1、第十三章第十三章 药品微生物药品微生物一、药品生境特征一、药品生境特征二、药品微生物污染的来源、种类及其卫生学意义二、药品微生物污染的来源、种类及其卫生学意义三、药品微生物的检测与卫生标准三、药品微生物的检测与卫生标准四、药品微生物污染及其预防四、药品微生物污染及其预防五、药品微生物研究的前景五、药品微生物研究的前景六、空气洁净度标准六、空气洁净度标准药品生境特征药品成分药品成分n营养丰富：葡萄糖注射液、糖浆、人参、血浆等。营养丰富：葡萄糖注射液、糖浆、人参、血浆等。n微生物代谢产物为原料，极易污染：氨基酸、酶类制剂。微生物代谢产物为原料，极易污染：氨基酸、酶类制剂。n金属离子促进微生物生长：
2、金属离子促进微生物生长：K+、Na+、Ca2+、Mg2+。pH值和渗透压：适合微生物生长。值和渗透压：适合微生物生长。含水量含水量抑菌、杀菌作用抑菌、杀菌作用药品微生物污染的途径原辅料原辅料（人或动物来源的原料、植物药材、（人或动物来源的原料、植物药材、微生物代谢产物）微生物代谢产物）生产环境：空气生产环境：空气水：药品配置、容器洗涤水：药品配置、容器洗涤操作人员：最大污染源操作人员：最大污染源设备容器及包装材料设备容器及包装材料规定灭菌药物规定灭菌药物非规定灭菌药物非规定灭菌药物药品微生物污染的种类q包括注射剂、输液剂及用于无菌体腔、烧包括注射剂、输液剂及用于无菌体腔、烧伤、眼科外伤用药等制
3、剂。伤、眼科外伤用药等制剂。1.规定灭菌药物规定灭菌药物q应达到无菌要求。应达到无菌要求。q生产过程除菌不彻底、包装不严、瓶塞松生产过程除菌不彻底、包装不严、瓶塞松动、安瓿漏气造成微生物污染。动、安瓿漏气造成微生物污染。药品微生物污染的种类q污染菌以污染菌以G 多见，如大肠杆菌、产气杆菌。多见，如大肠杆菌、产气杆菌。1.规定灭菌药物规定灭菌药物q在输液或注射液中出现浑浊、沉淀、云雾在输液或注射液中出现浑浊、沉淀、云雾状改变或产气现象，要坚决放弃使用。状改变或产气现象，要坚决放弃使用。药品微生物污染的种类a、对着墙看、对着墙看。b、对着亮看。、对着亮看。c、衬衣袖看。、衬衣袖看。目前检查药液目前
4、检查药液澄明度的方法是：澄明度的方法是：国家药典中检查药液澄明度的要求是：国家药典中检查药液澄明度的要求是：在不直接照射人眼的荧光灯下，照度在不直接照射人眼的荧光灯下，照度1000lx。塑料包装照度塑料包装照度2000lx。有色药液照度有色药液照度3000lx。灯光灯光不不照射药瓶，用亚光照射药瓶，用亚光白色白色衬板观察衬板观察有色有色杂质，杂质，灯光灯光要要照亮药瓶，用亚光照亮药瓶，用亚光黑色黑色衬板观察衬板观察浅色浅色杂质。杂质。中国药典 可见异物检测法 化学工业出版社 北京2005q滴眼剂的滴眼剂的pH及其渗透压近似于泪液，微生及其渗透压近似于泪液，微生物在其中容易发育，因而在保持和使用
5、过程物在其中容易发育，因而在保持和使用过程常存在被污染的危险。主要是绿脓杆菌污染。常存在被污染的危险。主要是绿脓杆菌污染。1、规定灭菌药物、规定灭菌药物药品微生物污染的种类q包括各种口服药剂、外用制剂和消毒剂与包括各种口服药剂、外用制剂和消毒剂与抗生素制剂，对这类药物没有无菌要求，抗生素制剂，对这类药物没有无菌要求，但对污染菌的数量和种类有相应卫生标准。但对污染菌的数量和种类有相应卫生标准。2、非规定灭菌药物、非规定灭菌药物药品微生物污染的种类q口服药剂：口服药剂：有固形剂和液形剂。固形剂包有固形剂和液形剂。固形剂包括粉、片、颗粒、丸、胶囊等制剂，由于括粉、片、颗粒、丸、胶囊等制剂，由于含水量
6、较低，较少受到微生物污染，尤其含水量较低，较少受到微生物污染，尤其是合成药物在制造过程中经加热、酸、碱是合成药物在制造过程中经加热、酸、碱处理，含有的活菌数极低，每克在处理，含有的活菌数极低，每克在10个以个以下，多的也不超过下，多的也不超过1000个。个。2.非规定灭菌药物非规定灭菌药物药品微生物污染的种类q液形剂包括各种乳剂、糖浆、饮剂等，较易液形剂包括各种乳剂、糖浆、饮剂等，较易受到微生物的污染，尤其是真菌的污染，常受到微生物的污染，尤其是真菌的污染，常可以检出酵母菌、青霉菌、黑曲霉菌等。可以检出酵母菌、青霉菌、黑曲霉菌等。2.非规定灭菌药物非规定灭菌药物药品微生物污染的种类q外用药剂：
7、外用药剂：包括外用的粉剂、液剂、软膏剂包括外用的粉剂、液剂、软膏剂等，多用于皮肤与黏膜，如耳鼻喉科用药、等，多用于皮肤与黏膜，如耳鼻喉科用药、新生儿脐部、妇产科用药。经常应用于人体新生儿脐部、妇产科用药。经常应用于人体高危险区，对微生物的污染应特别注意。高危险区，对微生物的污染应特别注意。2.非规定灭菌药物非规定灭菌药物药品微生物污染的种类q消毒剂、抗生素制剂：消毒剂、抗生素制剂：有较强的抑菌、杀菌有较强的抑菌、杀菌作用。但也有因所用的洗涤剂被污染而引起作用。但也有因所用的洗涤剂被污染而引起感染；六氯酚、洗必泰、酚等一般消毒剂也感染；六氯酚、洗必泰、酚等一般消毒剂也有被有被G-杆菌污染的报道。
8、可能与使用方法杆菌污染的报道。可能与使用方法有关系。有关系。2.非规定灭菌药物非规定灭菌药物药品微生物污染的种类药品微生物的卫生学意义（一）微生物引起药物变质1、物理性状和外观的变化2、产生有害代谢产物3、失去药用价值（二）对人体的危害：药源性感染、中毒或超敏反应药品微生物检测的内容无菌检查：检查药典要求无菌的药品、医疗器具、原辅料及其他物品是否无菌的一种方法一般规定灭菌样品检查特殊规定灭菌样品检查硫乙醇酸盐液体培养基（需氧菌、厌氧菌检查）改良马丁培养基（霉菌检查）结果判定：阳性对照管有菌 阴性对照管无菌 所有供试品管均应澄清或者浑浊但证明并非微生物生长所致药品微生物检测的内容微生物限度检查：
9、非规定灭菌剂及其原料、敷料受到微生物限度检查：非规定灭菌剂及其原料、敷料受到 微生物污染程度的一种检查法微生物污染程度的一种检查法方法：细菌总数、霉菌及酵母菌数、控制菌方法：细菌总数、霉菌及酵母菌数、控制菌控制菌的检查：非规定灭菌药品中不得检出的菌类控制菌的检查：非规定灭菌药品中不得检出的菌类我国药典选定的药品控制菌（大肠埃希菌、大肠菌群、我国药典选定的药品控制菌（大肠埃希菌、大肠菌群、沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和梭菌属）沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和梭菌属）药品微生物检测的内容结果判定：结果判定：细菌数、霉菌和酵母菌数及控制菌三项检测结果符合细菌数、霉菌和酵母菌数及控制菌三
10、项检测结果符合该品种规该品种规定定供试品符合规定；其中任何一项不符合供试品符合规定；其中任何一项不符合不符不符合；合；控制菌或其他致病菌的检测，按一次检出结果为准，控制菌或其他致病菌的检测，按一次检出结果为准，不得复试；不得复试；细菌数、霉菌和酵母菌数，其中任何一项不符合该品细菌数、霉菌和酵母菌数，其中任何一项不符合该品种的规定种的规定时，从同一样品中随机抽样，独立复试两次，以时，从同一样品中随机抽样，独立复试两次，以3次结果次结果平均值报告平均值报告菌数。菌数。细菌内毒素和热原质检查细菌内毒素和热原质检查q评价药品的一般污染时采用评价药品的一般污染时采用活菌数活菌数（细菌总数）（每（细菌总数
11、）（每克或每毫升药品、化妆品中活菌数量而不考虑其种类）克或每毫升药品、化妆品中活菌数量而不考虑其种类）表示。表示。q一方面可以判明药品、化妆品被细菌污染的程度，以一方面可以判明药品、化妆品被细菌污染的程度，以及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作及生产单位所用的原料、工具设备、工艺流程、操作者的卫生状况。者的卫生状况。q另一方面可以推测致病微生物存在的可能性。基本上另一方面可以推测致病微生物存在的可能性。基本上呈现正相关。呈现正相关。药品微生物细菌菌落总数、霉菌及酵母菌数和控制菌的检查药品微生物限度标准（一）制定标准的原则（一）制定标准的原则q使用要求：使用要求：各种药品的使用方法、部
12、位和使用各种药品的使用方法、部位和使用对象均不相同，有注射和口服的药物，有成人对象均不相同，有注射和口服的药物，有成人用和小孩用等等区别，对染菌限制也相应不同。用和小孩用等等区别，对染菌限制也相应不同。q剂型类别：剂型类别：液体剂型，中成药制剂和化学制剂，液体剂型，中成药制剂和化学制剂，染菌机会和程度均有不同。染菌机会和程度均有不同。q原料性质：原料性质：化学原料、植物原料和动物原料等，化学原料、植物原料和动物原料等，加营养成分和含杀菌剂的化妆品，染菌差别大。加营养成分和含杀菌剂的化妆品，染菌差别大。q生产条件：生产条件：设备条件、工人素质、技术水平，设备条件、工人素质、技术水平，产品质量不一
13、。产品质量不一。药品微生物限度标准（一）制定标准的原则（一）制定标准的原则（二）国际药品标准（二）国际药品标准药品微生物限度标准制制 剂剂活菌数及控制菌标准活菌数及控制菌标准注射用制剂，眼科用制剂，用注射用制剂，眼科用制剂，用于正常无菌体腔、严重烧伤和于正常无菌体腔、严重烧伤和溃疡面的制剂溃疡面的制剂1g(ml)制剂中不得含有活菌制剂中不得含有活菌用于局部和受伤皮肤的制剂，用于局部和受伤皮肤的制剂，供耳、鼻、喉等用的制剂供耳、鼻、喉等用的制剂1g(ml)制剂中活菌数不超过制剂中活菌数不超过100，不得含有肠杆菌科细菌、绿脓杆菌、不得含有肠杆菌科细菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌其他制
14、剂其他制剂1g(ml)制剂中活菌数不超过制剂中活菌数不超过1000，不得含有肠杆菌科细菌、绿脓杆菌、不得含有肠杆菌科细菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌，金黄色葡萄球菌，1g(ml)制剂中活制剂中活的真菌（霉菌、酵母）数不超过的真菌（霉菌、酵母）数不超过100WHO对药品的染菌限度标准对药品的染菌限度标准（三）我国药品标准（三）我国药品标准药品微生物限度标准v1972年，开始药品微生物检查工作v1978年，卫生部、化工部、商业部联合颁布药品卫生标准v1980年，药品微生物检验方法v1983年，第三次全国药品微生物检验方法及标准研讨会v1986年，卫生部颁布修改的药品卫生标准v1989年，卫生部下达药
15、品卫生标准补充规定和说明v1990年、1995年中国药典v中国药典2000年版检验原则q维持样品的污染原状维持样品的污染原状q去除残留防腐剂或抑菌剂去除残留防腐剂或抑菌剂q样品应有代表性样品应有代表性q符合规定检验条件符合规定检验条件q维持样品的污染原状维持样品的污染原状v为真实反映产品在出厂时本身所受的污染程度，在为真实反映产品在出厂时本身所受的污染程度，在检验之前必须去除影响染菌量发生变化的各种因素。检验之前必须去除影响染菌量发生变化的各种因素。v样品必须保持原有的封闭状态，不得任意启开，样品必须保持原有的封闭状态，不得任意启开，如发现有包装破裂、霉变、变色、异味等不再进行如发现有包装破裂
16、、霉变、变色、异味等不再进行检验。样品应保存在阴凉干燥处。检验。样品应保存在阴凉干燥处。检验原则q维持样品的污染原状维持样品的污染原状q去除残留防腐剂或抑菌剂去除残留防腐剂或抑菌剂v某些药品中加入防腐剂或抑菌成份，各种待检菌处某些药品中加入防腐剂或抑菌成份，各种待检菌处于受抑制状态而不易检出，必须创造条件使其复苏，于受抑制状态而不易检出，必须创造条件使其复苏，利于检出。利于检出。v药品检验中多采用稀释法、沉降法、离心沉淀法、药品检验中多采用稀释法、沉降法、离心沉淀法、活性剂法、离子交换树脂法等。活性剂法、离子交换树脂法等。检验原则q维持样品的污染原状维持样品的污染原状q去除残留防腐剂或抑菌剂去
17、除残留防腐剂或抑菌剂q样品应有代表性样品应有代表性v每批样品应从两个以上大包装单位中中随机抽取每批样品应从两个以上大包装单位中中随机抽取4瓶（盒）包装单位，检验时应从两瓶（盒）以上的样瓶（盒）包装单位，检验时应从两瓶（盒）以上的样品中共取品中共取10g(ml)。检验原则q维持样品的污染原状维持样品的污染原状q去除残留防腐剂或抑菌剂去除残留防腐剂或抑菌剂q样品应有代表性样品应有代表性q符合规定检验条件符合规定检验条件v药品可以受多种微生物污染，可以同时有细菌、霉药品可以受多种微生物污染，可以同时有细菌、霉菌、酵母菌等，检验条件有差异。菌、酵母菌等，检验条件有差异。检验原则空气洁净度标准vGMP(
18、good manufacturing practices for drugs)(good practice in the manufacturing and quality control of drugs)v药品生产质量管理规范或最佳生产工艺规范v药品生产和质量管理的基本准则v药品不仅要符合质量标准，而且生产全过程必须符合GMP，只有同时符合这两个条件的药品，才可做为合格的药品。空气洁净度标准v生产环境v仪器设备v原辅料v人员洁净厂房是药品生产的基本要求，洁净厂房的微生物量和微粒数是GMP的重要监控对象。以 0.5 m微粒来定量。：q国内外有代表性的通用空气洁净度级别有下面国内外有代表性的通
19、用空气洁净度级别有下面三种制度三种制度:v英制英制(粒粒ft3)：美国。：美国。v公制公制(粒粒L):以原苏联、澳大利亚为代表。以原苏联、澳大利亚为代表。v公制公制(粒粒L)：世界卫生组织、欧共体、德、：世界卫生组织、欧共体、德、日、英、中国。日、英、中国。空气洁净度标准v美国联邦标准美国联邦标准209：这是：这是1963年底颁发了洁净室第一个军用年底颁发了洁净室第一个军用部分的联邦标准部分的联邦标准209。1966年颁布修订后的年颁布修订后的209A，1973年年又颁布修订的又颁布修订的209B，并于，并于1976年再次颁发了年再次颁发了209B修正案修正案N01，增加了，增加了“1000”级。级。1987年颁发了年颁发了209C，1988年以年以209D代替，代替，209D又于又于1992年年3月月11日被日被209E取代。联邦取代。联邦标准标准209是国际上最通行最著名的洁净室标推，许多国家的是国际上最通行最著名的洁净室标推，许多国家的洁净度分级基本参照美国标难。洁净度分级基本参照美国标难。空气洁净度标准209E的空气洁净度级别的空气洁净度级别洁净厂房设计规范（GB 50073-2001）采用国际标准ISO 14644-1
