1、实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验 地中海沿岸国家、东南亚及中国南方多见地中海沿岸国家、东南亚及中国南方多见；重型地贫给家庭社会带来沉重的经济负担重型地贫给家庭社会带来沉重的经济负担和难以估量的精神负担；和难以估量的精神负担；中国南方人群地贫基因携带率 地区地区携带率携带率(%)(%)地贫地贫地贫地贫合计合计广西广西17.66.424.0广东广东8.52.511.0海南海南12.72.715.4云南云南9.8 7.317.1贵州贵州4.25.19.3重庆重庆5.22.07.2 地中海贫血（海洋性贫血、珠蛋白生成障地中海贫血（海洋性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血）：碍性贫血）：由于由于（突变、缺失
2、（突变、缺失等）引起的等）引起的，导致，导致，同时，同时的一种的一种。由于珠蛋白基因的缺陷使血红蛋由于珠蛋白基因的缺陷使血红蛋白中的珠蛋白肽链有一种或几种合成减少白中的珠蛋白肽链有一种或几种合成减少或不能合成，导致或不能合成，导致的的组成成分组成成分改改变。本组疾病的临床症状轻重不一，大多变。本组疾病的临床症状轻重不一，大多表现为表现为。地中海沿岸国家、东南亚及中国南方多见；诊断(Diagnosis)贫血症者常伴有红细胞渗透脆性的改变。由于遗传性珠蛋白基因缺陷（突变、缺失等）引起的一种或多种珠蛋白肽链生物合成减少或完全不能合成，导致珠蛋白肽链间的正常平衡不能维持，同时成人型Hb（HbA：22）
3、合成降低的一种遗传性血红蛋白病。地中海沿岸国家、东南亚及中国南方多见；地中海沿岸国家、东南亚及中国南方多见；5%,则为地贫基因携带者标本采集后，测试应在三日内完成。混匀，3000转/分钟，离心5分钟。混匀，3000转/分钟，离心5分钟。7、按下列公式计算出溶血率百分比。肽链分析Peptide chain analyses（勿倒掉比色杯中的溶液）溶血 =D1 100 chain disappear6、将混匀后的溶液，倒入比色杯中，再于530nm波长比色，读取光密度D2。SG-C母液（红细胞溶血液）组成；【参考值（参考范围）】父母双方同类型地贫者需行遗传咨询和产前诊断。肽链分析Peptide ch
4、ain analyses 重型重型地贫地贫（HbBarts胎儿水肿综合征胎儿水肿综合征）4个个基因都缺失了基因都缺失了(-/-)，在孕后期或出生后即死亡。在孕后期或出生后即死亡。骨髓腔扩大，骨质变薄，头大、眼间距增宽、鼻梁塌陷、颧骨突起等骨髓腔扩大，骨质变薄，头大、眼间距增宽、鼻梁塌陷、颧骨突起等血红蛋白电泳Hemoglobin electrophoresis肽链分析Peptide chain analysesD2 X 1.3、5分钟后，加入B试验液1ml。【参考值（参考范围）】D2 X 1.高发区人群遗传负荷评估混匀，3000转/分钟，离心5分钟。（HbBarts胎儿水肿综合征）2、加入待测
5、抗凝全血10l，立刻混匀，继续放在37保温5分钟。SG-C母液（红细胞溶血液）组成；7、按下列公式计算出溶血率百分比。标本采集后，测试应在三日内完成。地中海沿岸国家、东南亚及中国南方多见；Erythrocyte fragility test临床特点实验室检查父母调查阳性（基因分析）混匀，3000转/分钟，离心5分钟。实验：红细胞渗透脆性检验MCV 80fl 和/或MCH 27pg,则高度怀疑为地贫;由于遗传性珠蛋白基因缺陷（突变、缺失等）引起的一种或多种珠蛋白肽链生物合成减少或完全不能合成，导致珠蛋白肽链间的正常平衡不能维持，同时成人型Hb（HbA：22）合成降低的一种遗传性血红蛋白病。cha
6、in disappear1.广西人群地贫基因携带率很高。2.。3.产前诊断可预防重症和中间型地贫患儿出生，结合地贫筛查几乎可以阻断其出生。4.，但。5.是未来发展的方向。-靶型靶型RBC本组疾病的临床症状轻重不一，大多表现为慢性进行性溶血性贫血。鉴别诊断(Differential diagnosis)实验四地中海贫血与红细胞渗透脆性试验产前诊断可预防重症和中间型地贫患儿出生，结合地贫筛查几乎可以阻断其出生。chain disappear正常溶血率：指红细胞渗透脆性在正常范围。7、按下列公式计算出溶血率百分比。本组疾病的临床症状轻重不一，大多表现为慢性进行性溶血性贫血。标本采集后，测试应在三日内
7、完成。实验：红细胞渗透脆性检验重型地贫给家庭社会带来沉重的经济负担和难以估量的精神负担；由SG-A母液（红细胞渗透脆性检测液）；地中海沿岸国家、东南亚及中国南方多见；标本采集后，测试应在三日内完成。3、5分钟后，加入B试验液1ml。标本采集后，测试应在三日内完成。SG-C母液（红细胞溶血液）组成；临床特点实验室检查父母调查阳性（基因分析）遗传性球形红细胞增多症父母双方同类型地贫者需行遗传咨询和产前诊断。地贫诊断基因芯片(Thalachip);临床特点实验室检查父母调查阳性（基因分析）（勿倒掉比色杯中的溶液）（勿倒掉比色杯中的溶液）由于遗传性珠蛋白基因缺陷（突变、缺失等）引起的一种或多种珠蛋白肽
8、链生物合成减少或完全不能合成，导致珠蛋白肽链间的正常平衡不能维持，同时成人型Hb（HbA：22）合成降低的一种遗传性血红蛋白病。肽链分析Peptide chain analyses临床特点实验室检查父母调查阳性（基因分析）溶血 =D1 100 溶血率降低：指红细胞渗透脆性降低；7、按下列公式计算出溶血率百分比。地贫诊断基因芯片(Thalachip);【参考值（参考范围）】本组疾病的临床症状轻重不一，大多表现为慢性进行性溶血性贫血。5、向试管中加入C试验液0.6、将混匀后的溶液，倒入比色杯中，再于530nm波长比色，读取光密度D2。7、按下列公式计算出溶血率百分比。5%,则高度怀疑为地贫基因携带
9、者;阳性为标准地贫.0cm的比色杯中（切勿搅动试管底的红细胞），于530nm波长读取光密度D1（以纯化水作空白对照）。（勿倒掉比色杯中的溶液）SG-C母液（红细胞溶血液）组成；标本采集后，测试应在三日内完成。3、5分钟后，加入B试验液1ml。红细胞脆性实验红细胞脆性实验Erythrocyte fragility testErythrocyte fragility test地贫患者地贫患者正常人正常人血红蛋白电泳血红蛋白电泳Hemoglobin electrophoresisHemoglobin electrophoresis chain disappear (0-thal major)chai
10、n disappear (HbBarts hydrop fetalis)12341234 肽链分析肽链分析Peptide chain analyses 单管多重单管多重PCRPCR-ASO诊断诊断(Diagnosis)(Diagnosis)临床特点实验室检查父母调查阳性临床特点实验室检查父母调查阳性（基因分析）（基因分析）MCV 80fl 和和/或或MCH 27pg,则高度怀则高度怀疑为地贫疑为地贫;HbA2 3.5%,则为则为地贫基因携带者地贫基因携带者地中海贫血确诊试验地中海贫血确诊试验 地贫地贫诊断基因芯片诊断基因芯片(Thalachip);地贫地贫基因诊断条膜基因诊断条膜(反向点杂交反
11、向点杂交)/一管法多一管法多重重PCR ASO寡核苷酸探针点杂交寡核苷酸探针点杂交 DNA测序测序鉴别诊断鉴别诊断(Differential(Differential diagnosis)diagnosis)缺铁性贫血缺铁性贫血 遗传性球形红细胞增多症遗传性球形红细胞增多症 传染性肝炎或肝硬化传染性肝炎或肝硬化【检验原理】【检验原理】贫血症者常伴有红细胞渗透脆性的改变。贫血症者常伴有红细胞渗透脆性的改变。测定红细胞在一定渗透浓度下的溶血率，测定红细胞在一定渗透浓度下的溶血率，可筛查是否贫血，特别是可筛查是否贫血，特别是组成：由SG-A母液（红细胞渗透脆性检测液）；SG-B母液（终止红细胞溶血液
12、）母液（终止红细胞溶血液）；SG-C母液（红细胞溶血液）组成；成分：SG-A母液采用氯化钠（NaCl）、磷酸氢二钠（Na2HPO4）、磷酸二氢钠（NaH2PO4）制成；SG-B母液采用氯化钠制成；母液采用氯化钠制成；SG-C母液采用皂素（saponin）制成。新鲜抗凝全血新鲜抗凝全血（、EDTA-Na、ACD），置28保存。已发生溶血或有血凝块的标本为不合格样品。标本采集后，测试应在三日内完成。1、取试管一只，加入，放。2、加入，立刻混匀，继续放在。3、，加入。混匀，。4、将（），于（以纯化水作空白对照）。5、，混匀，（透明红色）后，。6、。7、按下列公式计算出溶血率百分比。chain dis
13、appear7、按下列公式计算出溶血率百分比。SG-C母液采用皂素（saponin）制成。溶血 =D1 100 鉴别诊断(Differential diagnosis)5、向试管中加入C试验液0.地中海沿岸国家、东南亚及中国南方多见；地中海贫血初筛检查SG-B母液采用氯化钠制成；5、向试管中加入C试验液0.肽链分析Peptide chain analyses标本采集后，测试应在三日内完成。chain disappear7、按下列公式计算出溶血率百分比。SG-B母液采用氯化钠制成；标本采集后，测试应在三日内完成。溶血 =D1 100 本组疾病的临床症状轻重不一，大多表现为慢性进行性溶血性贫血。鉴
14、别诊断(Differential diagnosis)SG-B母液（终止红细胞溶血液）；SG-C母液（红细胞溶血液）组成；SG-C母液采用皂素（saponin）制成。Erythrocyte fragility test父母双方同类型地贫者需行遗传咨询和产前诊断。溶血 =D1 100 混匀，3000转/分钟，离心5分钟。临床特点实验室检查父母调查阳性（基因分析）地中海贫血（海洋性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血）：1、取试管一只，加入A试验液1ml，放37，预热1-2分钟。父母双方同类型地贫者需行遗传咨询和产前诊断。（勿倒掉比色杯中的溶液）6、将混匀后的溶液，倒入比色杯中，再于530nm波长比色，读取
15、光密度D2。【参考值（参考范围）】本组疾病的临床症状轻重不一，大多表现为慢性进行性溶血性贫血。3、5分钟后，加入B试验液1ml。7、按下列公式计算出溶血率百分比。实验：红细胞渗透脆性检验7、按下列公式计算出溶血率百分比。已发生溶血或有血凝块的标本为不合格样品。SG-C母液（红细胞溶血液）组成；标本采集后，测试应在三日内完成。地贫诊断基因芯片(Thalachip);溶血率降低：指红细胞渗透脆性降低；溶血率 65为正常溶血率；55为溶血率降低；（注 56-64为溶血率轻度降低）。正常溶血率：指红细胞渗透脆性在正常范围。正常溶血率：指红细胞渗透脆性在正常范围。溶血率轻度降低：指红细胞溶血率不明显减低，在正常与可疑溶血率轻度降低：指红细胞溶血率不明显减低，在正常与可疑贫血症之间。贫血症之间。
