1、贵州天地药业有限责任公司贵州天地药业有限责任公司1第一部分第一部分 微生物知识微生物知识 第一章 微生物概论 一、什么是微生物一、什么是微生物微生物（microorganism,microbe）是一些肉眼看不见的微小生物的总称。包括属于原核类的细菌、放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体和蓝细菌（过去称蓝藻或蓝绿藻），属于真核类的真菌（酵母菌和霉菌）、原生动物和显微藻类，以及属于非细胞类的病毒、类病毒和朊病毒等。微生物千姿百态，有些是腐败性的，即引起食品气味和组织结构发生不良变化。当然有些微生物是有益的，它们可用来生产如奶酪，面包，泡菜，啤酒和葡萄酒。微生物非常小，必须通过显微镜放大约1000 倍
2、才能看到。比如中等大小的细菌，1000个叠加在一起只有句号那么大。想像一下一滴牛奶，每毫升腐败的牛奶中约有5千万个细菌，或者讲每毫升牛奶中细菌总数约为50亿。也就是一滴牛奶中可有含有50亿个细菌。2二、微生物的分类二、微生物的分类 根据微生物有无细胞基本结构、分化程度、化学组成等特点，可分为三大类。1.非细胞型微生物非细胞型微生物 无细胞结构，无产生能量的酶系统，由单一核酸（DNA/RNA）和蛋白质衣壳组成，必须在活细胞内增殖。病毒属于此类微生物。2.原核细胞型微生物原核细胞型微生物 细胞核分化程度低，只有DNA盘绕而成的拟核，无核仁和核膜。这类微生物包括细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体
3、和放线菌。3.真核细胞型微生物真核细胞型微生物 细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体，能进行有丝分裂。如真菌、藻类等。3三、三、微生物的作用及危害微生物的作用及危害1.1.微生物的作用微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。2.2.微生物的危害微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。从药品
4、生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。4第二章第二章 微生物的类群和形态结构微生物的类群和形态结构 微生物种类繁多，人们研究得最多、也较深入的主要有细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次体、古菌、真菌、显微藻类、原生动物、病毒、类病毒和朊病毒等。现择要介绍如下：一、细菌一、细菌 细菌是一类细胞细而短（细胞直径约0.5m-5m）、结构简单、细胞壁坚韧以二等分裂方式繁殖和水生性较强的原核微生物，分布广泛。2.2.细菌的特殊结构细菌的特殊结构特殊结构是指某些细菌具有的结构，包括荚膜、鞭毛、菌毛和芽孢，其中芽孢抵抗力最强，灭菌就以杀灭芽孢为依据。
5、51.1.细菌的形态与基本结构细菌的形态与基本结构 观察细菌最常用的仪器是光学显微镜，其大小可以用测微尺在显微镜下测量，一般以微米为单位。细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺形菌三类。（1）球菌 多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排列方式，分为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。（2）杆菌 形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球杆菌等。（3）螺形菌 菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆菌。细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结构。62.2
6、.细菌的特殊结构细菌的特殊结构特殊结构是指某些细菌具有的结构，包括荚膜、鞭毛、菌毛和芽孢，其中芽孢抵抗力最强，灭菌就以杀灭芽孢为依据。u 什么是芽孢？什么是芽孢？某些细菌在一定的环境条件下，胞质脱水浓缩，菌体内部形成一个圆形或椭圆形小体积称芽孢。芽孢的特点：芽孢是细菌的休眠状态，无繁殖能力。芽孢不直接引起疾病；当环境适宜时，芽孢又能发育成细菌的繁殖体，大量繁殖而致病；一个细菌只能形成一个芽孢，一个芽孢只能形成一个繁殖体；芽孢抵抗力极强在自然界克存活几年甚至几十年，灭菌以杀灭芽孢为依据；根据芽孢的大小、形态、和在菌体内的位置，可鉴别细菌。7892.2.细菌的繁殖细菌的繁殖 二分裂繁殖是细菌最普遍
7、、最主要的繁殖方式。其繁殖速度很快，大多数细菌约2030分钟繁殖一代，少数细菌繁殖速度较慢，需18小时才可繁殖一代。细菌的繁殖条件：丰富的营养物质：包括水分、无机盐类、蛋白胨、糖及生长因子；合适的酸碱度：大多数致病菌最适pH7.2-7.6；恰当的温度:大多数致病菌最适生长温度37；足够的气体：主要是氧气和二氧化碳。10细菌细胞分裂的电镜超薄切片图 杆菌二分裂过程模式图 11二、二、真菌真菌 真菌是一类有细胞壁，无叶绿素，以寄生或腐生方式生存，少数为单细胞，多数为多细胞，能进行无性或有性繁殖的一类真核细胞型微生物。真菌包括单细胞与多细胞两类。单细胞真菌呈圆形或卵圆形，称为酵母菌；多细胞真菌由菌丝
8、和孢子组成，并交织成团，称丝状菌或霉菌。真菌生长的最适的温度为2228，最适的pH值为4.06.0。其繁殖能力强，但生长速度比细菌慢，常需1-4周才形成菌落。真菌对热的抵抗力不强，一般加热6070 1小时即被杀死，但对干燥、日光、紫外线和一些化学消毒剂有抵抗力，对2.5碘酒、10甲醛则较敏感。12三、三、病毒病毒 病毒属非细胞型微生物，在自然界分布非常广泛，可在人、动物、植物、真菌和细菌中寄居并引起感染。病毒是体积最小、结构最简单的微生物，它仅有一种核酸（DNA或RNA）作其遗传物质。病毒必须在宿主活细胞内寄生，依靠细胞提供的能量、营养物质及生物大分子合成机制，完成病毒的复制过程。病毒与人类的
9、关系极为密切，人类的传染病约75是由病毒引起的。有些病毒传染性强，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。13理化因素对病毒的影响理化因素对病毒的影响（1）物理因素温度 多数病毒耐冷不耐热。在干冰温度（-70）和液氮温度（-196）下，病毒感染性可保持数月甚至数年。在5060 30分钟，100几秒钟即可灭活。pH 多数病毒在pH59范围内稳定，强酸或强碱条件下可被灭活。射线 X射线、射线和紫外线都能灭活病毒。（2）化学因素主要有化学消毒剂、抗生素及中草药等。除强酸、强碱消毒剂外，酚类、氧化剂、卤素类、醇类等对病毒均有灭活作用。14第三章第三章 微生物的营养微生物的营养一、微生物的营养要求一、微生
10、物的营养要求 微生物生长繁殖所需的营养物质主要有水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等。1.1.水水 水是各种生物细胞必需的，是良好的溶剂，微生物的新陈代谢过程中的一切生化反应都离不开水的作用。2.2.碳源碳源 碳源是合成菌体成分的原料，也是微生物获取能量的主要来源。整体上看来，微生物可以利用的碳源范围极广，分为有机碳源和无机碳源两大类。凡必须利用有机碳源的微生物就是异养微生物，凡能利用无机碳源的微生物就是自养微生物。糖类是最广泛利用的碳源。153.3.氮源氮源 氮源主要是供给合成菌体结构的原料，很少作为能源利用。与碳源相似，微生物作为一个整体来说，能利用的氮源种类十分广泛。某些微生物（如固氮菌）
11、能利用空气中分子态的氮或利用无机氮化物如铵盐、硝酸盐合成有机氮化物。4.4.无机盐类无机盐类 无机盐主要可为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素。微生物需要的无机盐类很多，主要有P、S、K、Na、Ca、Mg、Fe等，其主要功能为构成菌体成分；调节渗透压；作为某些酶的成分，并能激活酶的活性等。5.5.生长因子生长因子 有些微生物虽然供给它适合的碳源氮源和无机盐类，仍不能生长，还要供给一定量的所谓“生长因子”。其种类很多，主要是B族维生素的化合物等。生长因子可以从酵母浸出液、血液或血清中获得。16第四章第四章 微生物的生长和繁殖微生物的生长和繁殖一、微生物的生长和繁殖一、微生物的生长和繁殖微生物在
12、适宜的环境条件下，不断地吸收营养物质，并按照自己的代谢方式进行代谢活动，如果同化作用大于异化作用，则细胞质的量不断增加，体积得以加大，于是表现为生长。简单地说，生长就是有机体的细胞组分与结构在量方面的增加。单细胞微生物如细菌，生长往往伴随着细胞数目的增加。当细胞增长到一定程度时，就以二分裂方式，形成两个基本相似的子细胞，子细胞又重复以上过程。在单细胞微生物中，由于细胞分裂而引起的个体数目的增加，称为繁殖。在一般情况下，当环境条件适合，生长与繁殖始终是交替进行的。从生长到繁殖是一个由量变到质变的过程，这个过程就是发育。微生物处于一定的物理、化学条件下，生长发育正常，繁殖速率也高；如果某一或某些环
13、境条件发生改变，并超出了微生物可以适应的范围时，就会对机体产生抑制乃至杀灭作用。17二、细菌纯培养的群体生长规律二、细菌纯培养的群体生长规律 (1)延迟期：少量细菌接种到新鲜培养基后，一般不立即进行繁殖，生长速度近于零。因此在开始一段时间，细菌数几乎保持不变，甚至稍有减少。这段时间被称为延迟期，又称为迟缓期、调整期或滞留适应期。处于延迟期细菌细胞的特点是分裂迟缓、代谢活跃。延迟期的长短与菌种、种龄、接种量和培养基成分有关。(2)对数期：对数期又称指数期。这一阶段突出特点是细菌数以几何级数增加，代时稳定，细菌数目的增加与原生质总量的增加，与菌液混浊度的增加均呈正相关性。(3)稳定期：又称恒定期或
14、最高生长期。处于稳定期的微生物，新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等，整个培养物中二者处于动态平衡，此时生长速度又逐渐趋向零。稳定期的细胞内开始积累贮藏物，如肝糖、异染颗粒、脂肪粒等，大多数芽孢细菌也在此阶段形成芽孢。如果为了获得大量菌体，就应在此阶段收获，因这时细胞总数最高；这一时期也是发酵过程积累代谢产物的重要阶段，某些放线菌抗生素的大量形成也在此时期。(4)衰亡期：稳定期后如再继续培养，细菌死亡率逐渐增加，以致死亡数大大超过新生数，群体中活菌数目急剧下降，出现了“负生长”，此阶段叫衰亡期。18第五章第五章 热热 原原一、什么是热原？一、什么是热原？热原：指微量即能引起恒温动物体温异常升
15、高的物质的总称。是微生物的代谢产物，大多数细菌都能产生，致热能力最强的是革兰阴性杆菌所产生的热原，真菌和病毒也能产生热原。热原是微生物产生的一种内毒素，它存在于细菌的细胞膜和固体膜之间。内毒素是由磷脂、脂多糖和蛋白质所组成的复合物，其中脂多糖是内毒素的主要成分，具有特别强的热原活性，因而大致可以认为“内毒素=热原=脂多糖”。19二、热原的基本性质二、热原的基本性质 1、耐热性 在通常的灭菌条件下，热原往往不能被破坏，一般采用180，3-4h;250,30-45min或650，1min可彻底破坏热原。2、滤过性 热原直径约为1-5um，可通过一般滤器，甚至是微孔滤膜，孔径小于1nm的超滤膜可除去
16、绝大部分甚至全部热原。3、水溶性 热原可溶于水。4、不挥发性 热原具有不挥发性，但可溶于水蒸气所夹带的雾滴而带入蒸馏水中，因此，蒸馏水器上附有隔沫装置。5、被吸附性 热原可以被活性炭，离子交换树脂，石棉滤板等吸附。6、其他 热原能被强酸、强碱、强氧化剂、超声波等破坏。20三、污染热原的途径三、污染热原的途径 1、从溶媒中带入 溶媒常是注射剂中污染热原的主要途径。通常蒸馏器结构不合理，操作不当，注射用水贮放时间过长，均易导致注射用水含有热原。2、从原辅料中带入 有些原料本身容易滋生微生物，如果贮存时间过长或包装损坏，均易污染热原。3、从容器、用具、管道与设备中带入 配制注射剂的容器、用具、管道、
17、滤器等，使用前清洗不彻底或灭菌不完全，均可污染热原。4、制备过程中污染 环境的洁净级别达不到规定要求、或操作时间过长、灭菌不及时或灭菌不彻底、包装不严密等，都可能使注射剂污染热原。5、从输液器中带入 有时输液本生不含热原，但还是发生热原反应，一般就是由于输液用具污染热原而发生的热原反应。21四、除去热原的方法四、除去热原的方法 1、高温法 耐热器具洁净后用250干热灭菌30min以上可以破坏热原。2、酸碱法 玻璃器具可采用重铬酸钾硫酸清洁液或稀氢氧化钠处理破坏热原。3、吸附法 活性炭具有较强的吸附热原作用，同时兼有脱色助滤作用。应选用针用规格活性炭，常用量为0.1%-0.5%。此外，活性炭与白
18、陶土合用也可除去热原。4、离子交换法 热原分子含有带负电荷的磷酸根与羧酸根，强碱性阴离子交换树脂可吸附除去溶剂中的热原。5、凝胶滤过法 用二乙氨基乙基葡聚糖凝胶滤过可除去热原。6、反渗透法 选用三醋酸纤维素膜或聚酰胺膜进行反渗透可除去热原。7、超滤法 3.015nm的超滤膜能除去热原。22 第六章第六章 消毒与灭菌消毒与灭菌下列术语常用于表示物理或化学方法对微生物的杀灭程度。消毒消毒：杀死物体上病原微生物的方法,并不一定能杀死含细菌的芽胞。消毒所用的试剂称为消毒剂。灭菌灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌抑菌：抑制体内或体
19、外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂为各种抗生素，可抑制细菌的繁殖。防腐防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。同一种化学药品在高浓度时为消毒剂，低浓度时常为防腐剂。消毒与灭菌的方法一般可分为物理学方法和化学方法两大类。23一、物理消毒灭菌法一、物理消毒灭菌法 用于消毒灭菌的物理因素有热力、辐射、过滤等。1.1.热力灭菌法热力灭菌法 热力灭菌法分干热灭菌和湿热灭菌两大类，相同温度下，后者的灭菌效力比前者大。高温对细菌具有明显的致死作用，因此最常用于消毒与灭菌。多数无芽孢的细菌经5560作用3060分钟后死亡。经80湿热510分钟可杀死所有细菌繁殖体、真菌和酵母菌。细菌芽孢对高温有很强
20、的抵抗力，例如炭疽芽孢杆菌的芽孢，耐受515分钟的煮沸，而肉毒梭菌的芽孢则需煮沸35小时才死亡。如：葡萄糖注射液为121、12min、FO值12，氯化钠注射液为121、15min、FO值15，治疗性品种为121、10min、FO值10。242.2.辐射灭菌法辐射灭菌法（1）紫外线 作用于DNA，使细菌DNA的复制和转录受到干扰，导致细菌变异或死亡。波长在265-266nm杀菌效果最强，主要用于室内空气和工作台面的消毒。（2）电离辐射 对各种细菌均有致死作用。常用于大量一次性医用塑料制品的消毒和食品的消毒。（3）微波 是一种波长为1mm1m的电磁波，可穿透玻璃、塑料薄膜及陶瓷等物质，但不能穿透金
21、属表面。多用于检验室用品、无菌室的用具的消毒。3.3.滤过除菌法滤过除菌法 用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去,以达到除菌目的。滤菌器含有微细小孔0.22微米,只允许液体或气体通过,而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。适用范围：血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌。25二二.化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法 许多化学药物能影响微生物的化学组成、物理结构和生理活性，从而发挥防腐、消毒及灭菌的作用。洁净室(区)应定期消毒，使用的消毒剂不得对设备、物料和成品产生污染。消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。影响消毒剂作用效果的因素：消毒剂的性质、浓度及作用时间；细菌的种类和生活状态；环境因素，如有机物的
22、含量、温度、湿度及酸碱度等。26常用消毒剂的种类和用途常用消毒剂的种类和用途类别作用机制常用种类用途酚类蛋白变性，细胞膜损伤石炭酸地面、器具表面、皮肤消毒醇类蛋白变性乙醇皮肤、体温计消毒氧化剂氧化、蛋白沉淀高锰酸钾皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒重金属盐氧化、蛋白酶变性红汞、硫柳汞皮肤、粘膜、小创伤消毒氧化剂氧化、蛋白沉淀过氧乙酸、碘酒塑料、玻璃器材、皮肤消毒表面活性剂蛋白变性，细胞膜损伤新洁而灭手术洗手、浸泡手术器械27第二部分 洁净作业知识28一、洁净室一、洁净室1.1、洁净室的含义：洁净室是需要对尘粒及微生物数量进行控制的房间（区域），该房间（区域）的建造结构、装备及使用不仅能够截留粒子而且会
23、尽可能地减少粒子向该房间（区域）介入，并且，可根据需要对该房间（区域）的温度、湿度以及压差等参数进行控制。1.2、洁净室对药品生产的意义：药品，特别是静脉注射的药品，必须确保不受微生物的污染。悬浮在空气中的微生物大都依附在尘埃粒子表面，进入洁净室的空气，若不除尘控制微生物粒子，药品的质量就难以保证；药品生产过程中产生的各种粉尘必须除去，以防止药物的交叉污染和污染大气环境。药品生产中也会产生有害、高温、高湿的气体，需要及时排除，以保证生产人员的健康，保证生产不受影响，保证产品质量。调节控制空气至合适的温度和湿度，不仅是为生产人员提供舒适的生产劳动环境，而且也是药品生产质量保证的需要。29洁净度级
24、别尘粒最大允许数（粒/m）微生物最大允许数0.5m5m浮游菌（cfu/m3）沉降菌（cfu/皿）100级3500005110000级35000020001003100000级35000002000050010300000级10500000600001000151.3、洁净室（区）空气洁净度级别1.3.1 1998版GMP对药品生产洁净室（区）的空气洁净度划分为100级、10000级、100000级、300000级四个级别，具体划分详见下表：301.3.2 2010版GMP对药品生产洁净室（区）的空气洁净度划 分为A级、B级、C级、D级四个级别，具体划分详见下表：洁净度级别悬浮粒子最大允许数/立
25、方米 静态动态0.5m5.0m0.5m5.0mA级352020352020B级3520293520002900C级3520002900352000029000D级352000029000不作规定不作规定31洁净度级别浮游菌cfu/m3沉降菌(90mm)cfu/4h表面微生物接触碟(55mm)cfu/碟5指手套cfu/手套A级1111B级10555C级1005025D级20010050 微生物监测的动态标准321.4、洁净室（区）的送风量和换气次数1.4.1 1998版GMP送风量计算：单向流（层流）洁净室送风量=洁净室断面面积()风速 乱流（非单向流）洁净室送风量=洁净室容积（m3)换气次数（
26、次/h）换气次数：10000级洁净室换气次数n25次/h；100000级洁净室换气次数n15次/h；300000级洁净室换气次数n12次/h；1.4.2 2010版GMP送风量计算：单向流（层流）洁净室送风量=洁净室断面面积()风速 乱流（非单向流）洁净室送风量=洁净室容积（m3)换气次数（次/h）洁净区生产环境的空气换气次数应根据热量平衡及风量平衡计算，洁净区生产环境的空气换气次数应根据热量平衡及风量平衡计算，并加以验证。并加以验证。33项项 目目标标 准准 要要 求求材料及装修标准洁净室内表面应平整、光滑、无裂逢、接口严密、无颗粒脱落、防霉、防静电、避免眩光并耐受清洗和消毒、墙壁与地面交界
27、处宜成弧形或采取其它措施，以减少灰尘积聚和便于清洁。温度温度与药品生产工艺要求相适应，无特殊要求时，温度应控制在1826。湿度湿度与药品生产工艺要求相适应，无特殊要求时，湿度应控制在4565%。1.5、洁净室（区）内部分参数控制要求34项项 目目标标 准准 要要 求求照明主要工作室的照度宜为300Lx，对照度有特殊要求的生产部位要设置局部照明（例如质控室可见异物抽检）。压差1998版GMP空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于5帕，洁净室（区）与室外大气的静压差大于10帕，并应有指示压差的装置。2010版GMP洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差应不低于10帕斯卡。必要时，相同
28、洁净度级别的不同功能区域（操作间）之间也应当保持适当的压差梯度。噪声动态测试时室内噪声级应70dBA;空态测试时乱流洁净室噪声级应60dBA，层流洁净室噪声级应65dBA。洁净室（区）内部分参数控制要求35项项 目目标标 准准 要要 求求新风量进入洁净室的空气必须经净化处理，洁净室内应供给的新风量，其数值应取下列风量中的最大值：乱流洁净室总送风量的10%，平流洁净室总送风量的2%；补偿室内排风和保持室内正压值所需的新风量；保证室内每人每小时的新风量40m。洁净区域人数根据洁净区域空间大小与新风量，保证室内每人每小时的新风量，制定洁净区域各房间能够容纳多少人。洁净室（区）内部分参数控制要求36二
29、、污染洁净室（区）洁净度的因素。二、污染洁净室（区）洁净度的因素。2.1、来自外部的污染物质。a.大气污染 b.大气中的微生物2.2、洁净室内的污染源主要来自四个方面：a.作业人员；b.水 c.建筑围护结构、设施的产尘，这里包括墙、顶棚、地面和一些裸露管线的产尘；d.设备及产品生产过程的产尘。37污染发生源污染发生源粒状污染物粒状污染物有害气体有害气体备注备注人体粉尘、皮屑、污垢、细菌、纤维、化妆品体臭、CO2、氨、水蒸气吸烟粉尘（焦油、尼古丁等）二甲基硝酸铵等CO、CO2、NO、NO2、甲醛、丙烯醛、碳氢化合物在洁净室内禁止吸烟，在一般空调房间内也不宜吸烟办公设备纸张、家具的纤维及尘粒臭氧、
30、氨、溶剂挥发物（VOC）2.2.1、室内发生污染空气的主要物质，见下表：38污染发生源污染发生源粒状污染物粒状污染物有害气体有害气体备注备注机械运转设备转动设备磨损的粉尘、纤维、碳化油脂等润滑油挥发物燃烧器具烟尘CO、CO2、SO2、NO2、碳氢化合物等建筑材料细菌、霉菌、壁虱、石棉纤维、玻璃纤维、粉尘等甲醛、氡气、溶剂、粘接剂中有机溶剂挥发物（VOC）清洗、灭菌材料喷射剂（氟化碳氢化合物）、杀菌剂、防霉剂、溶剂、洗涤剂的挥发物392.3、人员与室内空气污染2.3.1、作业人员的发尘量：洁净室内的尘源，主要来自生产工艺设备运转发尘，产品和材料运送过程中发尘，洁净室内建筑内表面等的发尘和人员产尘
31、。来自生产设备运转中的尘粒有的可通过局部排风装置排除；按洁净室的管理规定，产品和材料均应进行清洁，在运送过程中的发尘量与人体发尘量相比是很少的；洁净室内表面只要严格按规定进行清扫、清洁，其发尘量也可控制到很少。洁净室的尘源主要来自操作人员的发尘，即使按“人净程序”进行了人身净化，洁净室内人员产尘仍是主要污染源。在洁净生产环境内，工作人员的发尘量多少与其穿着的洁净工作服种类、形式和洁净服的着装材质类型有关，与工作人员在洁净室内的活动、动作的幅度等因素有关。2.3.2、人体发菌量：生物洁净室，包括制药工业、生物制品工厂、医院的手术室等，必须控制人体的发菌量，人体的细菌散发量与服装、人员的活动及场所
32、等因素有关。40三、洁净室（区）的卫生管理要求三、洁净室（区）的卫生管理要求3.1、人员卫生 3.1.1、穿戴要求：根据各生产区域的规定穿戴工作服，并遵守净化程序。穿戴洁净工作服时，应先戴口罩后再穿洁净服，然后对着镜子检查穿戴工作服的情况，要求帽子要包盖全部头发，口罩要遮住口鼻、胡须、衣服要拉（扣）好，鞋带系好等。在10000级和100000级（B级和C级）空气洁净度级别的洁净区工作，每班洗一次洁净服、洁净工作鞋和口罩。更换下来的工作服应分区域堆放，装入专用容器中，标记明显。不同洁净区域的工作服不能同时在同一洗衣机内洗涤。洁净的工作服应存放在与使用工作服洁净度级别一致的区域内存放。413.1.
33、2、个人卫生：随时注意保持个人清洁卫生，做到“五勤”：勤剪指甲，勤理发剃须，勤换衣服，勤洗澡洗头、勤洗手。工作前洗干净手，不涂抺化妆品，上岗时不佩戴饰物、手表。不携带个人物品进入生产区，不在生产区内吃东西及吸烟。生产区内的饮水间要干净、整齐，对生产不造成污染。洁净室内随时注意保持手的清洁（上塞人员、胶塞漂洗人员需戴上经清洗并消毒过的乳胶手套后操作），手或手套在消毒以后，不能接触与工作无关的物品，严禁裸手直接接触药品及与药品直接接触的物料、设备、容器表面。一旦手或乳胶手套接触到与工作无关的物品，例如工作台台面、玻璃瓶瓶身、盛装丁基胶塞或中间品的容器具表面、门锁、洁净服以及口罩等，均应对手或手套进
34、行重新清洗与消毒后，方可继续操作。423.2、洁净室（区）环境卫生要求：按规定清洁消毒或灭菌（设备、设施及清洁工具）；严格执行人净物净管理制度。正确使用缓冲室、传递柜、传递窗等缓冲设施，规范工作行为。严格控制进入洁净区的人数。洁净室设施设备及清洁工具要符合GMP要求。严格执行人流、物流管理规定。433.3、物料卫生要求投入生产的原辅料必须符合药用标准。进入洁净区的物料，严格执行物净操作。根据工艺规程选用合适的工艺用水。与药品直接接触的压缩空气、干燥空气、惰性气体等应经净化处理，并符合要求443.4、设备卫生生产结束，按规定清洁设备。更换品种时，彻底清洁设备。备品、备件定置管理，进入洁净区的备品
35、备件从物流通道进入。对于产尘较大的工序或设备，要采取捕尘措施。45463.5、生产过程的卫生要求各车间、工序、岗位、容器具、设施设备等均应按相 应的清洁操作规程进行清洁、消毒。实行定置管理，保持良好的生产秩序。设备、设施均应有卫生状态标示，关键工序应在规定的时间内完成。按规定清场。四、洁净室（区）的作业程序4.1、人员进出洁净室（区）的标准程序：人员进入洁净区操作人员更衣程序（流程图）进出穿（脱）一般生产区工作鞋穿（脱）洁净工作鞋（洁净拖鞋）脱（穿）一般生产区工作服洗 手穿（脱）洁净工作服手消毒缓冲间脱（穿）生活鞋脱（穿）生活服穿（脱）一般生产区工作服洁净区脱（穿）一般生产区工作鞋474.2、
36、物料进出洁净室（区）标准程序484.3 意外情况处理1、洁净区出现设备故障，由操作人员立即报告工段长，工段长了解情况后，通知设备管理室并报告车间主任。2、维修工必须遵守洁净室管理制度，以及设备维修的有关规定，对设备进行维修。维修期间，操作工必须在场确保产品质量不受影响。3、洁净区通风系统出现故障或停电，按以下原则要求进行：不要打开通往低洁净级区的门。工段长立即向车间主任报告，并通知设备管理室；洁净区人员尽可能减少走动。灌装工段的灌装操作要立即停止。确定在5分钟内停电，操作人员要在原地静候。若故障时间较长（超过5分钟），则人员应缓慢离开洁净室。故障排除后若故障造成不同洁净级区间压差下跌甚至出现负压，则必须待压差正常后再运行15分钟，方能开始生产。故障排除后灌装工段生产现场的药液、玻璃瓶与丁基胶塞应视情形而进行回收或销毁。49
