1、实验 诊断临床常用免疫学检查 第一第一三节三节 免疫功能检测免疫功能检测 免疫功能免疫功能:体液免疫(体液免疫(Ig、C3)细胞免疫细胞免疫(自学自学)免疫球蛋白免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)一组具有一组具有 活性或抗体样结构的蛋白质活性或抗体样结构的蛋白质 由由 合成和分泌,合成和分泌,存在于机体存在于机体 、组织液和外分泌液中,、组织液和外分泌液中,是检查机体是检查机体 免疫功能的重要指标。免疫功能的重要指标。Ig临床意义临床意义1 Ig增高增高 (1)多克隆性:多种)多克隆性:多种Ig同时增高,同时增高,各种慢性感染、肝病、各种慢性感染、肝病、SLE等。等。(2)单克隆
2、性)单克隆性:仅一种仅一种Ig增高。增高。MM(3)IgE增高增高:型变态反应性疾病;寄生虫感染。型变态反应性疾病;寄生虫感染。破坏骨质破坏骨质 (X线、高钙血症)线、高钙血症)抑制红系生成抑制红系生成 (Hb:)抑制粒系生成抑制粒系生成 (WBC:N/)抑制血小板生成抑制血小板生成 (BPC:N/)大量单克隆大量单克隆Ig (Ig、电泳、电泳 ESR)轻链从肾脏滤过轻链从肾脏滤过 (蛋白尿、血尿)(蛋白尿、血尿)骨髓内浆细胞恶性增生骨髓内浆细胞恶性增生 患者唐某,男,患者唐某,男,5050岁岁.因全身不适,乏力,因全身不适,乏力,严重贫血于严重贫血于1 1月月2828日入院。日入院。骨髓像提
3、示骨髓像提示:浆细胞增生活跃浆细胞增生活跃.血清蛋白电泳血清蛋白电泳:63.9%:63.9%,主要是,主要是M M带。带。免疫球蛋白免疫球蛋白:IgG:IgG为为3.69g/L3.69g/L,IgAIgA为为9.76g/L9.76g/L,IgMIgM为为0.44g/L.0.44g/L.诊断为多发性骨髓瘤诊断为多发性骨髓瘤(IgA(IgA型型),第七节 C-反应蛋白 C-reactive protein,CRP第四节 肿瘤标志物检查AFP阴性原发性肝癌和小肝癌,70%以上血沉:45mm1h。(继:正常)CRP与ASO、RF联合检测(风湿三项),脸颊出现红斑,关节周围未见风湿结节。第六节 感染免疫
4、检测(ASO)(继:正常)抗DNA抗体(anti-DNA antibody)免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)作用:-(两面性)一组具有 活性或抗体样结构的蛋白质筛查试验敏感性高,确认试验阳性才能确认 合成降低:如慢性肝病 消耗:自身免疫性疾病76g/L,IgM为0.破坏骨质 (X线、高钙血症)针对真核细胞核成分的自身抗体总称。体液免疫(Ig、C3)Ig临床意义临床意义2 Ig降低降低(1)原发性)原发性 体液免疫缺陷和联合免疫缺陷病。体液免疫缺陷和联合免疫缺陷病。(2)继发性)继发性 :免疫抑制剂、放射线照射;免疫抑制剂、放射线照射;大量丢失大量丢失:肾病综合征、大面积烧伤等;
5、肾病综合征、大面积烧伤等;(3)新生儿和婴幼儿)新生儿和婴幼儿 :较低:较低 补体补体(complement,C)概念:概念:-组成:组成:-作用:作用:-(-(两面性两面性)补体补体C3(complement C3,C3)肝脏肝脏合成,含量最多。合成,含量最多。是经典是经典旁路途径被激活的关键物质旁路途径被激活的关键物质 比总补体活性更敏感。比总补体活性更敏感。补体补体C3 降低:降低:原料不足原料不足:如营养不良;如营养不良;合成降低合成降低:如慢性肝病如慢性肝病 消耗消耗:自身免疫性疾病自身免疫性疾病 丢失:大面积烧伤等;丢失:大面积烧伤等;先天性:遗传性先天性:遗传性C3缺乏症。缺乏症
6、。第四节第四节 肿瘤标志物检查肿瘤标志物检查1.1.甲胎蛋白(甲胎蛋白(AFPAFP)测定)测定1.1.甲胎蛋白(甲胎蛋白(AFPAFP)测定)测定 AFP是胎儿性蛋白。当肝细胞或生殖腺胚胎组织恶变时有关基因重新被激活致血AFP明显升高。(1 1)原发性肝癌)原发性肝癌 如果持续如果持续500500g/Lg/L,ALTALT基本正常,提示肝癌基本正常,提示肝癌 AFPAFP上升可在影像学诊断之前上升可在影像学诊断之前 手术放化疗有效:手术放化疗有效:若复发若复发 AFPAFP广泛用于普查广泛用于普查(早于症状出现(早于症状出现811月)月)(继:正常)(继:正常)约约10%10%患者患者AFP
7、AFP阴性阴性(2 2)良性肝病:肝炎、肝硬化)良性肝病:肝炎、肝硬化 ,95%95%200200g/Lg/L,一过性,与,一过性,与ALTALT同步同步(3 3)生殖腺胚胎癌:睾丸癌、卵巢癌等)生殖腺胚胎癌:睾丸癌、卵巢癌等(4 4)妊娠:)妊娠:正常:正常:3-43-4月后月后 ,7-87-8月高峰月高峰,但但300300g/Lg/L 异常异常 :提示胎儿神经管畸形。:提示胎儿神经管畸形。2.-L-岩藻糖苷酶岩藻糖苷酶(AFU)参与体内含岩藻糖苷的糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢参与体内含岩藻糖苷的糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢 在原发性肝癌明显升高,阳性率在原发性肝癌明显升高,阳性率81.2%81.2
8、%。AFPAFP阴性原发性肝癌和小肝癌,阴性原发性肝癌和小肝癌,70%70%以上以上与与AFPAFP联合检测联合检测并非特异并非特异破坏骨质 (X线、高钙血症)3观察风湿热、SLE、RA等疾病是否活动期CRP与ASO、RF联合检测(风湿三项),2细菌性/病毒性。消耗:自身免疫性疾病补体(complement,C)约10%患者AFP阴性患者唐某,男,50岁.因全身不适,乏力,严重贫血于1月28日入院。筛查试验敏感性高,确认试验阳性才能确认(3)ANA、抗ds-DNA、抗ENAASO 160。(3)新生儿和婴幼儿 :较低正常:3-4月后,7-8月高峰,但300g/L 异常:提示胎儿神经管畸形。免疫
9、抑制剂、放射线照射;抗双链DNA(double stranded DNA,ds-DNA)。一组具有 活性或抗体样结构的蛋白质阳性率2540。同时检测抗dsDNA和抗Sm抗体。链球菌溶血素O、链激酶、透明质酸酶等。体液免疫(Ig、C3)3.癌胚抗原(癌胚抗原(CEA):):胎儿性蛋白胎儿性蛋白 广谱,无鉴别价值,广谱,无鉴别价值,结、直肠癌首选指标。结、直肠癌首选指标。治疗监测和预后判断治疗监测和预后判断 结肠炎、结肠炎、-。少数吸烟者轻度升高。少数吸烟者轻度升高。4.4.前列腺特异抗原前列腺特异抗原(prostate specific antigen,PSA)前列腺腺泡及管道上皮合成,分泌到精
10、液前列腺腺泡及管道上皮合成,分泌到精液 前列腺癌辅助诊断、疗效、复发,筛查。前列腺癌辅助诊断、疗效、复发,筛查。可与可与前列腺酸性磷酸酶前列腺酸性磷酸酶同时检测。同时检测。良性前列腺良性前列腺-注:前列腺按摩、导尿等后,可升高。注:前列腺按摩、导尿等后,可升高。其他肿瘤标志物其他肿瘤标志物:糖链抗原糖链抗原19-9(CA19-9)胰腺癌胰腺癌 胆囊癌胆囊癌 癌抗原癌抗原125(CA125)卵巢癌卵巢癌 癌抗原癌抗原15-3(CA15-3)乳腺癌乳腺癌 神经元特异性烯醇化酶神经元特异性烯醇化酶 小细胞肺癌小细胞肺癌第五节第五节 自身抗体自身抗体(RF、ANA、抗、抗dsDNA)自身抗体产生自身抗
11、体产生:自身免疫耐受自身免疫耐受Self-tolerance:自身免疫自身免疫Autoimmunity:自身免疫病自身免疫病Autoimmune disease,AID 类风湿关节炎(类风湿关节炎(RA)以手脚小关节发病,以手脚小关节发病,血清和关节滑膜液中血清和关节滑膜液中 类风湿因子类风湿因子一、类风湿因子一、类风湿因子(rheumatoid factor,RF)感染微生物或寄生虫可能使自身感染微生物或寄生虫可能使自身IgGIgG变性。变性。用于类风湿性关节炎辅助诊断。用于类风湿性关节炎辅助诊断。阳性率阳性率7070。RFRF滴度可判断滴度可判断RARA活动性。活动性。特异性不高。特异性不
12、高。某些感染,如某些感染,如-、流感、寄生虫病等;、流感、寄生虫病等;恶性肿瘤、老年人可阳性。恶性肿瘤、老年人可阳性。RA其他检查其他检查:抗核周因子抗体抗核周因子抗体 抗角蛋白抗体抗角蛋白抗体 抗环瓜氨酸肽抗体抗环瓜氨酸肽抗体 抗角蛋白抗体抗角蛋白抗体谱谱二、抗核抗体谱二、抗核抗体谱 1.抗核抗体抗核抗体(anti-nuclear antibodies,ANA)2.抗抗DNA抗体抗体(anti-DNA antibody)抗双链抗双链DNA(double stranded DNA,ds-DNA)。3.可提取性核抗原多肽抗体谱(可提取性核抗原多肽抗体谱(ENA)测定)测定1.抗核抗体抗核抗体 针
13、对真核细胞针对真核细胞核成分核成分的自身抗体的自身抗体总称总称。特异性低,不作为鉴别指标,特异性低,不作为鉴别指标,筛选自身免疫病的主要试验。筛选自身免疫病的主要试验。是检查机体 免疫功能的重要指标。AFP上升可在影像学诊断之前由 合成和分泌,作用:-(两面性)抑制粒系生成 (WBC:N/)(3)ANA、抗ds-DNA、抗ENA一组具有 活性或抗体样结构的蛋白质风湿热病人,CRP增高、血沉加快、白细胞增多,考虑风湿活动。95%200g/L,一过性,与ALT同步3观察风湿热、SLE、RA等疾病是否活动期CRP与ASO、RF联合检测(风湿三项),抗核抗体(anti-nuclear antibodi
14、es,ANA)针对真核细胞核成分的自身抗体总称。第六节 感染免疫检测(ASO)69g/L,IgA为9.手术放化疗有效:若复发不规则低热数月,伴疲倦,体重下降,指、腕和膝关节疼痛(关节无明显肿胀);各种慢性感染、肝病、SLE等。是经典旁路途径被激活的关键物质ASO 160。同时检测抗dsDNA和抗Sm抗体。由 合成和分泌,因全身不适,乏力,严重贫血于1月28日入院。95%200g/L,一过性,与ALT同步 如果持续500g/L,ALT基本正常,提示肝癌因全身不适,乏力,严重贫血于1月28日入院。76g/L,IgM为0.阳性率2540。69g/L,IgA为9.SLE特异性标志之一,特异性99;免疫
15、球蛋白(immunoglobulin,Ig)免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)由 合成和分泌,各种慢性感染、肝病、SLE等。作用:-(两面性)破坏骨质 (X线、高钙血症)(3)ANA、抗ds-DNA、抗ENA因全身不适,乏力,严重贫血于1月28日入院。AFP上升可在影像学诊断之前-L-岩藻糖苷酶(AFU)机会性感染病原体检测1CRP是急性时相反应的极灵敏指标。抗抗ds-DNA抗体:抗体:对对SLE很高特异性,区分很高特异性,区分SLE和其他。和其他。活动期活动期SLE效价较高效价较高2.抗抗DNA抗体抗体(anti-DNA antibody)3.抗可提取核抗原(抗可提取核抗原(E
16、NA)抗体)抗体 抗抗Sm抗体:抗体:SLE特异性标志之一,特异性特异性标志之一,特异性99;阳性率阳性率2540。同时检测抗同时检测抗dsDNA和抗和抗Sm抗体。抗体。SLE辅助检验项目辅助检验项目(1 1)血常规:)血常规:(2 2)血沉:)血沉:(3 3)ANAANA、抗、抗ds-DNAds-DNA、抗、抗ENAENA(4 4)补体:)补体:(5 5)CRPCRP:(6 6)肾脏病理活检:)肾脏病理活检:(7 7)尿常规:)尿常规:第六节第六节 感染免疫检测(感染免疫检测(ASO)血清抗链球菌溶血素血清抗链球菌溶血素“O”O”测定测定 (anti-streptolysin“O”,抗,抗O
17、或或ASO)A群溶血性链球菌产生群溶血性链球菌产生 链球菌溶血素链球菌溶血素O、链激酶、透明质酸酶等。、链激酶、透明质酸酶等。检测相应抗体检测相应抗体 ASO应用最广应用最广血清抗链球菌溶血素血清抗链球菌溶血素“O”O”测定测定 常用于常用于风湿热风湿热和急性肾小球肾炎辅助诊断和急性肾小球肾炎辅助诊断 感染感染23周后,开始升高,持续数月到半年周后,开始升高,持续数月到半年 故一次结果偏高,不一定近期感染故一次结果偏高,不一定近期感染 风湿热病人风湿热病人,CRP增高、血沉加快、白细增高、血沉加快、白细胞增多,考虑风湿活动胞增多,考虑风湿活动。患者患者,女,女,19岁。不规则低热数月,伴疲倦,
18、体岁。不规则低热数月,伴疲倦,体重下降,指、腕和膝关节疼痛(关节无明显肿胀重下降,指、腕和膝关节疼痛(关节无明显肿胀);脸颊出现红斑,关节周围未见风湿结节。);脸颊出现红斑,关节周围未见风湿结节。血血RT:RBC 3.01012L,Hb 92gL,WBC 4.2109L,N 68%,L 32%,PLT 170109L。红细胞形态正常。红细胞形态正常。血沉血沉:45mm1h。免疫学检查免疫学检查:RF+,ANA+,抗,抗ds-DNA+,ASO 160。艾滋病病毒抗体艾滋病病毒抗体检查检查 筛查试验敏感性高,确认试验阳性才能确认筛查试验敏感性高,确认试验阳性才能确认 窗口期窗口期13个月个月。其他
19、检查其他检查:CD4、CD8、CD4/CD8 机会性感染病原体检测机会性感染病原体检测 某男某男,发热、剧烈腹泻,发热、剧烈腹泻20余天,近期表现余天,近期表现为反复感染、消瘦、衰竭,有输血史。为反复感染、消瘦、衰竭,有输血史。血液常规检查淋巴细胞绝对值降低,粪便血液常规检查淋巴细胞绝对值降低,粪便检验发现隐孢子虫检验发现隐孢子虫 继续进行继续进行 _检查对检查对疾病诊断疾病诊断更有必要更有必要 A.血培养血培养 B.电解质检验电解质检验 C.结肠镜检查结肠镜检查 D.HIV抗体检查抗体检查 癌抗原15-3(CA15-3)乳腺癌 合成降低:如慢性肝病第四节 肿瘤标志物检查甲胎蛋白(AFP)测定
20、SLE特异性标志之一,特异性99;免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)前列腺腺泡及管道上皮合成,分泌到精液抗核抗体(anti-nuclear antibodies,ANA)作用:-(两面性)破坏骨质 (X线、高钙血症)(1)多克隆性:多种Ig同时增高,甲胎蛋白(AFP)测定用于类风湿性关节炎辅助诊断。破坏骨质 (X线、高钙血症)筛查试验敏感性高,确认试验阳性才能确认破坏骨质 (X线、高钙血症)丢失:大面积烧伤等;抗DNA抗体(anti-DNA antibody)95%200g/L,一过性,与ALT同步因全身不适,乏力,严重贫血于1月28日入院。手术放化疗有效:若复发自身抗体产生:由
21、 合成和分泌,SLE特异性标志之一,特异性99;筛查试验敏感性高,确认试验阳性才能确认2细菌性/病毒性。免疫学检查:RF+,ANA+,抗ds-DNA+,筛选自身免疫病的主要试验。69g/L,IgA为9.破坏骨质 (X线、高钙血症)约10%患者AFP阴性 AFP广泛用于普查(早于症状出现811月)特异性低,不作为鉴别指标,(1)原发性肝癌76g/L,IgM为0.消耗:自身免疫性疾病各种慢性感染、肝病、SLE等。抗可提取核抗原(ENA)抗体95%200g/L,一过性,与ALT同步癌抗原15-3(CA15-3)乳腺癌因全身不适,乏力,严重贫血于1月28日入院。丢失:大面积烧伤等;血清抗链球菌溶血素“O”测定第七节第七节 C-C-反应蛋白反应蛋白 C-reactive protein,CRP 1CRP是是急性时相反应急性时相反应的极灵敏指标的极灵敏指标。组织损组织损伤和炎症,伤和炎症,非特异性非特异性,评估严重性评估严重性 2细菌性细菌性/病毒性。病毒性。3观察风湿热、观察风湿热、SLE、RA等疾病是否等疾病是否活动期活动期 4.CRP与与ASO、RF联合检测(联合检测(风湿三项风湿三项),),鉴别风湿热与鉴别风湿热与RA。