1、实验四、人体实验四、人体X-性染色质的观察性染色质的观察一、实验目的一、实验目的 1 1、通过实验初步掌握观察与鉴别通过实验初步掌握观察与鉴别X-染染色质的简易方法，识别其形态特征及所在色质的简易方法，识别其形态特征及所在部位。部位。2、为进一步研究人的染色体畸变与疾为进一步研究人的染色体畸变与疾病（性别异常）、鉴别胎儿性别（羊水细病（性别异常）、鉴别胎儿性别（羊水细胞涂片）提供参考条件。胞涂片）提供参考条件。二、实验原理二、实验原理 1、性染色体：、性染色体：和性别决定有明显的和性别决定有明显的直接关系的染色体。直接关系的染色体。2、性染色质发现：、性染色质发现：1949年年Barr等发现，
2、在雌猫的神经等发现，在雌猫的神经细胞核内有一个凝缩的深染小体，细胞核内有一个凝缩的深染小体，在雄性的细胞中没有。在雄性的细胞中没有。3、X-性染色质形成：性染色质形成：进一步了解到，雌体细胞中的两进一步了解到，雌体细胞中的两条条X-染色体在间期时有一条处于凝集染色体在间期时有一条处于凝集而不活跃的状态（异固缩状态），形而不活跃的状态（异固缩状态），形成明显的染色中心，染色中心这就叫成明显的染色中心，染色中心这就叫X-性染色质、性染色质、又叫又叫Barr小体。小体。4、适用于所有哺乳类：、适用于所有哺乳类：进一步研究发现所有的哺乳类都是进一步研究发现所有的哺乳类都是如此。雌性细胞中都有一个如此。
3、雌性细胞中都有一个Barr小体。小体。5、Barr小体的数目：小体的数目：正常雌体正常雌体XX1个个 正常雄体正常雄体XY0个个 雌体雌体XXX 2个个 雄体雄体XXY2个个 雌体、雌体、雄体细胞中无论有几条雄体细胞中无论有几条X染色体在间期细胞内除一条不失活外，染色体在间期细胞内除一条不失活外，其余都将形成其余都将形成X-染色质。染色质。巴氏小体的数目巴氏小体的数目 X X染色体的数目染色体的数目 6、Barr小体大小、形态、位置小体大小、形态、位置：X-X-染色质的形态表现为一结构致染色质的形态表现为一结构致密的浓染小体，轮廓清楚。密的浓染小体，轮廓清楚。大小约大小约1 1m m左右。左右
4、。常附着于核膜边缘或靠近内侧。常附着于核膜边缘或靠近内侧。形状有微凸形（馒头形）、形状有微凸形（馒头形）、三角形、卵形、短棒形（长方形）、三角形、卵形、短棒形（长方形）、圆球形等。圆球形等。7、鼓槌状突出物、鼓槌状突出物 在血液的多形核白细胞分裂形成过在血液的多形核白细胞分裂形成过程中，裂出形成有一细缝连结的鼓槌程中，裂出形成有一细缝连结的鼓槌状突出物（状突出物（Barr小体）。小体）。8 8、性别异常、性别异常 正常女性口腔粘膜细胞中约有正常女性口腔粘膜细胞中约有30-30-50%50%的的BarrBarr小体。小体。男性中偶尔可见不典型者。大于男性中偶尔可见不典型者。大于3%3%即性别异常
5、。即性别异常。Y Y小体：小体：用荧光染料如盐酸阿的平、用荧光染料如盐酸阿的平、QH染色后，可在间期核中看到一个直染色后，可在间期核中看到一个直径约径约0.3微米的强荧光小体，即微米的强荧光小体，即 Y Y小小体体 或在中期核中看到或在中期核中看到Y染色体的长染色体的长臂发出强荧光。臂发出强荧光。三、实验步骤三、实验步骤 1、取上皮粘膜细胞：用牙签从口、取上皮粘膜细胞：用牙签从口腔两侧颊部刮取上皮粘膜细胞，原位腔两侧颊部刮取上皮粘膜细胞，原位括括2-3次（弃去第一次刮取的死细胞），次（弃去第一次刮取的死细胞），分别涂抹在干净载玻片上，范围分别涂抹在干净载玻片上，范围 1-2张盖片大小。张盖片大小。2、染色：干后，用、染色：干后，用5%Giemsa（改良苯酚品红）染色改良苯酚品红）染色10min，勿干。，勿干。3、压片加盖玻片复以吸水纸，用、压片加盖玻片复以吸水纸，用手指轻度加压。手指轻度加压。4、镜检、镜检选取典型细胞的选取典型细胞的原则原则 1、核质呈网状细颗粒状分布；、核质呈网状细颗粒状分布；2、核膜清晰，核膜无破损；、核膜清晰，核膜无破损；3、染色适度；、染色适度；4、周围无杂菌。、周围无杂菌。四、作业四、作业 绘制口腔粘膜细胞图，示绘制口腔粘膜细胞图，示X-染色染色质的形状和部位。质的形状和部位。
