1、技能训练15 寄生虫的虫卵粪便检查法 学习和掌握用于虫卵检查的粪便材料的采集、保存和寄送的方法及要领学习和掌握饱和盐水漂浮法的操作技术实训目标显微镜、显微镜投影仪、天平、粪盒（或塑料袋）、粪筛、260孔英寸尼龙筛、玻璃棒、镊子、铁丝环；茶杯（或塑料杯）、100mL烧杯、离心管、漏斗、离心机、载片、盖片、带胶乳头的移液管、污物桶（或污物缸）、纱布、动物新鲜的粪便等仪器材料 方法步骤（一）粪便的采集、保存和寄送方法（二）粪便检查的方法（一）粪便的采集、保存和寄送方法 被检粪便应该是新鲜没有被污染的，最好从直肠采取。大家畜按直肠检查的方法采集，猪、羊可将食指或中指伸入直肠，钩取粪便。采取自然排出的粪
2、便，需采取粪堆或粪球上部未被污染的部分。粪便采好后按头编号装入清洁的容器（小广口瓶、纸盒、油纸袋、塑料袋等）内。采集的用具应避免相互交叉污染。每采一份，清洗一次。采取的粪便应尽快检查，不能立即检查急需转送寄出的，应放在冷暗处或冰箱中保存。若需寄出检查或需长期保存，可将粪浸入加温至5060的5%10%的福尔马林液中，使粪便中的虫卵失去活力，起固定作用，又不改变形态，还可防止微生物的繁殖。（二）粪便检查的方法 1沉淀检查法 2漂浮检查法 3直接涂片检查法 4粪便肉眼检查法 1沉淀检查法（1）反复水洗沉淀法 取粪便510g置于烧杯（或塑料杯）中，加1020倍量水充分搅合，再用金属筛或纱布2层滤过于另
3、一杯中，滤液静置20分钟后倾去上层液，再加水与沉淀物重新搅和、静置，如此反复水洗沉淀物多次，直至上层液透明为止，最后倾去上清液，用吸管吸取沉淀物滴于载玻片上，加盖玻片镜检。（2）离心机沉淀法 取粪便3g置于小杯中，加1015倍水搅拌混合，然后将粪便用金属筛（4060目）或纱布滤入离心管中，以20002500转/分的速度离心沉淀12分钟。取出后倾去上层液，再加水搅合离心沉淀，如此反复23次，最后倾去上层液，用吸管取沉淀物滴于载玻片上，加盖玻片镜检。（3）尼龙网淘洗法 取粪便510g置于烧杯（或塑料杯）中，加10倍量的水搅匀，先通过40目或60目的铜筛过滤。滤过液再通过260目锦纶筛兜过滤，并在筛
4、兜中断续加水冲洗，直到洗出的液体清澈透明为止；然后挑取兜内粪渣抹片检查。此法适用于宽度大于60m的虫卵。通过以上处理，粗大粪渣被铜筛扣留，纤细粪渣（直径小于40m）和可溶性色素均被冲洗走而使虫卵集中。2漂浮检查法（1）漂浮液的制备 常用的漂浮液是饱和盐水溶液，其制法是将食盐加入沸水中，直至不再溶解生成沉淀为止（1000mL水中约加食盐400g），用四层纱布或脱脂棉滤过后，冷却备用。此外还可使用硫代硫酸钠饱和液（1000mL水加入1750g硫代硫酸钠）、硝酸铵溶液（1000mL水加入1500g硝酸铵）和硝酸铅溶液（1000mL水加入650g硝酸铅）等溶液。后两者大大提高检出效果，甚至可用于吸虫病
5、的诊断。但是用高比重溶液时易使虫卵和卵囊变形，检查必须迅速，制片时补加1滴清水也可。（2）检查方法饱和盐水漂浮法 试管浮聚法3直接涂片检查法 这是最简单和常用的方法，但当体内寄生虫数量不多而粪便中排出的虫卵少时，有时不能查出虫卵。方法是：首先在载玻片上滴1滴50%甘油水溶液（或生理盐水、普通水），取少量粪便与甘油水溶液混合后，夹去较大的或较粗的粪渣，最后使玻片上留有一层均匀的粪液，其浓度的要求是将此玻片放于报纸上，能通过粪便膜模糊地辨认其下的字迹为合适。在粪膜上覆以盖玻片，置显微镜下检查。先用低倍镜检查，发现虫卵、卵囊后换取高倍镜检查。检查时应有顺序地查遍盖玻片下的所有部分。4粪便肉眼检查法 该法多用于绦虫病的诊断，也可用于某些肠道寄生虫病的驱虫诊断，即用药驱虫后检查随粪便排出的虫体。检查时，先检查粪便的表面，看是否有大型虫体和较大的绦虫节片，然后将粪便仔细捣碎，认真进行观察。对检查较小虫体或节片，将粪便置于较大的容器中（如金属桶、玻璃缸等），加入510倍量的水（或生理盐水），彻底搅拌后静置10分钟以上，然后倾去上层液，再重新加清水搅匀静置，如此反复数次，直至上层液体清亮为止。最后倾去上层清亮液，将少量沉淀物放在黑色浅盘（或衬以黑色纸或黑布的玻璃容器）中检查，必要时采用放大镜或实体显微镜检查，发现的虫体和节片用镊子、针或毛笔取出，以便进行鉴定。课后作业写出实习报告
