致病性检验临床微生物学-课件.ppt

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1、2023-1-111致病性球菌w 葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌w 表皮葡萄球菌w 链球菌属 链球菌w 肺炎链球菌w 奈瑟菌属 脑膜炎奈瑟菌w 淋病奈瑟菌2023-1-112 肺炎链球菌(S.pneumoniae)属链球菌科,链球菌属。广泛分布于自然界,主要寄生于人类上呼吸道,多数不致病。2023-1-113l1形态结构l2培养特性l3生化反应 l4抗原结构l5抵抗力特点 l6.变异性2023-1-1141.形态结构w G+,呈矛尖状,成双排列,标本或液体培养中成链状。w 有荚膜,无鞭毛,不形成芽胞。2023-1-1152023-1-1162.培养特性w 营养要求较高,含血液或血清的培养基中生长。

2、w 兼性厌氧,C02 5-10%生长最好。w 溶血性菌落周围有草绿色溶血环。w 液体培养基中培养24h,呈均匀混浊,后期因产生自溶而变得澄清 2023-1-1173生化反应 w 可分解多种糖类,产酸不产气。w 胆汁溶解试验阳性:加入胆汁或10%去氧胆酸钠,37.,5-10min,激活本菌的自溶酶,出现溶菌现象。2023-1-1182023-1-119w Optochin敏感试验阳性:单个菌落涂于血平板上,用optochin纸片贴于接种区中央,35需氧培养过夜,抑菌圈 18mm。2023-1-11102023-1-11114抗原结构w 荚膜多糖抗原:多糖抗原,型特异性,共85型,型引起大叶性肺炎

3、。w 菌体种属特异性抗原:多糖抗原,存在于细胞壁,称C多糖。在钙离子存在时,C多糖可与正常人血清中称为C-反应蛋白(C reactive protein,CRP)的球蛋白结合,发生沉淀。2023-1-11125抵抗力特点 较弱,加热56,20min即死亡。对一般消毒剂敏感,对干燥抵抗力较强。2023-1-11136.变异性 w 荚膜变异:有荚的光滑(S)型菌有毒力,失去荚膜的粗糙(R)型毒力减低或消失。2023-1-1114w 20、把小鼠随机分成两组,进行肺炎球菌荚膜形成试验,分别将两株细菌接种于不同组动物腹腔(每组接种一株细菌)。12小时后杀死小鼠解剖,取腹腔作荚膜染色试验。结果有一组只有

4、少量细菌,且未见荚膜主要原因是什么?w A、动物对细菌不敏感 B、染色试剂不合标准 C、细菌毒力发生了变异w D、采标本时间过早2023-1-1115二、致病性1致病物质2所致疾病2023-1-11161.致病物质w 荚膜:肺炎球菌的致病力,主要是荚膜的抗吞噬作用。w 溶血毒素“O”:自溶后释放,能溶解人和动物的红细胞,高浓度对动物有坏死及致死作用。2023-1-11172.所致疾病 w 存在于正常人上呼吸道。w 仅在人体抵抗力下降时才引起疾病。如大叶性肺炎,支气管炎等。2023-1-1118三、微生物学检验(一)标本采集 痰、脓液、血液等。2023-1-1119(二)检验方法及鉴定 1.直接

5、涂片 革兰氏色染色,荚膜染色2023-1-11202.分离培养。胆汁溶菌试验。菊糖发酵。Optochin试验。与草绿色链球菌鉴别2023-1-11213.小鼠毒力试验 有毒力的菌株,接种后12-36h,死亡。2023-1-1122第四节 奈瑟菌属(neisseria)2023-1-1123w 为一群G-双球菌,严格寄生菌,人是自然宿主w 主 要 致 病 菌 是 脑 膜 炎 球 菌(merningococcus)和淋病球菌(gonorrhoeae)2023-1-1124一、脑膜炎球菌即脑膜炎奈瑟菌,是流行性脑脊髓膜炎的病原体 2023-1-1125(一)、生物学性状w 1形态结构w 2培养特性w

6、 3生化反应w 4.抗原结构w 5.抵抗力特点2023-1-11261形态结构w G-,肾形成双排列w 在患者脑脊液标本中位于中性粒细胞内w 无芽胞、无鞭毛,具有荚膜、菌毛。2023-1-11272培养特性w 营养要求高,必须在含有血清或多种氨基酸、无机盐的培养基上生长良好。w 血平板:半透明,灰褐色,圆形,湿润光滑露滴样菌落。w 易自溶。2023-1-1128w 巧克力平板,蓝灰色,半透明,光滑湿润的菌落。w 卵黄双抗(EPV)平板:为无色,光滑湿润的菌落。w 血清肉汤:呈微混浊。2023-1-11293.生化反应w 分解葡萄糖、麦芽糖w 硝酸盐还原反应阴性,不分解尿素w 氧化酶试验阳性20

7、23-1-11304.抗原结构w 可分9个血清群,对人致病的主要试A群2023-1-11315抵抗力特点w 对寒冷、光、热力,干燥等十分敏感。室温3h,60 5min死亡。w 采集标本:注意保温迅速送检。w 对磺胺类、青霉素、链霉素均敏感。2023-1-1132w 12、对脑膜炎奈瑟氏菌的标本采送,哪一种是错误的?w A、低温 B、保温w C、防干燥 D、快速2023-1-1133(二)、致病性与免疫性w1致病物质w2所致疾病w3.免疫性2023-1-11341.致病物质:内毒素、荚膜,菌毛2.所致疾病:寄生在正常人鼻咽部,存在易患人群,与患者补体介导的杀菌活性缺陷有关。约2%-3%的人表现为

8、流脑症状2023-1-1135w 3.免疫性:病原可产生群特异性抗体,但不持久。2023-1-1136(三)微生物学检验 1标本采集 w 菌血症期病人采集血液w 有出血点或瘀斑者,可取瘀斑渗出液w 有脑膜刺激症状,抽取脑脊液 2023-1-11372检验方法直接涂片检查 脑脊液或瘀斑渗出液,干燥固定后革兰染色,若发现G-双球菌,呈肾形成对,可初报2023-1-1138分离培养鉴定w 过氧化酶试验:阳性w 触酶试验:阴性w 血清凝集试验:阳性2023-1-1139二、淋球菌 即淋病奈瑟菌,为淋病的病原体,人是唯一天然宿主和传染源2023-1-1140(一)、生物学性状w1形态结构w2培养特性w3

9、.生化反应w4抵抗力特点2023-1-11411形态结构wG-,球形或肾形,成对排列w有荚膜,无芽胞和鞭毛 2023-1-11422培养特性w 营养要求高,30-37 生长,须在含有血液或血清的培养基上培养,常用血液、巧克力等培养基w 初次分离,须5-10%CO2才能生长发育w 菌落:凸起,光滑、圆形,灰白色,半透明 2023-1-11433.生化反应w 氧化酶试验:阳性w 触酶:阳性w 只分解葡萄糖,不分解麦芽糖w 易自溶2023-1-11444抵抗力特点抵抗力弱,在干燥环境中仅能存活1-2h,湿热55 5min,100 立即死亡。室温下存活1-2d。对消毒剂极敏感2023-1-1145(二

10、)、致病性与免疫性1致病物质2所致疾病3.免疫性2023-1-11461致病物质w菌毛,外膜蛋白等 2023-1-11472所致疾病w侵犯人类泌尿生殖系统引起淋病(首位性病)2023-1-11483.免疫性 病后可产生相应的细胞和体液免疫,但免疫力弱,不足以保护再感染。2023-1-1149(三)微生物学检验2023-1-11501标本采集 泌尿、生殖道的各种分泌物、尿液 立即送检2023-1-11512直接涂片镜检w 急性淋病:嗜中性粒细胞内大量G-,肾形双球菌具有诊断意义w 慢性淋病:镜检较困难 2023-1-11523.分离培养鉴定 即采集即培养,常用含有两种以上抗生素(万古霉素、粘菌素、磺胺类等)的营养培养基上培养。2023-1-1153氧化酶试验:阳性触酶:阳性(多数奈瑟菌为阴性)发酵葡萄糖,不分解麦芽糖 PCR:灵敏,特异,标本不变限制(不需活菌)

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