1、微生物与病原微生物学微生物与病原微生物学微生物学与医学微生物学微生物学与医学微生物学医学微生物学的发展简史医学微生物学的发展简史2第一节第一节 微生物与病原微生物学微生物与病原微生物学v微生物（微生物（microorganism）:存在于自然界的一存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。千倍，甚至数万倍才能观察到的微小生物。3v微生物的种类微生物的种类 非细胞型（非细胞型（acellular）病毒病毒、亚病毒、朊粒
2、、亚病毒、朊粒 原核细胞型原核细胞型(prokaryotic)细菌细菌、古生菌、古生菌 细菌包括：细菌、支原体、衣原体、立克次体、细菌包括：细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌等螺旋体和放线菌等 真核细胞型真核细胞型(eukaryotic)真菌真菌v微生物的特点微生物的特点体积体积微小、微小、种类多、种类多、结构简单、繁殖快、易变异、分结构简单、繁殖快、易变异、分布广等。布广等。微生物的种类与特点微生物的种类与特点4v分布极为广泛：海、空、陆，以及人类、动分布极为广泛：海、空、陆，以及人类、动物和植物的体表、与外界相通的腔道中。物和植物的体表、与外界相通的腔道中。微生物的分布微生物的
3、分布5微生物与人类的关系微生物与人类的关系1、绝大多数微生物对人和动、植物是有益的，而绝大多数微生物对人和动、植物是有益的，而且有些是必需的。且有些是必需的。2、少数微生物具有致病性，能引起人和动、植物少数微生物具有致病性，能引起人和动、植物的病害，这些微生物称为的病害，这些微生物称为病原微生物（病原微生物（pathogenic pathogenic microorgnismmicroorgnism）。有些微生物，正常情况下不致病，只在特定情况下有些微生物，正常情况下不致病，只在特定情况下导致疾病，这类微生物称为导致疾病，这类微生物称为机会致病性微生物机会致病性微生物(opportunisti
4、c pathogen)(opportunistic pathogen)。8v医学微生物学（医学微生物学（medical microbiology）:主要主要研究与医学有关的致病性微生物的生物学特性、研究与医学有关的致病性微生物的生物学特性、致病和免疫机制以及特异性诊断、防治措施，以致病和免疫机制以及特异性诊断、防治措施，以控制和消灭感染性疾病和与之有关的免疫损伤等控制和消灭感染性疾病和与之有关的免疫损伤等疾病，达到保障和提高人类健康水平的目的。疾病，达到保障和提高人类健康水平的目的。第二节第二节 微生物学与医学微生物学微生物学与医学微生物学9第三节第三节 医学微生物学发展简史医学微生物学发展简
5、史 v1、经验微生物学时期、经验微生物学时期v2、实验微生物学时期、实验微生物学时期v3、现代微生物学时期、现代微生物学时期v 新病原微生物的发现、微生物基因组的研究、新型疫新病原微生物的发现、微生物基因组的研究、新型疫苗的研制、微生物学诊断技术的快速发展、新的抗细菌苗的研制、微生物学诊断技术的快速发展、新的抗细菌和抗病毒药物的研究。和抗病毒药物的研究。10古希腊时蒸酒古希腊时蒸酒腌渍与蜜饯的食品腌渍与蜜饯的食品1112The discovery of microorganisms The first person who observed and described microorganis
6、ms accurately.Antony van Leeuwenhoek (1632-1723)13v Final refutation of spontaneous generation birth of microbiology as a sciencev Discovery of the existence of anaerobic life fermentationv PasteurizationPasteurs contributions:Louis Pasteur working in his laboratoryLouis Pasteur 路易路易巴斯德巴斯德(1822 1895
7、)14李斯特（李斯特（1827-19121827-1912）：创用消毒防腐、无菌操作技）：创用消毒防腐、无菌操作技术。术。（一）糖的分解代谢产物及其意义由脂质A、核心多糖及特异多糖组成，即革兰阴性菌的内毒素（endotoxin）。1、杀灭芽胞最常用和最有效的方法是2、感染发生地点必须是在医院用于不耐高温的含糖或牛奶等培养基的灭菌。湿热消毒灭菌法：最常用的消毒灭菌法不能利用 -细菌芽胞并不直接引起疾病，只有当发芽成为繁殖体后，才能迅速大量繁殖而致病。按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基和厌氧培养基等。4、气体：主要指氧和二氧化碳。根据鞭毛的数量、位置可将鞭毛菌分成单毛菌、双
8、毛菌、丛毛菌、周毛菌四类。慢性和反复感染杆菌(bacillus)常用于手术器械的灭菌_。如：鼠疫耶氏菌在陈旧培养物上细菌的多形态性、细菌L型。15Robert Koch in his laboratoryThe recognition of microbial role in diseaseRobert Koch(1843 1910)细菌概述细菌概述第一节第一节 细菌的形态与结构细菌的形态与结构 17 细菌（细菌（bacteriumbacterium）是属原核生物界的一种单细胞微生物。是属原核生物界的一种单细胞微生物。广义细菌：广义细菌：包括细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、包括细菌、放
9、线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体。螺旋体。狭义细菌：狭义细菌：专指其中数量最大、种类最多、具有典型代表性的专指其中数量最大、种类最多、具有典型代表性的细菌。细菌。18一一 细菌的大小与形态细菌的大小与形态 一、细菌的大小与形态一、细菌的大小与形态1.细菌的大小细菌的大小-观察仪器：光学显微镜观察仪器：光学显微镜 2.细菌的形态细菌的形态-球菌球菌(coccus)杆菌杆菌(bacillus)螺形菌螺形菌(spiral bacterium)在自然界及人和动物体内，绝大多数细菌以在自然界及人和动物体内，绝大多数细菌以生物被膜生物被膜的的形式存在。形式存在。19螺旋菌形态形态:细菌的基本形态球菌
10、杆菌20Arrangement of cocci Cells2122Staphylococcus23 streptococci24杆菌 Bacilli have many different shapes depending on different length,thickness and size.2-3 m0.6-1.5 m是细菌的遗传物质。（三）滤过除菌法有鞭毛的细菌则沿穿刺线向周围扩散生长，穿刺线模糊不清，用于检查细菌的动力产气杆菌 -+细菌芽胞并不直接引起疾病，只有当发芽成为繁殖体后，才能迅速大量繁殖而致病。(1)芽胞的形成-细菌形成芽胞是受遗传因素的控制和环境因素的影响。细菌以无
11、性二分裂的方式进行繁殖。水溶性色素：能扩散至培养基或周围环境中，（铜绿假单胞菌产生的水溶性绿色色素，使伤口脓汁和敷料染成绿色）（2）细菌的特殊结构的变异：如：荚膜（肺炎链球菌）、芽胞（炭疽芽孢杆菌）、鞭毛（变形杆菌H-O变异）也可发生变异。（五）常见的医院感染根据鞭毛的数量、位置可将鞭毛菌分成单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌四类。-某些细胞壁外包绕一层较厚的粘液性物质。1、菌毛的化学组成：蛋白质（四）芽胞(spore)3、各种损伤机体免疫功能的治疗以及激素和抗生素的不适当使用25螺形菌弧弧 菌菌螺螺 菌菌26 细菌的结构细菌的结构 v细菌的基本结构细菌的基本结构 细胞壁、细胞膜、细胞质和核质细胞
12、壁、细胞膜、细胞质和核质v细菌的特殊结构细菌的特殊结构 荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞27细菌的基本结构细菌的基本结构 位于菌细胞的最外层，包绕在细胞膜的周围，为一种膜位于菌细胞的最外层，包绕在细胞膜的周围，为一种膜状结构，状结构，组成较复杂，组成较复杂，并随不同细菌而异。并随不同细菌而异。用革兰染色法可将细菌分为用革兰染色法可将细菌分为革兰阳性菌革兰阳性菌和和革兰阴性菌革兰阴性菌两两大类，大类，两类细菌细胞壁的共有组分为两类细菌细胞壁的共有组分为肽聚糖。肽聚糖。28 是一类复杂的多聚糖，为原核细胞所特有，是细菌细胞是一类复杂的多聚糖，为原核细胞所特有，是细菌细胞壁中的主要组分。
13、壁中的主要组分。v革兰阳性菌革兰阳性菌的肽聚糖由的肽聚糖由三部分组成，形成机械强度较大的三维网状立体结构；三部分组成，形成机械强度较大的三维网状立体结构；的肽聚糖仅由的肽聚糖仅由和和两部分组成，两部分组成，为单层平面网络的二维结构。为单层平面网络的二维结构。29N-乙酰葡糖胺-1,4糖苷键N-乙酰胞壁酸四肽侧链五肽交联桥金黄色葡萄球菌细胞壁肽聚糖结构示意图GMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGM30GMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGMGM大肠埃希菌细胞壁肽聚糖结构示意图3132v革兰阳性菌细胞壁特殊组分革兰阳性菌细胞壁特殊组分 （teichoic
14、 acid）v按其结合部位不同，分为按其结合部位不同，分为壁磷壁酸（壁磷壁酸（wall teichoic acid）和膜磷壁酸（和膜磷壁酸（membrane teichoic acid）。3334革兰阳性菌和革兰阴性菌细胞壁革兰阳性菌和革兰阴性菌细胞壁革兰阳性菌与阴性菌细胞壁结构比较具有多种抗原决定簇，决定菌体的抗原性。2、微生物的种类与数量：10革兰阴性菌细胞壁由-和-组成2、各种诊疗技术，尤其是侵入性诊疗技术的使用3、环境污染：Pasteurs contributions:（五）常见的医院感染1、感染对象免疫功能低下有些微生物，正常情况下不致病，只在特定情况下导致疾病，这类微生物称为机会致
15、病性微生物(opportunistic pathogen)。固体培养基：菌落，菌苔大肠埃希菌细胞壁肽聚糖结构示意图Louis Pasteur 路易巴斯德(1822 1895)Pasteurization3、细菌芽胞抵抗力强的原因：35意义：革兰阳性和阴性菌细胞壁结构显著不同，导致这两意义：革兰阳性和阴性菌细胞壁结构显著不同，导致这两类细菌在类细菌在。36v 细胞壁的功能细胞壁的功能 v 维持菌体形态。维持菌体形态。v 抵抗渗透压的影响。抵抗渗透压的影响。v 参与细菌体内外的物质交换。参与细菌体内外的物质交换。v具有多种抗原决定簇，决定菌体的抗原性。具有多种抗原决定簇，决定菌体的抗原性。v粘附宿
16、主细胞，与细菌致病性有关。粘附宿主细胞，与细菌致病性有关。37缺壁细菌（细菌缺壁细菌（细菌L型）型）v细胞壁因理化或生物因素受损的细菌能够生长和分裂者细胞壁因理化或生物因素受损的细菌能够生长和分裂者称为称为细菌细胞壁缺陷型细菌细胞壁缺陷型或或细菌细菌L型型（bacterial L form）。）。v细菌细菌L型在高渗环境下可存活。来源于革兰阳性菌的称型在高渗环境下可存活。来源于革兰阳性菌的称为原生质体（为原生质体（protoplast）；来源于革兰阴性菌的称为）；来源于革兰阴性菌的称为原生质球（原生质球（spheroplast）。）。38v(1)细菌细菌L型的成因：溶菌酶，溶葡萄球菌素，青霉素
17、，胆汁，型的成因：溶菌酶，溶葡萄球菌素，青霉素，胆汁，抗抗体，补体等。体，补体等。v(2)细菌细菌L型的形态：大小不一，高度多形性，革兰氏染色阴性。型的形态：大小不一，高度多形性，革兰氏染色阴性。v(3)细菌细菌L型的培养：高渗低琼脂含血清的培养基，生长缓慢，形型的培养：高渗低琼脂含血清的培养基，生长缓慢，形成成“油煎蛋样油煎蛋样”菌落。菌落。v(4)细菌细菌L型的致病性：引起慢性感染，如尿路感染、骨髓炎等。型的致病性：引起慢性感染，如尿路感染、骨髓炎等。临床意义：临床意义：慢性和反复感染慢性和反复感染 常规细菌检查阴性常规细菌检查阴性39v主要功能：渗透与运输作用，细胞呼吸作用、生物合成主要
18、功能：渗透与运输作用，细胞呼吸作用、生物合成作用，信号转导等作用。作用，信号转导等作用。1.中介体（中介体（mesosome）：）：细菌细胞膜可形成一种特有细菌细胞膜可形成一种特有的结构，是部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，的结构，是部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，多见于革兰阳性细菌。多见于革兰阳性细菌。细胞膜（细胞膜（cell membrane）40v1、核糖体（、核糖体（ribosome）:沉降系数为沉降系数为70S（30S+50S），），链霉素能与链霉素能与30S亚基结合，红霉素能与亚基结合，红霉素能与50S亚基结合，均亚基结合，均能干扰其蛋白质合成，从而杀死细菌。能干扰其
19、蛋白质合成，从而杀死细菌。v2、染色体外的遗传质，存在于细菌细染色体外的遗传质，存在于细菌细胞质中。为闭合环状的双链胞质中。为闭合环状的双链DNA，带有遗传信息，控制细，带有遗传信息，控制细菌某些特定的遗传性状。菌某些特定的遗传性状。v3、胞质颗粒、胞质颗粒:细菌细胞质中含有多种颗粒，大多为储藏的细菌细胞质中含有多种颗粒，大多为储藏的营养物质，包括糖原、淀粉等多糖、脂类、磷酸盐等。如营养物质，包括糖原、淀粉等多糖、脂类、磷酸盐等。如（metachromatic granule）。）。plasmids41核质（核质（nuclear material）是细菌的遗传物质。由一条双股环状是细菌的遗传物
20、质。由一条双股环状DNA分子组成。分子组成。无核膜、核仁和有丝分裂器。无核膜、核仁和有丝分裂器。42细菌的特殊结构细菌的特殊结构 荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞荚膜、鞭毛、菌毛和芽胞43v-某些细胞壁外包绕一层较厚的粘液性物质。某些细胞壁外包绕一层较厚的粘液性物质。厚度厚度0.2m，边缘明显，称为，边缘明显，称为荚膜荚膜。厚度厚度 0.2m者称为者称为微荚膜微荚膜。若黏液性物质疏松地附着于细菌表面，边界不明显且易被若黏液性物质疏松地附着于细菌表面，边界不明显且易被洗脱者称为洗脱者称为粘液层粘液层。44（一）荚膜（一）荚膜（capsule）v荚膜的化学组成：多糖；多肽或糖与蛋白复合物。荚膜的化学组成：多
21、糖；多肽或糖与蛋白复合物。v荚膜的形成：与环境和营养有关，一般在人和动物的体荚膜的形成：与环境和营养有关，一般在人和动物的体内或营养丰富的培养基中易形成。内或营养丰富的培养基中易形成。v荚膜的功能：荚膜的功能：抗吞噬作用，是细菌致病重要的毒力因子抗吞噬作用，是细菌致病重要的毒力因子 抗有害物质的损伤作用；抗有害物质的损伤作用；粘附作用，参与生物被膜的形成。粘附作用，参与生物被膜的形成。45某些细菌表面附着的细长呈波状弯曲的丝状物。根据某些细菌表面附着的细长呈波状弯曲的丝状物。根据鞭毛的数量、位置可将鞭毛菌分成单毛菌、双毛菌、丛鞭毛的数量、位置可将鞭毛菌分成单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌四类。毛
22、菌、周毛菌四类。抗有害物质的损伤作用；streptococci5、高压蒸汽灭菌法：最有效的灭菌方法。A、外膜 B、菌毛C、鞭毛D、芽胞中介体（mesosome）：细菌细胞膜可形成一种特有的结构，是部分细胞膜内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，多见于革兰阳性细菌。1、益：绝大多数微生物对人和动、植物是有益的，而且有些是必需的。抗体或补体 (部分或完全失去胞壁)Arrangement of cocci Cells如：鼠疫耶氏菌在陈旧培养物上细菌的多形态性、细菌L型。毒素是病原菌合成的对机体有毒害作用的物质，有内毒素和外毒素两种。（九）改善工作人员的卫生与健康条件凡在送风口装有高效过滤器的房间，通常称为生
23、物洁净室。95%酒精脱色复红复染抗有害物质的损伤作用；46v鞭毛的化学组成：蛋白质鞭毛的化学组成：蛋白质v鞭毛的功能：鞭毛的功能：(1)运动器官：细菌的运动有化学趋向性；运动器官：细菌的运动有化学趋向性；(2)具抗原性：具抗原性：H 抗原；抗原；(3)致病性：有些细菌的鞭毛与致病性有关。致病性：有些细菌的鞭毛与致病性有关。根据细菌有无动力，鞭毛的数量、部位和特异的抗原性，根据细菌有无动力，鞭毛的数量、部位和特异的抗原性，可用于鉴定细菌和细菌分类。可用于鉴定细菌和细菌分类。4748-许多许多G-菌和少数菌和少数G+菌菌体表面存在着一种比鞭毛更细、菌菌体表面存在着一种比鞭毛更细、更短而直硬的丝状物
24、。更短而直硬的丝状物。1、菌毛的化学组成：蛋白质、菌毛的化学组成：蛋白质2、菌毛的种类：、菌毛的种类：v普通菌毛（普通菌毛（ordinary pilus）v性菌毛（性菌毛（sex pilus）493、：(1)普通菌毛-粘附作用与细菌的。如：大肠埃希氏菌的 I 型菌毛；肠产毒型大肠杆菌的定植因子（CFA/I）(2)性 菌 毛-。50v-某些细菌在一定环境条件下，能在菌体内部形成一个某些细菌在一定环境条件下，能在菌体内部形成一个圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠形式。产生芽胞的细圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠形式。产生芽胞的细菌都是菌都是G+菌。不同细菌的芽胞形态、大小、位置有所差菌。不同细菌的芽胞形
25、态、大小、位置有所差异，是鉴别细菌的指标之一。异，是鉴别细菌的指标之一。)51521、芽孢的形成与发芽：、芽孢的形成与发芽：v (1)芽胞的形成芽胞的形成-细菌形成芽胞是受遗传因素的控制细菌形成芽胞是受遗传因素的控制和环境因素的影响。和环境因素的影响。一般只是在动物体外形成。一般只是在动物体外形成。v (2)芽胞的发芽芽胞的发芽-一个细菌只形成一个芽胞，一个芽一个细菌只形成一个芽胞，一个芽胞发芽也只生成一个菌体。细菌芽胞并不直接引起疾病，胞发芽也只生成一个菌体。细菌芽胞并不直接引起疾病，只有当发芽成为繁殖体后，才能迅速大量繁殖而致病。只有当发芽成为繁殖体后，才能迅速大量繁殖而致病。)53v2、
26、：芽胞对热、干燥、辐射、化学消毒剂：芽胞对热、干燥、辐射、化学消毒剂等理化因素均有强大的抵抗力，等理化因素均有强大的抵抗力，v3、细菌芽胞抵抗力强的原因：、细菌芽胞抵抗力强的原因：(1)芽胞含多层致密的膜结构，理化因素不易进入芽胞含多层致密的膜结构，理化因素不易进入(2)含水量少，蛋白质受热后不易变性含水量少，蛋白质受热后不易变性(3)芽胞的核心和皮质中含有吡啶二羧酸，芽胞的核心和皮质中含有吡啶二羧酸，DAP与钙结合与钙结合生成的盐提高芽胞中各酶的热稳定性。生成的盐提高芽胞中各酶的热稳定性。)54 细菌形态与结构检查法细菌形态与结构检查法显微镜放大法显微镜放大法染色法染色法55细菌形态与结构检
27、查法细菌形态与结构检查法革兰染色法革兰染色法抗酸染色法抗酸染色法特殊染色法（荚膜、芽孢、鞭毛等）特殊染色法（荚膜、芽孢、鞭毛等）56革兰染色法步骤：步骤：涂片涂片固定固定结晶紫初染结晶紫初染碘液媒染碘液媒染 95%酒精脱色酒精脱色复红复染复红复染结果：结果：菌：紫色菌：紫色 菌：红色菌：红色革兰染色法意义：革兰染色法意义：鉴别细菌鉴别细菌 选择药物选择药物 研究细菌致病性研究细菌致病性57 Procedures of Gram Stainingn1 G菌细胞壁组成中不包括（菌细胞壁组成中不包括（）。）。nA、外膜、外膜 B、磷壁酸、磷壁酸 C、脂多糖、脂多糖 D、肽聚糖、肽聚糖n2具有下列哪一
28、结构的细菌抵抗力最强（具有下列哪一结构的细菌抵抗力最强（）nA、外膜、外膜 B、菌毛、菌毛C、鞭毛、鞭毛D、芽胞、芽胞n3具有黏附作用的细菌结构是（具有黏附作用的细菌结构是（）。）。nA、菌毛、菌毛B、荚膜、荚膜C、芽胞、芽胞 D、中介体、中介体n5细菌的测量单位是细菌的测量单位是。n6细菌的三种基本形态为：细菌的三种基本形态为：-n7细菌的基本结构有细菌的基本结构有。n8细菌的特殊结构有细菌的特殊结构有 。n9革兰阳性菌细胞壁由-和-组成。n10革兰阴性菌细胞壁由-和-组成 第二节 细菌的生长繁殖与变异1、营养物质：、营养物质：水、含碳化合物、含水、含碳化合物、含 氮化合物和氮化合物和无机盐
29、是基本的营养成份，还有生长因子无机盐是基本的营养成份，还有生长因子。2、酸碱度：、酸碱度：多数病原菌生长繁殖的最适多数病原菌生长繁殖的最适pH为为7.27.6。3、适宜的温度：、适宜的温度：多数病原菌最适宜的温度是多数病原菌最适宜的温度是37。4、气体：、气体：主要指氧和二氧化碳。细菌与人类不同，主要指氧和二氧化碳。细菌与人类不同，并非所有细菌的生长都需要氧气，根据对氧的需并非所有细菌的生长都需要氧气，根据对氧的需要，可把细菌分为四类：要，可把细菌分为四类：n专性需氧菌专性需氧菌：必须在有氧的环境下生长繁殖，如：必须在有氧的环境下生长繁殖，如霍乱弧菌；霍乱弧菌；n微需氧菌：微需氧菌：在低氧分压
30、在低氧分压(5%6%)环境中生长最好，环境中生长最好，如幽门螺杆菌。如幽门螺杆菌。n专性厌氧菌：专性厌氧菌：必须在无氧环境中才能生长，如破必须在无氧环境中才能生长，如破伤风梭菌。伤风梭菌。n兼性厌氧菌：兼性厌氧菌：在有氧或无氧环境中都能生长，大在有氧或无氧环境中都能生长，大多数病原菌属于此类。多数病原菌属于此类。1繁殖方式繁殖方式 细菌以细菌以无性二分裂无性二分裂的方式进行繁殖。的方式进行繁殖。2繁殖速度繁殖速度 在适宜的环境中，一般细菌在适宜的环境中，一般细菌2030分钟分裂分钟分裂1次。次。细菌分裂一次称为繁殖一代。若以细菌分裂一次称为繁殖一代。若以20分钟分裂分钟分裂1次次计算，经过计算
31、，经过10小时，小时，1个细菌将繁殖成个细菌将繁殖成10亿个以亿个以上。但由于营养物质消耗，代谢产物的堆积等环上。但由于营养物质消耗，代谢产物的堆积等环境改变，经一段时间，细菌繁殖速度会逐渐减慢，境改变，经一段时间，细菌繁殖速度会逐渐减慢，甚至死亡。甚至死亡。631/26/20231/26/2023n细菌个体的生长繁殖细菌个体的生长繁殖 (1)繁殖方式：二分裂繁殖方式：二分裂(binary fission)繁殖，无性繁殖。繁殖，无性繁殖。(2)繁殖速度：细菌分裂数量倍增所需要的时间叫代时。繁殖速度：细菌分裂数量倍增所需要的时间叫代时。n细菌群体的生长繁殖细菌群体的生长繁殖-生长曲线：生长曲线：
32、n(1)迟缓期：迟缓期：n(2)对数期：对数期：n(3)稳定期：稳定期：n(4)衰退期：衰退期：三、细菌的人工培养1培养基培养基 用人工方法配制的适合于细菌生长繁殖的营养物质。用人工方法配制的适合于细菌生长繁殖的营养物质。按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基和厌氧培养基等。选择培养基和厌氧培养基等。按物理性状可分为液体、固体和半固体培养基。按物理性状可分为液体、固体和半固体培养基。2、细菌在培养基中的生长现象细菌在培养基中的生长现象（1）细菌在液体培养基中的生长现象）细菌在液体培养基中的生长现象 不同细菌在液体培养基中生长繁
33、殖可出现不同细菌在液体培养基中生长繁殖可出现均匀混浊、沉淀和形均匀混浊、沉淀和形成菌膜成菌膜三种现象，临床应用的澄清透明的注射液若发现上述任三种现象，临床应用的澄清透明的注射液若发现上述任何一种现象，均表明已被细菌污染，禁止使用。何一种现象，均表明已被细菌污染，禁止使用。细菌在液体培养基中的生长现象：细菌在液体培养基中的生长现象：均匀混浊生长均匀混浊生长 沉淀生长菌膜生长沉淀生长菌膜生长菌膜菌膜菌沉淀菌沉淀均匀浑浊均匀浑浊对照对照n（2）细菌在半固体培养基中的生长现象细菌在半固体培养基中的生长现象 n 经常用于做动力试验：即将细菌穿刺接种于半经常用于做动力试验：即将细菌穿刺接种于半固体培养基中
34、，经培养后，无鞭毛的细菌沿穿刺固体培养基中，经培养后，无鞭毛的细菌沿穿刺线生长，穿刺线清晰；有鞭毛的细菌则沿穿刺线线生长，穿刺线清晰；有鞭毛的细菌则沿穿刺线向周围扩散生长，穿刺线模糊不清，用于检查细向周围扩散生长，穿刺线模糊不清，用于检查细菌的动力菌的动力检查细菌的动力。检查细菌的动力。1、3：有动力：有动力2：无动力：无动力细菌在半固体培养基中的生长现象：细菌在半固体培养基中的生长现象：n（3）细菌在固体培养基中的生长现象）细菌在固体培养基中的生长现象n 单个细菌在固体培养基上生长繁殖成肉眼可单个细菌在固体培养基上生长繁殖成肉眼可见的细菌集落，称之见的细菌集落，称之菌落菌落。不同细菌形成的菌
35、落。不同细菌形成的菌落大小、形状、颜色不同，即菌落特征，有利于鉴大小、形状、颜色不同，即菌落特征，有利于鉴别细菌种类别细菌种类 。菌苔：细菌在固体培养基上密集生长时多个菌落融合在一起。细菌在固体培养基中的生长现象：细菌在固体培养基中的生长现象：菌落菌落n固体培养基：菌落，菌苔固体培养基：菌落，菌苔3人工培养的意义人工培养的意义（1）对患者做出病原学诊断）对患者做出病原学诊断（2）生物制品的制备）生物制品的制备（3）细菌的鉴定与研究）细菌的鉴定与研究1热原质热原质 细菌在代谢过程中所合成的注入人和动物体内能引起发热反应细菌在代谢过程中所合成的注入人和动物体内能引起发热反应的物质。的物质。多由革兰
36、阴性菌产生，热原质耐高温，不被高压蒸气多由革兰阴性菌产生，热原质耐高温，不被高压蒸气灭菌（灭菌（121 30min）所破坏，常通过滤过或吸附除去液体中）所破坏，常通过滤过或吸附除去液体中大部分热原质，蒸馏法效果最好。大部分热原质，蒸馏法效果最好。菌的热原质：细胞壁中的脂多糖菌的热原质：细胞壁中的脂多糖2毒素和侵袭性酶毒素和侵袭性酶 毒素是病原菌合成的对机体有毒害作用的物质，有内毒素和毒素是病原菌合成的对机体有毒害作用的物质，有内毒素和外毒素两种。外毒素两种。侵袭性酶是病原菌在代谢过程中产生的具有损伤机体组织、侵袭性酶是病原菌在代谢过程中产生的具有损伤机体组织、促使细菌侵袭和扩散的致病性物质。促
37、使细菌侵袭和扩散的致病性物质。(一一)细菌的合成代谢产物细菌的合成代谢产物3维生素维生素 某些细菌合成的维生素除供自身需要外，还可分泌到细菌体外。某些细菌合成的维生素除供自身需要外，还可分泌到细菌体外。如人体肠道的大肠埃希菌能合成如人体肠道的大肠埃希菌能合成B族维生素和维生素族维生素和维生素K，供人体吸，供人体吸收利用。收利用。4抗生素抗生素 由某些微生物产生的，并能抑制或杀灭其他微生物的物质称为由某些微生物产生的，并能抑制或杀灭其他微生物的物质称为抗生素。抗生素。广泛应用于感染性疾病的治疗。广泛应用于感染性疾病的治疗。5.细菌素细菌素 某些细菌产生的仅对近缘菌株有抗菌作用的蛋白质。某些细菌产
38、生的仅对近缘菌株有抗菌作用的蛋白质。n某些细菌（和真菌）在一定条件下（氧、适宜某些细菌（和真菌）在一定条件下（氧、适宜温度等），能产生各种颜色的色素。温度等），能产生各种颜色的色素。n水溶性色素水溶性色素：能扩散至培养基或周围环境中，：能扩散至培养基或周围环境中，（铜绿假单胞菌产生的水溶性绿色色素，使伤口脓汁铜绿假单胞菌产生的水溶性绿色色素，使伤口脓汁和敷料染成绿色和敷料染成绿色）n脂溶性色素：不溶于水，只存在于菌体，而不脂溶性色素：不溶于水，只存在于菌体，而不扩散至含水的培养基中。扩散至含水的培养基中。（金黄色葡萄球菌合成脂溶性金黄色色素金黄色葡萄球菌合成脂溶性金黄色色素）n细菌的色素有助于
39、细菌的鉴别细菌的色素有助于细菌的鉴别6.色素 （一）糖的分解代谢产物及其意义（一）糖的分解代谢产物及其意义 1 1、糖发酵试验、糖发酵试验 葡萄糖葡萄糖 HCOOH HCOOH 脱氢酶脱氢酶 CO CO2 2+H+H2 2 2 2、I-I-吲哚（吲哚（indolindol）试验）试验色氨酸色氨酸吲哚吲哚玫瑰吲哚玫瑰吲哚 二甲基氨基苯甲醛二甲基氨基苯甲醛 -+3、M -甲基红（methyl red）实验-+甲基红指示剂甲基红指示剂pH4.2（红色）（红色）6.3（黄色）（黄色）大肠杆菌为阳性反应，大肠杆菌为阳性反应，产气杆菌为阴性反应产气杆菌为阴性反应 2、V -VP（Voges-Proskau
40、er）试验）试验葡萄糖葡萄糖丙酮酸丙酮酸乙酰甲基甲醇乙酰甲基甲醇 二乙酰二乙酰红色化合物红色化合物 -+4、C -枸橼酸盐利用试验枸橼酸盐利用试验利用枸橼酸盐生长利用枸橼酸盐生长 +不能利用不能利用 -+IMViC试验试验I-吲哚（吲哚（indol）试验）试验M -甲基红（甲基红（methyl red）试验）试验V -VP（Voges-Proskauer）试验）试验C -枸橼酸盐利用（枸橼酸盐利用（citrate utilization）试）试验验 I M Vi C试验试验 大肠埃希菌大肠埃希菌 +-产气杆菌产气杆菌 -+遗传：遗传：细菌在一定环境下，亲代将其细菌在一定环境下，亲代将其生物学性
41、状传给子代的现象称为遗传。生物学性状传给子代的现象称为遗传。变异：变异：在一定条件下，子代与亲代之在一定条件下，子代与亲代之间以及子代与子代之间的生物学性状出现的间以及子代与子代之间的生物学性状出现的差异。差异。五、细菌的遗传与变异n1、形态结构的变异n2、毒力变异：指细菌在一定条件下毒力的减弱或增强n3、耐药性变异：细菌对某种抗菌药物由敏感变成耐药变异常见的细菌变异现象 1、形态结构的变异、形态结构的变异 （1）细菌的大小和形态的变异：）细菌的大小和形态的变异：在不同在不同的生长时期可不同，生长过程中受外界环境的生长时期可不同，生长过程中受外界环境的影响也可发生变异。如：鼠疫耶氏菌在陈的影响
42、也可发生变异。如：鼠疫耶氏菌在陈旧培养物上细菌的多形态性、细菌旧培养物上细菌的多形态性、细菌L型。型。（2）细菌的特殊结构的变异：）细菌的特殊结构的变异：如：荚如：荚膜（肺炎链球菌）、芽胞（炭疽芽孢杆菌）、膜（肺炎链球菌）、芽胞（炭疽芽孢杆菌）、鞭毛（变形杆菌鞭毛（变形杆菌H-O变异）也可发生变异。变异）也可发生变异。（3）细菌的）细菌的L型变异：型变异：许多细菌在某些许多细菌在某些因素如青霉素、溶菌酶等的影响下，细菌肽因素如青霉素、溶菌酶等的影响下，细菌肽聚糖合成受到抑制，可形成细胞壁缺陷菌，聚糖合成受到抑制，可形成细胞壁缺陷菌，称为称为L型细菌。型细菌。特殊结构的变异特殊结构的变异 42-
43、43炭疽杆菌炭疽杆菌 失去形成芽胞能力失去形成芽胞能力,毒性降低毒性降低 10-20天天 变形杆菌变形杆菌 0.1%石炭酸石炭酸 迁徙生长（迁徙生长（H）点状生长、单个菌落（点状生长、单个菌落（O）鞭毛变异鞭毛变异 2、毒力的变异、毒力的变异 毒力增强：毒力增强：无毒力的白喉棒状杆菌常寄无毒力的白喉棒状杆菌常寄居在咽喉部，不致病；当感染了居在咽喉部，不致病；当感染了-棒状噬菌棒状噬菌体后变成溶原性细菌，则获得产生白喉毒素体后变成溶原性细菌，则获得产生白喉毒素的能力，引起白喉。的能力，引起白喉。毒力减弱：毒力减弱：有毒菌株长期在人工培养有毒菌株长期在人工培养基上传代培养，可是细菌的毒力减弱或消基
44、上传代培养，可是细菌的毒力减弱或消失。卡介苗失。卡介苗(BCG)是有毒的牛分枝杆菌在是有毒的牛分枝杆菌在含有胆汁的甘油、马铃薯培养基上，经过含有胆汁的甘油、马铃薯培养基上，经过13年，连续穿年，连续穿230代，获得的一株毒力减代，获得的一株毒力减弱但仍保持免疫原性的变异株。弱但仍保持免疫原性的变异株。n毒力变异：毒力变异：n增强增强 棒状噬菌体棒状噬菌体白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 获得白喉毒素获得白喉毒素 n减弱减弱 胆汁、甘油、马铃薯培养基胆汁、甘油、马铃薯培养基牛分枝杆菌牛分枝杆菌 卡介苗卡介苗 13年年(230代代)3、耐药性变异、耐药性变异 耐药性变异耐药性变异：细菌对某种抗菌药物由细菌
45、对某种抗菌药物由敏感变为耐药的变异。有些细菌还表现为同敏感变为耐药的变异。有些细菌还表现为同时耐受多种抗菌药物，即多重耐药性。时耐受多种抗菌药物，即多重耐药性。从抗生素广泛应用以来，细菌对抗生从抗生素广泛应用以来，细菌对抗生素耐药的不断增长是世界范围内的普遍趋势，素耐药的不断增长是世界范围内的普遍趋势，给临床治疗带来很大的困难，并成为当今医给临床治疗带来很大的困难，并成为当今医学上的重要问题。学上的重要问题。细菌遗传变异在医学上的应用n1、诊断方面n2、治疗方面n3、预防方面n4、基因工程中的应用第三节 细菌与外界环境n一、细菌的分布n（一）细菌在自然界的分布1、土壤中的细菌：、土壤中的细菌：
46、土壤是细菌生殖的大本营，一般离地面土壤是细菌生殖的大本营，一般离地面1020cm耕作层中耕作层中最多。最多。2、水中的细菌、水中的细菌 保护水源，加强水和粪便的管理，是预防和控制肠道传染病保护水源，加强水和粪便的管理，是预防和控制肠道传染病的重要环节。的重要环节。3、空气中的细菌、空气中的细菌（二）细菌在正常人体的分布（1）正常菌群的概念）正常菌群的概念：在正常情况下，人体体表及与在正常情况下，人体体表及与外界相通的腔道存在着不同种类和数量对人体无害的微外界相通的腔道存在着不同种类和数量对人体无害的微生物群，称为正常微生物群，统称正常菌群或正常菌丛。生物群，称为正常微生物群，统称正常菌群或正常
47、菌丛。（2）正常菌群的生理意义：）正常菌群的生理意义：1、生物拮抗作用、生物拮抗作用2、营养作用、营养作用3、免疫作用、免疫作用（3）、条件致病菌n定义：正常菌群与人体间的平衡状态在某些特定条件下被打破，使原来不致病的正常菌群也能引起疾病。1）正常菌群转化为条件致病菌）正常菌群转化为条件致病菌机体的局部或全身免疫功能降低；机体的局部或全身免疫功能降低；寄居部位的改变；寄居部位的改变；不适当的抗菌药物治疗：不适当的抗菌药物治疗：2）菌群失调及菌群失调症）菌群失调及菌群失调症 菌群失调：由于受到某些因素的影响，正由于受到某些因素的影响，正常菌群中各种细菌的种类和数量发生较大常菌群中各种细菌的种类和
48、数量发生较大的变化，称为菌群失调。的变化，称为菌群失调。菌群失调症：严重的菌群失调使机体表现严重的菌群失调使机体表现出一系列的临床症状，称菌群失调症。出一系列的临床症状，称菌群失调症。二、消毒与灭菌n（一）基本概念n1、消毒：用理化方法杀灭或消除物体表面或环境中的病原微生物。用以消毒的药品称为消毒剂。n2、灭菌：杀灭物体上的所有微生物。n3、防腐：防止或抑制体外微生物的生长繁殖，细菌一般不死亡。n4、无菌及无菌操作：不含活的微生物称为无菌。n 防止微生物进入机体或物体的操作技术称为无菌操作或无菌技术。（二）物理消毒灭菌法n1、热力灭菌法n2、辐射杀菌法n3、滤过除菌法一一、热力灭菌法、热力灭菌
49、法干热灭菌法干热灭菌法 湿热灭菌法湿热灭菌法巴氏消毒法巴氏消毒法煮沸法煮沸法流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法间歇灭菌法间歇灭菌法高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法焚烧焚烧烧灼烧灼干烤干烤红外线灭菌红外线灭菌湿热消毒灭菌法：最常用的消毒灭菌法n1、巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，而不影响被消毒物品的营养成分。n常用于牛奶、酒类的消毒。n2、煮沸法：煮沸煮沸100100经经5min5min可杀死一切细菌的可杀死一切细菌的繁殖体，芽胞需繁殖体，芽胞需1 12 2小时才能杀死。小时才能杀死。n用于用于食具、饮水、刀剪、注射器和一般外科器械食具、饮水、刀剪、注射器和一般外科器械的消毒的消毒n
50、3、流通蒸汽消毒法：利用普通蒸笼或阿诺蒸锅进行消毒。n用于一般用于一般外科器械、注射器和食具外科器械、注射器和食具的消毒的消毒n4、间歇灭菌法：利用连续三次流通蒸汽加热，以达到灭菌的目的。n用于不耐高温的含糖或牛奶等培养基的灭菌。n5、高压蒸汽灭菌法：最有效的灭菌方法。n用于耐高温、耐潮湿的物品，手术衣、敷料、手术器械、生理盐水及普通培养基。干热灭菌法：干热灭菌法：微生物脱水干燥和大分子变性（1）焚烧：）焚烧：（2）烧灼：）烧灼：（3）干烤（）干烤（160170/2h）：）：（二）紫外线与电离辐射杀菌（二）紫外线与电离辐射杀菌 1、紫外线：、紫外线：波长在波长在240300nm的紫外线具的紫外
