1、实验一实验一 微生物学实验常用仪器洗涤及干微生物学实验常用仪器洗涤及干热灭菌热灭菌 目目 的的 要要 求求l 认识微生物实验所需要的各种器皿，了解常认识微生物实验所需要的各种器皿，了解常用工具和仪器的名称、用途。用工具和仪器的名称、用途。l 掌握对玻璃器皿的清洗、包扎方法与干热灭掌握对玻璃器皿的清洗、包扎方法与干热灭菌的操作过程。菌的操作过程。实验原理实验原理l 微生物学实验要求较高的无菌状态微生物学实验要求较高的无菌状态，因此，实验所用的器，因此，实验所用的器皿，大多数要进行消毒、灭菌从而用以培养微生物，所以皿，大多数要进行消毒、灭菌从而用以培养微生物，所以对其质量、规格、洗涤和包扎方法均有
2、一定要求。对其质量、规格、洗涤和包扎方法均有一定要求。l 干热灭菌干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。达到灭菌的目的。l 与湿热灭菌相比，干热灭菌所需与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度要高（温度要高（160170），），时间要长（时间要长（12h），但干热灭菌温度不能超过，但干热灭菌温度不能超过180，否则，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。否则，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。实实 验验 材材 料料玻璃仪器：玻璃仪器：每人数：每人数：培养皿培养皿 3套；套；大试管大试管 3只。只。每组数：每组数：三角瓶三角瓶
3、 6只；只；烧杯（烧杯（500ml）2只；只；烧杯（烧杯（1000ml）1只；只；小试管小试管 6只；只；吸管（吸管（0.2ml 2支，支，0.5ml 2支，支，1ml 2支）共支）共6支支 每橱数：每橱数：量筒（量筒（500ml）1只；只；洗涤用品：洗涤用品：去污粉、肥皂、清洗剂、毛刷等。去污粉、肥皂、清洗剂、毛刷等。包扎用品：包扎用品：棉花、扎绳、包扎纸等。棉花、扎绳、包扎纸等。l 由一底一盖组成一套，常用的培养皿皿底直径直径90 mm，高，高15mm,皿底皿盖均为玻璃制成。l 制成平板，可用于分离、纯化、鉴定菌种、活菌计数分离、纯化、鉴定菌种、活菌计数以及测定抗生素测定抗生素、噬菌体的效
4、价噬菌体的效价等。实验程序实验程序（仪器的认识、清洗与包扎仪器的认识、清洗与包扎）（一）学习下列常用仪器的种类、规格和应用范围：（一）学习下列常用仪器的种类、规格和应用范围：培培养养皿皿l 大试管大试管(约约18mm18mm180mm):180mm):可装倒平板用的培养基；可装倒平板用的培养基；可作制备斜面用；可作制备斜面用；装液体培养基用于微生物的振荡培养装液体培养基用于微生物的振荡培养 (2)(2)中试管中试管(13(1315)mm15)mm(100(100150)mm:150)mm:装液体培养基培养细菌或做斜面用；装液体培养基培养细菌或做斜面用；用于细菌、霉菌、病毒等的稀释和血用于细菌、
5、霉菌、病毒等的稀释和血清学试验清学试验。l(3)(3)小试管小试管(10(1012)mm12)mm100mm:100mm:一般用于糖发酵或血清学试验，和其一般用于糖发酵或血清学试验，和其它需要节省材料的试验。它需要节省材料的试验。试管试管l三角瓶三角瓶 用来装无菌水、培养基和振荡培无菌水、培养基和振荡培养微生物养微生物等。l烧杯烧杯 用来配制培养基与各种溶液等。用来配制培养基与各种溶液等。l玻璃吸管玻璃吸管 （二）学习（二）学习玻璃器皿的洗涤方法玻璃器皿的洗涤方法1、新玻璃器皿的洗涤、新玻璃器皿的洗涤 在在2%的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干净。的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干净。
6、2、旧玻璃器皿的洗涤、旧玻璃器皿的洗涤（1）试管、培养皿、三角瓶试管、培养皿、三角瓶：洗衣粉和去污粉洗刷，自来水洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗冲洗 A 装有固体培养基装有固体培养基：刮掉，洗涤刮掉，洗涤 B 带菌的器皿带菌的器皿：2%来苏尔或来苏尔或0.25%新洁尔灭消毒液中浸泡新洁尔灭消毒液中浸泡24小时或煮沸小时或煮沸0.5小时，然后洗涤小时，然后洗涤 C 带病原菌培养物的器皿带病原菌培养物的器皿：先高压蒸汽灭菌，倒去培养物先高压蒸汽灭菌，倒去培养物洗净后的洗净后的试管试管倒置于试管筐内，倒置于试管筐内，三角瓶三角瓶倒置于洗涤架上，倒置于洗涤架上，培养皿培养皿的的皿底和皿盖分开，依次压着皿
7、边排列倒扣在桌上皿底和皿盖分开，依次压着皿边排列倒扣在桌上,晾干晾干.（2）玻璃吸管玻璃吸管：吸管尖端与装在水龙头上的橡皮管连接，反吸管尖端与装在水龙头上的橡皮管连接，反复冲洗复冲洗 a 吸过血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管吸过血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管：立立即投入盛有自来水的容器中浸泡，实验后集中冲洗。即投入盛有自来水的容器中浸泡，实验后集中冲洗。b 塞有棉花的吸管塞有棉花的吸管：用水将棉花冲出，然后冲洗用水将棉花冲出，然后冲洗 c 吸过含有微生物培养物的吸管吸过含有微生物培养物的吸管：2%来苏尔或来苏尔或0.25%新洁新洁尔灭消毒液中浸泡尔灭消毒液中浸泡24小时然后洗
8、小时然后洗 d 吸管内壁有油垢吸管内壁有油垢：洗涤液中浸泡数小时，再冲洗洗涤液中浸泡数小时，再冲洗 洗涤后，若内壁的水均匀分布成一洗涤后，若内壁的水均匀分布成一薄层薄层，表示完全洗净，表示完全洗净，若还挂有水珠，则需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自若还挂有水珠，则需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水冲洗。来水冲洗。l 培养皿的包扎培养皿的包扎：l 培养皿常用旧报纸紧培养皿常用旧报纸紧紧包裹，一包紧包裹，一包710套，包好后干热或湿套，包好后干热或湿热灭菌。热灭菌。l 也可用金属筒包装。也可用金属筒包装。（三）学习（三）学习各种器皿的包扎各种器皿的包扎 吸管的包扎吸管的包扎：l 1 在上端约在上端
9、约0.5cm处，塞入一小段处，塞入一小段1.5 cm长的棉花长的棉花（勿用脱脂棉），目的是避免将外界或嘴中杂菌吹入管内，（勿用脱脂棉），目的是避免将外界或嘴中杂菌吹入管内，或不慎将菌液吸出管外。或不慎将菌液吸出管外。l 2 45 cm宽的长纸条宽的长纸条.试管和三角瓶等的包扎：试管和三角瓶等的包扎：l 试管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅胶塞；试管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅胶塞；l 用二层报纸包扎好（如有牛皮纸，效果更好），进行干热用二层报纸包扎好（如有牛皮纸，效果更好），进行干热或湿热灭菌。或湿热灭菌。l 试管较多时，一般试管较多时，一般7个或个或10个一组，再用双层报纸包扎。个一组，再用双层报纸
10、包扎。视频：视频：玻璃器皿的包扎玻璃器皿的包扎实验程序实验程序（干热灭菌的操作方法干热灭菌的操作方法）1装入待灭菌物品装入待灭菌物品 将包好的待灭菌物品放入电烘箱内，关好箱门。物品将包好的待灭菌物品放入电烘箱内，关好箱门。物品不要摆得不要摆得太挤，太挤，以免妨碍空气流通；以免妨碍空气流通；不要接触电烘箱内壁的铁板不要接触电烘箱内壁的铁板。2升温升温 接通电源，拨动开关，接通电源，拨动开关，打开电烘箱排气孔打开电烘箱排气孔，让温度逐渐上升。，让温度逐渐上升。当温度升至当温度升至100时，关闭排气孔。时，关闭排气孔。3恒温恒温 当温度升达到当温度升达到160170时，保持此温度时，保持此温度2h。4降温降温 切断电源、自然降温。切断电源、自然降温。5开箱取物开箱取物 待电烘箱内温度降到待电烘箱内温度降到70以下后，打开箱门以下后，打开箱门，取出灭菌物品。，取出灭菌物品。结果与思考题结果与思考题l1、通过本次实验你认识了微生物学实验常、通过本次实验你认识了微生物学实验常用的哪些器皿？用的哪些器皿？l2、简述玻璃器皿洗涤的基本要求。、简述玻璃器皿洗涤的基本要求。l3、简述干热灭菌的操作步骤。、简述干热灭菌的操作步骤。
