1、第六章第六章 芳酸及其酯类药物的分析芳酸及其酯类药物的分析概述概述n本类药物的分子结构为：具有取代本类药物的分子结构为：具有取代苯基的羧酸化合物。苯基的羧酸化合物。n结晶性粉末结晶性粉末，具有具有mpmp。n游离芳酸类药物，几乎不溶于水，游离芳酸类药物，几乎不溶于水，易溶于有机溶剂，芳酸碱金属盐易易溶于有机溶剂，芳酸碱金属盐易溶于水。溶于水。n第一节典型药物第一节典型药物分类与理化性质分类分类与理化性质分类1.1.水杨酸类水杨酸类2.2.苯甲酸类苯甲酸类3.3.其他芳酸类其他芳酸类 n（一）（一）.水杨酸类水杨酸类n1.1.典型药物典型药物COOHOCOCH3C O O N aO HN H2阿
2、斯匹林阿斯匹林（ASAASA）水杨酸水杨酸 （SASA）对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠OHCOOH双水杨酯双水杨酯贝诺酯贝诺酯OCOOHCOHOCOOOCOCH3NHCOCH3FFOHCOOH二氟尼柳二氟尼柳n水杨酸nSalicylic acid CAS 69-72-7nPka 2.98nDissociation Constant:pKa12.98(25)pKa213.6(25)nPartition Coefficient(Calculated):Log P 2.19(calc)n阿司匹林阿司匹林 Aspirin CAS 50-78-2 nDissociation Constant:pKa3.3
3、8(25,1M KCl)nPartition Coefficient(Calculated):Log P 1.02(calc)nWhite monoclinic tablets or needle-like crystals.d 1.40.mp 135(rapid heating);the melt solidifies at 118.uv max(0.1N H2SO4):229 nm(E1%1cm 484);(CHCl3):277 nm(E1%1cm 68).Is odorless,but in moist air it is gradually hydrolyzed into salicy
4、lic and acetic acids and acquires the odor of acetic acid.Stable in dry air.pK(25)3.49.One gram dissolves in 300 ml water at 25,in 100 ml water at 37,in 5 ml alcohol,17 ml chloroform,10-15 ml ether.Less soluble in anhydr ether.Decomp by boiling water or when dissolved in solns of alkali hydroxides a
5、nd carbonates.Inorganic salts of acetylsalicylic acid are soluble in water(esp the Ca salt,q.v.),but are decomposed quickly.LD50 orally in mice,rats:1.1,1.5 g/kg(Hart).n二氟尼柳 diflunisal CAS 22494-42-4 nLog P 4.39 nWhite,crystals from toluene,mp 211-213.Freely sol in alc,methanol;sol in most organic s
6、olvents,ethyl acetate,acetone;slightly sol in chloroform,carbon tetrachloride,methylene chloride.Practically insol in water at neutral or acidic pH.Insol in hexane.LD50 orally in female mice:439 mg/kg(Stone).n双水杨酸酯 salsalatenWhite,crystals from toluene,mp 211-213.Freely sol in alc,methanol;sol in mo
7、st organic solvents,ethyl acetate,acetone;slightly sol in chloroform,carbon tetrachloride,methylene chloride.Practically insol in water at neutral or acidic pH.Insol in hexane.LD50 orally in female mice:439 mg/kg(Stone).n对氨基水杨酸钠 sodium aminosalicylate2.2.主要性质主要性质（1 1）酸性：）酸性：a.a.芳酸类药物分子中具有芳酸类药物分子中具有C
8、OOHCOOH，显显弱酸性，可用酸碱滴定法测定含量弱酸性，可用酸碱滴定法测定含量b.b.药用芳酸药用芳酸pKapKa在在3 36 6之间之间COOHOCOCH3COOHOHCOOHlpKa4.263.492.95HOHOCO分子内分子内氢键氢键2)2)无游离无游离-COOHCOOH，有有ArAr，可用可用UVUV法法3)3)具有芳伯氨基，可采用亚硝酸钠滴定法。具有芳伯氨基，可采用亚硝酸钠滴定法。4)4)具有酚羟基，与具有酚羟基，与FeFe3 3生成有色的物质生成有色的物质5)5)水杨酸酯类易水解，产生特殊杂质水杨酸酯类易水解，产生特殊杂质（二）（二）.苯甲酸类苯甲酸类1.1.代表药物代表药物苯
9、甲酸（钠）苯甲酸（钠）丙磺舒丙磺舒C O OH(Na)SO2COOHN(CH2CH2CH2)2CH3CH3NHCOOH甲芬那酸甲芬那酸2.2.主要性质主要性质1)1)具有游离具有游离-COOHCOOH，用用NaOHNaOH直接滴定直接滴定；2)2)根据溶解差异，可选用双相滴定法；根据溶解差异，可选用双相滴定法；3)3)具有苯环，有具有苯环，有UVUV、IRIR特征吸收，鉴别和特征吸收，鉴别和含量测定。含量测定。4)4)苯甲酸（钠）与苯甲酸（钠）与FeClFeCl3 3显色反应，丙磺舒显色反应，丙磺舒的受热分解等用于鉴别。的受热分解等用于鉴别。（三）其他芳酸类（三）其他芳酸类ClOCCH3CH3
10、COOC2H5氯贝丁酯氯贝丁酯CHCH2CHCOOHCH3CH3CH3布洛芬布洛芬1.1.代表药物代表药物2.2.性质性质1)1)氯贝丁酯是油状液体，具有羧酸氯贝丁酯是油状液体，具有羧酸酯易水解，酸碱滴定法（剩余滴定酯易水解，酸碱滴定法（剩余滴定法）含量测定法）含量测定2)2)布洛芬具有酸性，可直接酸碱滴布洛芬具有酸性，可直接酸碱滴定法。定法。3)3)均具有均具有UVUV、IRIR特征吸收，可用于鉴特征吸收，可用于鉴别和含量测定。别和含量测定。一一 与与FeClFeCl3 3反应反应n1.1.水杨酸及其盐水杨酸及其盐OHCOOH 紫堇色紫堇色第二节鉴别反应第二节鉴别反应 水杨酸水杨酸+FeCl
11、3pH 462COOO3Fe3FeOCOCH3COOHH2O+放冷放冷Fe(OH)3T.S 紫堇色配位化合物紫堇色配位化合物 FeCl3T.S 碱性或中性溶液 赭色赭色C O OH2.2.苯甲酸苯甲酸碱式苯甲碱式苯甲酸铁盐酸铁盐3 3、双水杨酯、双水杨酯双水杨酯双水杨酯NaOHNaOH水解水解水杨酸钠水杨酸钠显水杨酸盐的鉴别反应显水杨酸盐的鉴别反应三氯化铁呈色三氯化铁呈色加稀盐酸加稀盐酸白色白色溶于醋酸铵溶于醋酸铵S.TS.TSO2COOHN(CH2CH2CH2)2NaOH水稀释水稀释pH56FeCl3 T.S1D米黄色米黄色3.3.丙磺舒丙磺舒4.4.氯贝丁酯氯贝丁酯ClO CCH3CH3C
12、OOC2H5KOH盐酸羟胺盐酸羟胺稀稀HClHClFeCl3 TS呈紫色呈紫色异 羟 肟 酸异 羟 肟 酸盐盐异 羟 肟 酸异 羟 肟 酸铁铁n二、重氮化二、重氮化-偶合反应偶合反应 H+NaNO2 TSRN2+Cl-萘酚 OH 橙红色橙红色COONaNH3OH 对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠COOCOOCH3NHCOCH3 贝诺酯贝诺酯 H+同上三、水解反应三、水解反应OCOCH3COOHNa2CO3OHCOONaCH3COONaCO2H2SO4OHCOOHCH3COOH+白色沉淀白色沉淀 醋酸气味醋酸气味1.阿司匹林阿司匹林四四.分解产物的反应分解产物的反应SO2COOHN(CH2CH2CH
13、2)2NaOH熔融熔融Na2SO3HNO3氧化氧化Na2SO4显硫酸盐反应显硫酸盐反应n六、紫外吸收光谱法六、紫外吸收光谱法n七、红外吸收光谱法七、红外吸收光谱法一、阿司匹林中的特殊杂质检查一、阿司匹林中的特殊杂质检查1、合成工艺、合成工艺H+OH苯酚苯酚ONaCO2ONaCOONaCOOHOH 水杨酸水杨酸OCOCH3醋酐醋酸苯酯醋酸苯酯COOHOH(CH3CH2)2O+乙酰化COOHOCOCH3CH3COOH+O HOHCOO水杨酸苯酯水杨酸苯酯O HOCOCH3COO乙酰水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯2 2、溶液的澄清度检查、溶液的澄清度检查 检查碳酸钠检查碳酸钠试液中不溶物试液中不溶物 苯酚
14、苯酚 醋酸苯酯醋酸苯酯 水杨酸苯酯水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯溶溶l阿司匹林阿司匹林Na2CO3 不溶不溶Na2CO3杂质杂质溶液应澄清溶液应澄清3 3、水杨酸、水杨酸 游离水杨酸是阿司匹林中的特殊杂质游离水杨酸是阿司匹林中的特殊杂质 v来源来源生产中乙酰化不完全生产中乙酰化不完全 贮存中水解产物贮存中水解产物ChP2015采用采用HPLC法控制法控制SA的限量的限量n供试品溶液（临用新制）供试品溶液（临用新制）n溶剂用溶剂用1%冰醋酸甲醇溶液冰醋酸甲醇溶液n流动相：乙腈流动相：乙腈-四氢呋喃四氢呋喃-冰醋酸冰醋酸-水（水（20：5：5：70）n按外标法计算，不得过按外标法计算，不得
15、过0.1%n含量测定方法含量测定方法原料生产原料生产贮存贮存制剂生产制剂生产贮存贮存引入杂质引入杂质原料标准原料标准引入杂质引入杂质制剂标准制剂标准原料原料 0.1%0.1%片剂片剂 0.3 0.3肠溶片肠溶片 1.5 1.5栓剂栓剂 3.0 3.0有关物质：乙酰水杨酸酐，乙酰有关物质：乙酰水杨酸酐，乙酰水杨酰水杨酸，水杨酰水杨酸水杨酰水杨酸，水杨酰水杨酸梯度HPLC法A 乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70)B 乙腈060min，A 10020%B 080%供试品，对照液，灵敏度试验液，水杨酸二二.对氨基水杨酸钠中的杂质检查对氨基水杨酸钠中的杂质检查 1.1.杂质来源杂质来源:未反
16、应完全的原料间氨基酚未反应完全的原料间氨基酚 遇热受潮生成间氨基酚遇热受潮生成间氨基酚,再再 被氧化成二苯醌型化合物被氧化成二苯醌型化合物N H2O HC O O N aH2O-CO2O醌类醌类NH2OH间氨基酚间氨基酚3.原理原理:方法方法1：对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠乙醚不溶乙醚不溶间氨基酚间氨基酚乙醚溶解乙醚溶解分离分离判断：判断：VHCl 0.3ml2.方法方法 双相滴定法双相滴定法:Ch.P2005 HPLC法：法：USP（29）乙醚提取乙醚提取H2O两相两相HCl(0.02mol/L)滴定滴定充分振摇充分振摇甲基橙甲基橙1D乙醚相乙醚相水相水相滴定前滴定前NH2OH甲基橙（甲基橙
17、（pH3.04.4）红红 黄黄 滴定中滴定中NH2OH+HClNH2.HClOH滴定终点滴定终点微过量微过量HCl酸性：黄酸性：黄 红红ChP2015采用采用HPLC法测定有关物质法测定有关物质n特杂：间氨基酚特杂：间氨基酚 外标法外标法 0.25%n单杂：对照主峰面积的单杂：对照主峰面积的0.1%n总杂：对照主峰面积的总杂：对照主峰面积的1.0%n流动相：甲醇流动相：甲醇-10%四丁基氢氧化铵溶四丁基氢氧化铵溶液液-0.05mol/L磷酸氢二钠磷酸氢二钠-0.05mol/L磷酸二氢钠磷酸二氢钠(200:19:400:400)nC18柱，检测波长：柱，检测波长：265nm三三.贝诺酯中的特殊杂
18、质检查贝诺酯中的特殊杂质检查n1.对氨基酚对氨基酚n与碱性亚硝酸铁氰化钠反应呈蓝绿色，与碱性亚硝酸铁氰化钠反应呈蓝绿色，贝诺酯无此反应，控制对氨基酚的量贝诺酯无此反应，控制对氨基酚的量（不得显蓝绿色）（不得显蓝绿色）n2.游离水杨酸游离水杨酸n3.有关物质有关物质nHPLC法（与含量测定相同条件）法（与含量测定相同条件）v检查方法：以原料为例检查方法：以原料为例用对照法，用二个钠氏比色管用对照法，用二个钠氏比色管 30显色显色样品液：样品液：0.1g乙醇乙醇1ml50ml稀硫酸铁铵稀硫酸铁铵1ml水至水至水至水至对照液：对照液：SA对照品对照品0.1g冰醋酸冰醋酸1ml1000ml精取精取1m
19、l同上同上？四四.甲芬那酸中特殊杂质的检查甲芬那酸中特殊杂质的检查1.1.铜盐铜盐:铜作为合成的催化剂铜作为合成的催化剂原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法 Cu1.572ppmCu1.572ppm（Ch.P 2010Ch.P 2010）2.2,3-2.2,3-二甲基苯胺二甲基苯胺 GCGC法测定法测定2.2.有关物质有关物质HPLCHPLC法法 （Ch.P 2010Ch.P 2010）不加校正因子的主成分自身对照法：单杂，总杂。不加校正因子的主成分自身对照法：单杂，总杂。五五.氯贝丁酯氯贝丁酯1.对氯酚对氯酚起始原料起始原料分解产物分解产物GCGC法：限度法：限度 0.0025%0.0025
20、%Ch.P2010Ch.P2010GCGC法：限度法：限度 0.003%0.003%USP(29)USP(29)2.2.挥发性杂质挥发性杂质GCGC法：各杂质峰面积总和法：各杂质峰面积总和总峰面积的总峰面积的0.5%0.5%第四节第四节 含量测定含量测定一、酸碱滴定法一、酸碱滴定法(一一)直接滴定法：以直接滴定法：以ASAASA为例为例1.1.原理原理+COOHOCOCH3NaOHOCOCH3COONa+H2O2、方法、方法本品适量中性乙醇酚酞溶解NaOHNaOH滴定液（滴定液（0.10.1mol/L)mol/L)滴定滴定？空白试验？空白试验？1)1)中性乙醇：中性乙醇：增加增加ASAASA的
21、溶解性。的溶解性。防止防止ASAASA水解。水解。消除乙醇中酸的影响。消除乙醇中酸的影响。3、讨论、讨论3)3)已 事 先 将 溶 剂 的 酸 性 物 质 中 和，已 事 先 将 溶 剂 的 酸 性 物 质 中 和，Ch.P2010Ch.P2010不要求做空白试验。不要求做空白试验。4)供试品含水杨酸超过规定限度时，不供试品含水杨酸超过规定限度时，不宜用直接滴定法。易受降解产物水杨宜用直接滴定法。易受降解产物水杨酸及醋酸的干扰。酸及醋酸的干扰。5)应用：苯甲酸、丙磺舒、二氟尼柳、应用：苯甲酸、丙磺舒、二氟尼柳、甲酚那酸、双水杨酯、布洛芬。甲酚那酸、双水杨酯、布洛芬。2)酚酞酚酞 pH 8.3
22、10.0 (无无 红红)n(二二)水解后剩余滴定法（水解后剩余滴定法（USP32)USP32)1.1.原理原理:以以ASAASA为例为例+2NaOHOHCOONa+NaACOCOCH3COOH2NaOH+H2SO4Na2SO4+2H2Omol比？比？2.方法方法样品定量过量NaOH(0.5mol/L)10酚酞H2SO4(0.25mol/L)滴定空白试验空白试验?含量含量%?3.讨论讨论1)1)需做空白试验校正需做空白试验校正NaOH吸收CO2Na2CO3用用H H2 2SOSO4 4回滴消耗的酸量减少回滴消耗的酸量减少,影响试验结果。影响试验结果。2)含量含量CO2H2SO4（V0）空白：CO
23、2水解H2SO4（VS）样品：含量含量%=（V0 VS）FT W100%Mol比：比：ASA NaOH H2SO4=1 2 1BTBTNaOHSOH5.02125.01142(三三)、两步滴定法、两步滴定法以以ASAASA片为例，采用先中和后水解回滴两步滴定法。片为例，采用先中和后水解回滴两步滴定法。片剂片剂辅料稳定剂：酒石酸或枸橼酸辅料稳定剂：酒石酸或枸橼酸生产中水解产物：水杨酸、醋酸生产中水解产物：水杨酸、醋酸1.第一步：中和第一步：中和1)1)原理：原理：中和分解产物中和分解产物OCOCH3COOHOHCOOHCOONaOHNaOH+H2OCH3COOHCH3COONaNaOH+H2O中
24、和稳定剂中和稳定剂OHCHCHCOOHOHCOOHOHCHCHCOONaOHCOONa2NaOH+2H2O酒石酸酒石酸自身成盐自身成盐OCOCH3COOHOCOCH3COONa+NaOH+H2O2)操作：操作：取取10片片称重称重()研细研细 片粉片粉w(相当于相当于ASA 0.3g)中性乙醇中性乙醇酚酞酚酞NaOH(0.1mol/L)滴定滴定粉红色粉红色 30不褪色不褪色W2.第二步：水解与第二步：水解与H2SO4回滴回滴1)原理：原理：+NaOHOHCOONa+NaACOCOCH3COONa2NaOH+H2SO4Na2SO4+2H2Omol比？比？2)操作操作中和液中和液NaOH（0.1m
25、ol/L)定量过量定量过量回流回流 H2SO4(0.05mol/L)酚酞酚酞 红红无无空白试验空白试验?mol比：比：ASA：ASA（Na）：）：H2SO4：NaOH=1：1：0.5：1T=？M=180.02%100%0标示量）（标示量WwFTVV已知已知:1010片重片重5.48645.4864g g空白消耗硫酸空白消耗硫酸:32.50:32.50ml ml 样品消耗硫酸样品消耗硫酸:16.98:16.98mlml阿司匹林片阿司匹林片:0.3:0.3g gW=0.5346 g W=0.5346 g 约相当于约相当于ASA 0.3gASA 0.3g氯贝丁酯采用水解后剩余滴定法氯贝丁酯采用水解后
26、剩余滴定法n自编题内容（四）、（四）、双相滴定法双相滴定法以苯甲酸钠为例以苯甲酸钠为例 Ch.P 2005Ch.P 20051.原理：利用溶解度的差异原理：利用溶解度的差异苯甲酸钠苯甲酸钠水水 有有苯甲酸苯甲酸水水 有有HCl 滴定滴定水相水相乙醚相乙醚相滴定中：滴定中：C O O N a+HClC O O H终点：微过量终点：微过量HCl 黄黄橙红橙红C O O Na滴定前：滴定前：甲基橙（pH3.04.4）红 黄Ch.P 2015 采用非水溶液滴定法采用非水溶液滴定法n利用苯甲酸钠的弱碱性利用苯甲酸钠的弱碱性n溶剂：冰醋酸溶剂：冰醋酸n指示剂指示剂:结晶紫结晶紫n滴定液：高氯酸滴定液：高氯
27、酸二、二、UV法法1、直接、直接UV法法 二氟尼柳胶囊二氟尼柳胶囊UV对照品法对照品法丙磺舒片丙磺舒片UV百分吸收系数法百分吸收系数法自编题目自编题目2.离子交换离子交换UV法法nUSP(32)USP(32)：氯贝丁酯、杂质对氯酚均有：氯贝丁酯、杂质对氯酚均有UVUV吸收，用强碱性阴离子交换树脂吸附吸收，用强碱性阴离子交换树脂吸附酸性杂质后，测定含量。酸性杂质后，测定含量。3.柱分离色谱柱分离色谱UV法法nUSPUSP（3232）n阿司匹林胶囊剂，预处理，柱分离，再阿司匹林胶囊剂，预处理，柱分离，再测测UVUV。n1.1.色谱柱的制备：色谱柱的制备：n硅藻土硅藻土+新制碳酸钠新制碳酸钠n2.2
28、.供试品溶液制备供试品溶液制备n用三氯甲烷冲洗，冰醋酸用三氯甲烷冲洗，冰醋酸-三氯甲烷冲洗三氯甲烷冲洗收集收集三三.HPLC法法n离子抑制色谱法离子抑制色谱法n阿司匹林栓剂为例：阿司匹林栓剂为例：n色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验n样品前处理：除掉基质的影响，先加热，样品前处理：除掉基质的影响，先加热，后冷却，除掉基质。后冷却，除掉基质。方法方法2：离子对：离子对-HPLC：对氨基水杨酸钠：对氨基水杨酸钠离子对选择的原则：离子对选择的原则：1)1)具有具有-COOHCOOH、-SO-SO3 3H H等酸性基团，选用阳离子等酸性基团，选用阳离子表面活性剂作为离子对试剂；表面活性剂
29、作为离子对试剂；如如:氢氧化四丁基铵等氢氧化四丁基铵等2)2)具有具有-NHNH2 2、-NH-NH-等碱性基团，选用阴离子表等碱性基团，选用阴离子表面活性剂作为离子对试剂；面活性剂作为离子对试剂；如如:十二烷基磺酸钠等十二烷基磺酸钠等3)3)同时含有碱性、酸性基团根据实验要求选择。同时含有碱性、酸性基团根据实验要求选择。作作 业业一一 编写计算标示百分含量的题目编写计算标示百分含量的题目1.用剩余酸碱滴定法测定片剂的含量用剩余酸碱滴定法测定片剂的含量2.用用UV-吸收系数法测定片剂的含量吸收系数法测定片剂的含量二二 设计题设计题1.任选一本类药物，设计其鉴别、特任选一本类药物，设计其鉴别、特殊杂质检查及含量测定方法殊杂质检查及含量测定方法
