1、 实验三实验三 王王 新新 花花实验三血栓与止血、骨髓细胞形态学检查实验三血栓与止血、骨髓细胞形态学检查实实验目的:验目的:1.1.掌握掌握PTPT、APTTAPTT、TTTT、原理、参考值及临、原理、参考值及临床意义。床意义。2.2.掌握增生性贫血骨髓像特点。掌握增生性贫血骨髓像特点。3.3.了解正常骨髓像特点。了解正常骨髓像特点。4.4.了解急性白血病分型及骨髓像特点。了解急性白血病分型及骨髓像特点。实验原理实验原理:PT:PT、APTTAPTT、TTTT。问题问题:缺铁性贫血或巨幼红细胞性贫血血象、骨缺铁性贫血或巨幼红细胞性贫血血象、骨 髓象特点?髓象特点?内容 一、止血、凝血和纤溶的机
2、制一、止血、凝血和纤溶的机制二、血小板检测的临床意义二、血小板检测的临床意义三、凝血系统检查三、凝血系统检查四、四、纤维蛋白溶解系统的作用纤维蛋白溶解系统的作用五、五、血凝仪的简况介绍血凝仪的简况介绍 六、正常六、正常M、B象。象。七、白血病七、白血病M、B象。象。八、贫血八、贫血M、B象。象。一、止血、凝血和纤溶的机制正常人具有复杂而完整止血机制正常人具有复杂而完整止血机制,主要依赖主要依赖:1)1)血管壁的结构和功能;血管壁的结构和功能;2)2)血小板的质量和数量;血小板的质量和数量;3)3)血浆凝血因子活性血浆凝血因子活性;4)4)健全神经体液调节。健全神经体液调节。血管、血小板、凝血因
3、子、纤溶素、血浆抑血管、血小板、凝血因子、纤溶素、血浆抑制物等正常情况处于静息状态,一旦有出制物等正常情况处于静息状态,一旦有出血发生,几秒内就可激活,并通过血管收血发生,几秒内就可激活,并通过血管收缩,血小板血栓和纤维蛋白的形成来完成缩,血小板血栓和纤维蛋白的形成来完成止血过程。止血过程。一期止血一期止血 P 84 BT PLt二期 P85二、血小板的作用 当血管受损时,血小板迅速黏附于暴露的胶原组织,发生粘附、变形、释放等反应。激活的血小板可释放5-羟色胺和ADP等物质,进一步加速血小板的变性,聚集,成为不可逆的第二相聚集,形成白色血栓,构成初期止血屏障。如血小板数量少、质量差会造成出血、
4、止血功能障碍。操作 在清洁试管中加入稀释液在清洁试管中加入稀释液0.99ml0.99ml。耳垂、指端血耳垂、指端血10ul,10ul,擦去管外血液擦去管外血液,置于血小置于血小板稀释液内板稀释液内,立即混匀,室温下立即混匀,室温下3-53-5分钟。分钟。取血小板悬液一滴取血小板悬液一滴,加至计数池内静止加至计数池内静止10-1510-15分钟,分钟,使血小板下沉。使血小板下沉。用用40 x40 x计数中央大方计数中央大方:四角四角+中间中间=5=5个中方格的血小个中方格的血小板数板数,将数得的总数(将数得的总数(T T)乘以)乘以50005000即为每即为每ulul血的血的血小板数血小板数,再
5、乘以再乘以10106 6得每升血中血小板数。得每升血中血小板数。(即(即T T5 510109 9/L/L)。)。报告:报告:PLT:?PLT:?10109 9/L/L计数板3mm计数板3 m mR R RR R意义:参考值(100300)109/L 生理性生理性:正常人晨低正常人晨低,午后高午后高,春高冬低,静脉春高冬低,静脉 毛细毛细血管血管,月经早期低月经早期低,妊娠中晚期高妊娠中晚期高,娩后低。娩后低。病理性:病理性:血小板血小板 40040010109 9/L/L称增多称增多。1.1.反应性增多反应性增多:急性出血、急性溶血、急性化脓感染;急性出血、急性溶血、急性化脓感染;2.2.原
6、发血小板增多原发血小板增多:骨髓增生性疾病、慢粒白血病;真性红细胞增多症;骨髓增生性疾病、慢粒白血病;真性红细胞增多症;脾切除。脾切除。血小板血小板10010010109 9/L/L称减少称减少,500.5mg/L0.5mg/L,则胶乳颗粒发生凝,则胶乳颗粒发生凝集反应。集反应。参考值参考值 胶胶 乳乳 凝凝 集集 法法 为为 阴阴 性。性。临床意义临床意义 D-dD-d:是纤溶酶作用于交联纤维蛋白的特异性分子是纤溶酶作用于交联纤维蛋白的特异性分子标记物,标记物,在继发性纤溶时,阳性在继发性纤溶时,阳性或增高,而在或增高,而在原发性纤溶时不增高原发性纤溶时不增高,是鉴别二者的重要指标。,是鉴别
7、二者的重要指标。五、血凝仪的简况介绍:早期使用血凝仪采用凝固法(凝固法据检测原理早期使用血凝仪采用凝固法(凝固法据检测原理的不同又分为光学法、磁珠法和电流法)进行测的不同又分为光学法、磁珠法和电流法)进行测定,仪器的检测项目也比较有限,随着免疫学方定,仪器的检测项目也比较有限,随着免疫学方法(主要是免疫比浊法)和发色底物法的应用,法(主要是免疫比浊法)和发色底物法的应用,血凝仪的检测项目大大增加。血凝仪的检测项目大大增加。免疫比浊法用于:免疫比浊法用于:FDPFDP、D-D-二聚体和二聚体和AT-AT-测定。测定。发色底物法可用于发色底物法可用于AT-AT-、蛋白、蛋白C C和纤溶酶原等项和纤
8、溶酶原等项目的测定。凝固法、免疫比浊法和发色底物法的目的测定。凝固法、免疫比浊法和发色底物法的联合应用使血凝仪不仅可用于临床的常规检测,联合应用使血凝仪不仅可用于临床的常规检测,同时也为研究新的实验指标在止血、血栓性疾病同时也为研究新的实验指标在止血、血栓性疾病中的应用提供了有利条件。中的应用提供了有利条件。名称参与途径*纤维蛋白共同*凝血酶原共同*组织因子外源*钙离子易变因子共同*抗血友病球蛋白内源*Christmas因子内源Stuart-Prower共同*血浆凝血活酶前质内源接触因子内源纤维蛋白稳定因子共同 因子因子 激肽释放酶原;高分子激肽原激肽释放酶原;高分子激肽原依赖因子个:依赖因子个:凝血因子名称和特性14个