1、第七章第七章 三萜及其苷三萜及其苷（Triterpenoids）三萜类化合物的含义、生物活性及其生物合成；三萜类化合物的含义、生物活性及其生物合成；三萜类化合物的主要类型及其代表物；三萜类化合物的主要类型及其代表物；三萜类化合物的理化性质；三萜类化合物的理化性质；三萜类化合物的提取、分离方法；三萜类化合物的提取、分离方法；三萜类化合物的结构测定方法：三萜类化合物的结构测定方法：IR、UV、NMR、MS三萜及其苷的主要内容三萜及其苷的主要内容由由30个碳原子组成的萜类化合物个碳原子组成的萜类化合物7.1 含义、生物活性及其生物合成含义、生物活性及其生物合成一、含义一、含义三萜的定义：由三萜的定义
2、：由30个碳原子组成的萜个碳原子组成的萜类化合物，分子中有类化合物，分子中有6个异戊二烯单位，个异戊二烯单位，通式通式(C5H8)6；游离或成苷、成酯的形式；游离或成苷、成酯的形式；成苷位置：主要成苷位置：主要3-、28-（酯苷）；（酯苷）；苷类多溶于水，水溶液振摇会产生持苷类多溶于水，水溶液振摇会产生持久泡沫，故称三萜皂苷；因多含羧基，久泡沫，故称三萜皂苷；因多含羧基，又称酸性皂苷。又称酸性皂苷。甾体皂苷甾体皂苷（Steroidal Saponins）皂苷皂苷（Saponins）三萜皂苷（三萜皂苷（Triterpenoid Saponins）HOHHHCO2HOleanolic acid13
3、579101214161820222324252627283029糖部分：单糖（葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖）、双糖、三糖部分：单糖（葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖）、双糖、三糖，多数为吡喃型糖，多数为吡喃型二、生物活性二、生物活性 三、三萜的生合成与类型三、三萜的生合成与类型三萜是由三萜是由角鲨烯角鲨烯(squalene)经过不同的途径环合而成，而经过不同的途径环合而成，而角鲨烯角鲨烯是由倍半萜金合欢醇是由倍半萜金合欢醇(farnesol)的焦磷酸酯尾尾缩合而成。的焦磷酸酯尾尾缩合而成。OPP焦磷酸香叶酯（焦磷酸香叶酯（GPP）焦磷酸金合欢酯焦磷酸金合欢酯FPP角鲨烯角鲨烯2,3-环氧角鲨
4、烯环氧角鲨烯环化酶环化酶羊毛甾醇羊毛甾醇达玛烷型达玛烷型(dammaranes)HO13101320212526273029281918817HHO13101320212526273029281918羊毛脂烷型羊毛脂烷型（lanostane）13101320212526273029281918817环阿屯烷型（环阿屯烷型（cycloartane）甘遂烷型甘遂烷型(tirucallanes)13101320212526273029281918HH楝烷型楝烷型(meliacanes)1310132021188HH葫芦烷型葫芦烷型(cucurbitane)1310132021252627302928
5、18817HHH齐墩果烷型齐墩果烷型(oleanes)131013188H2830292023242726251517乌苏烷型乌苏烷型 (ursanes)131013188H2830292023242726251517羽扇豆烷型（羽扇豆烷型（lupanes）131013188H283029202324272625151719212213101318H8H283029232427251517212226H木栓烷型木栓烷型(friedelanes)四四环环三三萜萜五五环环三三萜萜7.2 三萜化合物的分类及其代表物三萜化合物的分类及其代表物一、四环三萜（一、四环三萜（monotepenoids）1.
6、达玛烷型三萜达玛烷型三萜(dammaranes)l 四环：四环：6-6-6-5，全反式，全反式，全椅式构象全椅式构象l 8-CH3l 10-CH3l 14-CH3l 13-Hl 17-侧链侧链l 20-位位R或或S构型构型HO13101320212426273029281918817HHHOHHH1.达玛烷型三萜达玛烷型三萜(dammaranes)l20S-原人参三醇皂苷有原人参三醇皂苷有溶血（红细胞破溶血（红细胞破裂，血红蛋白逸出）裂，血红蛋白逸出）作用，而作用，而20S-原人原人参二醇皂苷则对抗溶血作用参二醇皂苷则对抗溶血作用lRb1还有增强还有增强RNA聚合酶的活性，而聚合酶的活性，而R
7、c则有抑制则有抑制RNA聚合酶的活性。聚合酶的活性。lRg1有轻度中枢神经兴奋作用及抗疲劳作有轻度中枢神经兴奋作用及抗疲劳作用，而用，而Rh则有中枢神经抑制作用和安定则有中枢神经抑制作用和安定作用。作用。H8OglcglcHHH1013141720HORO2ginsenoside R Ra1 -glc-6-ara(p)-4-xylRa2 -glc-6-ara(f)-2-xylRb1 -glc-6-glcRb2 -glc-6-ara(p)Rc -glc-6-ara(f)Rd -glcRg1 -H(20R)20(s)-protopanaxadiol五加科植物人参五加科植物人参（Panax gins
8、eng）H8HOOR1HHH1013141720HOR2O20(s)-protopanaxatriolginsenoside R1 R2Re glc-2-rha glcRf glc-2-glc H(20s)l 酸性条件下（酸性条件下（HCl/煮沸），煮沸），20S-原人参二醇（或三醇）可发生差原人参二醇（或三醇）可发生差向异构化，转变成向异构化，转变成20R-原人参二醇（或三醇），再环合生成相应原人参二醇（或三醇），再环合生成相应的人参二醇或人参三醇（三甲基四氢吡喃环侧链）。的人参二醇或人参三醇（三甲基四氢吡喃环侧链）。GlyOH+HOH+OHH+OO20(S)-protopanaxadiol
9、20(S)-protopanaxatriol20(R)-protopanaxadiol20(R)-protopanaxatriol20(R)-panaxadiol20(R)-panaxatriol20(S)-panaxadiol20(S)-panaxatriolH+Smith降解降解HCl/（50%HOAc）HCl/2.羊毛脂烷型三萜羊毛脂烷型三萜（lanostane）HO13101320212526273029281918HOHHHHHHl 四环：四环：6-6-6-5，全反，全反 式，式，全椅式构象全椅式构象l 10-CH3 l 13-CH3l 14-CH3l 8-Hl 17-侧链侧链l 2
10、0R-构型构型l 羊毛甾烷的高度氧化化合物。羊毛甾烷的高度氧化化合物。l 有有C30、C27和和C24三种骨架。三种骨架。补中益气、滋补强壮、补中益气、滋补强壮、扶正固本、延年益寿扶正固本、延年益寿Ganoderma lucidum CO2HOOOHOO3110132026CO2HOOHOO31101320ganoderic acid Clucidenic acid AOOHOO311013Olucidone A3.环阿屯烷型三萜（环阿尔廷环阿屯烷型三萜（环阿尔廷cycloartane）与羊毛脂烷相似，差别仅在与羊毛脂烷相似，差别仅在于于19-位甲基与位甲基与9-位脱氢形成位脱氢形成三元环三元
11、环13101320212526273029281918817H黄芪（黄芪（Astragalus membranaceus）补气强壮之功效补气强壮之功效R1OOOR2OHOR3R1R2R3cycloastragenolHHHastragaloside Ixyl(2,3-diAc)glcHastragaloside Vglc(2-1)xyl-Hglcastragaloside VIIxylglcglcHO13101320212526273029281918H4.甘遂烷型甘遂烷型 三萜三萜(tirucallanes)l 环环 A/B、B/C、C/D均为反式均为反式l 10-CH3,14-CH3l 8
12、-Hl 13-CH3l 17-侧链侧链l 20S-构型构型13101320212526273029281918HHH11OOHOdyvariabilin AOOHdyvariabilin BOOOOHdyvariabilin COO分自巴布亚新几内亚产的民间草药分自巴布亚新几内亚产的民间草药Dysoxylum variabile的的茎皮，后两个对茎皮，后两个对KB细胞有一定的毒性。细胞有一定的毒性。1310132021188HH5.楝烷型三萜楝烷型三萜(meliacanes)l 存在于楝科楝属植物苦楝中，具苦味存在于楝科楝属植物苦楝中，具苦味l 由由26个碳构成，四降三萜。个碳构成，四降三萜。
13、l A/B,B/C,C/D均为反式均为反式l 具有具有 8-CH3，10-CH3，13-CH3l 具有具有14-H。印楝印楝Azadirachta indicaHHOOMeOCOMeOOO1-methoxy-1,2-dihydroepoxyazadione印楝素对昆虫有拒印楝素对昆虫有拒食、干扰产卵、干食、干扰产卵、干扰昆虫变异，使其扰昆虫变异，使其无法蜕变为成虫、无法蜕变为成虫、驱避幼虫及抑制其驱避幼虫及抑制其生长的作用而达到生长的作用而达到杀虫目的杀虫目的 6.葫芦烷型三萜葫芦烷型三萜(cucurbitane)A/B环的取代基和羊毛甾烷环的取代基和羊毛甾烷类型化合物不同，有类型化合物不同，
14、有5-H、10-H，9-CH3，其余与羊其余与羊毛脂烷型结构一样。毛脂烷型结构一样。131013202125262730292818817HHHHO13101320212526273029281918H专利专利200810212740：血胆甲素治疗白血病血胆甲素治疗白血病圆果雪胆圆果雪胆(Hemsleya amabilis)HOHOOOHOROOH雪雪胆胆甲甲素素R R=A Ac c雪雪胆胆乙乙素素R R=H HHHO13101320212526273029281918817HHl原萜烷：达玛烷异构体，原萜烷：达玛烷异构体，二者基本碳骨架相同二者基本碳骨架相同l特征是：特征是：8-CH3、9-
15、H、14-CH3及及17-侧链。侧链。HO13101320212526273029281918817HHH7.原萜烷型三萜（原萜烷型三萜（protostane）Alisma plantago-aquatica OHHOOHHOOHOHOHOHOOHHOOHOOalisol Aalisol Balisol CAlisols A and C有显著降血脂活性有显著降血脂活性 利水渗湿、利水渗湿、泄热通淋泄热通淋 7.2 三萜化合物的分类及其代表物三萜化合物的分类及其代表物二、五环三萜（二、五环三萜（monotepenoids）1.齐墩果齐墩果烷型三萜烷型三萜(oleananes)l 五环：五环：6-
16、6-6-6-6，全椅式构象，全椅式构象l A/B、B/C、C/D均反式，均反式，D/E顺式顺式l 游离，成酯或苷游离，成酯或苷l 8 -CH3、10 -CH3、13-H、14 -CH3l 28-CO2H1310132022262728302925HHHHO172423123456789101112131415161718192021232425262728293022齐 墩 果 烷(oleanane)A/B,B/C,C/D trans,D/E cis有降转氨酶作用，用于治疗急性黄疸型肝炎有降转氨酶作用，用于治疗急性黄疸型肝炎HCO2HHHOoleanolic acid油橄榄油橄榄Olea eu
17、ropaea缓急，润肺，缓急，润肺，解毒，调和诸药解毒，调和诸药甘草甘草Glycyrrhiza uralensis18HO2CHHROO甘草次酸（甘草次酸（glycyrrhetinic acid）具有抗菌及肾上腺皮）具有抗菌及肾上腺皮质激素样作用，临床上用于抗炎（风湿性关节炎、过质激素样作用，临床上用于抗炎（风湿性关节炎、过敏性皮炎）和治疗胃溃疡。敏性皮炎）和治疗胃溃疡。甘草次酸甘草酸乌拉尔甘草皂苷A乌拉尔甘草皂苷B黄甘草皂苷RH-D-gluA2-D-gluA4-D-gluA3-D-gluA2-D-glu A-D-glu A-D-glu A-D-glu A-gluA：葡萄糖醛酸：葡萄糖醛酸2.
18、乌苏烷型三萜（乌苏烷型三萜（ursanes）131013202226272825HHHHHO1724232930与齐墩果烷型的区别与齐墩果烷型的区别仅在于仅在于E-环上是环上是邻碳邻碳二甲基二甲基还是还是同碳二同碳二甲基甲基HHCO2HHHOUrsolic acidA/B,B/C,C/D trans,D/E cisHHH232526272930乌苏烷（ursane)1920HHHHHHCO2HHHOasiatic acidHOOH积雪草（积雪草（Centella asiatica）清热解毒，利湿消肿清热解毒，利湿消肿积雪草酸积雪草酸中药地榆中药地榆(Sanguisorba officinali
19、s)凉血、止血凉血、止血sanguisorbin B and EHHCO2RHAraO地地榆榆皂皂苷苷B B:R R=H H地地榆榆皂皂苷苷E E:R R=3 3-A Ac c-g gl lc c3.羽扇豆烷型（羽扇豆烷型（Lupanes）u E环为五元环：环为五元环：6-6-6-5u A/B,B/C,C/D,D/E均反式均反式u 19-位异丙基位异丙基131013188H2830292023242726251517192122HOHHCH2OH131013188HCO2R22830292023242726251517192122R1OR1=R2=H:23-hydroxybetulinic a
20、cidR1=Ara,R2=H:saponin IR1=AraRha,R2=GlcGlcRha:saponin II264白头翁（白头翁（Pulsatilla chinensis）清热解毒）清热解毒131013188H2830292023242726251517192122GluAOAra4 红树植物红树植物老鼠簕老鼠簕Acanthus ilicifolius 清热解毒，清热解毒，消肿散结消肿散结4.木栓烷型（木栓烷型（Friedelanes）13101318H8H283029232427251517212226H4-位只有一个甲基位只有一个甲基l 4-CH3l 5-CH3l 9-CH3l 14
21、-CH3l 13-CH3由齐墩果烯经甲基移位转变而来由齐墩果烯经甲基移位转变而来HHHH2 32 42 52 62 7HH2 8木 栓 烷齐 墩 果 烯雷公藤（雷公藤（Tripterygium wilfordii）治疗风湿性关节炎治疗风湿性关节炎HCO2HHOtriptergone雷雷公公藤藤酮酮7.3 三萜类化合物的理化性质三萜类化合物的理化性质一、物理性质一、物理性质态态：苷元有较好晶型，而皂苷多为无定形粉末。苷元有较好晶型，而皂苷多为无定形粉末。味味：多数味苦、辛辣，其粉末对人粘膜有强烈刺激性（打喷嚏）。：多数味苦、辛辣，其粉末对人粘膜有强烈刺激性（打喷嚏）。例外：甘草酸：甜味，粘膜刺激
22、弱例外：甘草酸：甜味，粘膜刺激弱吸湿性吸湿性：皂苷具有吸湿性。：皂苷具有吸湿性。二、化学性质二、化学性质 1.颜色反应颜色反应三萜鉴别三萜鉴别 在无水条件下，三萜化合物（苷元和苷）与强无机酸、三氯乙酸在无水条件下，三萜化合物（苷元和苷）与强无机酸、三氯乙酸或或Lewis酸（氯化锌、三氯化铝、三氯化锑）作用，会产生颜色变酸（氯化锌、三氯化铝、三氯化锑）作用，会产生颜色变化或荧光。化或荧光。但全饱和、且但全饱和、且3-位无羟基或羰基的化合物无颜色反应：位无羟基或羰基的化合物无颜色反应：l 醋酐醋酐-浓硫酸（浓硫酸（Liebermann-Burchard）反应：将样品溶于醋酐中，）反应：将样品溶于醋
23、酐中，加硫酸加硫酸-醋酐（醋酐（1：20），可产生），可产生黄黄红红紫紫蓝蓝等颜色变化，最等颜色变化，最后褪色。后褪色。l 氯化锑（氯化锑（Kahlenberg）反应：将样品氯仿或醇溶液点于滤纸上，）反应：将样品氯仿或醇溶液点于滤纸上，喷以喷以20%五氯化锑的氯仿溶液，干燥后五氯化锑的氯仿溶液，干燥后6070加热，显加热，显蓝蓝色、色、灰灰蓝色蓝色、灰紫色灰紫色等多种颜色斑点。等多种颜色斑点。l 三氯醋酸（三氯醋酸（Rosen-Heimer）反应：将样品溶液滴在滤纸上，喷）反应：将样品溶液滴在滤纸上，喷25%三氯醋酸乙醇溶液，加热至三氯醋酸乙醇溶液，加热至100，生成，生成红色红色渐变为渐变为
24、紫色紫色。l 氯仿氯仿-浓硫酸（浓硫酸（Salkowski）反应：样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，）反应：样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在氯仿层呈现在氯仿层呈现红色红色或或蓝色蓝色。l 冰醋酸冰醋酸-乙酰氯（乙酰氯（Tschugaeff）反应：样品溶于冰醋酸中，加乙酰）反应：样品溶于冰醋酸中，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色淡红色或或紫红色紫红色。2.沉淀反应：与胆甾醇或金属盐类沉淀沉淀反应：与胆甾醇或金属盐类沉淀分离皂苷分离皂苷胆甾醇胆甾醇皂苷皂苷乙醚回流乙醚回流 乙醚溶液乙醚溶液 不溶物不溶物可用于纯化皂苷可用于纯化皂苷分子复合物沉淀分子复
25、合物沉淀大多数皂苷水溶液大多数皂苷水溶液胆甾醇胆甾醇(cholesterol)水溶液水溶液l 金属盐沉淀：皂苷的水溶液可和一些金属盐类如铅盐、钡盐、铜金属盐沉淀：皂苷的水溶液可和一些金属盐类如铅盐、钡盐、铜盐等产生沉淀。如：三萜皂苷盐等产生沉淀。如：三萜皂苷+PbAc2沉淀沉淀分解脱铅分解脱铅皂苷皂苷 三萜皂苷为酸性皂苷，可用中性三萜皂苷为酸性皂苷，可用中性PbAc2沉淀（甾体皂苷则为中性皂沉淀（甾体皂苷则为中性皂苷，须用碱性苷，须用碱性Pb(OH)Ac沉淀）。沉淀）。缺点：铅盐吸附力强，容易带入杂质，脱铅时会损失皂苷。缺点：铅盐吸附力强，容易带入杂质，脱铅时会损失皂苷。3.溶血作用溶血作用
26、人参总皂苷：无溶血作用人参总皂苷：无溶血作用原人参三醇及齐墩果酸为苷元的人参皂苷：显著溶血作用原人参三醇及齐墩果酸为苷元的人参皂苷：显著溶血作用原人参二醇为苷元的人参皂苷：抗溶血作用原人参二醇为苷元的人参皂苷：抗溶血作用大多数皂苷的水溶液能破坏红细胞而有溶血作用大多数皂苷的水溶液能破坏红细胞而有溶血作用l 原因：与红细胞壁上胆甾醇生成沉淀。原因：与红细胞壁上胆甾醇生成沉淀。l 皂苷水溶液不能用于静脉注射或肌肉注射。皂苷水溶液不能用于静脉注射或肌肉注射。l 溶血指数：指在一定条件下能使血液中红细胞完全溶解的最低皂溶血指数：指在一定条件下能使血液中红细胞完全溶解的最低皂苷浓度。如甘草皂苷，溶血指数
27、苷浓度。如甘草皂苷，溶血指数1：4000，溶血性能较强。，溶血性能较强。7.4 三萜类化合物的提取分离三萜类化合物的提取分离一、三萜苷元一、三萜苷元有机溶剂提（乙醇、甲醇、氯仿等）有机溶剂提（乙醇、甲醇、氯仿等）u 醇提，提取物直接进行分离醇提，提取物直接进行分离；u 醇提，有机溶剂醇提，有机溶剂（石油醚、氯仿等）萃取；（石油醚、氯仿等）萃取；u 制备成衍生物制备成衍生物（甲酯、乙酰衍生物（甲酯、乙酰衍生物）再进行分离；）再进行分离；u 将皂苷进行水解，有机溶剂将皂苷进行水解，有机溶剂（氯仿等）提取；（氯仿等）提取；硅胶吸附柱层析硅胶吸附柱层析 溶剂系统：石油醚溶剂系统：石油醚氯仿、氯仿氯仿、
28、氯仿乙酸乙酯、氯仿乙酸乙酯、氯仿丙酮、丙酮、氯仿氯仿甲醇等甲醇等石石见见穿穿粗粗粉粉氯氯仿仿提提取取氯氯仿仿提提取取液液浓浓缩缩至至小小体体积积,放放置置,过过滤滤固固体体析析出出物物方方法法(1 1)溶溶于于适适量量甲甲醇醇甲甲醇醇溶溶液液加加少少量量硅硅胶胶拌拌匀匀,加加热热除除去去溶溶剂剂，上上硅硅胶胶柱柱硅硅胶胶柱柱(1 1)环环己己烷烷-乙乙酸酸乙乙酯酯(9 9:1 1)洗洗脱脱除除去去亲亲脂脂性性较较强强成成分分(2 2)环环己己烷烷-乙乙酸酸乙乙酯酯(8 8:2 2)洗洗脱脱T TL LC C检检查查齐齐墩墩果果酸酸部部分分方方法法(2 2)少少量量苯苯洗洗涤涤(除除去去亲亲脂脂
29、性性较较强强成成分分)淡淡黄黄色色固固体体9 95 5%乙乙醇醇溶溶解解(1 1:1 10 00 0)过过滤滤、浓浓缩缩、放放置置齐齐墩墩果果酸酸粗粗品品反反复复重重结结晶晶齐齐墩墩果果酸酸纯纯品品回回收收溶溶剂剂齐齐墩墩果果酸酸粗粗品品9 95 5%乙乙醇醇重重结结晶晶齐齐墩墩果果酸酸纯纯品品u 醇提醇提，石油醚脱脂、正丁醇萃取；，石油醚脱脂、正丁醇萃取；u 醇提醇提，大孔吸附树脂吸附；，大孔吸附树脂吸附；u 醇提醇提，铅盐、胆甾醇沉淀；，铅盐、胆甾醇沉淀；醇醇提提药药材材醇醇提提液液减减压压浓浓缩缩后后,加加适适量量水水，亲亲脂脂性性溶溶剂剂萃萃取取亲亲脂脂性性杂杂质质水水层层正正丁丁醇醇
30、萃萃取取正正丁丁醇醇层层通通过过大大孔孔吸吸附附树树脂脂柱柱，水水:醇醇(极极性性递递减减)洗洗脱脱洗洗脱脱液液蒸蒸干干总总皂皂苷苷3.分离分离（1）硅胶色谱：）硅胶色谱：常用洗脱剂：常用洗脱剂：CHCl3-MeOH-H2O、CH2Cl2-MeOH-H2O、EtOAc-EtOH-H2O、水饱和的、水饱和的n-BuOH 等等分配分配（3）凝胶色谱：）凝胶色谱：常用凝胶：常用凝胶：Sephadex LH-20 常用洗脱剂：常用洗脱剂：MeOH-H2O，氯仿，氯仿-MeOH等等（2）反相硅胶色谱：）反相硅胶色谱：常用填充剂：常用填充剂：RP-18、RP-8 常用洗脱剂：常用洗脱剂：CH3OH-H2O
31、或乙腈或乙腈-水水草玉梅粗粉热MeOHMeOH提取物Diaion HP-20,H2O,10%30%,50%,70%,90%MeOH洗脱70%甲醇洗脱物90%甲醇洗脱物(硅胶)CMH(12:27:0.4)Lichroprep RP-870%甲醇Fr1Fr3Fr4Fr6Fr7HPLCODS-120A67%MeOHHPLCODS-120A67%MeOH硅胶柱CMH(10:5:1)(12:3:0.2)硅胶柱CMHLichroprepRP-890%甲醇硅胶柱EMH(12:2:1)HPLCODS-120A87%MeOHHPLC(9:5:1)皂苷123456CMH=CHCl3-MeOH-H2OEMH=EtO
32、Ac-MeOH-H2OR1OCH2R3COOR2R1R2R31ara-rha-ribglc-glc-rhaOH2ara-rha-ribglc-glc-rhaHHHHOH3456xyl-rha-ribara-rha-ribxyl-rha-ribara-rha-ribglc-glc-rhaHHH7.5 三萜类化合物的结构测定三萜类化合物的结构测定先确定是否为三萜皂苷：先确定是否为三萜皂苷：Liebemman-Burchard和和Molish反应反应再确定苷元再确定苷元 （结构类型、取代基、立体构型等）：（结构类型、取代基、立体构型等）：波谱方法、化学方法（氧化、还原、波谱方法、化学方法（氧化、还原
33、、脱水、乙酰化、甲酯化等脱水、乙酰化、甲酯化等）最后确定糖（种类及连接顺序、连接位置）：最后确定糖（种类及连接顺序、连接位置）：水解，用水解，用TLC对照、对照、HPLC、GC-MS等鉴定水解产物。等鉴定水解产物。结构测定的一般步骤：结构测定的一般步骤：孤立双键孤立双键 205-250 nm,-不饱和羰基不饱和羰基 242-250nm异环共轭双烯异环共轭双烯240，250，260nm同环共轭双烯同环共轭双烯285nm11-oxo，12-齐墩果烯型化合物：齐墩果烯型化合物：18-H 248 249nm 18-H 242 243nm（判断（判断18-H构型）构型）1112孤孤立立双双键键205-2
34、50nmO 不不饱饱和和羰羰基基2 24 42 2-2 25 50 0n nm m同同环环共共轭轭2 28 85 5n nm m异异环环共共轭轭240,250,260 n nm mA 2（1392-1379、1370-1355 cm-1）；）；B 3（1330-1315、1306-1299、1269-1250 cm-1）齐墩果烷齐墩果烷A 3（1392-1386、1383-1370、1364-1359 cm-1）；）；B 3（1312-1308、1276-1270、1250-1245 cm-1）乌苏烷乌苏烷A 1；B 1 四环三萜四环三萜1.确定确定骨架骨架：A区（区（1355-1392 cm
35、-1）和和B区区(1245-1330 cm-1）的碳氢吸收来区别齐墩果烷、乌苏烷和四环三萜。的碳氢吸收来区别齐墩果烷、乌苏烷和四环三萜。2.判断官能团判断官能团11-C=O为为,-不饱和羰基时不饱和羰基时:1600 1605cm-1(C=C)1673 1679cm-1(C=O)C=O：1700-1800 cm-1l 1oOH：3640-3641cm-1，l 2oOH：3623-3630cm-1a键：键：3625-3628 cm-1 e键：键：3623-3630cm-1 分子离子峰分子离子峰碎片峰碎片峰分子量，分子式（分子量，分子式（高分辨质谱）高分辨质谱）骨架及取代基（种类、骨架及取代基（种类
36、、位置和数目）位置和数目）1.三萜苷元三萜苷元 EI-MS（电子轰击质谱）（电子轰击质谱）RDA裂解裂解 麦氏重排麦氏重排 2.皂苷类（因难挥发，皂苷类（因难挥发，EI受限制）受限制）FD-MS(场解析质谱场解析质谱)FAB-MS(快原子轰击质谱快原子轰击质谱)ESI-MS(电喷雾质谱电喷雾质谱)LD-TOF-MS(激光解析飞行时间质谱激光解析飞行时间质谱)1.1 12齐墩果烯类齐墩果烯类RDA裂解裂解HOCOOHRDAHO+COOH+-COOHa1,m/e 203+a3,m/e 133a,m/e 248(100)+a2,m/e 189HOb-18,m/e 190+b-1,m/e 207-H2
37、O-H+b-19,m/e 189-H2Ob,m/e 208+.+.+.+.+.+.M+m/z 456b m/z 208a m/z 248(100)a1 m/z 203b-1 m/z 207b-18 m/z 190b-19 m/z 1891.2 11-氧氧-12-齐墩果烯类齐墩果烯类RDA裂解裂解和麦氏重排和麦氏重排OHOHOM+m/z 440m/z 232m/z 2732.1 皂苷的皂苷的FAB-MS 准分子离子峰（准分子离子峰（Quasi-molecular ion peaks）positive:M+K+、M+Na+、M+H+negative:M-H-碎片峰：碎片峰：从外到内逐一失去糖基从外
38、到内逐一失去糖基 M-n糖基糖基HOCOOOOHOHOHOHOOOHOHOOHOHOHCH3941 M-H-795 M-H-146-633 M-H-143-162-471 M-H-143-162-162-OOHOHOOHOHCCH2OHOOOHOOHOHOOHOHOOHOHHHHHOH3CM-H-M-H-2glc-Note:酯苷键比较容易断裂酯苷键比较容易断裂1.1H NMRCH3及其他脂肪氢及其他脂肪氢 0.62.0 3.2 5.5 4.3 6.0（1）CH3：0.61.5 ppm，s或者或者d 齐墩果烷型：齐墩果烷型：6-8个单峰甲基；个单峰甲基；木栓烷型：木栓烷型：1个双峰甲基个双峰甲基
39、 乌苏烷型：乌苏烷型：2个不同双峰甲基（个不同双峰甲基（29,30-CH3,J 6.0Hz）羽扇豆烷型：羽扇豆烷型：2个相同双峰甲基（个相同双峰甲基（29,30-CH3,J 6.0Hz）四环三萜：四环三萜：3个双峰甲基个双峰甲基CH3CO:1.8-2.1 sCOOCH3:3.6 sC=C-CH3:1.6-1.8，brs（羽扇豆烯型（羽扇豆烯型 30-CH3）13101318H8H283029232427251517212226HHO13101320212526273029281918817HHO13101320212526273029281918131013202125262730292819
40、18817(2)O-CH：3.2 5.5 HOCH:3.2 4.0 AcOCH:4.0 5.5(3)CHCH：4.3 6.0 环内双键环内双键:5 环外双键环外双键:5识别构型识别构型HOCH3HOCH3HOCH3 4.9-5.5HOCH3O 5.5 5.5-5.6,2H,d 6.4-6.8 5.4-5.6判断取代情况判断取代情况a-bond,位阻位阻高场高场 糖端基氢糖端基氢:4.3 5.5；6.1 6.3(酯苷酯苷端基氢端基氢)甲基五碳糖甲基五碳糖CH3:1.4 1.8（d,5.57.0）糖其他氢糖其他氢:3.2 4.2 (4)皂苷皂苷（糖）（糖）CH=C 5.25 brsGlc 其它其它H苷元上苷元上O-CH7个个CH3,sGlc-1 5.13(d,8.0)OHOOHGlcCH2OH2.13C NMR
