1、选修1生物技术实践第第3讲植物组织培养、讲植物组织培养、DNA技术及植物有效成分的提取技术及植物有效成分的提取基础夯实课堂归纳课时作业考点精研直击高考一、植物组织培养一、植物组织培养1培养基培养基(1)成分：大量元素、微量元素、有机成分、成分：大量元素、微量元素、有机成分、_和琼和琼脂。脂。(2)类型：类型：_、发芽培养基和生根培养基。、发芽培养基和生根培养基。(3)作 用：为 植 物 组 织 或 器 官 生 长 和 发 育 提 供作 用：为 植 物 组 织 或 器 官 生 长 和 发 育 提 供_。(4)制备：配制各种母液制备：配制各种母液配制培养基配制培养基_。【知识梳理【知识梳理】激素激
2、素MS培养基培养基营养条件营养条件灭菌灭菌 完整的植株完整的植株脱分化脱分化再分化再分化 3菊花的组织培养过程菊花的组织培养过程(1)影响植物组织培养的主要因素影响植物组织培养的主要因素选材：一般选择选材：一般选择_植株的茎上部新生的侧植株的茎上部新生的侧枝。枝。培养基：常用培养基：常用_，其主要成分有大量元，其主要成分有大量元素、微量元素、有机物，常需要添加素、微量元素、有机物，常需要添加_。未开花未开花MS培养基培养基植物激素植物激素(2)实验操作过程实验操作过程制备制备MS固体培养基：配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌固体培养基：配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌外植体消毒：外植体消毒：70%的
3、酒精消毒的酒精消毒无菌水清洗无菌水清洗0.1%的氯的氯化汞溶液消毒化汞溶液消毒无菌水清洗无菌水清洗接种：始终在接种：始终在_旁进行，对接种工具要用旁进行，对接种工具要用_灭菌，将菊花茎段插入培养基中时灭菌，将菊花茎段插入培养基中时注意不要倒插注意不要倒插培养与移栽：在培养与移栽：在1822 的的_中培养，得到试中培养，得到试管苗后进行移栽管苗后进行移栽酒精灯火焰酒精灯火焰火焰灼烧火焰灼烧无菌箱无菌箱 4月季的花药培养月季的花药培养(1)被子植物的花粉发育过程被子植物的花粉发育过程小孢子母细胞小孢子母细胞_双核期双核期花粉粒花粉粒(2)产生花粉植株的两条途径产生花粉植株的两条途径(3)影响花药培
4、养的因素影响花药培养的因素主要因素：主要因素：_和和_。月季花药培养一般选择月季花药培养一般选择_期。期。四分体时期四分体时期单核期单核期 材料的选择材料的选择培养基的组成培养基的组成 单核单核 二、植物有效成分的提取二、植物有效成分的提取1植物芳香油的提取植物芳香油的提取(1)植物芳香油的主要化学成分：萜类化合物及其衍生植物芳香油的主要化学成分：萜类化合物及其衍生物，具有很强的物，具有很强的_性。提取方法有蒸馏、性。提取方法有蒸馏、_和萃取和萃取等。等。(2)提取玫瑰精油实验提取玫瑰精油实验原理：原理：_法。法。实验流程：实验流程：挥发挥发压榨压榨 水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏 水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏
5、无水无水Na2SO4 (3)提取橘皮精油的实验提取橘皮精油的实验原理：一般用原理：一般用_法。法。实验流程：石灰水浸泡实验流程：石灰水浸泡漂洗漂洗_过滤过滤静置静置再次再次_橘皮油。橘皮油。压榨压榨压榨压榨过滤过滤 水水萃取萃取干燥干燥纸层析纸层析三、三、DNA和蛋白质技术和蛋白质技术1DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定(1)提取原理提取原理DNA与杂质的溶解度不同，与杂质的溶解度不同，DNA与杂质对酶、高温、洗与杂质对酶、高温、洗涤剂的涤剂的_不同。不同。(2)实验设计实验设计材料的选取：选用材料的选取：选用DNA含量相对含量相对_的生物组织，的生物组织，如鸡血、菜花、洋葱等。如鸡血、菜花、
6、洋葱等。破碎细胞破碎细胞(以鸡血为例以鸡血为例)：鸡血细胞，加：鸡血细胞，加_，用，用_搅拌，用搅拌，用_过滤，收集滤液。过滤，收集滤液。耐受性耐受性较高较高蒸馏水蒸馏水玻璃棒玻璃棒纱布纱布 去除杂质：利用去除杂质：利用DNA在不同浓度的在不同浓度的_中中溶解度不同，通过控制溶解度不同，通过控制_的浓度去除杂质。的浓度去除杂质。DNA析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的等的、冷却的_(体积分数为体积分数为95%)。(3)DNA的鉴定的鉴定将将DNA溶解在溶解在2 mol/L的的NaCl溶液中，加入溶液中，加入 4 mL的的_，沸水中加
7、热，沸水中加热5 min，溶液变成蓝色。，溶液变成蓝色。NaCl溶液溶液NaCl溶液溶液 酒精溶液酒精溶液二苯胺试剂二苯胺试剂热变性热变性冷却冷却变性变性90复性复性55左右左右引物引物延伸延伸DNA聚合酶聚合酶 血红蛋白血红蛋白透析透析小小凝胶色谱凝胶色谱 1下列有关植物组织培养的叙述，正确的是下列有关植物组织培养的叙述，正确的是()A愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株传的植株C用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成用人工薄膜将胚状体、愈伤组织
8、等分别包装可制成人工种子人工种子D植物耐盐突变体可通过添加适量植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养的培养基培养筛选而获得筛选而获得【答案【答案】D【自练自测【自练自测】【解析【解析】在普通培养基中添加适量的在普通培养基中添加适量的NaCl，制成选择培，制成选择培养基，可用来筛选植物耐盐突变体，故选项养基，可用来筛选植物耐盐突变体，故选项D正确；愈伤组正确；愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞；二倍体植株的花粉经离体培养后得到单倍状态的薄壁细胞；二倍体植株的花粉经离体培养后得到单倍体植株，该单倍体
9、高度不育，不能稳定遗传；用人工薄膜将体植株，该单倍体高度不育，不能稳定遗传；用人工薄膜将胚状体等进行包装可制成人工种子，愈伤组织不能作为制作胚状体等进行包装可制成人工种子，愈伤组织不能作为制作人工种子的材料，故选项人工种子的材料，故选项A、B、C错误。错误。2(2015年江苏南京三模年江苏南京三模)下列有关下列有关DNA粗提取与鉴定的粗提取与鉴定的实验叙述，正确的是实验叙述，正确的是()A酵母、菜花和猪的成熟红细胞都可作为提取酵母、菜花和猪的成熟红细胞都可作为提取DNA的的材料材料BDNA在在NaCl溶液中的溶解度随其溶液浓度增大而增溶液中的溶解度随其溶液浓度增大而增大大C在溶有在溶有DNA的
10、滤液中加入嫩肉粉，可分解其中的杂的滤液中加入嫩肉粉，可分解其中的杂质蛋白质蛋白D鉴定鉴定DNA时，应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中时，应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴进行沸水浴【答案【答案】C【解析【解析】理论上只要含有理论上只要含有DNA的生物组织均可作为该实的生物组织均可作为该实验的材料，因此酵母和菜花均可作为提取验的材料，因此酵母和菜花均可作为提取DNA的材料，但哺的材料，但哺乳动物成熟红细胞无细胞核，即没有足够的乳动物成熟红细胞无细胞核，即没有足够的DNA，不能作为，不能作为提取提取DNA的材料，的材料，A错误；错误；DNA在在2 mol/L NaCl溶液中溶解溶液中溶解度最
11、大，高于或低于此浓度其溶解度均降低，度最大，高于或低于此浓度其溶解度均降低，B错误；嫩肉粉错误；嫩肉粉含有蛋白酶，故在溶有含有蛋白酶，故在溶有DNA的滤液中加入嫩肉粉，可分解其的滤液中加入嫩肉粉，可分解其中的杂质蛋白，中的杂质蛋白，C正确；鉴定正确；鉴定DNA时，不能将丝状物直接加时，不能将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴，应将丝状物先溶解再放入二入到二苯胺试剂中进行沸水浴，应将丝状物先溶解再放入二苯胺试剂检测，苯胺试剂检测，D错误。错误。3标准的标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是这三大步需要的温度依次是()A94
12、、55、72 B72、55、94 C55、94、72 D80、55、72【答案【答案】A【解析【解析】当温度上升到当温度上升到90 或以上或以上(9096)时，双链时，双链DNA解旋为单链，称之为变性；当温度下降到解旋为单链，称之为变性；当温度下降到50 左右左右(4060)时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；当温度上升到结合；当温度上升到72(7075)时，溶液中的四种脱氧时，溶液中的四种脱氧核苷酸在核苷酸在Taq DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的合成新的DNA链，称为延伸。链，称为延伸
13、。4下列有关下列有关“血红蛋白提取和分离血红蛋白提取和分离”的叙述中，正确的的叙述中，正确的是是()A用蒸馏水进行红细胞的洗涤，其目的是使红细胞涨用蒸馏水进行红细胞的洗涤，其目的是使红细胞涨破破B将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子将血红蛋白溶液进行透析，其目的是去除相对分子质量较大的杂质质量较大的杂质C血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是使血红蛋白溶于有机溶剂白溶于有机溶剂D整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红整个过程不断用磷酸缓冲液处理，是为了维持血红蛋白的结构和活性蛋白的结构和活性【答案【答案】D【解析【解析】应用生理盐水洗涤，
14、目的是去除杂蛋白，以利应用生理盐水洗涤，目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化；血红蛋白为大分子，透析的目的是于后续步骤的分离纯化；血红蛋白为大分子，透析的目的是为了除去小分子物质；血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目为了除去小分子物质；血红蛋白释放时加入有机溶剂，其目的是溶解磷脂，加速血红蛋白的释放。的是溶解磷脂，加速血红蛋白的释放。5在玫瑰精油的提取和胡萝卜素的提取过程中共有的操在玫瑰精油的提取和胡萝卜素的提取过程中共有的操作是作是()A纸层析纸层析B水浴加热水浴加热C过滤过滤 D加入加入NaCl【答案【答案】C【解析【解析】纸层析法用于胡萝卜素的鉴定；水浴加热用于纸层析法用于胡萝卜素的鉴
15、定；水浴加热用于胡萝卜素的萃取；在玫瑰精油的提取和胡萝卜素的提取过程胡萝卜素的萃取；在玫瑰精油的提取和胡萝卜素的提取过程中都要用到过滤；在玫瑰精油的提取中加入中都要用到过滤；在玫瑰精油的提取中加入NaCl使油水分使油水分层。层。1MS培养基的主要成分及作用：培养基的主要成分及作用：植物组织培养的过程及条件植物组织培养的过程及条件成分成分作用作用大量元素大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐提供植物细胞生活所必需的无机盐微量元素微量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐提供植物细胞生活所必需的无机盐蔗糖蔗糖提供碳源，调节培养基的渗透压提供碳源，调节培养基的渗透压植物激素植物激素调节作用，启动细胞分裂
16、、脱分化和调节作用，启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键再分化的关键氨基酸、维生素氨基酸、维生素等小分子有机物等小分子有机物满足离体细胞在正常代谢途径受一定满足离体细胞在正常代谢途径受一定影响后所产生的特殊营养需求影响后所产生的特殊营养需求2植物组织培养技术和花药离体培养技术的比较植物组织培养技术和花药离体培养技术的比较项目项目植物组织培养植物组织培养花药离体培养花药离体培养相相同同点点理论依据理论依据植物细胞的全能性植物细胞的全能性基本过程基本过程脱分化脱分化再分化再分化影响因素影响因素选材、营养、激素、温度、选材、营养、激素、温度、pH、光照等、光照等不不同同点点外植体外植体体细胞体细胞生殖
17、细胞生殖细胞(花粉粒花粉粒)生殖方式生殖方式无性生殖无性生殖有性生殖有性生殖培养结果培养结果正常植株正常植株单倍体植株单倍体植株可育性可育性可育可育高度不育，秋水仙素处理高度不育，秋水仙素处理后可育后可育操作流程操作流程制备培养基制备培养基外植外植体消毒体消毒接种接种培培养养移栽移栽栽培栽培选材选材材料的消毒材料的消毒接种接种和培养和培养筛选和诱导筛选和诱导移移栽栽栽培选育栽培选育3植物激素：植物激素：在配制好的在配制好的MS培养基中，常常需要添加培养基中，常常需要添加植物激素。其中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分植物激素。其中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素
18、。植物激素的浓度、使用的先后顺化和再分化的关键性激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等，都会影响实验结果。序以及用量的比例等，都会影响实验结果。按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验按照不同的顺序使用这两类激素，会得到不同的实验结果结果(如下表如下表)：使用顺序使用顺序实验结果实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细有利于细胞分裂，但细胞不分化胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂又分化细胞既分裂又分化同时使用同时使用分化频率提高分化频率提高考查植物组织培养和花药离体培考查植物组织培养
19、和花药离体培1(2016年黑龙江鹤壁期末年黑龙江鹤壁期末)月季的花药培养过程的难点月季的花药培养过程的难点之一是材料的选择，下列有关材料选择的叙述中正确的是之一是材料的选择，下列有关材料选择的叙述中正确的是()A从花药来看，应当选择盛花期的花药从花药来看，应当选择盛花期的花药B从花粉来看，应当选择小孢子四分体期的花粉从花粉来看，应当选择小孢子四分体期的花粉C从花蕾来看，应当选择略微开放的花蕾从花蕾来看，应当选择略微开放的花蕾D从检测花粉的实验方法看，应该用显微镜观察已染从检测花粉的实验方法看，应该用显微镜观察已染色的花粉样品临时装片色的花粉样品临时装片【答案【答案】D【解析【解析】从花药来看，
20、应当选择初花期的花药，从花药来看，应当选择初花期的花药，A错错误；从花粉来看，应当选择单核期的花粉，误；从花粉来看，应当选择单核期的花粉，B错误；从花蕾来错误；从花蕾来看，应当选择完全未开放的花蕾，看，应当选择完全未开放的花蕾，C错误；用已染色的花粉错误；用已染色的花粉样品作临时装片，才能观察到细胞核的位置，以确定花粉发样品作临时装片，才能观察到细胞核的位置，以确定花粉发育的时期，育的时期，D正确。正确。2植物的花药培养在育种上有特殊的意义。植物组织培植物的花药培养在育种上有特殊的意义。植物组织培养可用于无病毒植株及细胞产物的工厂化生产等方面。请回养可用于无病毒植株及细胞产物的工厂化生产等方面
21、。请回答相关问题：答相关问题：(1)利用月季的花药离体培养产生单倍体时，选材非常重利用月季的花药离体培养产生单倍体时，选材非常重要。一般来说，在要。一般来说，在_期花药培养的成功率最期花药培养的成功率最高。为了选择该期的花药，通常选择高。为了选择该期的花药，通常选择_的花的花蕾。确定花粉发育时期最常用的方法有蕾。确定花粉发育时期最常用的方法有_法，但是法，但是对于花粉细胞核不易着色的植物，需采用对于花粉细胞核不易着色的植物，需采用_法，该法能将花粉细胞核染成法，该法能将花粉细胞核染成_色。色。(2)若要进行兰花无病毒植株的培育，首先选择兰花的若要进行兰花无病毒植株的培育，首先选择兰花的_作为外
22、植体。从外植体到无病毒植株作为外植体。从外植体到无病毒植株试管苗，要人为控制细胞的试管苗，要人为控制细胞的_和和_过程。过程。(3)进行组织培养需配制进行组织培养需配制MS培养基，在该培养基中常需要培养基，在该培养基中常需要添加添加_、_等激素。植物激素的用量比例等激素。植物激素的用量比例应为应为_，有利于根的分化。，有利于根的分化。(4)不同植物的组织培养除需营养和激素外，不同植物的组织培养除需营养和激素外，_ _等外界条件也很重要。等外界条件也很重要。(5)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，下列无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，下列各项中使用化学药剂进行消毒的是各项中使用化
23、学药剂进行消毒的是_，采用灼烧方，采用灼烧方法进行灭菌的是法进行灭菌的是_。(填序号填序号)培养皿培养皿培养基培养基实验操作者的双手实验操作者的双手三角锥三角锥形瓶形瓶接种环接种环花蕾花蕾【答案【答案】(1)单核靠边完全未开放醋酸洋红焙花单核靠边完全未开放醋酸洋红焙花青青铬矾蓝黑铬矾蓝黑(2)茎尖分生组织脱分化茎尖分生组织脱分化(或去分化或去分化)再分化再分化(3)生长素细胞分裂素生长素细胞分裂素(两空顺序可以颠倒两空顺序可以颠倒)生长素多生长素多于细胞分裂素于细胞分裂素(4)pH、温度、光照、温度、光照(5)【解析【解析】(1)早期的花药比后期的更容易培养成功。一般早期的花药比后期的更容易培
24、养成功。一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高。该时期的花药通常存在于完全未开放的花培养成功率最高。该时期的花药通常存在于完全未开放的花蕾中。蕾中。(2)根尖、茎尖约根尖、茎尖约00.1 mm区域中几乎不含病毒。病区域中几乎不含病毒。病毒通过维管系统移动，而分生组织中不存在维管系统，且茎毒通过维管系统移动，而分生组织中不存在维管系统，且茎尖分生组织中，代谢活力高，在竞争中病毒复制处于劣势。尖分生组织中，代谢活力高，在竞争中病毒复制处于劣势。(3)生长素与细胞分裂素等植物激素可调节脱分化和再分化。生长素与细胞分裂
25、素等植物激素可调节脱分化和再分化。当生长素含量高于细胞分裂素含量时，利于生根。当生长素含量高于细胞分裂素含量时，利于生根。(4)植物培植物培养时，除需要营养、激素外，还需要适宜的温度、养时，除需要营养、激素外，还需要适宜的温度、pH和光照和光照等。等。(5)对实验器具进行灭菌处理，对实验过程中的具有生物对实验器具进行灭菌处理，对实验过程中的具有生物活性的材料或用具进行消毒处理。活性的材料或用具进行消毒处理。1植物有效成分的提取的三种方法比较植物有效成分的提取的三种方法比较植物有效成分的提取植物有效成分的提取提取提取方法方法水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法压榨法压榨法有机溶剂有机溶剂萃取法萃取法实验实验
26、原理原理利用水蒸气将挥利用水蒸气将挥发性较强的植物发性较强的植物芳香油携带出来芳香油携带出来通过机械加压，通过机械加压，压榨出果皮中的压榨出果皮中的芳香油芳香油使芳香油溶解在使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸有机溶剂中，蒸发溶剂获得芳香发溶剂获得芳香油油方法方法步骤步骤水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏分离油层分离油层除水过滤除水过滤石灰水浸泡、石灰水浸泡、漂洗漂洗压榨、过滤、压榨、过滤、静置静置再次过滤再次过滤粉碎、干燥粉碎、干燥萃取、过滤萃取、过滤浓缩浓缩提取提取方法方法水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法压榨法压榨法有机溶剂有机溶剂萃取法萃取法适用适用范围范围适用于提取玫瑰适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥油、薄荷油等挥发性
27、强的芳香油发性强的芳香油适用于柑橘、柠适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料檬等易焦糊原料的提取的提取适用范围广，要适用范围广，要求原料的颗粒要求原料的颗粒要尽可能细小，能尽可能细小，能充分浸泡在有机充分浸泡在有机溶剂中溶剂中优点优点简单易行，便于简单易行，便于分离分离生产成本低，易生产成本低，易保持原料原有的保持原料原有的结构和功能结构和功能出油率高，易分出油率高，易分离离局限局限性性水中蒸馏会导致水中蒸馏会导致原料焦糊和有效原料焦糊和有效成分水解等问题成分水解等问题分离较为困难，分离较为困难，出油率相对较低出油率相对较低使用的有机溶剂使用的有机溶剂处理不当会影响处理不当会影响芳香油的质量芳香油的质量
28、2植物有效成分提取过程的注意事项植物有效成分提取过程的注意事项(1)在玫瑰精油的提取过程中，加入在玫瑰精油的提取过程中，加入NaCl的目的是增加水的目的是增加水层的密度，有利于玫瑰油与水分层，加入无水层的密度，有利于玫瑰油与水分层，加入无水Na2SO4的目的的目的是吸收精油中残留的水分。是吸收精油中残留的水分。(2)在提取橘皮精油时，为了提高出油率，需要将柑橘皮在提取橘皮精油时，为了提高出油率，需要将柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡，浸泡时间为干燥去水，并用石灰水浸泡，浸泡时间为10 h以上。橘皮要以上。橘皮要浸透，这样压榨时不会滑脱，且出油率高，过滤时不会堵塞浸透，这样压榨时不会滑脱，且出油率
29、高，过滤时不会堵塞筛眼。筛眼。(3)在胡萝卜素的提取中，原料颗粒的大小、紧密程度、在胡萝卜素的提取中，原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件也能影响萃取。因此在萃含水量、萃取的温度和时间等条件也能影响萃取。因此在萃取的过程中，要先将胡萝卜进行粉碎和干燥，使之与萃取剂取的过程中，要先将胡萝卜进行粉碎和干燥，使之与萃取剂充分接触，提高溶解度。充分接触，提高溶解度。考查植物有效成分的提取考查植物有效成分的提取1(2016年河南洛阳期末年河南洛阳期末)在植物有效成分的提取过程在植物有效成分的提取过程中，下列有关叙述错误的是中，下列有关叙述错误的是()A蒸馏法是利用水将芳香油溶解下来，
30、再把水蒸发蒸馏法是利用水将芳香油溶解下来，再把水蒸发掉，剩余的就是芳香油掉，剩余的就是芳香油B压榨法是通过机械加压，可压榨出果皮中的芳香油压榨法是通过机械加压，可压榨出果皮中的芳香油C萃取法是使芳香油溶解在溶剂后通过蒸发就可获得萃取法是使芳香油溶解在溶剂后通过蒸发就可获得芳香油芳香油D蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油香油【答案【答案】A【解析【解析】蒸馏法是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携蒸馏法是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后可以分层，将芳香油分离带出来，形成油水混合物，冷却后可以分层，将芳香油分离出来
31、，出来，A错误；压榨法是通过机械加压，将原料中的芳香油错误；压榨法是通过机械加压，将原料中的芳香油挤压出来，挤压出来，B正确；萃取法是将粉碎、干燥的植物原料用有机正确；萃取法是将粉碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机溶剂中，之后再通过蒸馏装溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机溶剂中，之后再通过蒸馏装置蒸发出有机溶剂，剩下的就是要提取的物质，置蒸发出有机溶剂，剩下的就是要提取的物质，C正确；蒸正确；蒸馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油，馏法适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油，D正正确。确。2回答下列有关植物有效成分提取的问题：回答下列有关植物有效成分提取的问题：(1)
32、从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和卜粉碎和_，以提高萃取效率。鉴定萃取物中是否，以提高萃取效率。鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用含有胡萝卜素时，通常可采用_法，在鉴定的过程法，在鉴定的过程中需要用中需要用_作为对照。作为对照。(2)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是氯化钠的作用是_，分离出的油，分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是层中加入无水硫酸钠的作用是_，除去，除去固体硫酸钠的常用方法是固体硫酸钠的常用方法是_。(3)橘皮精油的有效成分在用水蒸
33、气蒸馏时会发生部分水橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，使用水中蒸馏法又会产生解，使用水中蒸馏法又会产生_的问题，所以一般的问题，所以一般采用采用_法。法。【答案【答案】(1)干燥纸层析标准样品干燥纸层析标准样品(2)有利于油层和有利于油层和水层的分离除去少量的水过滤水层的分离除去少量的水过滤(3)原料焦糊压榨原料焦糊压榨【解析【解析】(1)为提高萃取效率，从胡萝卜中提取胡萝卜素为提高萃取效率，从胡萝卜中提取胡萝卜素时，需要在萃取前将胡萝卜粉碎和干燥。通常采用纸层析法时，需要在萃取前将胡萝卜粉碎和干燥。通常采用纸层析法鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素，在鉴定的过程中需要用标鉴定萃取物
34、中是否含有胡萝卜素，在鉴定的过程中需要用标准样品作为对照。准样品作为对照。(2)水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，为使油层水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，为使油层和水层分离，需在油水混合物中加入氯化钠；分离出的油层和水层分离，需在油水混合物中加入氯化钠；分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是除去少量的水；除去固体硫酸钠中加入无水硫酸钠的作用是除去少量的水；除去固体硫酸钠的常用方法是过滤。的常用方法是过滤。(3)由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊蒸馏时会发生部分水解，使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题，所以一般采用压榨法提取橘皮
35、精油。的问题，所以一般采用压榨法提取橘皮精油。1PCR的反应过程的反应过程DNA和蛋白质技术、和蛋白质技术、DNA的粗提取和鉴定的粗提取和鉴定2细胞内细胞内DNA复制与复制与PCR技术比较技术比较细胞内细胞内DNA复制复制PCR不不同同点点解旋解旋在解旋酶作用下边解旋在解旋酶作用下边解旋边复制边复制80100高温解高温解旋，双链分开旋，双链分开酶酶DNA解旋酶、解旋酶、DNA聚合聚合酶酶Taq DNA聚合酶聚合酶引物引物RNA单链单链DNA或或RNA温度温度体内温和条件体内温和条件高温高温相相同同点点需提供需提供DNA复制的模板复制的模板四种脱氧核苷酸做原料四种脱氧核苷酸做原料子链延伸的方向都
36、是从子链延伸的方向都是从5端到端到3端端都需要酶的催化都需要酶的催化3血红蛋白的分离方法血红蛋白的分离方法(1)凝胶色谱法凝胶色谱法蛋白质比较蛋白质比较相对分子质量大相对分子质量大相对分子质量小相对分子质量小凝胶内部凝胶内部不能进入不能进入能进入能进入运动方式运动方式垂直向下垂直向下垂直向下和无规则扩垂直向下和无规则扩散运动散运动经过路程经过路程较短较短较长较长洗脱次序洗脱次序先流出先流出后流出后流出(2)电泳法电泳法含义：带电粒子在电场作用下发生迁移过程。含义：带电粒子在电场作用下发生迁移过程。原理：利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异原理：利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异和分子
37、本身大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速和分子本身大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。度，从而实现样品中各种分子的分离。特别提醒特别提醒(1)引物是指能够与引物是指能够与DNA母链的一段碱基序列母链的一段碱基序列互补配对的一小段互补配对的一小段DNA或或RNA。(2)DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。(3)血红蛋白的分离一般用血红蛋白的分离一般用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法，聚丙烯酰胺凝胶电泳法，可以用来测定蛋白质的相对分
38、子质量，即对血红蛋白进行纯可以用来测定蛋白质的相对分子质量，即对血红蛋白进行纯度鉴定。度鉴定。4分离分离DNA、分离蛋白质与、分离蛋白质与PCR技术的比较技术的比较项目项目分离分离DNAPCR技术技术分离蛋白质分离蛋白质实验实验原理原理DNA在不同浓度在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，溶液中溶解度不同，且不溶于冷酒精且不溶于冷酒精利用利用DNA热变性热变性原理体外扩增原理体外扩增DNA依据相对分子质依据相对分子质量的大小不同来量的大小不同来分离蛋白质分离蛋白质实验实验过程过程选取材料选取材料破碎细胞破碎细胞释放释放DNA除去杂质除去杂质DNA析出与鉴定析出与鉴定变性变性复性复性延延伸伸样品处
39、理样品处理凝胶凝胶色谱操作色谱操作实验实验结果结果获得较纯净的获得较纯净的DNA获得大量获得大量DNA相对分子质量不相对分子质量不同的蛋白质得以同的蛋白质得以分离分离实验实验意义意义为为DNA研究打下基础研究打下基础解决了解决了DNA研究研究中材料不足的问中材料不足的问题题为蛋白质的研究为蛋白质的研究和利用提供了原和利用提供了原材料材料5分离分离DNA实验中实验中4次过滤的比较次过滤的比较项目项目第一次过滤第一次过滤 第二次过滤第二次过滤 第三次过滤第三次过滤第四次过滤第四次过滤滤液中滤液中含含DNA的的核物质核物质DNA溶于溶于0.14 mol/L NaCl溶液的杂质溶液的杂质溶于冷酒精的溶
40、于冷酒精的杂质杂质纱布上纱布上细胞膜、核细胞膜、核膜等残片膜等残片不溶于不溶于2 mol/LNaCl溶液溶液的杂质的杂质DNADNA过滤前加入过滤前加入的物质的物质蒸馏水蒸馏水NaCl溶液溶液蒸馏水蒸馏水体积分数为体积分数为95%的冷酒精的冷酒精过滤的过滤的目的目的去除细胞去除细胞膜、核膜等膜、核膜等杂质杂质去除溶于去除溶于2 mol/LNaCl的杂的杂质质去除溶于去除溶于0.14 mol/L NaCl溶液溶液的杂质的杂质去除溶于去除溶于95%冷酒精的杂质冷酒精的杂质考查考查PCR技术和蛋白质技术技术和蛋白质技术1多聚酶链式反应多聚酶链式反应(PCR技术技术)是体外酶促合成特异是体外酶促合成特
41、异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增，得以迅速扩增，其简要过程如图所示。下列关于其简要过程如图所示。下列关于PCR技术叙述不正确的是技术叙述不正确的是()APCR技术是在实验室中以少量技术是在实验室中以少量DNA制备大量制备大量DNA的的技术技术B反应中新合成的反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板又可以作为下一轮反应的模板CPCR技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增技术中以核糖核苷酸为原料，以指数方式扩增D应用应用PCR
42、技术与探针杂交技术可以检测基因突变技术与探针杂交技术可以检测基因突变【答案【答案】C【解析【解析】PCR技术是人工扩增技术是人工扩增DNA的方法，原料是脱氧的方法，原料是脱氧核苷酸而不是核糖核苷酸。核苷酸而不是核糖核苷酸。2(2015年四川重点中学模拟年四川重点中学模拟)如图为凝胶色谱法分离蛋如图为凝胶色谱法分离蛋白质示意图和白质示意图和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳示意图。据图分析聚丙烯酰胺凝胶电泳示意图。据图分析不正确的是不正确的是()A在装填图甲中凝胶色谱柱时一旦发现柱内有气泡存在装填图甲中凝胶色谱柱时一旦发现柱内有气泡存在，就需要重装在，就需要重装B图甲中大分子蛋白质因阻力大而移动慢，所以最
43、后图甲中大分子蛋白质因阻力大而移动慢，所以最后从层析柱中流出来从层析柱中流出来C图乙中凝胶中加入的图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质在电泳时迁移可以使蛋白质在电泳时迁移速率完全取决于分子大小速率完全取决于分子大小D洗脱时，如果红色区带均匀一致的移动，说明色谱洗脱时，如果红色区带均匀一致的移动，说明色谱柱制作成功柱制作成功【答案【答案】B【解析【解析】在装填凝胶色谱柱时，凝胶装填在色谱柱内要在装填凝胶色谱柱时，凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在，因为气泡会影响蛋白质洗脱的次均匀，不能有气泡存在，因为气泡会影响蛋白质洗脱的次序，序，A正确；图甲中大分子蛋白质因不容易进入凝胶内部的正确；图甲
44、中大分子蛋白质因不容易进入凝胶内部的通道，故路程短，移动速度快，所以最先从层析柱中流出通道，故路程短，移动速度快，所以最先从层析柱中流出来，来，B错误；错误；SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子大小，因此图乙中凝胶加入的于分子大小，因此图乙中凝胶加入的SDS可以使蛋白质迁移可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小，速率完全取决于分子大小，C正确；洗脱时，如果红色区带正确；洗脱时，如果红色区带均匀一致的移动，说明色谱柱制作成功，均匀一致的移动，说明色谱柱制作成功，D正确。正确。考查考查DNA的粗提取和鉴定的粗提取和鉴定1(2016年黑龙江齐齐哈尔期中
45、年黑龙江齐齐哈尔期中)“DNA的粗提取和鉴的粗提取和鉴定定”实验中的三次过滤：实验中的三次过滤：(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液(2)过滤含黏稠物的过滤含黏稠物的0.14 mol/L NaCl溶液溶液(3)过滤溶解有过滤溶解有DNA的的2 mol/L NaCl溶液溶液以上三次过滤分别为了获得以上三次过滤分别为了获得()A含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液的滤液B含核物质的滤液、滤液中含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含黏稠物、含DNA的滤的滤液液C含核物质的滤液、滤液中含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的
46、黏稠物、纱布上的DNAD含较纯的含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤的滤液液【答案【答案】A【解析【解析】(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液，目的是过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液，目的是为了获得含有核物质的滤液；为了获得含有核物质的滤液；(2)DNA在在0.14 mol/L NaCl溶液溶液中的溶解度最低，因此过滤含粘稠物的中的溶解度最低，因此过滤含粘稠物的0.14 mol/L NaCl溶液溶液的目的是获得纱布上的粘稠物；的目的是获得纱布上的粘稠物；(3)DNA在在2 mol/L NaCl溶液溶液中的溶解度最高，因此过滤溶解有中的溶解度最高，因此过滤溶解有
47、DNA的的2 mol/L NaCl溶液溶液的目的是获得含的目的是获得含DNA的滤液。的滤液。2“DNA的粗提取与鉴定的粗提取与鉴定”实验中，操作正确的是实验中，操作正确的是()A取制备好的鸡血细胞液取制备好的鸡血细胞液510 mL注入烧杯中，迅速注入烧杯中，迅速加入物质的量浓度为加入物质的量浓度为0.14 mol/L的的NaCl溶液溶液20 mL，同时用玻，同时用玻璃棒沿同一方向快速搅拌璃棒沿同一方向快速搅拌5 min，可使血细胞破裂，释放出，可使血细胞破裂，释放出DNAB整个整个DNA提取过程中，两次加蒸馏水的目的都是为提取过程中，两次加蒸馏水的目的都是为了降低溶液中了降低溶液中NaCl的浓
48、度，使的浓度，使DNA分子的溶解度达到最低，分子的溶解度达到最低，析出析出DNA分子分子C整个整个DNA提取操作中，两次加入提取操作中，两次加入2 mol/L的的NaCl溶溶液，目的都是使液，目的都是使DNA尽可能多地溶解在尽可能多地溶解在NaCl溶液中溶液中DDNA鉴定操作中，只要向溶有鉴定操作中，只要向溶有DNA的的NaCl溶液中加溶液中加入入4 mL的二苯胺试剂，即可出现蓝色的二苯胺试剂，即可出现蓝色【答案【答案】C【解析【解析】取制备好的鸡血细胞液注入烧杯中，迅速加入取制备好的鸡血细胞液注入烧杯中，迅速加入蒸馏水并用玻璃棒沿同一方向搅拌，使血细胞破裂，将蒸馏水并用玻璃棒沿同一方向搅拌，
49、使血细胞破裂，将DNA释放出来；整个释放出来；整个DNA提取过程中，使用两次蒸馏水，第一次提取过程中，使用两次蒸馏水，第一次是使血细胞吸水涨破，释放是使血细胞吸水涨破，释放DNA，第二次是用来稀释，第二次是用来稀释NaCl溶溶液，使液，使DNA析出；在析出；在DNA鉴定操作中，鉴定操作中，DNA遇二苯胺试剂呈遇二苯胺试剂呈蓝色需在沸水浴条件下完成。蓝色需在沸水浴条件下完成。【答案【答案】二苯胺二苯胺蒸馏蒸馏压榨压榨萃取萃取【网控全局【网控全局】1植物组织培养的植物组织培养的4个方面：个方面：(1)理论基础：全能性。理论基础：全能性。(2)基本过程：包括脱分化和再分化。基本过程：包括脱分化和再分
50、化。(3)培养基的制备：诱导愈伤组织的固体培养基，分装后培养基的制备：诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行灭菌。接种前，要对外植体进行消毒。要进行灭菌。接种前，要对外植体进行消毒。(4)植物激素的影响：组织培养的培养基中必须加入生长植物激素的影响：组织培养的培养基中必须加入生长素和细胞分裂素，两种激素的使用顺序和浓度配比将影响组素和细胞分裂素，两种激素的使用顺序和浓度配比将影响组织培养过程中的细胞分裂和分化。织培养过程中的细胞分裂和分化。【易混必明【易混必明】2DNA的粗提取与鉴定：的粗提取与鉴定：(1)DNA的溶解性：的溶解性：DNA在在0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解溶液中的溶
