1、GC基础知识岛津国际贸易（上海）有限公司岛津国际贸易（上海）有限公司分析中心分析中心第一部分色谱原理和基本构成色谱原理和基本构成3Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱法的起源石油醚碳酸钙颗粒色素玻璃柱4Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱法的定义和分类v色谱是通过组分在流动相和固定相之间分配比的差异色谱是通过组分在流动相和固定相之间分配比的差异进行分离的。进行分离的。v根据流动相的状态，色谱法分类根据流动相的状态，色谱法分类v 色谱类型流动相主要分析对象气相色
2、谱法气体挥发性有机物液相色谱法液体可以溶于水或有机溶剂的各种物质超临界流体色谱法 超临界流体各种有机化合物电色谱法缓冲溶液、电场离子和各种有机化合物5Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱法的特点v分离效率高分离效率高v分析速度快分析速度快 v检测灵敏度高检测灵敏度高v样品用量少样品用量少v选择性好选择性好v多组分同时分析多组分同时分析v易于自动化易于自动化6Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱法的基本原理v 死时间：死时间：t t0 0v 溶质保留时间：溶质保
3、留时间：t ts sv 保留时间：保留时间：t tR Rv 容量因子：容量因子：kk7Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱法基本原理v 分离度分离度v 选择性系数选择性系数8Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱过程动力学-塔板理论v 理论塔板数理论塔板数N N：b b1/21/2为半峰宽，为半峰宽，w w为峰底宽为峰底宽v 理论塔板高度理论塔板高度H H：9Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱
4、过程动力学-速率理论10Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱动力学-速率理论v Van DeemterVan Deemter速率方程式速率方程式 HBCAH=A+B/u+CuA：涡流扩散B：纵向扩散项C：传质阻力项HETP:理论塔板高度U U11Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited气相色谱基本构成12Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited气相色谱构成示意图载气控制：手动、数字(AFC)/恒线速度、恒压、
5、恒流进样口：DRI、SPL/Splitless、OCI、PTV色谱柱：填充柱、毛细柱检测器：FID、TCD、ECD、FPD、FTD数据处理：C-R8A、Gcsolution、Clarity_Shimadzu进样口色谱柱检测器温度控制区气相色谱主机钢瓶He,N2载气控制数据处理13Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited气相色谱基本流路图隔垫吹扫出口分流出口载气玻璃衬管F2F1空气400-600ml/min氢气40-60ml/min尾吹气约35ml/min14Shimadzu International Trading(Shanghai
6、)Co.Limited气相色谱基本控制参数v 温度温度v 压力（流量）压力（流量）v 温度、压力（流量）的时间程序温度、压力（流量）的时间程序15Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited载气纯度的重要性载气不纯带来的问题：载气不纯带来的问题：v载气中氧的存在导致固定相氧化，损坏色谱柱，改变载气中氧的存在导致固定相氧化，损坏色谱柱，改变样品的保留值。样品的保留值。v载气中水的存在导致部分固定相或硅烷化担体发生水载气中水的存在导致部分固定相或硅烷化担体发生水解，甚至损坏柱子。解，甚至损坏柱子。v气体中有机化合物或其它杂质的存在产生基线噪音
7、和气体中有机化合物或其它杂质的存在产生基线噪音和托尾现象。托尾现象。v气体中夹带的粒装杂质可能是气路控制系统失灵。气体中夹带的粒装杂质可能是气路控制系统失灵。第二部分载气部分载气部分17Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited保证载气纯度的措施v 保证载气纯度在保证载气纯度在99.999%99.999%以上。以上。v 加装载气净化装置。加装载气净化装置。v 10%10%的钢瓶气保有量。的钢瓶气保有量。18Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited压力单位换算100kPa1bar
8、1kPa1.0210-2kgf/cm21kgf/cm298.1kPa1kPa1.4510-1psi1pasi6.89kPa第三部分进样口部分进样口部分20Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited气相色谱进样方式v 热进样热进样v分流分流/无分流进无分流进样样v直接进样（全量注入）直接进样（全量注入）v宽口毛细柱和填充柱宽口毛细柱和填充柱v 冷进样冷进样vPTVPTV进样进样v冷柱头进样冷柱头进样21Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited进样口的结构v 填充柱进样口填充柱进样
9、口隔垫吹扫出口载气玻璃衬管填充柱隔垫吹扫出口分流出口载气玻璃衬管F隔垫吹扫出口载气玻璃衬管宽孔径毛细柱v WBIWBI进样口进样口v 分流分流/无分流进样口无分流进样口22Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited进样口结构v 冷柱头进样口冷柱头进样口(OCI)(OCI)v PTVPTV进样口进样口隔垫吹扫出口分流出口载气玻璃衬管F2F1加热-250/min隔垫吹扫出口载气玻璃衬管0.53mm内径宽孔毛细柱23Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited分流/无分流进样口v 分流比
10、分流比=柱流量柱流量/（分流流量（分流流量+柱流量）柱流量）分流流量分流流量柱流量柱流量时时分流比分流比=柱流量柱流量/分流流量分流流量v 分流比的设定要依据样品浓度分流比的设定要依据样品浓度 （浓度越高分流比越大）（浓度越高分流比越大）v 分流比的设定要依据毛细柱容量分流比的设定要依据毛细柱容量 （柱容量越低，分流比越大）（柱容量越低，分流比越大）v 常用的分流比范围为常用的分流比范围为1:201:201:2001:200,根据具体情况可用范围很宽，比如：根据具体情况可用范围很宽，比如：0.10.1mmmm毛细柱快速毛细柱快速分析可用分析可用1 1：500500以上的分流比以上的分流比24S
11、himadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited歧视效应和热分解v 热进样热进样 (SPL,WBI)(SPL,WBI)v存在存在歧视现象和样品热分解歧视现象和样品热分解v 冷进样冷进样 (OCI,PTV)(OCI,PTV)v进样是在较低温度下进行进样是在较低温度下进行v定量精度高定量精度高歧视效应和热解效应的影响小歧视效应和热解效应的影响小25Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited歧视效应的产生低沸点组分百分比偏高低沸点组分百分比偏高 进针进针 退针退针高沸点组分残留高沸点组分残留2
12、6Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited进样量和歧视效应的关系v 进样体积越小，歧视现象越严重。进样体积越小，歧视现象越严重。(%)0.5 1.0 2.0 3.0 4.0(uL)52 51 50 49 48n-C9n-C427Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited减少歧视效应的方法-样品注入方面v快速进样法快速进样法 v溶剂冲洗法溶剂冲洗法v热针法热针法28Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited溶剂冲洗法蒸溜和
13、分溜蒸溜和分溜减少减少溶剂溶剂 空气空气 样品样品 空气空气(%)0.5 1.0 2.0 3.0 4.0(uL)52 51 50 49 48n-C4n-C929Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited减少歧视效应的方法-冷进样v 概念概念v样品是在冷状态样品是在冷状态-低于样品沸点的温度下进样低于样品沸点的温度下进样 (依据溶剂依据溶剂)v气化室快速升温使样品气化气化室快速升温使样品气化v PTVPTV进样方式进样方式v分流进样分流进样(高浓度样高浓度样)v无分流进样无分流进样 (低浓度样低浓度样)v大体积进样大体积进样LVILVI(
14、痕量分析痕量分析)v OCIOCI柱头进样柱头进样v只适用于只适用于0.530.53内径的柱子内径的柱子v没有分流流路，不能分析高浓度样品（污染柱子），没有分流流路，不能分析高浓度样品（污染柱子），进样量一般小于进样量一般小于2ul2ul30Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedSPL-无分流进样和 OCI以及PTV-无分流进样的比较氨基甲酸盐农药的热解现象氨基甲酸盐农药的热解现象Splitless-SPLCool-on-columnSplitless-PTV31Shimadzu International Trading(Shan
15、ghai)Co.Limited进样体积推荐限值v 无分流进样无分流进样 (SPL,PTV)(SPL,PTV)2uL2uLv 高压进样高压进样 (SPL,PTV)(SPL,PTV)5uL5uLv 直接进样（直接进样（全量进样）全量进样）3uL3uL 用宽口径毛细柱用宽口径毛细柱v 冷柱头进样（冷柱头进样（OCIOCI）2uL2uLv LVI-PTV LVI-PTV 进样进样v空衬管空衬管10uL10uLv衬管衬管 +石英棉石英棉50uL50uLv衬管衬管 +填料填料 1000uL1000uL32Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited隔
16、垫吹扫的作用v 吹扫掉进样垫高温脱落的组分，一般为橡胶中的吹扫掉进样垫高温脱落的组分，一般为橡胶中的增塑剂或低聚物，减少鬼峰增塑剂或低聚物，减少鬼峰v 吹扫溢出衬管的溶剂气体，减少溶剂拖尾吹扫溢出衬管的溶剂气体，减少溶剂拖尾v 常用流量范围：常用流量范围：3 35mL5mL/min/min第四部分色谱柱色谱柱34Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited色谱柱类型毛细柱柱材：熔融石英、铝内径：0.2mm-0.53mm长度：10-100m固定相种类：OV-1，PEG-20M，OV-17等固定相膜厚：0.2-5m v 填充柱填充柱柱材：不锈
17、钢，玻璃内径：2.6-3mm长度：0.5-6m填料：担体和固定液的种类固定液的浓度 1-30%担体有硅藻土、玻璃、石英、塑料担体（TPA）等。35Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited气相色谱的固定相v固体：固体：活性炭、活性铝、硅胶、分子筛等，用于无机气体及低活性炭、活性铝、硅胶、分子筛等，用于无机气体及低碳烃的分析碳烃的分析应用比例约占应用比例约占10%10%v液体：液体：硅酮、聚乙二醇、聚脂等，用于液体样品及高沸点化合硅酮、聚乙二醇、聚脂等，用于液体样品及高沸点化合物分析。物分析。应用比例占应用比例占90%90%以上以上36S
18、himadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited毛细柱选择-固定相v相似相溶原理，选用非极性的固定相分析非极性化合相似相溶原理，选用非极性的固定相分析非极性化合物物v如果化合物可以用不同极性的固定相分析，选用极性如果化合物可以用不同极性的固定相分析，选用极性最小的固定相。最小的固定相。v非极性固定相的使用寿命长于极性固定相。非极性固定相的使用寿命长于极性固定相。v最通用的固定相是最通用的固定相是OV-1OV-1和和SE-54SE-54。v对于偶极或氢键化合物，选用含腈基或聚乙二醇的固对于偶极或氢键化合物，选用含腈基或聚乙二醇的固定相。定相。v轻
19、烃或永久气体，选用轻烃或永久气体，选用PLOTPLOT柱。柱。v应用范围最广的五种固定相，应用范围最广的五种固定相，Rtx-1Rtx-1、Rtx-5Rtx-5、Rtx-50Rtx-50、Rtx-1701Rtx-1701和和RtxRtx-wax-wax可以满足可以满足90%90%以上的分析需求。以上的分析需求。37Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited毛细柱选择-内径v0.25mm0.25mm口径柱具有较高的柱效，口径柱具有较高的柱效，用于标准的用于标准的GC/MSGC/MS应应用和分流用和分流/无分流分析。无分流分析。v0.32mm
20、0.32mm口径柱中等柱效，多用于无分流进样。口径柱中等柱效，多用于无分流进样。v0.53mm0.53mm口径柱，可以替代填充柱，适合于痕量分析。口径柱，可以替代填充柱，适合于痕量分析。38Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited内径对毛细柱分离的影响0.22mm x 25m39Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited毛细柱选择-膜厚v标准膜厚（标准膜厚（0.250.250.5m0.5m）：最广泛的应用，对于流）：最广泛的应用，对于流出达到出达到300300的大多数样品分析效
21、果良好。的大多数样品分析效果良好。v薄液膜（薄液膜（0.10.10.2m0.2m）：适合石化分析，甘油三酯）：适合石化分析，甘油三酯等高沸点的物质。等高沸点的物质。v厚液膜（厚液膜（1 15m5m）：适合于流出温度在）：适合于流出温度在100100200200之间的低沸点化合物。之间的低沸点化合物。40Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited膜厚对毛细柱分离的影响CBP1-W25-100膜厚 1umCBP1-W25-500膜厚 5um41Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limite
22、d毛细柱选择-柱长v标准柱（标准柱（252530m30m）：标准柱长，满足大部分应用。）：标准柱长，满足大部分应用。v短柱（短柱（5 515m15m）：通常用于）：通常用于1010个组份以下简单样品的个组份以下简单样品的快速分析。快速分析。v长柱（长柱（50m50m以上）：复杂样品分析。以上）：复杂样品分析。42Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited几种代表性固定液的极性名称I BenzeneI Benzene 名称 I BenzeneI BenzeneSqualaneSqualane0 0 （非极性）（非极性）PEG20M(DBW
23、AX)322PEG20M(DBWAX)322（强极性）（强极性）SE30SE301515 FFAP FFAP 340 340OV101(DB1)OV101(DB1)1717 PEG1000 PEG1000 347 347SE54(DB5)SE54(DB5)33 33（弱极性）（弱极性）EGAEGA 372 372DC550DC5507474 DEGS DEGS 484 484OV17OV17119119（中极性）（中极性）TCEPTCEP 593 593（超强极性）（超强极性）BCEFBCEF 690 69043Shimadzu International Trading(Shanghai)C
24、o.Limited常用毛细柱商品名及固定液对照表固定相J&WSGERESTEKSUPELCOCHROMPACK聚甲基硅氧烷OV-1DB-1BP-1Rtx-1SPB-1CP Sil 5 CB聚苯基甲基硅氧烷（5%苯基）SE-52DB-5BP-5Rtx-1,MXT-5SPB-1,PTE-5SAC-5CP Sil 8 CB聚苯基甲基硅氧烷（20%苯基）OV-7Rtx-20聚苯基甲基硅氧烷（50%苯基）OV-17,DB-17Rtx-50SP-22506%腈乙基甲基硅酮Rtx-1301OVI-G4314%腈乙基甲基硅酮OV-1701DB-1701BP-10Rtx-1701SPB-1701CP Sil 1
25、9 CB50%三氟丙基甲基硅氧烷OV-210DB-210Rtx-200CP Sil 43 CB50%腈乙苯基甲基硅酮DB-225Rtx-22550%腈乙基甲基硅酮DB-23聚乙二醇（硝苯二酸修饰）FFAPDB-FFAPStabilwax-DANukolCP Wax 58 CB,FFAP-CB聚乙二醇PEG-20MDB-WAXBP-20StabilwaxSupecolwax-10Carbowax 20MCP Wax 52 CB,联苯基聚甲基硅氧烷（14%联苯基）DB-XLB44Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited毛细柱的内径、膜厚及
26、柱容量I.D.流速 He(ml/min)柱容量(ng)0.1 0.2-0.6 10-150 0.25 0.6-1.3 40-250 0.32 1.4-2.2 60-400 0.53 4-20 80-600 45Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited一般进样量范围1.填充柱气体:0.550 ml液体 :0.11ml2.毛细柱气体 :0.11 ml液体 :0.0042.0ul46Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited进样量毛细柱分离的影响47Shimadzu Internat
27、ional Trading(Shanghai)Co.Limited色谱柱的老化v 为什么必须进行色谱柱老化？为什么必须进行色谱柱老化？新色谱柱含有溶剂和高沸点物质，所以基线不稳新色谱柱含有溶剂和高沸点物质，所以基线不稳，出现鬼峰和噪声；旧柱长时间未用，也存在同，出现鬼峰和噪声；旧柱长时间未用，也存在同样问题。样问题。一般采用升温老化，即从室温程序升温一般采用升温老化，即从室温程序升温到最高温度，并在高温段保持数小时。到最高温度，并在高温段保持数小时。新柱老化时，最好不要连接检测器。新柱老化时，最好不要连接检测器。v 每天都要进行老化吗？每天都要进行老化吗？视仪器基线情况，确定是否需要老化以及老
28、化时视仪器基线情况，确定是否需要老化以及老化时间。间。第五部分检测器检测器49Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited常用检测器检测器载气种类测定浓度应用热导（TCD）氦、氢、氩、氮50ppm以上无机气体、有机化合物氢火焰离子化（FID）氦、氮数ppm以上有机化合物电子捕获（ECD）氮数ppb以上有机卤素等化合物火焰热离子（FTD）氦、(氮)数ppb以上氮、磷化合物火焰光度（FPD）氦、氮约0.1ppm硫、磷化合物50Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedFID的检测原理v
29、 在氢火焰中，有机化合物燃烧产生在氢火焰中，有机化合物燃烧产生CHOCHO+离子，该离子，该离子强度与含量成正比。离子强度与含量成正比。v 该检测器检出的是有机化合物。该检测器检出的是有机化合物。v 无机气体及氧化物在该检测器无响应。无机气体及氧化物在该检测器无响应。51Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedFID检测器结构CH Oxidation CHO+e-组分在氢火焰中氧化52Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedTCD检测原理和结构惠斯通电桥惠斯通电桥53Shim
30、adzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedECD检测原理v 载气（氮气）载气（氮气）ECDECD检测器中电离成正离子和自由检测器中电离成正离子和自由电子电子v 亲电子化合物与自由电子结合生成负离子，在检亲电子化合物与自由电子结合生成负离子，在检测池中移动速度比自由电子慢测池中移动速度比自由电子慢v 生成的负离子与正离子结合生成的负离子与正离子结合v ECDECD中自由电子减少（离子流减小）中自由电子减少（离子流减小）v 自由电子减少与自由电子减少与亲电子化合物的浓度成正比亲电子化合物的浓度成正比v ECD是高选择性、高灵敏度的检测器，用于检测微
31、是高选择性、高灵敏度的检测器，用于检测微量或痕量的卤素化合物及硝基化合物。量或痕量的卤素化合物及硝基化合物。v 对电负性集团有高选择性对电负性集团有高选择性和高灵敏度和高灵敏度(如卤素如卤素)54Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedECD检测器结构N2 N2+e-PCB+e-PCB-PCB+N2+(neutral compound)b rayreverse55Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedFTD检测器v 有机氮化合物在碱金属表面热分解成激发态氮化有机氮化合物在碱
32、金属表面热分解成激发态氮化物物CNCN*,CN,CN*又从碱金属表面吸收电子，生成又从碱金属表面吸收电子，生成CNCN-，放出电子后的碱金属生成正离子，产生的信号电放出电子后的碱金属生成正离子，产生的信号电流被检出。流被检出。v 该检测器对有机氮、磷化合物具有高灵敏度和高该检测器对有机氮、磷化合物具有高灵敏度和高选择性。选择性。56Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedFTD检测器结构 硫酸铷硫酸铷加加热热到到 600-800Rb.+CN Rb*+CN-(Rb*indicates an excited Rb.)57Shimadzu
33、International Trading(Shanghai)Co.LimitedFPD检测原理v S S、P P在还原火焰中燃烧，产生特征波长的光线（在还原火焰中燃烧，产生特征波长的光线（S=394nm,P=526nm)S=394nm,P=526nm)。这些光线通过滤光片，经光。这些光线通过滤光片，经光电倍增器放大并转化为电信号被检测。电倍增器放大并转化为电信号被检测。v 该检测器对有机磷和有机硫化合物具有高选择性该检测器对有机磷和有机硫化合物具有高选择性和高灵敏度。和高灵敏度。58Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedFPD检测
34、器结构S:(S-S)*(S-S)+hv(394 nm)P:(PHO)*(PHO)+hv(526 nm)第六部分数据分析数据分析60Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited气相色谱分析步骤v开机：连好流路，先开载气再开电源，开辅助气开机：连好流路，先开载气再开电源，开辅助气v设定流量、温度、检测器参数设定流量、温度、检测器参数v用默认处理参数进行样品分析用默认处理参数进行样品分析v根据图谱调整分析条件，再分析样品，直至得到理想谱图根据图谱调整分析条件，再分析样品，直至得到理想谱图v确定定量方法（内标、外标、面积归一等）确定定量方法（内标
35、、外标、面积归一等）v选择校正点数，编辑选择校正点数，编辑IDID表（输入组分的保留时间和标样浓度）表（输入组分的保留时间和标样浓度）v选择校正次数（每浓度取几次均值）选择校正次数（每浓度取几次均值）v选择曲线计算方式（直线、最小二乘或折线选择曲线计算方式（直线、最小二乘或折线 ）v按从低浓度到高浓度的顺序，分析完所有标样，即完成曲线制作按从低浓度到高浓度的顺序，分析完所有标样，即完成曲线制作v进行未知样分析，每次分析结束，自动计算定量结果进行未知样分析，每次分析结束，自动计算定量结果v分析完了，关机：系统降温后，关电源，关载气。分析完了，关机：系统降温后，关电源，关载气。61Shimadzu
36、 International Trading(Shanghai)Co.Limited数据可靠性判断v 良好的峰面积重现性，一般良好的峰面积重现性，一般CV%CV%在在0.50.53%3%v 工作曲线具有良好的线性工作曲线具有良好的线性v 微量注射器的残留现象（交叉污染）微量注射器的残留现象（交叉污染）v 峰形正常，避免拖尾峰和前沿峰峰形正常，避免拖尾峰和前沿峰(柱选择恰当、衬管无污染、温度及流量设定柱选择恰当、衬管无污染、温度及流量设定)v 色谱峰分离良好色谱峰分离良好(分离度分离度2.5)2.5)62Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Lim
37、ited数据不良时的检查措施1.1.检查是否漏气检查是否漏气用检漏液检查各连接部位，并确认峰面积重现性用检漏液检查各连接部位，并确认峰面积重现性2.2.检查色谱柱是否良好检查色谱柱是否良好长时间使用，因吸附、固定液流失、固定液分解及污染，长时间使用，因吸附、固定液流失、固定液分解及污染，造成柱劣化，更换新柱造成柱劣化，更换新柱3.3.检查衬管是否正常检查衬管是否正常确认衬管有无破损、污染，确认石英棉的位置确认衬管有无破损、污染，确认石英棉的位置4.4.样品性质，是否易分解样品性质，是否易分解对于不稳定的样品应注意保存温度，要避光并注意存放时对于不稳定的样品应注意保存温度，要避光并注意存放时间。
38、间。63Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited计算方法v 峰处理参数（峰处理参数（WIDTH,SLOPE,DRIFT,T.DBLWIDTH,SLOPE,DRIFT,T.DBL等）等）v 定性：保留指数及允许误差（时间窗，时间带）定性：保留指数及允许误差（时间窗，时间带）v 定量：定量：v定量方法：定量方法：内标法、外标法、面积归一法等内标法、外标法、面积归一法等v工作曲线的制作工作曲线的制作 曲线点数：一点、两点及多点曲线点数：一点、两点及多点v 曲线计算：线性范围、线性回曲线计算：线性范围、线性回归、折线、二次曲线、三次曲线归、折
39、线、二次曲线、三次曲线64Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited峰处理参数-WIDTHv 控制数据采集速度，控制数据采集速度，WIDTH/10WIDTH/10采一次数据采一次数据v 去除高频噪声去除高频噪声(电磁干扰）电磁干扰）WH/2WIDTH/4WH/2WIDTH/4v 控制控制S.TESTS.TEST时间，斜率测试时间为时间，斜率测试时间为 1010WIDTHWIDTHv 推荐值：填充柱推荐值：填充柱 5 5 毛细柱毛细柱 2 23 3WIDTH：设为为最窄峰的半高宽，单位：秒65Shimadzu International
40、Trading(Shanghai)Co.Limited峰处理参数-SLOPEv 判断峰起点判断峰起点v 滤除低平噪声（如蛇行等）滤除低平噪声（如蛇行等）v SLOPESLOPE的确定：一般通过的确定：一般通过S.TESTS.TEST进行，测定时间进行，测定时间为为 1010倍倍WIDTHWIDTH的时间。的时间。v 特殊情况，可根据实际需要改变该值。特殊情况，可根据实际需要改变该值。SLOPE：10倍WIDTH的所有信号的总和，用于：66Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedSLOPE值的手动设定单位：uv/minSLOPESLOP
41、ESLOPESLOPE峰斜率，作为噪声滤除SLOPE峰斜率，积分不稳定，须手动设定67Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited峰处理参数-DRIFTDRIFT：判断相邻峰的积分方式注：1）设定值为0时，工作站将自动判断 2）如DRIFT与基线至峰谷连线较接近时，积分可能不稳定，导致面积值变化较大，需加以注意。68Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.LimitedDRIFT值的设定DRIFTDRIFTDRIFTDRIFTDRIFTDRIFT69Shimadzu International
42、 Trading(Shanghai)Co.Limited峰处理参数-T.DBLT.DBL2 x T.DBL4 x T.DBLWIDTHSLOPE2WIDTHSLOPE/24WIDTHSLOPE/48WIDTHSLOPE/8v 设定值为设定值为0 0时，自动判断；时，自动判断；v 不使用时可设为不使用时可设为10001000。v T.DBLT.DBL设定为某值时，设定为某值时，SLOPESLOPE和和WIDTHWIDTH按下图改变按下图改变 T.DBL：峰展宽一倍所需要的时间70Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited积分峰标记v E
43、E：超量程峰，这种峰的面积计算是错误的：超量程峰，这种峰的面积计算是错误的v S S：拖尾峰（溶剂峰常同时出现：拖尾峰（溶剂峰常同时出现S S、E E两个标记）两个标记）v T T：尾上峰，作过拖尾处理的峰：尾上峰，作过拖尾处理的峰v V V：与前邻峰垂直分割：与前邻峰垂直分割v L L：前沿峰：前沿峰 标记：标记：71Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited定性参数v 保留时间允许误差：保留时间允许误差：v 时间窗时间窗(%)-(%)-相对允差相对允差设定简单，但所测组分保留时间跨度大时，设定简单，但所测组分保留时间跨度大时，不易设
44、定不易设定v 时间带时间带-绝对允差绝对允差设定较繁，需逐个组分设定设定较繁，需逐个组分设定绝对保留值、相对保留值、多参考保留值72Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited定量方法v 面积归一化法面积归一化法v 校正面积归一化法校正面积归一化法v 外标法外标法v 内标法内标法73Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited定量方法简介一1 1、面积百分率法（面积归一）、面积百分率法（面积归一）各组分浓度以面积百分率表示，该结果可以确认各组分浓度以面积百分率表示，该结果可以确认大概
45、的浓度，但有误差。大概的浓度，但有误差。2 2、校正面积百分率法（校正面积归一）、校正面积百分率法（校正面积归一）用重量响应因子对峰面积进行修正，用该法测定用重量响应因子对峰面积进行修正，用该法测定的浓度比前者准确，但前提是样品中所有组分都的浓度比前者准确，但前提是样品中所有组分都出峰，否则也有误差存在。出峰，否则也有误差存在。这两种方法应用的必须条件是：这两种方法应用的必须条件是：v 样品中所有组分都出峰样品中所有组分都出峰v所有峰面积计算必须准确所有峰面积计算必须准确74Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited定量方法简介二3 3
46、、外标法、外标法该法是应用最广泛的方法之一，其误差来源主要该法是应用最广泛的方法之一，其误差来源主要是进样误差，因此，分析前一定要做面积重复性是进样误差，因此，分析前一定要做面积重复性（即进样重复性）实验。（即进样重复性）实验。4 4、内标法、内标法在样品中添加内标物，通过组分与内标峰的面积在样品中添加内标物，通过组分与内标峰的面积比，对组分进行定量。比，对组分进行定量。该方法减小了进样误差对定量结果的影响。该方法减小了进样误差对定量结果的影响。75Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited面积归一化法v 公式：公式：%100%AiAi
47、Ci优点：1）无需做校正、简便、快速2）进样量不严格要求缺点：1）所有组分都流出且被检测到2）所有组分的检测灵敏度都相同76Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited校正面积归一化法v 公式：公式：v 式中：式中：FiFi为校正因子，为校正因子，FiFi浓度（含量）浓度（含量）/面积面积优点：进样量要求不严格缺点：1）所有组分都流出且被检测到2）所有组分都需作校正%100)(%AiFiAiFiCi77Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited外标法v 公式：公式：iFiFAiCi
48、21优点：1）不需所有峰都流出或被检测到2）只对所测组分作校正缺点：1）进样量必须准确2）仪器必须有良好的稳定性78Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited内标法v 公式：公式：ISISCiFiFAAiCi)(21优点：1）进样量不严格要求2）只对所测组分作校正缺点：1）必须在样品中加一内标组分2）操作较为繁琐3）选择内标物困难79Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited定量参数（制备工作曲线）校正级别（校正级别（曲线计算方法曲线计算方法）v 单点校正（单点校正（liner)
49、liner)v 两点校正（两点校正（liner)liner)v 多点校正多点校正v线性回归线性回归v点到点连线（折线）点到点连线（折线）v二次曲线二次曲线v三次曲线三次曲线80Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited单点校正单点校正v 对每一组分仅做一个浓度的标样对每一组分仅做一个浓度的标样v 标样浓度应尽可能接近实际样品中各组分的浓度标样浓度应尽可能接近实际样品中各组分的浓度v 单点校正曲线通过原点单点校正曲线通过原点81Shimadzu International Trading(Shanghai)Co.Limited多点校正多点校正v 对每一组分至少作三个不同浓度水平的校正对每一组分至少作三个不同浓度水平的校正v 标样浓度范围应包含实际样品中各组分的浓度标样浓度范围应包含实际样品中各组分的浓度v 多级校正有几种方式多级校正有几种方式1.1.当当组分响应值随浓度变化不呈线性变化时，使用多组分响应值随浓度变化不呈线性变化时，使用多线性校正（折线校正）或二次曲线、三次曲线线性校正（折线校正）或二次曲线、三次曲线2.2.组分响应值随浓度变化呈线性变化时，使用最小二组分响应值随浓度变化呈线性变化时，使用最小二乘法，进行线性回归校正乘法，进行线性回归校正
