yersinia enterocolitica 感染？n西元六七十年代Campylobacter等幾種腸道病菌才引起注意，為何那麼晚？之前這些菌不存在嗎？n如何證實致病性質體(virulence plasmid)？
