1、 酶分子化学修饰：酶分子化学修饰：就是在分子水平上对就是在分子水平上对酶进行改造，以达到改构和改性的目的。酶进行改造，以达到改构和改性的目的。在体外将酶分子通过人工的方法与一些在体外将酶分子通过人工的方法与一些化学物质，特别是一些有生物相容性的化学物质，特别是一些有生物相容性的物质进行共价连接，从而改变酶的结构物质进行共价连接，从而改变酶的结构和性质。这些化学物质称为修饰试剂，和性质。这些化学物质称为修饰试剂，酶化学修饰主要用于基础酶学的研究和酶化学修饰主要用于基础酶学的研究和疾病治疗。疾病治疗。=在基础酶学研究上在基础酶学研究上4探测酶活性必需氨基酸的性质和数目探测酶活性必需氨基酸的性质和数
2、目4酶蛋白一级结构的测定酶蛋白一级结构的测定4酶蛋白的结构变化与运动酶蛋白的结构变化与运动4酶蛋白部分区域的构象状态酶蛋白部分区域的构象状态4酶的作用机理与催化反应历程酶的作用机理与催化反应历程4酶分子的拓扑学以及寡聚酶的亚基结合状态酶分子的拓扑学以及寡聚酶的亚基结合状态4酶的固定化技术酶的固定化技术4酶纯度的分析与检测酶纯度的分析与检测=在疾病治疗上在疾病治疗上4克服酶在体内的不稳定性克服酶在体内的不稳定性 4消除或降低酶的抗原性消除或降低酶的抗原性4有助于酶分子到达并集中于病灶细胞有助于酶分子到达并集中于病灶细胞=在工业上的应用在工业上的应用4酶稳定性提高，使生产成本降低酶稳定性提高，使生
3、产成本降低4反应条件的改善和酶寿命的延长导致生产工反应条件的改善和酶寿命的延长导致生产工艺的技术革新和改进。艺的技术革新和改进。第一节第一节 酶分子的化学修饰方法酶分子的化学修饰方法第二节第二节 酶化学修饰的基本要求酶化学修饰的基本要求第三节第三节 酶蛋白肽链的大分子修饰酶蛋白肽链的大分子修饰第四节第四节 修饰酶的化学性质修饰酶的化学性质一、酶的表面修饰一、酶的表面修饰（一）化学固定化：（一）化学固定化：一般是直接通过一般是直接通过酶表面的氨基酸残基将酶分子共价酶表面的氨基酸残基将酶分子共价连接到惰性载体上；由于载体的引连接到惰性载体上；由于载体的引入，使酶所处的微环境发生改变，入，使酶所处的
4、微环境发生改变，进而改变了酶的性质，特别是动力进而改变了酶的性质，特别是动力学性质发生了改变。学性质发生了改变。l（二）酶的小分子修饰作用（二）酶的小分子修饰作用l主要是利用一些小分子修饰试剂，主要是利用一些小分子修饰试剂，通过共价结合来修饰酶的一些基通过共价结合来修饰酶的一些基团（如团（如-COO-、-NH3+、-SH、-OH、咪唑基等），提高酶的稳定、咪唑基等），提高酶的稳定性。常用的小分子修饰试剂有乙性。常用的小分子修饰试剂有乙基、糖基和甲基等。基、糖基和甲基等。（三）酶的大分子修饰作用（三）酶的大分子修饰作用可分为非共价修饰和共价修饰两大类：可分为非共价修饰和共价修饰两大类：1、大分子
5、非共价修饰：、大分子非共价修饰：利用一些大分子试剂通利用一些大分子试剂通过与酶非共价相互作用，对酶进行有效的保过与酶非共价相互作用，对酶进行有效的保护。例如聚乙二醇、右旋糖苷等通过氢键固护。例如聚乙二醇、右旋糖苷等通过氢键固定于酶分子的表面，同时又有效地与外部水定于酶分子的表面，同时又有效地与外部水相连，从而保护酶的活力；一些多元醇、多相连，从而保护酶的活力；一些多元醇、多糖、多聚氨基酸、多胺等能通过调节酶的微糖、多聚氨基酸、多胺等能通过调节酶的微环境来保护酶活力；另外一些蛋白质可以通环境来保护酶活力；另外一些蛋白质可以通过相互作用，排除分子表面的水分子，降低过相互作用，排除分子表面的水分子，
6、降低介电常数，使酶的稳定性增加。介电常数，使酶的稳定性增加。2、大分子共价修饰：、大分子共价修饰：利用一些可溶性利用一些可溶性大分子，通过共价键连接于酶分子大分子，通过共价键连接于酶分子的表面，形成一层覆盖层，形成的的表面，形成一层覆盖层，形成的可溶性酶具有许多有用的性质。例可溶性酶具有许多有用的性质。例如用聚乙二醇共价修饰超氧化物歧如用聚乙二醇共价修饰超氧化物歧化酶（化酶（SODSOD），不仅可以降低或消除），不仅可以降低或消除酶的抗原性，而且提高了抗蛋白酶酶的抗原性，而且提高了抗蛋白酶的能力，延长了半衰期，从而提高的能力，延长了半衰期，从而提高了药效。了药效。（四）分子内交联：（四）分子内
7、交联：增加酶分增加酶分子表面的交联键数目是提高子表面的交联键数目是提高酶稳定性的有效方法之一，酶稳定性的有效方法之一，例如胰凝乳蛋白酶上的羧基例如胰凝乳蛋白酶上的羧基经过羰二亚胺活化后，可以经过羰二亚胺活化后，可以与一系列二胺发生作用，使与一系列二胺发生作用，使酶的稳定性得到改善。酶的稳定性得到改善。（五）分子间交联：（五）分子间交联：利用一些双功能利用一些双功能或多功能试剂将不同的酶交联在一或多功能试剂将不同的酶交联在一起形成杂化酶。例如用戊二醛把胰起形成杂化酶。例如用戊二醛把胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶交联在一起，蛋白酶和胰凝乳蛋白酶交联在一起，可以降低胰凝乳蛋白酶的自溶性；可以降低胰凝乳蛋白酶
8、的自溶性；将胰蛋白酶与碱性磷酸脂酶交联形将胰蛋白酶与碱性磷酸脂酶交联形成的杂化酶可作为部分代谢途径的成的杂化酶可作为部分代谢途径的模型。模型。（六）脂质体包埋：（六）脂质体包埋：一些医药用酶，一些医药用酶，如如 SODSOD、溶菌酶等，由于分子量较、溶菌酶等，由于分子量较大，不易进入人体细胞内，而且在大，不易进入人体细胞内，而且在体内半衰期短，产生免疫原性反应；体内半衰期短，产生免疫原性反应；用脂质体包埋法纪可解决这些问题。用脂质体包埋法纪可解决这些问题。制止提是天然脂类或类固醇组成的制止提是天然脂类或类固醇组成的 微球体，酶分子包埋在其内部，可微球体，酶分子包埋在其内部，可以通过与细胞的膜融
9、合或内吞作用以通过与细胞的膜融合或内吞作用而进入细胞内。而进入细胞内。l（七）反相胶团微囊化：（七）反相胶团微囊化：这是近年这是近年来发展起来的酶在有机相中进行催来发展起来的酶在有机相中进行催化的技术，反相胶团中酶的稳定性化的技术，反相胶团中酶的稳定性大大提高；一些表面活性剂溶解在大大提高；一些表面活性剂溶解在非极性有机溶剂中时可自发地形成非极性有机溶剂中时可自发地形成近似球状的反相胶团，反相胶团是近似球状的反相胶团，反相胶团是表面活性剂的疏水尾部朝外而极性表面活性剂的疏水尾部朝外而极性头部朝内的微胶团，其内部可容纳头部朝内的微胶团，其内部可容纳一定量的水，酶溶解在其中避免变一定量的水，酶溶解
10、在其中避免变性（见图）。性（见图）。加加H2O 疏水尾部疏水尾部 亲水头部亲水头部 加酶液加酶液 S PEEE 图：反相胶团的结构和酶的分布图：反相胶团的结构和酶的分布二、酶分子的内部修饰二、酶分子的内部修饰（一）非催化活性基团的修饰：（一）非催化活性基团的修饰：通过对非通过对非催化残基的修饰可以改变酶的动力学性催化残基的修饰可以改变酶的动力学性质，改变酶对特殊底物的亲和力；通常质，改变酶对特殊底物的亲和力；通常可被修饰的氨基酸残基既可以是亲核的，可被修饰的氨基酸残基既可以是亲核的，也可以是亲电子的，还可以是是可氧化也可以是亲电子的，还可以是是可氧化残基。残基。（二）酶蛋白主链的修饰：（二）酶
11、蛋白主链的修饰：主要是靠酶法主要是靠酶法进行修饰，用蛋白酶对主联进行部分水进行修饰，用蛋白酶对主联进行部分水解，可以改变酶的催化特性解，可以改变酶的催化特性。（三）催化活性基团的修饰：（三）催化活性基团的修饰：通过选择通过选择性修饰催化活性氨基酸的侧链来实现性修饰催化活性氨基酸的侧链来实现氨基酸残基的取代，使一种氨基酸侧氨基酸残基的取代，使一种氨基酸侧链转化为另一种氨基酸侧链，这种方链转化为另一种氨基酸侧链，这种方法又称为化学突变法。法又称为化学突变法。（四）肽链伸展后的修饰：（四）肽链伸展后的修饰：酶蛋白经过酶蛋白经过脲、盐酸胍处理，使肽链充分伸展，脲、盐酸胍处理，使肽链充分伸展，对酶分子内
12、部的疏水基团进行修饰，对酶分子内部的疏水基团进行修饰，然后在适当条件下，重新进行折叠。然后在适当条件下，重新进行折叠。三、与辅因子相关的修饰三、与辅因子相关的修饰对依赖辅因子的酶可用两种方法进行修饰：对依赖辅因子的酶可用两种方法进行修饰：w如果辅因子与酶是非共价结合的如果辅因子与酶是非共价结合的,可以将可以将辅因子共价结合于酶分子上；辅因子共价结合于酶分子上；w引入新的具有更强反应的辅因子。引入新的具有更强反应的辅因子。四、金属酶的金属取代四、金属酶的金属取代 酶分子中的金属离子可以被其他金酶分子中的金属离子可以被其他金属离子取代，可以改变酶的专一性、稳属离子取代，可以改变酶的专一性、稳定性等
13、。定性等。一、被修饰酶的性质一、被修饰酶的性质（一）酶的稳定性：（一）酶的稳定性：包括热稳定性、酸包括热稳定性、酸碱稳定性，作用温度以及碱稳定性，作用温度以及pHpH，酶蛋白，酶蛋白解离时的电化学性质，抑制剂的性质解离时的电化学性质，抑制剂的性质等。等。（二）酶活性中心的状况：（二）酶活性中心的状况：包括酶分子包括酶分子活性中心的组成，如参与活性中心的活性中心的组成，如参与活性中心的氨基酸残基、辅因子等。酶分子的形氨基酸残基、辅因子等。酶分子的形状、大小以及寡聚酶的亚基组成。状、大小以及寡聚酶的亚基组成。（三）酶侧链基团的性质与反应性质（三）酶侧链基团的性质与反应性质1 1、对巯基的化学修饰：
14、、对巯基的化学修饰：常用的修饰试剂有烷化剂、汞试剂常用的修饰试剂有烷化剂、汞试剂和和EllmanEllman试剂等。试剂等。2 2、氨基的化学修饰：、氨基的化学修饰：常用的修饰试剂有乙酸酐、常用的修饰试剂有乙酸酐、2 2，4 4，6-6-三硝基苯磺酸、三硝基苯磺酸、2 2，4-4-二硝基氟苯、烷基二硝基氟苯、烷基化试剂、丹磺酰氯化试剂、丹磺酰氯(DNS)(DNS)和苯异硫氰酸酯和苯异硫氰酸酯（PITCPITC）等。）等。3 3、羧基的化学修饰：、羧基的化学修饰：水溶性羰二亚胺或氨化反应、水溶性羰二亚胺或氨化反应、硼氟化三甲锌盐反应、甲醇硼氟化三甲锌盐反应、甲醇-盐酸盐酸酯化反应等。酯化反应等。
15、4 4、咪唑基的修饰反应：、咪唑基的修饰反应：焦碳酸二乙酯反应、碘代反应、焦碳酸二乙酯反应、碘代反应、碘化反应等。碘化反应等。5 5、吲哚基的化学修饰：、吲哚基的化学修饰：2-2-羟基羟基-5-5-硝基苄溴、光敏试硝基苄溴、光敏试剂、剂、4-4-硝基苯硫氯等。硝基苯硫氯等。6 6、甲硫氨酸侧链基团的化学修饰：、甲硫氨酸侧链基团的化学修饰：H H2 2O O2 2、光敏试剂、碘代乙酰胺等。、光敏试剂、碘代乙酰胺等。7 7、二硫键的化学修饰：、二硫键的化学修饰：2-2-巯基乙醇、二硫苏糖醇、过巯基乙醇、二硫苏糖醇、过甲酸等。甲酸等。8 8、酚基的化学修饰：、酚基的化学修饰：N-N-乙酰咪唑、碘化反
16、应、四硝乙酰咪唑、碘化反应、四硝基甲烷、偶氮化试剂、二异丙基氟基甲烷、偶氮化试剂、二异丙基氟磷酸。磷酸。9 9、胍基的化学修饰：、胍基的化学修饰：丁二酮、丁二酮、1 1，2-2-环己二酮、苯乙环己二酮、苯乙二醛等。二醛等。二、修饰反应的条件：二、修饰反应的条件：修饰反应应尽修饰反应应尽量在酶稳定条件下进行，并尽量不量在酶稳定条件下进行，并尽量不破坏酶活性必需基团，修饰率高，破坏酶活性必需基团，修饰率高，活力回收要高。活力回收要高。（一）（一）pH与离子强度：与离子强度：pH决定了酶分子决定了酶分子中反应基团的解离状态，酶的解离状态中反应基团的解离状态，酶的解离状态不同，其反应性能也不同；另一方
17、面，不同，其反应性能也不同；另一方面，有些修饰试剂在不同有些修饰试剂在不同pH下，与同一种基下，与同一种基团反应可以形成不同的产物。离子强度团反应可以形成不同的产物。离子强度对修饰反应也有重要影响。对修饰反应也有重要影响。（二）修饰反应的温度与时间：（二）修饰反应的温度与时间：严格控制反应温度和时间可以严格控制反应温度和时间可以减少或消除一些非专一性的修饰反减少或消除一些非专一性的修饰反应。应。（三）反应体系中酶与修饰剂的比例：三）反应体系中酶与修饰剂的比例：酶与修饰试剂的比例可以控制酶与修饰试剂的比例可以控制酶分子的修饰程度。酶分子的修饰程度。三、酶蛋白修饰反应的主要类型三、酶蛋白修饰反应的
18、主要类型4酯化及相关反应酯化及相关反应4烷基化反应烷基化反应4氧化还原反应氧化还原反应4芳香环取代反应芳香环取代反应4溴化氰裂解反应溴化氰裂解反应一、聚乙二醇及其修饰反应：一、聚乙二醇及其修饰反应：聚乙二聚乙二醇（醇（PEG）是线性大分子，具有良）是线性大分子，具有良好的生物相容性和水溶性，在体内好的生物相容性和水溶性，在体内无毒性、无残留、无免疫原性，并无毒性、无残留、无免疫原性，并可消除酶分子的抗原性，被广泛用可消除酶分子的抗原性，被广泛用于酶的修饰。于酶的修饰。4聚乙二醇末端活化后可以与酶产生交联，聚乙二醇末端活化后可以与酶产生交联，使酶分子被覆盖上一层疏松的亲水外壳，使酶分子被覆盖上一
19、层疏松的亲水外壳，导致动力学发生改变，从而产生许多有导致动力学发生改变，从而产生许多有用的性质，用的性质，如可以在广泛的如可以在广泛的pH范围内范围内溶解、不被离子交换剂吸附，电泳迁移溶解、不被离子交换剂吸附，电泳迁移率下降等。率下降等。4主要的修饰方法有：主要的修饰方法有：叠氮法、琥珀酸酐叠氮法、琥珀酸酐法、羰二亚胺法、重氮法。法、羰二亚胺法、重氮法。二、糖类的修饰反应二、糖类的修饰反应4右旋糖苷及右旋糖苷硫酸酯修饰反应：右旋糖苷及右旋糖苷硫酸酯修饰反应：右旋糖苷是由右旋糖苷是由 -葡萄糖通过葡萄糖通过 -1，6-糖糖苷键连接而成的高分子多糖，具有良苷键连接而成的高分子多糖，具有良好的生物相
20、容性和水溶性，其双羟基好的生物相容性和水溶性，其双羟基经过活化后可与酶分子上的游离氨基经过活化后可与酶分子上的游离氨基相结合。主要的修饰方法有：溴化氰相结合。主要的修饰方法有：溴化氰法、高碘酸氧化法。法、高碘酸氧化法。4糖肽（糖肽（Glycopeptide)的修饰反应的修饰反应:糖肽糖肽是由人纤维蛋白或是由人纤维蛋白或 -球蛋白经蛋白酶球蛋白经蛋白酶水解后得到的产物，其分子上具有游离水解后得到的产物，其分子上具有游离氨基，活化后可与酶分子上的氨基反应。氨基，活化后可与酶分子上的氨基反应。主要方法有：主要方法有：2，3-异氰酸甲苯活化法、异氰酸甲苯活化法、戊二醛法。戊二醛法。4聚乳糖修饰反应：聚
21、乳糖修饰反应：聚乳糖在一定温度下，聚乳糖在一定温度下，通过适当的还原剂可与酶分子上氨基反通过适当的还原剂可与酶分子上氨基反应。应。三、合成大分子多聚物修饰酶三、合成大分子多聚物修饰酶4聚聚N-乙烯吡咯烷酮乙烯吡咯烷酮(PVP):用水溶性的分用水溶性的分子量为子量为10,000的的PVP,经过开环水解经过开环水解,活化活化后后,与酶结合。与酶结合。4聚乙烯醇聚乙烯醇(PVA):PVA与对硝基苯氧酰氯反与对硝基苯氧酰氯反应，其硝基再用连二亚硫酸钠还原为氨应，其硝基再用连二亚硫酸钠还原为氨基，与酶分子中的羧基共价连接。基，与酶分子中的羧基共价连接。4聚丙烯醇聚丙烯醇(PAA):用分子量为用分子量为2
22、50，000的的PAA，经过，经过N-羟基琥珀酰亚胺活化后与羟基琥珀酰亚胺活化后与酶的氨基反应。酶的氨基反应。4聚顺丁烯二酸酐聚顺丁烯二酸酐:用分子量为用分子量为98，000的聚顺丁烯二酸酐，可以直接与的聚顺丁烯二酸酐，可以直接与酶分子的氨基发生反应。酶分子的氨基发生反应。4聚氨基酸：聚氨基酸：用分子量为用分子量为5，700的聚的聚赖氨酸做修饰剂时，其氨基与酶分赖氨酸做修饰剂时，其氨基与酶分子上的羧基通过羰二亚胺产生交联。子上的羧基通过羰二亚胺产生交联。用丙氨酸的二肽或三肽做修饰剂时，用丙氨酸的二肽或三肽做修饰剂时，其酸酐可以与酶发生反应。其酸酐可以与酶发生反应。四、天然大分子对酶的修饰反应四
23、、天然大分子对酶的修饰反应4肝素：肝素：肝素由氨基葡萄糖和两种糖醛肝素由氨基葡萄糖和两种糖醛酸组成，平均分子量约为酸组成，平均分子量约为20，000，是，是一种含硫酸酯的黏多糖；经过肝素修一种含硫酸酯的黏多糖；经过肝素修饰的酶具有良好的稳定性，不仅可以饰的酶具有良好的稳定性，不仅可以提高酶的疗效，而且具有抗血凝、抗提高酶的疗效，而且具有抗血凝、抗血栓、降血脂等活性。目前常用羰二血栓、降血脂等活性。目前常用羰二亚胺法、三氯均嗪法和溴化氰法活化亚胺法、三氯均嗪法和溴化氰法活化肝素，对酶分子进行修饰。肝素，对酶分子进行修饰。l人血清蛋白：人血清蛋白：常用戊二醛法、羰常用戊二醛法、羰二亚胺法和活性酯法
24、对人血清蛋二亚胺法和活性酯法对人血清蛋白进行活化，然后对酶分子进行白进行活化，然后对酶分子进行修饰。修饰。一、热稳定性：一、热稳定性：一般来说，经过化学修饰一般来说，经过化学修饰的酶，热稳定性有较大的提高。主要是的酶，热稳定性有较大的提高。主要是由于修饰试剂的多个功能基团与酶分子由于修饰试剂的多个功能基团与酶分子的多个功能基团相互交联增加了酶分子的多个功能基团相互交联增加了酶分子构象的稳定性（表构象的稳定性（表5-1）。）。二、抗原性：二、抗原性：修饰酶的抗原性与修饰剂有修饰酶的抗原性与修饰剂有关，目前比较公认的是关，目前比较公认的是PEP和人血清白蛋和人血清白蛋白在消除酶分子抗原性方面效果较
25、好白在消除酶分子抗原性方面效果较好（表（表5-2）。）。表表5-1 5-1 天然酶和修饰酶的热稳定性比较天然酶和修饰酶的热稳定性比较 酶酶 修饰剂修饰剂 修饰酶修饰酶 天然酶天然酶 处理条件处理条件(/(/时间时间)残留酶活残留酶活(%)(%)酰苷脱氢酶酰苷脱氢酶 胰蛋白酶胰蛋白酶 过氧化氢酶过氧化氢酶 溶菌酶溶菌酶 尿激酶尿激酶糜蛋白酶糜蛋白酶 右旋糖苷右旋糖苷 右旋糖苷右旋糖苷 右旋糖苷右旋糖苷 右旋糖苷右旋糖苷 人血清白蛋白人血清白蛋白 肝肝 素素 37/100min37/100min 100/30min100/30min 50/10min50/10min 100/30min100/30
26、min 37/48h37/48h 37/24h37/24h 7070 100100 4646 6464 4040 9090 2020 9999 8080 0 0 9595 5050酶酶L-AsnL-Asn 酶酶SODSOD酶酶 Gln-Aln Gln-Aln 酶酶尿酸酶尿酸酶腺苷脱氢酶腺苷脱氢酶ArgArg 酶酶过氧化氢酶过氧化氢酶胰蛋白酶胰蛋白酶抗原性抗原性修饰剂修饰剂 -葡萄糖苷葡萄糖苷酶酶核糖核酸酶酶核糖核酸酶酶PEGPEGPEGPEGPEGPEGPEGPEGPEGPEGPEGPEG白蛋白白蛋白白蛋白白蛋白白蛋白白蛋白Poly-DL-AlaPoly-DL-Ala消消 除除消消 除除消消
27、除除消消 除除消消 除除消消 除除消消 除除降降 低低降降 低低消消 除除表表5-2 5-2 修饰酶的抗原性变化修饰酶的抗原性变化三、对各类失活因子的抵抗力三、对各类失活因子的抵抗力:化化学修饰酶与天然酶相比学修饰酶与天然酶相比,对蛋白酶、对蛋白酶、抑制剂等失活因子的抵抗力均有抑制剂等失活因子的抵抗力均有不同程度的提高（表不同程度的提高（表5-3）。）。四、修饰酶在体内的半衰期：四、修饰酶在体内的半衰期：多多数修饰酶在体内的半衰期得到有数修饰酶在体内的半衰期得到有效延长（表效延长（表5-4）。）。五、最适五、最适pH:大多数酶经化学修饰大多数酶经化学修饰后，最适后，最适pH发生了变化，这在应发
28、生了变化，这在应用上具有重要意义（表用上具有重要意义（表5-5）。）。六、六、Km 的变化的变化:有些酶经化学修有些酶经化学修饰后，饰后，Km变大，这可能是由于变大，这可能是由于屏蔽效应引起的。屏蔽效应引起的。表表5-3 5-3 天然酶和修饰酶抗失活因子能力比较天然酶和修饰酶抗失活因子能力比较酶酶抗抑制剂抗抑制剂抗蛋白酶抗蛋白酶修饰剂修饰剂抗失活剂抗失活剂过氧化氢酶过氧化氢酶核糖核酸酶核糖核酸酶溶菌酶溶菌酶胰蛋白酶胰蛋白酶 -葡萄糖苷葡萄糖苷酶酶尿激酶尿激酶右旋糖苷右旋糖苷右旋糖苷右旋糖苷右旋糖苷右旋糖苷右旋糖苷右旋糖苷白蛋白白蛋白右旋糖苷右旋糖苷抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶抗蛋白酶抗蛋白酶抗糜蛋白酶
29、抗糜蛋白酶抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶抗抗SDSSDS抗大豆抑制剂抗大豆抑制剂抗胃蛋白酶抗胃蛋白酶抗胎盘抑制剂抗胎盘抑制剂抗尿素抗尿素抗抗SDSSDS表表5-4 5-4 天然酶与修饰酶的半衰期比较天然酶与修饰酶的半衰期比较酶酶羧肽酶羧肽酶ArgArg 酶酶Gln-AsnGln-Asn酶酶尿酸酶尿酸酶超氧化物岐化酶超氧化物岐化酶过氧化氢酶过氧化氢酶修饰剂修饰剂半衰期半衰期天然酶天然酶修饰酶修饰酶白蛋白白蛋白白蛋白白蛋白糖肽糖肽右旋糖苷右旋糖苷右旋糖苷右旋糖苷PEGPEG3.5h3.5h17h17h1.4h1.4h1h1h4h4h6min6min6h6h12h12h8h8h20h20h4h4h8h8h表表5-5 5-5 天然酶与修饰酶的最适天然酶与修饰酶的最适pHpH酶酶修饰酶修饰酶天然酶天然酶修饰剂修饰剂糜蛋白酶糜蛋白酶猪肝尿酸酶猪肝尿酸酶吲哚吲哚-3-3-链烷羟化酶链烷羟化酶猪肝尿酸酶猪肝尿酸酶产沅假丝酵母尿酸酶产沅假丝酵母尿酸酶白蛋白白蛋白PEGPEGPEGPEG聚丙烯酸聚丙烯酸肝肝 素素10.510.57.4-8.57.4-8.55.0-5.55.0-5.59.09.08.88.83.53.58.28.28.28.28.08.09.09.0
