考马斯亮蓝染色法测定蛋白质浓度含(-Bradford-法)课件.ppt

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1、实验人员:董佳琦实验人员:董佳琦 潘立潘立 考马斯亮蓝染色法的优点考马斯亮蓝染色法的优点:(1 1)灵敏度高灵敏度高(比(比LowryLowry法灵敏法灵敏4 4倍),测倍),测其最低蛋白质测量可达其最低蛋白质测量可达1mg1mg。(2)(2)测定快速测定快速,简洁简洁。只需加入一种试剂,只需加入一种试剂,完成一个样品的测定,只需完成一个样品的测定,只需5min5min左右。左右。(3)(3)此方法干扰物少此方法干扰物少 如干扰Lowry法的K+、Na+、Mg+例子,Tris缓冲液、蔗糖、甘油、EDTA等均不干扰此法。考马斯亮蓝染色法的缺点:考马斯亮蓝染色法的缺点:1.1.。2 2器材器材(1

2、 1)取样器及其架子)取样器及其架子 (2 2)试管及试管架)试管及试管架 (3 3)漩涡混合器)漩涡混合器 (4 4)微量进样器)微量进样器(5 5)VIS-7220VIS-7220可见分光光度计可见分光光度计 (2 2、将待测蛋白配成合适浓度、将待测蛋白配成合适浓度3 3、加入、加入G250G250试剂试剂4 4、比色、比色5 5、制作标准曲线、制作标准曲线6 6、根据标准曲线计算待测蛋白浓度、根据标准曲线计算待测蛋白浓度思考题思考题 1.考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理是什么?是什么?2.为什么不能用试管刷来清洗比色皿?为什么不能用试管刷来清洗比色皿?3.能否将卫生纸塞入比色皿中吸干余液?能否将卫生纸塞入比色皿中吸干余液?4.为什么最后要用为什么最后要用95%的乙醇来润洗比的乙醇来润洗比色皿?色皿?

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