1、单基因性继发性高血压单基因性继发性高血压的的基因诊断基因诊断k糖皮质激素抑制性醛固酮增多症（糖皮质激素抑制性醛固酮增多症（GRHGRH）k表征性盐皮质激素增多症（表征性盐皮质激素增多症（AMEAME）k1111羟化酶缺乏症羟化酶缺乏症k1717羟化酶缺乏综合征羟化酶缺乏综合征kLiddleLiddle 综合征综合征kGordon Gordon 综合征综合征k孤立型嗜铬细胞瘤孤立型嗜铬细胞瘤kII A II A 型多发性内分泌瘤型多发性内分泌瘤kII B II B 型多发性内分泌瘤型多发性内分泌瘤kVon Hippel-LindauVon Hippel-Lindau综合征综合征k I I 型神经
2、纤维瘤型神经纤维瘤k高血压伴短指畸形高血压伴短指畸形糖皮质激素抑制性醛固酮增多症糖皮质激素抑制性醛固酮增多症表征性盐皮质激素增多症表征性盐皮质激素增多症1717羟化酶缺乏综合征羟化酶缺乏综合征1111 羟化酶缺乏症羟化酶缺乏症Liddle Liddle 综合征综合征II A II A 型多发性内分泌瘤型多发性内分泌瘤II B II B 型多发性内分泌瘤型多发性内分泌瘤I I 型神经纤维瘤型神经纤维瘤Von Hippel-LindauVon Hippel-Lindau 综合征综合征GordonGordon综合征综合征CYP11B1/CYP11B2HSD11B2CYP17CYP11B1 SCNN1
3、B,SCNN1GRET proto-oncogeneRET proto-oncogene NF1gene VHL tumour suppressor geneWNK1、WNK4（单基因性继发性高血压）（单基因性继发性高血压）单基因性继发性高血压单基因性继发性高血压基因诊断（国内）基因诊断（国内）病名病名 Liddle 综合征综合征IIaIIa型多发性内分泌瘤型多发性内分泌瘤糖皮质激素抑制性醛固酮增多症糖皮质激素抑制性醛固酮增多症*Gordon综合征综合征单位单位高研所、北医高研所、北医高研所高研所内研所内研所 高研所高研所 历史历史(Liddle 综合征综合征)1963 Liddle 首例报道
4、首例报道1994 Shimkets 肾上皮钠通道肾上皮钠通道亚单位亚单位 基因突变基因突变 1995 Hansson 肾上皮钠通道肾上皮钠通道亚单位亚单位 基因突变基因突变特征特征(Liddle综合征综合征)遗传遗传 临床表现临床表现 常染色体显性遗传病常染色体显性遗传病（16p)肾上皮钠通道（肾上皮钠通道（ENaC)基因突变基因突变高血压高血压低醛固酮低醛固酮低血钾低血钾 低血浆肾素活性（低血浆肾素活性（PRA）Liddle 综合征家系综合征家系-1Liddle综合征家系先证者综合征家系先证者的临床特征的临床特征 男男,25 岁岁 18 岁发生高血压岁发生高血压 血压：血压：230/140
5、mmHg 血钾血钾:2.7mmol/L 高血压家族史高血压家族史:母、兄弟、侄女母、兄弟、侄女 Liddle综合征家系先证者综合征家系先证者的临床特征的临床特征低低PRA:0 ng/ml/h(0.1-5.5)低尿醛固酮低尿醛固酮：0.7 ug/24h(3.4-12.7)联合用降压药无效联合用降压药无效安替舒通治疗无效安替舒通治疗无效氨苯喋啶氨苯喋啶（triamterene）治疗和低钠饮治疗和低钠饮食后高血压和低血钾明显改善食后高血压和低血钾明显改善 1985年住院资料年住院资料氨苯喋啶和低钠治疗前后氨苯喋啶和低钠治疗前后血压和生化指标改变血压和生化指标改变 血压血压 血钾血钾 尿尿ald (m
6、mHg)(mmol/L)(ug/24h)治疗前治疗前 230/140 2.7 0.7 治疗后治疗后 110/84 4.2 6.4 Liddle家系一级亲属的临床及生化检查家系一级亲属的临床及生化检查 病人病人 血压血压 年龄年龄 发病年龄发病年龄(岁岁)(mmHg)(岁岁)高血压高血压 卒中卒中-1 130/8076-1*120/80 46 33 43-3*126/9241 18 32-5*138/106 37 18-7*144/108 31 14 23-2*160/120 24 15-3 105/7521-4 110/8015-5 98/78 9病人病人 PRA 血浆血浆 alt.尿尿 al
7、d 血钾血钾 尿钾尿钾 (ng/ml/h)(ng/ml/h)(ng/dl)(mmol/l)(mmol/l)-1 4.03-1*1.02 7.4 3.5 3.52 46.6-3*1.24 10.1 1.3 3.54 40.4-5*1.08 9.6 0.4 4.07 22.1-7*0.77 7.7 2.7 3.37 42.0-2*0 2.1 0.4 3.64 55.7-3 3.80-4 4.25-5 4.06Liddle家系一级亲属的临床及生化检查家系一级亲属的临床及生化检查基因诊断方法基因诊断方法(Liddle综合征综合征)制备基因组制备基因组DNA 从外周血从外周血（5-10ml）白细胞中抽提
8、白细胞中抽提DNADNA 直接测序直接测序 PCR 扩增扩增 ENaC 513-638密码子密码子 和和 ENaC 524-631密码子密码子 PCR纯化产物用纯化产物用 ABI 377 测序仪进行序列分析测序仪进行序列分析基因诊断结果基因诊断结果(Liddle综合征家系综合征家系-1)5名家系成员名家系成员(II-1,3,5,7,III-2)，ENaC基因基因616密码子存在密码子存在CCC-CTC(pro-Leu)的错义突变的错义突变 先证者父亲先证者父亲(I-1)和其他年青子女和其他年青子女(III-3,4,5)未检出这一突变未检出这一突变Liddle家系成员家系成员 ENaC基因序列分
9、析基因序列分析 II-1 II-3 II-5 II-7CCC-CTCP616L已报道的已报道的Liddle综合征综合征ENaC基因的致病基因的致病突变突变 亚单位亚单位 密码子密码子 碱基改变碱基改变 蛋白改变蛋白改变 _ 564 564 CGA-TGA Arg-stop codonCGA-TGA Arg-stop codon_ 582 582 deletion stop codon deletion stop codon_ 589 CAG-TGA Gln-stop codon 589 CAG-TGA Gln-stop codon 592 ACG-ACCG Thr-frame 592 ACG-
10、ACCG Thr-frame shiftshift_ 594 CCC-CCCC Pro-frame 594 CCC-CCCC Pro-frame shiftshift_ 615 615 CCC-TCC Pro-Ser CCC-TCC Pro-Ser_ 616 CCC-CTC Pro-Leu 616 CCC-CTC Pro-Leu_ 616 CCC-TCC Pro-Ser 616 CCC-TCC Pro-Ser_ 618 618 CTA-TTA Tyr-His CTA-TTA Tyr-His_ 574 TGG-TGA Trp-stop codon 574 TGG-TGA Trp-stop cod
11、on Liddle 综合征家系综合征家系-2基因诊断结果基因诊断结果(Liddle综合征家系综合征家系-2)3名家系成员名家系成员(II-5,III-1,4)，ENaC基因基因616密码子存在密码子存在CCC-TCC（pro-Ser)的错义突变的错义突变 其他家系成员其他家系成员(II-2,3,4,6,7,8,III-2,3)未检出这一突变未检出这一突变基因诊断结果基因诊断结果(Liddle综合征家系综合征家系-2)3名名CCC-TCC突变者同时存在突变者同时存在632密密码子的码子的GAC-CAC（Asp-His)变异变异 150名无关个体测序未发名无关个体测序未发GAC-CAC变变异，证明
12、这是一种突变。该突变与异，证明这是一种突变。该突变与Liddle 综合征发病间关系有待研究综合征发病间关系有待研究Liddle 家系家系-2的的 P616S突变突变 (CCC-TCC,Pro-Ser)Liddle 家系家系-2 D632H 突变突变(GAC-CAC,Asp-His)ENaC 亚单位亚单位 ENaCNH2COOH subunitNedd 4 结合部位结合部位 MEN-IIaIIa型：型：甲状腺髓样癌（MTC）、甲状旁腺腺瘤或增生、嗜铬细胞瘤 MEN-IIbIIb型型：MTC、嗜铬细胞瘤、粘膜神经节瘤、马凡氏体型 Sipple 1961年报道第一例年报道第一例 MEN-II a型（
13、瑞金型（瑞金1998，2002）MEN-II b型（瑞金型（瑞金2002）多内分泌腺瘤病IIa型家系图 女、女、5151岁、岁、“血压升高血压升高7 7年、阵发性心悸、多汗年、阵发性心悸、多汗2 2年年”、97 97年入院、年入院、160/100 160/100 mm Hgmm Hg B B 超：双側超：双側甲状腺实质性肿块、甲状腺实质性肿块、双側肾上腺多发性占位双側肾上腺多发性占位 性病变性病变 CTCT：双側双側甲状腺甲状腺占位性病变、双側肾上腺占位性病变占位性病变、双側肾上腺占位性病变 甲状腺及颈前淋巴结穿刺：甲状腺髓样癌、颈前淋巴转移甲状腺及颈前淋巴结穿刺：甲状腺髓样癌、颈前淋巴转移 手术病理诊断：右侧甲状腺髓样癌、左侧混合性髓样手术病理诊断：右侧甲状腺髓样癌、左侧混合性髓样-滤滤 泡型癌、左颈前淋巴结转移、泡型癌、左颈前淋巴结转移、双側多发性双側多发性嗜铬细胞瘤嗜铬细胞瘤 女、女、5151岁、岁、4040岁发现有高血压岁发现有高血压 左侧甲状腺全切术、左侧甲状腺全切术、病理诊断：左侧甲状腺髓样癌病理诊断：左侧甲状腺髓样癌 可靠、准确可靠、准确 方便方便 临床前诊断临床前诊断Thank you
