1、色谱分析色谱分析色谱法：色谱法：采用多级化、层析化的高效分离技术。采用多级化、层析化的高效分离技术。多组分分离技术，是色谱分析的基础。多组分分离技术，是色谱分析的基础。色谱分析色谱分析：采用分离分析一体化技术，实现多采用分离分析一体化技术，实现多组分测定的现代仪器分析方法。组分测定的现代仪器分析方法。对于色谱法与色谱分析，你了解多少？对于色谱法与色谱分析，你了解多少？色谱法色谱法与与色谱分析色谱分析色谱分析色谱分析n色谱法的发展色谱法的发展色谱分析色谱分析植物色素分离图示植物色素分离图示19031903（19061906）年，）年，Michael TswettMichael Tswett提出色
2、谱法提出色谱法19311931年德国的年德国的Richard Kuhn，用，用AlAl2 2O O3 3和和CaCOCaCO3 3分离了分离了-,-,-,和和-胡萝卜素等胡萝卜素等6060多种色素，获得了多种色素，获得了19381938年的诺贝年的诺贝尔化学奖。尔化学奖。19481948年年A.W.K.A.W.K.蒂塞留斯（瑞典人）蒂塞留斯（瑞典人）发现电泳技术和发现电泳技术和吸附色谱法吸附色谱法 诺贝尔奖诺贝尔奖库恩库恩（R.Kuhn）19001967 德德国人国人蒂塞留斯蒂塞留斯（A.Tiselius）19021971 瑞典瑞典人人 古罗马人分析混合染料（类似辐射纸色谱）古罗马人分析混合染
3、料（类似辐射纸色谱）19521952年，年，MartinMartin和和Synge 发明了气发明了气-液分配液分配色谱法。色谱法。荣获荣获1952 年年诺贝尔化学诺贝尔化学奖。奖。马丁马丁(A.J.P.Martin)1910 英英国国人人辛格辛格(R.L.M.Synge)19141994 英英国国人人 19581958年，年，SteinStein和和MooreMoore研制出氨基酸分研制出氨基酸分析仪，确定了核糖核酸酶的分子结构。析仪，确定了核糖核酸酶的分子结构。获得了获得了19721972年的诺贝尔化学奖。年的诺贝尔化学奖。对核糖核酸酶的三维结构及其对核糖核酸酶的三维结构及其 124个氨个氨
4、基酸顺序的研究基酸顺序的研究 莫尔莫尔(S.Moore)19131982 美美国人国人 斯坦斯坦(W.H.Stein)19111980 英国人英国人 分析过程分析过程 制备固定相；制备固定相；加样；加样；洗脱（或展开）；洗脱（或展开）；对分离组分进行定性、定量分析。对分离组分进行定性、定量分析。色谱法一般步骤色谱法一般步骤 制备固定相；制备固定相；加样；加样；洗脱；洗脱；对组分定性定量分析。对组分定性定量分析。差速迁移差速迁移（differential migration)：试样中组分：试样中组分在两相间的在两相间的作用力作用力不同。不同组分被流动相不同。不同组分被流动相运载运载移动的速率移动
5、的速率不同，产生的不同，产生的差数迁移，使微小差异差数迁移，使微小差异的不同组分被分离。的不同组分被分离。作用力作用力：吸附力、溶解力、离子交换力、吸附力、溶解力、离子交换力、分子排阻力分子排阻力样品在相对运动两相分配平衡的过程。样品在相对运动两相分配平衡的过程。（1）两相状态分类：）两相状态分类：流动相流动相 固定相固定相 类型类型 Gas chromatography，GC Gas Liquid chromatography，GLC Gas solid chromatography，GSCLiquid chromatography，LC Liquid solid chromatograph
6、y，LSC Liquid liquid chromatography，LLCSupercritical fluid chromatography，SFCColumn chromatography Packed Column chromatography Capillary Column chromatographyPlanar chromatography Thin layer chromatography，TLC Paper chromatography(partition chromatography)（adsorption chromatography）(ion exchange chr
7、omatography,IEC)（size exclusion chromatography;SEC）亲和色谱（亲和色谱（affinity chromatography）按色谱过程的机理分类按色谱过程的机理分类p吸附色谱吸附色谱：吸附和溶解能力差异而分离。吸附和溶解能力差异而分离。p分配色谱分配色谱：溶解度差异达到分离的。溶解度差异达到分离的。p离子交换色谱离子交换色谱：离子交换剂亲和力不同离子交换剂亲和力不同。p空间排阻色谱空间排阻色谱：分子的大小而滞留不同。：分子的大小而滞留不同。p亲和色谱亲和色谱：利用生物大分子和固定相表面特异亲和利用生物大分子和固定相表面特异亲和力，进行选择性分离的一
8、种方法。力，进行选择性分离的一种方法。色谱分析色谱分析其他分类方式其他分类方式 按色谱动力学过程分类按色谱动力学过程分类 迎头法、顶替法和洗脱法迎头法、顶替法和洗脱法 按应用目的分类按应用目的分类 分析型色谱和制备型色谱分析型色谱和制备型色谱 按色谱过程的特殊物理化学原理或特殊的按色谱过程的特殊物理化学原理或特殊的操作方式分类，如：操作方式分类，如：*化学键合相色谱化学键合相色谱 *裂解色谱裂解色谱 *二维色谱等等二维色谱等等 *手性色谱手性色谱色谱分析色谱分析 色谱法与经典化学分析的比较色谱法与经典化学分析的比较 色谱法与光谱、质谱分析法的比较色谱法与光谱、质谱分析法的比较 色谱分析的特点色
9、谱分析的特点 色谱分析的局限性：色谱分析的局限性：定性能力？（未知样品）定性能力？（未知样品）色谱数据的色谱数据的“漂移漂移”？（对比光谱数据）（对比光谱数据）色谱分析色谱分析 色谱法与经典化学分析的比较色谱法与经典化学分析的比较化学分析依物质化学分析依物质独特的化学性质独特的化学性质来进行测定来进行测定,色谱分析使色谱分析使化学性质相同化学性质相同/相似的复杂组分相似的复杂组分相互分相互分离后测定。离后测定。色谱法与光谱、质谱分析法的比较色谱法与光谱、质谱分析法的比较 光谱、质谱主要是对纯化样品的光谱、质谱主要是对纯化样品的定性分析定性分析工具工具,色谱是色谱是分离分析分离分析的工具。的工具
10、。色谱分析色谱分析 色谱法与分馏法的比较色谱法与分馏法的比较 色谱分离比分馏快，得到的物质纯度比分离法高。色谱分离比分馏快，得到的物质纯度比分离法高。苯苯(80.1)和环己烷和环己烷80.74 的的bpbp仅差仅差0.60.6，如用分离，如用分离柱进行分离是不可能的。柱进行分离是不可能的。0 5 10 15 20 25 30 tR/sec苯环己烷色谱分析色谱分析u 色谱分析的特点色谱分析的特点(1)(1)高选择性：高选择性：良好分离良好分离。（色谱的热力学性质）。（色谱的热力学性质）(2)(2)高柱效：高柱效：10103 310106 6次实现分离。次实现分离。(3)(3)高灵敏度高灵敏度：高
11、灵敏检测器，痕量杂质分析：高灵敏检测器，痕量杂质分析(4)(4)分析速度快分析速度快：多组分分析仅几分钟：多组分分析仅几分钟(5)(5)定量准确定量准确：分离检测一体化，结果准确性。：分离检测一体化，结果准确性。(6)(6)应用范围广应用范围广(7)(7)试样用量少试样用量少 色谱分析色谱分析注意：注意：（1 1）色谱仪并不是色谱柱和检测器的简单堆积。）色谱仪并不是色谱柱和检测器的简单堆积。（2 2）试液处理很关键。）试液处理很关键。（3 3）分子量低于）分子量低于20002000的小分子化合物的分析。的小分子化合物的分析。（4 4）色谱工作者应完全了解色谱法理论）色谱工作者应完全了解色谱法理论,探讨错误探讨错误的原因、分析谱图的原因、分析谱图,并不断地积累有关的经验。并不断地积累有关的经验。色谱分析色谱分析色谱分析最新进展色谱分析最新进展全二维气相色谱法全二维气相色谱法气相色谱仪的微型化气相色谱仪的微型化超高压液相色谱系统超高压液相色谱系统二维液相色谱仪器及切换技术二维液相色谱仪器及切换技术毛细管电色谱毛细管电色谱色谱分析色谱分析色谱分析相关网站 http:/
