1、实验十一、果蝇的单双因子、伴性遗传及三点实验十一、果蝇的单双因子、伴性遗传及三点试验（杂交）（试验（杂交）（6学时）（综合性、设计性实学时）（综合性、设计性实验）验）一、实验目的一、实验目的 1、通过对果蝇的杂交实验，正确理解分离定律的实质，并验证与加深理解三个遗传规律。2、认识伴性遗传的正、反交差别，掌握伴性遗传的特点。3、掌握绘制遗传学图的原理和方法，加深对重组值，遗传学图，双交换值，并发率和干涉等概念理解。4、掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。二、实验原理二、实验原理 果蝇的单因子遗传是指常染色体上一对等位基果蝇的单因子遗传是指常染色体上一对等位基因的传递规律。由
2、于显隐关系，在子一代只表现显因的传递规律。由于显隐关系，在子一代只表现显性性状，但基因型是杂合状态。在形成配子时，基性性状，但基因型是杂合状态。在形成配子时，基因保持相对独立，又按原样分配到不同的配子中去，因保持相对独立，又按原样分配到不同的配子中去，理论上的比例是理论上的比例是1：1。雌雄配子各。雌雄配子各1：1，结合的概，结合的概率又相等，子二代的基因型就有三种，比例是率又相等，子二代的基因型就有三种，比例是1：2：1，而表型就是，而表型就是3：1。分离规律和自由组合规律，不仅适合于植物，也可用于动物。1910年，摩尔根发现白眼果蝇突变体，观察到交叉遗传现象。因为白眼w在X染色体上，为性连
3、锁遗传。XWXW X+Y X+X+XWY XWY白 X+XW红 X+XW红 X+Y红 X+Y红 X+X+红 XWY白 X+XW红 即W基因由外公经由女儿传给了外孙，称为交叉遗传。1916年，Bridge 发现X染色体不分开实验，证明白眼基因在X染色体上。遗传基本规律：分离规律、自由组合规律、伴性遗传规律、连锁与互换规律。1.一对相对性状：长翅(雌)残翅(雄)；残翅(雌)长翅(雄)2.两对相对性状：灰残(雌)檀黑长(雄)；檀黑长(雌)灰残(雄)3.伴性遗传：红(雌)白(雄)；白(雌)红(雄)4.三点测交；三隐性(雌)野生型(雄)三、材料与试剂器材三、材料与试剂器材1、材料：黑腹果蝇（、材料：黑腹
4、果蝇（Drosophila melanogaster）野生）野生型及型及4种突变型（种突变型（白眼黑身，白眼小翅，红眼残翅，黑檀体）品系。品系。2、试剂：乙醚、乙醇、琼脂、绵白糖、酵母粉、丙酸、试剂：乙醚、乙醇、琼脂、绵白糖、酵母粉、丙酸、玉米粉玉米粉3、器材：恒温培养箱、高压灭菌器、烧杯、量筒、天平、器材：恒温培养箱、高压灭菌器、烧杯、量筒、天平、培养瓶、棉塞、滤纸、毛笔、镊子、牛皮纸、记号笔、培养瓶、棉塞、滤纸、毛笔、镊子、牛皮纸、记号笔、玻璃棒玻璃棒实验设计:1.以组为单位，根据所提供的果蝇品系，确定杂交组合（单因子、双因子、伴性遗传及三因子），选定所需亲本。2.实验设计：包括时间安排3
5、.繁殖所需亲本，收集处女蝇。4.杂交及统计实验数据。5.自交验证。6.完成实验报告。四、实验步骤四、实验步骤1 1、果蝇饲养、果蝇饲养2 2、选择处女蝇：、选择处女蝇：实验前2-3天陆续按组合收集8小时内羽化的果蝇，分离。3 3、果蝇杂交：、果蝇杂交：转移5-6对亲本,记录杂交日期和亲本组合名称，并注明班级学号。4 4、去亲本：、去亲本：杂交后7-8天5 5、F F1 1代性状观察及自交：代性状观察及自交：去亲本后4-5天进行，连续检查2-3天；移5-6对进行自交（无需处女蝇）。6 6、再去亲本：、再去亲本：自交后7-8天。7 7、记录结果：、记录结果：去亲本后4-5天进行，连续统计7-8天。
6、有幼虫、蛹 去亲本处女蝇的选取8-10小时内羽化的果蝇分离:pm10:00去成蝇:am6:00,pm2:00,pm10:00分别收集分离成蝇:am8:00收集分离成蝇；每瓶培养基放置5-6对亲本果蝇。长翅 残翅 vgvg vgvg去亲本78天基因型配子F1 基因型长翅 长翅+vg +vg 去亲本78天F1 代自交F2 代表型比例将实验结果的数据填写到表格将实验结果的数据填写到表格单因子杂交实验结果单因子杂交实验结果果蝇伴性遗传实验果蝇伴性遗传实验结果结果正交正交X+X+XwY观察结果观察结果统计日期统计日期红眼红眼（+）红眼红眼（+）将实验结果填入将实验结果填入表格中表格中果蝇伴性遗传实验果蝇
7、伴性遗传实验结果结果反交反交XwXwX+Y观察结观察结果果统计日统计日期期红眼红眼（+）白眼白眼（w）果蝇伴性遗传实验果蝇伴性遗传实验结果结果正交正交F2观察结果观察结果统计日期统计日期红眼红眼（+）白眼白眼（w）红眼红眼（+）白眼白眼（w）合计合计百分比百分比果蝇伴性遗传实验果蝇伴性遗传实验结果结果反交反交F2观察结果观察结果统计日期统计日期红眼红眼（+）白眼白眼（w）红眼红眼（+）白眼白眼（w）合计合计百分比百分比果蝇双因子遗传实验结果果蝇双因子遗传实验结果子代类型子代类型统计日期统计日期长灰长灰长黑檀长黑檀 残灰残灰残黑檀残黑檀合计合计将实验结果填如表格中F1（正、反交（正、反交合瓶统计
8、）果合瓶统计）果蝇数目蝇数目果蝇双因子遗传实验结果果蝇双因子遗传实验结果F2代结果统计代结果统计长灰长灰长黑檀长黑檀残灰残灰残黑檀残黑檀合计合计实验观察数（实验观察数（o）理论数（理论数（c）偏差偏差 （o-c）（o-c）2/c基因的连锁与交换实验基因的连锁与交换实验子代表型子代表型统计日期统计日期灰长灰长灰残灰残黑长黑长黑残黑残合计合计将杂交实验将杂交实验的的F2结果结果填入表中填入表中基因的连锁与交换实验基因的连锁与交换实验把表格填充完成把表格填充完成并进行处理数据并进行处理数据实验值实验值(o)理论值理论值(c)(o-c)(o-c)2(o-c)2/c灰长灰长灰残灰残黑长黑长黑残黑残合计合
9、计果蝇的三点测交实验和基因定位实验果蝇的三点测交实验和基因定位实验结果结果测交后代表型测交后代表型观察数观察数m-sn重组重组 sn-w重组重组m-w重组重组sn w m+w +sn +wsn +w msn w +m将观察的结果填入表格中将观察的结果填入表格中果蝇杂交注意事项果蝇杂交注意事项1、母本必须是处女蝇2、子一代羽化之前必须去掉亲本3、F1代必须转入新的培养基中进行自交4、亲本果蝇麻醉时，麻醉时间不宜过长5、麻醉果蝇时，必须倒入空瓶，严禁在 培养瓶中进行麻醉思考题思考题1、结合实验数据，简述单因子遗传规律。、结合实验数据，简述单因子遗传规律。2、说明此实验中选取处女蝇的重要性。、说明此
10、实验中选取处女蝇的重要性。3、本实验的注意事项是什么？把伴性遗传杂交实验结果、本实验的注意事项是什么？把伴性遗传杂交实验结果4、填写在实验结果统计表内。并结合自己的数据简述伴、填写在实验结果统计表内。并结合自己的数据简述伴性遗传规律。性遗传规律。5、简述双因子遗传规律及双因子杂交的步骤。、简述双因子遗传规律及双因子杂交的步骤。6、什么是连锁遗传。基因的连锁与交换的定律是什么？、什么是连锁遗传。基因的连锁与交换的定律是什么？计算基因间的重组值。计算基因间的重组值。7、对三因子实验，画遗传学图，把三个基因定位在染色、对三因子实验，画遗传学图，把三个基因定位在染色体上，计算并发率和干涉。体上，计算并发率和干涉。（并发率（并发率=观察到的双交换率观察到的双交换率/两个单交两个单交换频率的乘积换频率的乘积 干涉干涉=1-并发率）并发率）思考题1、计算基因间的重组值。、计算基因间的重组值。2、画遗传学图，把三个基因定位在染色体上。、画遗传学图，把三个基因定位在染色体上。3、计算并发率和干涉。、计算并发率和干涉。（并发率（并发率=观察到的双交换率观察到的双交换率/两两个单交换频率的乘积个单交换频率的乘积 干涉干涉=1-并发率）并发率）
