1、第五组 组长：组员：指导教师：生化分离工程三级项目蛋黄中卵磷脂的分离纯化01实验原理02实验材料及主要仪器01什么是卵磷脂？02卵磷脂有哪些功效？03卵磷脂的分布及蛋黄中的卵磷脂？04提取卵磷脂的方法有哪些？03原始数据及数据处理04结果分析与讨论05改进与优化0101 PART ONE卵磷脂 卵磷脂卵磷脂被英美科学家喻之为“健脑的黄金，养心的极品”，被日本营养学家称为“本世纪最伟大的保健品”。确切的卵磷脂是磷脂酰胆碱Pc，但商业“卵磷脂”是一类含磷酸根脂质的总和，包括磷脂酸PA、磷脂酰胆胺(脑磷脂)PE、磷脂酰胆碱(卵磷脂)PC、磷脂酰丝胺酸PS、磷脂酰甘油PG和磷脂酰肌醇PI 6种。184
2、4年法国人Gohley从蛋黄中发现卵磷脂，并以希腊文命名为Lecithos（卵磷脂），通用药品名称为Lecithin，也自此揭开了其神秘的面纱。卵磷脂是磷脂的一种，又名磷脂酰胆碱，简称PC。磷脂酰胆碱由甘油基，脂肪酸基和胆碱构成。卵磷脂的功效对人体有什么好处呢？肝脏的保护神卵磷脂不但可预防脂肪肝，还能促进肝细胞再生，防止肝硬化并有助于肝功能的恢复。糖尿病患者的营养品不足会使胰脏机能下降，无法分泌充分的胰岛素，不能有效地将血液中的葡萄糖运送到细胞中。血管的“清道夫”卵磷脂具有乳化分解油脂的作用，对高血脂和高胆固醇有显著的功效，可预防和治疗动脉硬化。胎、婴儿神经发育的必需品 婴幼儿时期是大脑形成发
3、育最关键时期，卵磷脂可以促进大脑神经系统与脑容积的增长、发育。柔润皮肤能分解体内过多的毒素，并经肝脏和肾脏的处理排出体外，可消除青春痘、雀斑。可预防老年痴呆的发生人记忆力减退，其原因与乙酰胆碱含量不足有一定关系。人脑能直接从血液中摄取磷脂，并很快转化为乙酰胆碱。能有效地化解胆结石胆结石90是由胆固醇组成，卵磷脂可以将多余的胆固醇分解、消化及吸收。良好的心理调和剂补充卵磷脂，可使大脑神经及时得到营养，改善因神经紧张而引起的急躁、易怒、失眠等症。卵磷脂的分布卵磷脂存在于每个细胞之中，更多的是集中在脑及神经系统、血液循环系统、免疫系统以及肝、心、肾等重要器官。存在于油料作物种子和蛋黄中，尤其在蛋黄中
4、含量最高。牛奶、动物的脑、骨髓、心脏、肺脏、肝脏、肾脏以及大豆和酵母中都含有卵磷脂。卵磷脂在体内多与蛋白质结合，以脂肪蛋白质(脂蛋白)的形态存在着，所以卵磷脂是以丰富的姿态存在于自然界当中，所以建议人们尽量摄取足够多种类的食物。提取卵磷脂的方法超临界超临界CO2-乙醇乙醇夹带剂萃取法夹带剂萃取法优点优点萃取物无溶剂残留萃取物无溶剂残留，杂质含量杂质含量较低较低,卵磷脂含量高卵磷脂含量高缺点缺点对仪器及反应条件要求较严格对仪器及反应条件要求较严格微波辅助萃取法微波辅助萃取法优点优点提取用时短，溶剂用量少，提提取用时短，溶剂用量少，提取率高，节能取率高，节能缺点缺点 对仪器要求高，操作较复杂对仪器
5、要求高，操作较复杂丙酮提取法丙酮提取法优点优点提取效率较高，工艺成熟，成提取效率较高，工艺成熟，成本较低本较低缺点缺点产品中容易有化学溶剂丙酮的产品中容易有化学溶剂丙酮的残留残留低温超滤法低温超滤法优点优点 无化学溶剂残留无化学溶剂残留缺点缺点工艺要求高、产量较低，因此工艺要求高、产量较低，因此成本较高成本较高配位吸附柱层析配位吸附柱层析法法优点优点分离系统可循环使用，成本低分离系统可循环使用，成本低廉。较为环保，分离周期短，廉。较为环保，分离周期短，毒性小毒性小缺点缺点 对所用仪器要求高对所用仪器要求高0202 PART TWO实验部分 实验原理卵黄中的甘油三酸酯占全部脂类的60%，磷脂约占
6、28%,甾醇脂及其他约占6%。磷脂易溶于乙醚、苯、氯仿，部分溶于乙醇，极难溶于丙酮；卵磷脂溶于乙醇、甲醇、氯仿等有机溶剂，但不溶于丙酮；丙酮能够溶解油脂和游离脂肪酸、甘油三酯等。因此本实验采用化学试剂从蛋黄中提取卵磷脂时，先采用丙酮脱水去其他脂类，再用乙醇对丙酮粉进行溶解，抽滤浓缩干燥最终获得卵磷脂。实验材料和仪器实验材料：鸡蛋、无水乙醇、丙酮仪器：电子天平、真空抽气机、干燥箱、恒温水浴锅、旋转蒸发仪、抽滤漏斗、厚壁烧瓶、磨口瓶实验步骤0504030201蛋黄的分离：蛋黄的分离：将鸡蛋打人将鸡蛋打人培养皿中用培养皿中用小烧杯分离小烧杯分离成蛋白和蛋成蛋白和蛋黄黄。称量蛋。称量蛋黄重量（黄重量（
7、G）及小烧杯重及小烧杯重量（量（G0）丙酮脱水去油：丙酮脱水去油：选用分析纯的丙选用分析纯的丙酮，酮，丙酮的体积丙酮的体积与蛋黄的克数与蛋黄的克数(mLg)比例为比例为 3：1静置静置15min后真空抽滤，水后真空抽滤，水分和溶于丙酮的分和溶于丙酮的其它脂质在滤液其它脂质在滤液中，中，而蛋黄卵磷而蛋黄卵磷脂则留于滤渣即脂则留于滤渣即蛋黄粉中。称量蛋黄粉中。称量滤渣重量（滤渣重量（G1)。乙醇溶解丙酮粉乙醇溶解丙酮粉提取卵磷脂提取卵磷脂:用用分析纯的无水乙分析纯的无水乙醇配制出醇配制出99.7%的乙醇溶夜的乙醇溶夜,将将丙酮粉溶于其中丙酮粉溶于其中（每克丙酮粉加（每克丙酮粉加9.5ml乙醇），乙
8、醇），在在40下静置下静置（水浴锅），再（水浴锅），再用真空抽滤装置用真空抽滤装置过滤至残渣较干过滤至残渣较干不粘手。不粘手。浓缩：水浴的浓缩：水浴的温度控制在温度控制在80-85为宜为宜。浓缩至冷凝管浓缩至冷凝管口不再滴口不再滴 出出乙醇，圆底烧乙醇，圆底烧瓶中的物液泛瓶中的物液泛起细小较密的起细小较密的泡沫时去除热泡沫时去除热源，继续在水源，继续在水浴中存放半小浴中存放半小时后即可。时后即可。干燥：浓缩后干燥：浓缩后所得的物液流所得的物液流动性很强，含动性很强，含有较多水分。有较多水分。考虑其抗热性考虑其抗热性较差，故放在较差，故放在不高不高60 的的烘箱中，至其烘箱中，至其不再呈流动性，
9、不再呈流动性，具有粘稠感时具有粘稠感时取出。称量干取出。称量干燥后质量（燥后质量（G2）并计算得率。并计算得率。数据原始数据记录原始数据记录蛋黄重量G（g）小烧杯重量G0（g）干燥后烧杯重量G2（g）35.402111.077127.965%100-02GGG得率计算卵磷脂得率=（127.965-111.077）/35.402*100%=47.703511%结果分析与讨论卵磷脂得率高于一般水平11%左右，可能原因如下：1.在最初蛋黄与蛋白的分离过程中，蛋白去除不彻底。2.丙酮脱脂时间不足 导致提取物中含有大量杂质。其他产生误差原因：1.丙酮去油抽滤后在弃去残夜液的过程中存在样品损失。2.乙醇溶
10、液配制浓度存在误差改进与优化一、蛋黄粉丙酮脱脂效果优化方案 丙酮与卵磷脂料液比优化 1、尝试各种不同料液比情况下的脱脂效果，分为1:3、1:6、1:9、1:12、1:15 2、尝试脱脂时间下的脱脂效果：0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h(考察指标：丙酮不溶物质量，越小表示除杂越多，效果越好)二、丙酮不溶物乙醇萃取效果优化方案 1、试验不同乙醇浓度下的萃取效果 分成四组进行单因素试验来进行验证 乙醇浓度分别为50%、60%、70%、80%、90%、100%（料液比1:7，水浴时间1.5h，水浴温度35%）2、试验不同萃取时间下的萃取效果 分成八组进行单因素试验来进行验证
11、萃取时间分别为0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h、4.0h (料液比1:7，乙醇浓度选取已优化参数，水浴温度35)3、试验不同萃取温度下的萃取效果 分成八组进行单因素试验来进行验证 萃取温度分别为15、20、25、30、35、40、45、50（前两个因素选用已优化参数，；料液比1:7）参考文献1张珍.鸡蛋黄中提取卵磷脂的最佳操作工艺J.甘肃农业大学,2003.2郁军,裘爱泳,刘元法.磷脂的研究进展J.西部粮油科技,2002,25(1):26-29.3 迟玉杰.加快禽畜中高附加值天然产物高效提取与产品开发J.食品科学 1992,13(4):349-364.4宋国
12、安.磷脂的开发和应用前景J.辽宁化工，1999，258(4):235-2375李亚琴，吴守一.乙醇溶剂与CO2相结合提取高纯度卵黄磷脂的研究J.农业工程学报，2001,17(2):144-1496常皓,王二雷,宫新统,刘静波.蛋黄卵磷脂研究概况J.食品工业科技,2010,05:414-416+420.7吴晓英,林影,叶倩君,李晶晶.蛋黄卵磷脂的制备研究J.食品科学,2004,05:115-119.8迟玉杰,林淑英.卵黄卵磷脂提取与应用的研究进展J.食品与发酵工业,2002,05:50-53.9李涛,王天志.卵磷脂的研究进展J.中药材,2002,10:752-756.10马双雁.大豆卵磷脂的制备方法及其应用前景J.现代农业科技,2009,01:225-227.11黄素芬.鸭蛋黄卵磷脂提取技术研究D.浙江大学,2004.12常皓.蛋黄卵磷脂的提取、分析及氧化稳定性研究D.吉林大学,2012.13袁江兰,康旭,黄红霞.鸡蛋黄卵磷脂提取方法的比较研究J.食品科学,2009,02:25-28.14刘文倩,廖泉,赵玲艳,邓放明.卵磷脂提取与纯化技术研究进展J.食品与机械,2014,01:267-271.15肖虹,周裔彬,尚岩岩,邵磊,胡经纬,毛晓文.超声辅助提取鸡蛋卵磷脂的工艺研究J.食品工业科技,2010,08:255-257.THANKSWE WILL TRY OUR BEST（3)
