经皮肾活检术课件.pptx

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资源描述

1、取组织不够或空穿时可重复穿刺铅是重金属,铀有放射性肾小球基底膜、肾小管基底膜、包曼囊壁4 PBS 50ml,置冰箱内)亮绿SF 0.苏木素 0.将分切后的肾组织即浸3.蛋白、免疫复合物染成桔红色置Schiff试剂染 51010目镜中加25格测微器,在40高倍镜下,参照血球计数板算得每平方毫米内阳性细胞数与细胞亲和力强,对糖原、核蛋白,尤其微管、内质网等细胞膜结构有较好的固定作用3%硫酸,用时现配,等量混合皮肤消毒液:1%普鲁卡因或2%利多卡因局麻非单纯肾后(梗阻)因素导致的慢性肾功能减退解剖显微镜、冰瓶一个,眼科平镊两把,直尺一把,双面刀一片,蜡板一块多聚甲醛固定时间稍长无妨流水冲洗,镜下观察

2、细胞核呈兰色,其余组织呈灰色纯丙酮脱水45(每15 换液1次)用手大鱼际部(或手指)在体表进针部位施压,平车送患者回病房蒸馏水 100ml25%盐酸,70%酒精)76g,加双蒸水30ml再加8ml 1N NaOH(NaOH须新鲜配制),摇之使乳白色液清亮DAB-H2O2显色液置50ml量瓶内混合,摇1,间隔再摇,试剂全部溶解呈乳白色用解剖显微镜或放大镜判断肾组织部位(皮质和髓质,有无肾小球),及时与术者联系3%硫酸,用时现配,等量混合合格的电镜标本应有1个肾小球(注意取材准确性)快速脱水(甩片),透明封片一般用梯度浓度的乙醇或丙酮脱水蒸馏水 200mlMasson三色染色将细胞核染成黑色,胞浆

3、及胶原纤维染成蓝绿色,呈分枝小管状或泡状,膜完整蒸馏水 200ml自体肾或移植肾病理诊断Masson三色染色1过碘酸氧化15急性肾盂肾炎、肾脓肿、肾结核等冰醋酸 1.纱布及编号的胶布置培养皿备用5%甲苯胺兰水溶液染色约1(可加温,见水汽停),水洗,镜下定位合格组织应包括皮质和髓质确诊多普勒超声检查或肾动脉造影常规监测(术后6h内)15mol/L(pH7.0g,玻棒搅匀,当溶液呈深紫色时,即移入冷水中,促使冷却,静置过夜,过滤封闭保存,用前若加5醋酸则染色更佳。焦虑及不合作者酌情用镇静剂肾活检标本免疫化学及免疫荧光染色制备技术切片厚度由干涉色估计,其颜色与厚度的关系如下取得标本后,即平铺在小蜡板

4、上,迅速以锋利的刀片将组织按规定分配,立即固定液固定。合格组织应包括皮质和髓质急性肾盂肾炎、肾脓肿、肾结核等合格的电镜标本应有1个肾小球(注意取材准确性)受检者术前1224h内排便置50ml量瓶内混合,摇1,间隔再摇,试剂全部溶解呈乳白色低倍下呈完整清晰的单层结构,高倍下见双层结构合格组织应包括皮质和髓质争取在穿刺组织取出后0.材料来源丰富,操作简便非单纯肾后(梗阻)因素导致的急性肾功能减退受检者取俯卧位,腹部肋缘下(相当于肾区位置)垫以510 cm棉枕减少肾脏移动。病因、病变程度、治疗和预后等未解决或不明确者锐利刀片切割组织1mm、2mm及4mm数段淡黄色结晶体,水溶液中性,具强挥发性和毒性

5、。室温和正常大气情况下,配制简单,操作方便,染色均匀技术工作是正确诊断的保证合格的电镜标本应有1个肾小球(注意取材准确性)蒸馏水 200ml各种基底膜:肾小球基底膜、包曼囊壁和肾小管基底膜纱布及编号的胶布置培养皿备用加HRP-链霉素卵白素复合物(streptoavidin),室温40,PBS冲洗。混合红液配制:Masson染液中加少许1%酸性品红,比例需染片后定5%马休黄(martius yellow),95%酒精,2%磷钨酸2mol/L NaH2PO4.受检者取俯卧位,腹部肋缘下(相当于肾区位置)垫以510 cm棉枕减少肾脏移动。5%马休黄(martius yellow),95%酒精,2%磷

6、钨酸置Schiff试剂染 510将苏木素溶于酒精,倾入明矾液中,混合后蒸沸,加一氧化汞1.升汞-苦味酸混合固定,可行常规染色、各种特殊染色和酶标抗体染色快速脱水(甩片),透明封片常规监测(术后6h内)锇酸(osmium tetroxide OSO4)另有火棉及碳膜(更坚固)、微筛膜等,各有所长氧化汞 0.视操作者及单位经验确定是否选用半自动穿刺枪清洁5ml小瓶,加光镜固定液3ml(FAA固定液:福尔马林10 ml,冰醋酸5 ml,95%乙醇85 ml混匀),盖塞紧后备用10目镜中加25格测微器,在40高倍镜下,参照血球计数板算得每平方毫米内阳性细胞数注意防护、避免皮肤破损经济、易得、不受条件限

7、制,固定效果接近戊二醛合格组织应包括皮质和髓质预温蒸馏水 23ml电镜和光镜固定液不得互相混淆脱水后的标本,移入包埋剂与纯丙酮(1:1)30再移入2:1丙酮中3h纯包埋剂3h行光镜、免疫病理和电镜检查蒸馏水 100ml用超薄切片机将修好的包埋块切成0.5内固定(保持生活状态)自体肾活检者施压穿刺点1305mol/L Tris-Hcl(pH7.75%的冷戊二醛),将肾组织迅速置蜡板上固定液中,锋利刀片切成1mm3小块,移入小瓶中,确保组织块全部浸没在固定液中,加盖,4固定75%冷戊二醛作预固定酒精脱水,二甲苯透明,封片移植肾活检者压迫穿刺点30锇酸(osmium tetroxide OSO4)水

8、洗后1盐酸分化(过一下)金黄色 709010目镜中加25格测微器,在40高倍镜下,参照血球计数板算得每平方毫米内阳性细胞数将注射器造成负压的同时先进针,如无出血边退出注射针,边注射局麻药冰醋酸 10ml明显肉眼血尿、尿中血凝块多者,易尿路梗阻导致严重尿潴留,应行经皮膀胱穿刺导尿或三腔导尿管导尿及反复冲洗膀胱,直至肾出血中止多用戊二醛作前(预)固定,锇酸后固定不影响细胞渗透压,故对缓冲液渗透压要求高加特异性抗体(一抗)室温孵育2h,PBS冲洗禁止剧烈运动或重体力劳动(术后3周内)皮内及沿进针途径皮下局麻磷钨酸 0.肾活检标本的初步处理用手大鱼际部(或手指)在体表进针部位施压,平车送患者回病房分子较大,渗透力弱,组织块若1mm3,固定效果差,引起固定不均匀5%苯胺兰,1%醋酸)置Schiff试剂染 510PASM染色反应阳性物质0g,玻棒搅匀,当溶液呈深紫色时,即移入冷水中,促使冷却,静置过夜,过滤封闭保存,用前若加5醋酸则染色更佳。内外膜完整,基本平行,可见核孔混合红液配制:Masson染液中加少许1%酸性品红,比例需染片后定分切后的组织迅速置预冷的培养皿内的湿纱布中

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