1、实验三实验三 果蝇的性状观察果蝇的性状观察 与饲养管理与饲养管理 生科院生科院:刘福霞刘福霞一、实验目的一、实验目的二、实验原理二、实验原理三、实验材料三、实验材料四、实验器具及药品和试剂四、实验器具及药品和试剂五、实验步骤五、实验步骤 了解果蝇的生活习性，掌握果蝇饲养管了解果蝇的生活习性，掌握果蝇饲养管理的方法，鉴定果蝇的雌雄性别和突变性理的方法，鉴定果蝇的雌雄性别和突变性状。状。普通果蝇（普通果蝇（Drosophila melanogasterDrosophila melanogaster）为双翅目昆虫，）为双翅目昆虫，具完全变态。用果蝇做实验材料有许多优点：具完全变态。用果蝇做实验材料有
2、许多优点：1.1.生长迅速，每生长迅速，每1212天左右天左右即可完成一个世代；即可完成一个世代；2.2.繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵500500个左右个左右，因，因此在短时间内即可获得大量的子代，便于遗传分析；此在短时间内即可获得大量的子代，便于遗传分析；3.3.饲养容易饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；4.4.加之突变性状多达加之突变性状多达400400以上以上，且易观多数是形态变异，容，且易观多数是形态变异，容察。察。野生型果蝇野生型果蝇(红眼、长翅、直刚毛红眼、长翅、直刚毛)及几及几种常见的突变型：如突变
3、型（白眼、小翅、种常见的突变型：如突变型（白眼、小翅、卷刚毛）和突变型（黑檀体）果蝇。卷刚毛）和突变型（黑檀体）果蝇。生化培养箱、双筒解剖镜（或放大镜）、生化培养箱、双筒解剖镜（或放大镜）、镊子、锅、电磁炉、高压灭菌器、电热恒温镊子、锅、电磁炉、高压灭菌器、电热恒温干燥箱、培养瓶、棉花塞、烧杯、玻棒、棉干燥箱、培养瓶、棉花塞、烧杯、玻棒、棉签、滤纸。签、滤纸。乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖（或红糖）。粉、白糖（或红糖）。（一）生活史的观察一）生活史的观察 果蝇的生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫果蝇的生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个连续的发育阶段（图
4、四个连续的发育阶段（图1 1）。）。卵：卵：卵白色，长椭圆形，长约卵白色，长椭圆形，长约0.5mm0.5mm，在背面，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在柔软的的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在柔软的食物上，不至于深陷到食物中去。食物上，不至于深陷到食物中去。幼虫：幼虫：幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第三龄期，体长可达三龄期，体长可达4 45mm5mm。在解剖镜下观察可见。在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；稍后有一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；稍后有一对半透明的唾腺，每条唾腺前有一条唾腺管向一对半透明的唾腺，每条唾腺前有一
5、条唾腺管向前延伸，然后会合成一条导管通向消化道。神经前延伸，然后会合成一条导管通向消化道。神经节位于消化道前端的上方。节位于消化道前端的上方。果蝇幼虫果蝇幼虫 蛹：蛹：幼虫生活七天左右即化蛹，化蛹前从幼虫生活七天左右即化蛹，化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上，渐次形成一个培养基中爬出附在瓶壁上，渐次形成一个棱形的蛹。起初颜色淡黄、柔软，以后逐棱形的蛹。起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，这就显示即将羽化渐硬化，变为深褐色，这就显示即将羽化了。了。果蝇三龄幼虫和蛹：成虫：成虫：刚羽化出的果蝇，身体狭长，翅还没有展开，刚羽化出的果蝇，身体狭长，翅还没有展开，身体较白嫩，此时野生型体色与黑檀体
6、体色都是身体较白嫩，此时野生型体色与黑檀体体色都是一样的，没有多大区别。不久，蝇体变为粗短椭一样的，没有多大区别。不久，蝇体变为粗短椭圆形，双翅展开，体色加深，如野生型果蝇的体圆形，双翅展开，体色加深，如野生型果蝇的体色成为灰褐色，突变型黑檀体果蝇的体色成为乌色成为灰褐色，突变型黑檀体果蝇的体色成为乌黑色。黑色。果蝇成虫：图图1 果蝇生活史果蝇生活史1卵卵 2一龄幼虫一龄幼虫 3二龄幼虫二龄幼虫 4三龄幼虫三龄幼虫 5蛹蛹6成虫成虫(雄雄)7成虫成虫(雌雌)果蝇生活周期的长短与温度关系果蝇生活周期的长短与温度关系密切，密切，3030以上时果蝇则将不育且以上时果蝇则将不育且濒临死亡，低温则使它的
7、生活周期濒临死亡，低温则使它的生活周期延长，同时生活力也降低。培养果延长，同时生活力也降低。培养果蝇的最适温度是蝇的最适温度是20202525。从表中可以看出，从表中可以看出，2525时，从卵到成虫约时，从卵到成虫约1010天，天，2020时约为时约为1515天。盛夏时，果蝇应该放在生化天。盛夏时，果蝇应该放在生化培养箱内饲养或放在有空调的房间内饲养。培养箱内饲养或放在有空调的房间内饲养。10 15 20 25 卵幼虫幼虫成虫 57天 18天 8天 5天6.3天 4.2天（二）果蝇雌雄性别的鉴别（二）果蝇雌雄性别的鉴别 果蝇有雌雄之分，幼虫期较难区别，成虫期则较易区别（图2）雌雄果蝇的比较雌雄
8、果蝇的比较1体型：体型：雌果蝇雌果蝇体型较大，雄果蝇较小；体型较大，雄果蝇较小；2腹部末端：雄性腹部腹部末端：雄性腹部椭圆椭圆，雌性末端，雌性末端尖尖；3腹部背面：雌性有明显腹部背面：雌性有明显5条黑色条纹，雄性有条黑色条纹，雄性有7条，延至条，延至 腹面，肉眼看其腹部末端呈现一腹面，肉眼看其腹部末端呈现一明显黑点明显黑点。4腹部腹面：雌性有较明显的腹部腹面：雌性有较明显的7个腹片，雄性有个腹片，雄性有5个腹片。个腹片。5 5性梳：雄性第一对足的跗节基部外侧有黑性梳：雄性第一对足的跗节基部外侧有黑色鬃毛状性梳（图色鬃毛状性梳（图3 3），雌性则无。性梳的有无，），雌性则无。性梳的有无，是鉴别雌
9、雄性果蝇的明显标志之一。是鉴别雌雄性果蝇的明显标志之一。图图3 左：雄性果蝇的左前足左：雄性果蝇的左前足 中：跗节基部的性梳中：跗节基部的性梳 右：雌果蝇无性梳右：雌果蝇无性梳 C、基节、基节 TR、转节、转节 F、腿节、腿节 TI、胫节、胫节 TA、跗节、跗节 （三）几种常见的突变性状（三）几种常见的突变性状 实验中常用的果蝇突变性状多可用肉眼鉴别，有一些则实验中常用的果蝇突变性状多可用肉眼鉴别，有一些则可借助于解剖镜辨认，这些性状一般都是明显而稳定的。可借助于解剖镜辨认，这些性状一般都是明显而稳定的。突变名称 基因符号 性 状 特 征 在染色体上座位 白眼 残翅 黄体 黑檀体 焦毛 小翅
10、w vg y e Sn m 复眼白色 翅全退化，部分残留不能飞 全身呈浅橙黄色 身体呈乌木色，黑亮 刚毛卷曲如烧焦状 翅短仅长至腹端 X 1.5 R 67.0 X 0.0 R 70.7 X 21.0 X 36.1 （四）果蝇麻醉（四）果蝇麻醉 检查果蝇或进行果蝇杂交时，应先进行麻醉，使其保持安静状态。果蝇具有以下一些特性：一是具有趋光性，二是喜欢向上爬。掌握了这些特性，我们就能很方便地将果蝇转移到另外一个培养瓶中。麻醉时，先在棉签上滴上数滴乙醚，将培养瓶口朝下，果蝇即向上爬行。轻抽出棉塞，插进棉签，将棉塞塞住，平放在桌面上（不能将培养瓶竖立，以免果蝇落入培养基中不便取出）约半分钟，果蝇即被麻醉
11、。注意不能麻醉过度，如果果蝇的翅膀与身体呈45o角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡。麻醉后的果蝇放在滤纸上方便观察。检查后的果蝇可以放回原培养瓶中，也可以进行处死。（五）果蝇培养基五）果蝇培养基 果蝇在水果摊或果园里常可见到，但它并不是以水果为食，而是采食生长在水果上的酵母菌，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇的饲料。实验室常用的培养基配制方法是：取一锅盛300ml水，在电磁炉上将水加热烧开，取一个500ml的烧杯，称玉米粉40g、琼脂粉2g，倒入烧杯中加水100ml搅拌均匀。另称白糖30g加入锅中加热溶解，待糖全部溶解后即可倒入玉米糊并将之煮熟。为防止培养基长霉，可加2ml丙酸作为防腐剂。培养果蝇的饲料瓶，常用的有牛奶瓶、三角瓶、大中型指管，用纱布包裹的棉花球作瓶塞。瓶子和棉塞要高压灭菌消毒。每一瓶大约装2cm厚度的培养基。待冷却后，檫干瓶壁上的水珠即可使用。1.如何区分果蝇的雌雄个体？2.果蝇麻醉是的注意事项有哪些？
