1、第七章第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析的分析Benzene Benzene ethylaminesethylamines本章要求本章要求 掌握：苯乙胺类拟肾上腺素药物掌握：苯乙胺类拟肾上腺素药物的的结构结构和和性质性质；主要苯乙胺类拟肾上腺素；主要苯乙胺类拟肾上腺素药物的药物的鉴别、杂质检查和含量测定鉴别、杂质检查和含量测定的原理的原理与特点与特点 熟悉：杂质的结构、危害、检查熟悉：杂质的结构、危害、检查方法与限度方法与限度 了解：影响药物稳定性因素、体内了解：影响药物稳定性因素、体内药分药分拟肾上腺素药拟肾上腺素药 adrenergic drug adrenergi
2、c drug 凡能引起类似肾上腺素能神经兴凡能引起类似肾上腺素能神经兴奋的效果的药，也包括直接或间接激动肾奋的效果的药，也包括直接或间接激动肾上腺素受体的药物，称为拟肾上腺素药，上腺素受体的药物，称为拟肾上腺素药，又称拟交感胺。又称拟交感胺。R1CHCHNHR2OHR3*HOOHHC CH2NHCH3肾上腺素HOOHHC CH2NH2去甲肾上腺素HOOHHC CH2NHCH(CH3)2异丙肾上腺素H2NClHC CH2NHC(CH3)3克伦特罗ClHC CH2NHCH3麻 黄 碱OHOHOHOHOHBenzene ethylamines代表药物代表药物 （1 1）弱碱性：具有）弱碱性：具有脂烃
3、胺脂烃胺侧链，其氮为仲胺氮侧链，其氮为仲胺氮（2 2）酚羟基特性：具有邻苯二）酚羟基特性：具有邻苯二酚酚或苯酚结构，酚或苯酚结构，酚易氧化，多元酚更易氧化显色。易氧化，多元酚更易氧化显色。（3 3）光学活性：本类药物大多具）光学活性：本类药物大多具手性碳手性碳原子，具原子，具有旋光性。有旋光性。（4 4）紫外吸收特性：苯环（）紫外吸收特性：苯环（254nm254nm）其他基团：芳伯氨基特性（盐酸克仑特罗）其他基团：芳伯氨基特性（盐酸克仑特罗）（二）化学性质（二）化学性质(properities)(properities)第二节第二节 鉴别试验鉴别试验 IdentificationIdentif
4、ication1.1.与与FeClFeCl3 3显色显色:（酚羟基酚羟基）紫色紫色,加碱加碱紫红色紫红色,红色红色.2.2.与与HCHO-HHCHO-H2 2SOSO4 4显色显色:（酚羟基酚羟基）醌式结构醌式结构3.3.氧化反应氧化反应:（酚羟基酚羟基）肾上腺素肾上腺素10mg,HCl2ml10mg,HCl2ml溶解溶解,H,H2 2O O2 210d10d血红色血红色.4.双缩脲反应双缩脲反应:氨基醇结构氨基醇结构 盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱10mgH10mgH2 2O1mlO1ml溶溶,加加CuSOCuSO4 42d,20%2d,20%NaOH1mlNaOH1ml蓝紫色蓝紫色.加加EtEt2
5、2O1ml,O1ml,上层紫红上层紫红,下层蓝下层蓝.5.Rimini Test5.Rimini Test脂肪伯胺脂肪伯胺.重酒石酸间羟胺重酒石酸间羟胺 5mgH5mgH2 2O 0.5mlO 0.5ml溶溶,NaNa3 3Fe(NO)(CN)Fe(NO)(CN)6 62d,CH2d,CH3 3COCHCOCH3 32d,NaHCO2d,NaHCO3 3 0.2g,0.2g,60601min1min红紫色红紫色.6.6.吸收光谱：吸收光谱：UV.IRUV.IR，表，表7-37-3第三节第三节 特殊杂质与检查特殊杂质与检查一一 酮体酮体:肾上腺素加肾上腺素加HCl(92000)HCl(92000
6、)2mg/ml,310nm 2mg/ml,310nm 测测A,A,不得过不得过0.05.(E=453)0.05.(E=453)二二 光学纯度（光学纯度（Optical PurityOptical Purity）重酒石酸去甲肾上腺素加水重酒石酸去甲肾上腺素加水50mg/ml,50mg/ml,比旋度比旋度-10.0-10.0-12.0-12.0 enantioseparationenantioseparation ee%ee%三、有关物质三、有关物质 除克伦特罗外，除克伦特罗外，ChP2010ChP2010对所有其他该类药对所有其他该类药物都检查有关物质物都检查有关物质盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上
7、腺素:TLCTLC（高低浓度对比法）（高低浓度对比法）盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍:PCPC（下行法）（下行法）其他其他:HPLCHPLC（主成份自身对照法）（主成份自身对照法）例例 盐酸去氧肾上腺素加甲醇盐酸去氧肾上腺素加甲醇20 20 mg/ml(Cmg/ml(C1 1),),取适量加甲醇取适量加甲醇 0.1mg/ml0.1mg/ml (C(C2 2),),各点样各点样10l,C10l,C1 1如显杂质斑点如显杂质斑点,不得不得比比C C2 2主斑点更深主斑点更深.L=0.1/20L=0.1/20100%=0.5%.100%=0.5%.第四节第四节 含量测定含量测定ASSAYASSAY 一、非
8、水溶液滴定法一、非水溶液滴定法 （nonaqueous titrationnonaqueous titration）非水滴定法：在非水溶液中进行的滴定非水滴定法：在非水溶液中进行的滴定分析法分析法 非水酸碱滴定法：在非水溶液中进行的非水酸碱滴定法：在非水溶液中进行的酸碱滴定法酸碱滴定法两种酸碱滴定法对比两种酸碱滴定法对比 1 1.以水为溶剂的酸碱滴定法的特点：以水为溶剂的酸碱滴定法的特点：优点：易得，易纯化，价廉，安全优点：易得，易纯化，价廉，安全 缺点：当酸碱太弱，无法准确滴定缺点：当酸碱太弱，无法准确滴定 有机酸、碱溶解度小，无法滴定有机酸、碱溶解度小，无法滴定 强度接近的多元或混合酸碱无
9、法分步或分别滴定强度接近的多元或混合酸碱无法分步或分别滴定 2 2.非水酸碱滴定法的特点非水酸碱滴定法的特点 非水溶剂为滴定介质非水溶剂为滴定介质 增大有机物溶解度增大有机物溶解度 改变物质酸碱性改变物质酸碱性 扩大酸碱滴定范围扩大酸碱滴定范围非水溶剂的分类非水溶剂的分类：A.A.质子性溶剂：具有较强的授受质子能力的溶剂质子性溶剂：具有较强的授受质子能力的溶剂 1)1)酸性溶剂：酸性溶剂：具有具有给出质子能力（醋酸）给出质子能力（醋酸）2)2)碱性溶剂：具有接受质子能力（乙二胺）碱性溶剂：具有接受质子能力（乙二胺）3)3)两性溶剂：既易给出质子、又易接受质子的两性溶剂：既易给出质子、又易接受质
10、子的溶剂（甲醇）溶剂（甲醇）B.B.非质子性溶剂：溶剂分子中无转移性质子的溶剂非质子性溶剂：溶剂分子中无转移性质子的溶剂 1)1)偶极亲质子性溶剂：吡啶偶极亲质子性溶剂：吡啶 2)2)惰性溶剂：氯仿惰性溶剂：氯仿溶剂的选择溶剂的选择 滴定酸时滴定酸时选择碱性溶剂或偶极亲质选择碱性溶剂或偶极亲质子性溶剂子性溶剂 滴定碱时滴定碱时选择酸性溶剂或惰性溶剂选择酸性溶剂或惰性溶剂(一一)基本原理基本原理当当HAHA酸性较强时，反应不能定量酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低完成，必须除去或降低HAHA的酸性，的酸性，使反应顺利地完成。使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游
11、离碱类盐游离碱类盐被置换出的弱酸被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。因此，要根据不同情况采用相应测定条件。游离碱与高氯酸直接反应游离碱与高氯酸直接反应有机弱碱盐类：置换滴定有机弱碱盐类：置换滴定(二二)一般方法一般方法供供试试品品+冰冰醋醋酸酸10ml30ml若供试品为氢卤酸若供试品为氢卤酸盐再加盐再加5%5%醋酸汞醋酸汞的的冰醋酸液冰醋酸液3ml5ml3ml5ml结结果果高氯酸滴定液滴定高氯酸滴定液滴定以空白以空白试验校试验校正正 (三三)问题讨论问题讨论1.1.适用范围适用范围 主要用于主要用于K Kb bC Cb b1010-8-8的弱碱的含量测定。的弱碱的含量测定。一般
12、：一般：K Kb b为为1010-8-81010-10-10时时,宜选冰醋酸作为溶剂；宜选冰醋酸作为溶剂；K Kb b为为1010-10-101010-12-12时，宜选冰醋酸与醋酐的时，宜选冰醋酸与醋酐的混合溶液；混合溶液；K Kb b1010-12-12时，应用醋酐作为溶剂。时，应用醋酐作为溶剂。2.2.酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列顺序排序：以下列顺序排序：高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸 消除消除HXHX干扰的方法：加干扰的方法：加3-5ml3-5mlHg(Ac)Hg(Ac)2 2 ,量不足终量不足终点不明显，结果
13、偏低。点不明显，结果偏低。ChP2010ChP2010有部分测定不加有部分测定不加!2BHX+Hg(Ac)2BHX+Hg(Ac)2 2 2BHAc+HgX 2BHAc+HgX2 2 过量过量(1(13 3倍倍)不影响测定结果不影响测定结果 3.3.滴定剂的稳定性滴定剂的稳定性 非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥非水溶液滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。若滴定样品与标定定剂的浓度。若滴定样品与标定HClOHClO4 4溶液时的温溶液时的温度不一致，温差未超过度不一致，温差未超过1010时，应将高氯酸滴
14、定时，应将高氯酸滴定液的浓度加以校正液的浓度加以校正:N:N1 1=N=N0 0/1+0.0011(t/1+0.0011(t1 1-t-t0 0)4.4.终点指示方法终点指示方法 ：指示剂法（结晶紫）；指示剂法（结晶紫）；电位法电位法:玻璃玻璃甘汞电极系统甘汞电极系统 5.5.其他干扰其他干扰HOCHCH2NHCH3OHBr2+3BrBrHOBrCHCH2NHCH3OH+3HBrI22Na2S2O32NaINa2S4O6 剩余剩余Br22KI2KBrI2 (二二)溴量法溴量法 盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素0.1g,0.1g,加加H H2 2O 20mlO 20ml溶解溶解,精加溴液精加溴液
15、(0.05 mol.L(0.05 mol.L-1-1)50ml,)50ml,加加HCl 5mlHCl 5ml密塞密塞15min,15min,加加KI10mlKI10ml用用NaNa2 2S S2 2O O3 3(0.1mol.L(0.1mol.L-1-1)滴定滴定,淀淀 粉指示粉指示.1ml.1ml溴液相当于溴液相当于3.395mg C3.395mg C9 9H H1212NONO2 2.HCl.HCl (0.05(0.05202.5202.51/3)1/3)硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇(C(C1313H H2121NONO3 3)H)H2 2SOSO4 4 0.4g0.4g，精称，精称,HAc1
16、0ml,HAc10ml溶解溶解,丙酮丙酮15ml,15ml,加加1d1d结晶紫结晶紫,用用HClOHClO4 4(0.1mol.L(0.1mol.L-1-1)滴定至蓝绿色滴定至蓝绿色,空白校正空白校正.T:0.1 T:0.1576.7=57.67mg/ml 576.7=57.67mg/ml 三、亚硝酸钠法三、亚硝酸钠法 盐酸克伦特罗（芳伯氨基），酸性盐酸克伦特罗（芳伯氨基），酸性溶液中与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成溶液中与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成重氮盐，永停法指示终点。重氮盐，永停法指示终点。四、四、UVUV和比色法和比色法1 1、UVUV盐酸甲氧明注射液（吸收系数法）盐酸甲氧明注射液（吸
17、收系数法）2 2、比色法、比色法盐酸克仑特罗栓（重氮化反应）盐酸克仑特罗栓（重氮化反应）,盐酸异丙肾上腺盐酸异丙肾上腺素气雾剂（和亚铁离子配位显色）素气雾剂（和亚铁离子配位显色）例例:盐酸克仑特罗栓盐酸克仑特罗栓2020粒粒,精称精称,取适量取适量,氯仿溶氯仿溶解后盐酸提取定溶到解后盐酸提取定溶到50mlA50mlA液液.取对照品加盐酸取对照品加盐酸7.2g/mlB7.2g/mlB液液.精取精取A,BA,B液各液各15ml,15ml,显色后分别定显色后分别定溶到溶到25ml,500nm25ml,500nm测定测定A.Cx=AxA.Cx=AxCs/As,Cs/As,标示量标示量%=Cx%=CxD
18、 DW W100/W100/W标示量标示量 重酒石酸去甲肾上腺素注射液重酒石酸去甲肾上腺素注射液:外标法以峰面外标法以峰面积计算积计算.血浆中儿茶酚胺类血浆中儿茶酚胺类HPLC-ECDHPLC-ECD测定测定:内标二羟苯内标二羟苯胺胺.血血2ml,2ml,制血浆制血浆,加内标加内标,0.3mol/LHAc,0.3mol/LHAc洗脱洗脱,离离心心,过滤过滤,干燥干燥,0.3ml,0.3ml流动相溶解流动相溶解,进样进样.取对照品取对照品加加2 ml2 ml代血浆代血浆,同上处理同上处理,测定测定 以以H H对对/H/H内内对对C C作标准曲线作标准曲线.五、五、HPLCHPLC第五节第五节 体内药分体内药分动物组织中盐酸克仑特罗的残留测定动物组织中盐酸克仑特罗的残留测定1.1.样品提取：乙酸乙酯；稀盐酸样品提取：乙酸乙酯；稀盐酸2.2.净化：净化：SCXSCX小住小住3.3.衍生化：衍生化：GC-MSGC-MS4.4.测定测定:外标法外标法5.5.计算计算 :含量含量(g/kg)=(g/kg)=AxCsV Asm本章小结本章小结结构和性质结构和性质鉴别：鉴别：双缩脲反应双缩脲反应杂质检查：酮体杂质检查：酮体含量测定：非水溶液滴定法含量测定：非水溶液滴定法
