1、活血化瘀类方药活血化瘀类方药的研究思路与方法的研究思路与方法 2010.12n传统中医理论对活血化瘀药功效的描述传统中医理论对活血化瘀药功效的描述n活血化瘀药是以疏通血脉、祛除瘀血为主要作活血化瘀药是以疏通血脉、祛除瘀血为主要作用，临床用于治疗血瘀证的药物。用，临床用于治疗血瘀证的药物。n活血化瘀药通过活血化瘀，产生止痛、调经、活血化瘀药通过活血化瘀，产生止痛、调经、破血消癥、疗伤消肿、活血消痈等作用。破血消癥、疗伤消肿、活血消痈等作用。n其主治范围较广，如内科之胸、腹、头诸痛，其主治范围较广，如内科之胸、腹、头诸痛，而痛如针刺，痛处固定者；体内之癥瘕积聚；而痛如针刺，痛处固定者；体内之癥瘕积
2、聚；中风后半身不遂，肢体麻木；关节痹痛日久；中风后半身不遂，肢体麻木；关节痹痛日久；血证之出血色紫，夹有血块；外伤科之跌扑损血证之出血色紫，夹有血块；外伤科之跌扑损伤，瘀肿疼痛，痈肿疮疡等。凡一切瘀血阻滞伤，瘀肿疼痛，痈肿疮疡等。凡一切瘀血阻滞之证，均可用之。之证，均可用之。血瘀症涉及的主要病种血瘀症涉及的主要病种n胸痹心痛症，与现代医学的冠心病、心胸痹心痛症，与现代医学的冠心病、心绞痛相关；绞痛相关；n中风、半身不遂与脑梗塞、脑血管意外中风、半身不遂与脑梗塞、脑血管意外相关；相关；n腹内肿块，痛有定处，常属血份，癥瘕腹内肿块，痛有定处，常属血份，癥瘕积聚与体内肿块相关；积聚与体内肿块相关；n
3、外伤科之跌扑损伤，瘀肿疼痛外伤科之跌扑损伤，瘀肿疼痛等。等。血瘀症的表现：血瘀症的表现：n血液流变学异常：血液有血液流变学异常：血液有“浓、粘、凝、聚浓、粘、凝、聚”倾向。倾向。n微循环障碍：通常指微动脉与静脉间的微血管微循环障碍：通常指微动脉与静脉间的微血管血液循环障碍。包括：微血流缓慢和淤滞；微血液循环障碍。包括：微血流缓慢和淤滞；微血管内凝血；微血管变形；微血管缩窄和闭塞；血管内凝血；微血管变形；微血管缩窄和闭塞；微血管周围水肿、瘀血和出血。微血管周围水肿、瘀血和出血。n血流动力学异常：器官或组织的血流血流动力学异常：器官或组织的血流、血管血管阻力阻力、血流循环障碍。血流循环障碍。一、活
4、血化瘀方药的研究思路一、活血化瘀方药的研究思路n1.改善高黏滞血症改善高黏滞血症 n高黏滞血症（高黏滞血症（blood hypervisicocity syndrome,BHS）以血液流变学异常和微循）以血液流变学异常和微循环障碍为特征。表现为血沉和红细胞压积提高，环障碍为特征。表现为血沉和红细胞压积提高，红细胞变形能力下降，纤维蛋白原含量增加，红细胞变形能力下降，纤维蛋白原含量增加，血小板黏附性、聚集性、血栓形成能力增高等。血小板黏附性、聚集性、血栓形成能力增高等。高黏滞血症影响对组织器官的正常血液灌注，高黏滞血症影响对组织器官的正常血液灌注，是机体血瘀的的病理表现，也是许多疾病发生、是机体
5、血瘀的的病理表现，也是许多疾病发生、发展过程中的重要环节。高血脂患者往往具有发展过程中的重要环节。高血脂患者往往具有高黏滞血症。高黏滞血症。与高黏滞血症相关的疾病与高黏滞血症相关的疾病n冠心病、缺血性脑血管病、糖尿病、肾冠心病、缺血性脑血管病、糖尿病、肾病综合征、慢性肺源性心脏病等。病综合征、慢性肺源性心脏病等。n活血化瘀药可不同程度地改善血液流变活血化瘀药可不同程度地改善血液流变学异常和微循环障碍，从而减轻高黏滞学异常和微循环障碍，从而减轻高黏滞血症，阻断与其相关疾病的发生或发展。血症，阻断与其相关疾病的发生或发展。2改善组织器官缺血改善组织器官缺血n组织器官缺血严重者可致组织梗死。组织器官
6、缺血严重者可致组织梗死。n心肌缺血心肌缺血n缺血性脑卒中。缺血性脑卒中。n活血化瘀药改善组织器官缺血的途径活血化瘀药改善组织器官缺血的途径：n扩张组织动脉血管、扩张组织动脉血管、n改善血液流变性、改善血液流变性、n改善微循环、改善微循环、n改善血管内皮细胞功能、改善血管内皮细胞功能、n清除氧自由基，减轻组织过氧化损伤等。清除氧自由基，减轻组织过氧化损伤等。3对慢性器官功能减退性疾对慢性器官功能减退性疾病的影响病的影响n血液循环不良可引起组织功能障碍。血液循环不良可引起组织功能障碍。n改善对组织器官血液循环，是改善其功改善对组织器官血液循环，是改善其功能障碍的有效手段之一。能障碍的有效手段之一。
7、n慢性肾衰患者常伴有血浆黏度及纤维蛋白慢性肾衰患者常伴有血浆黏度及纤维蛋白原浓度升高。血浆黏度与尿素氮、血肌酐原浓度升高。血浆黏度与尿素氮、血肌酐呈正相关。呈正相关。n血浆黏度的提高影响血液的流动性、导致血浆黏度的提高影响血液的流动性、导致血流缓慢、肾脏血流减少。血流缓慢、肾脏血流减少。n慢性肾衰由于尿毒症对红细胞膜的损害，慢性肾衰由于尿毒症对红细胞膜的损害，使红细胞的变形能力降低，聚集性增强，使红细胞的变形能力降低，聚集性增强，难以通过微血管造成微循环障碍。难以通过微血管造成微循环障碍。n中医认为中医认为“老年多瘀老年多瘀”。老年往往存在。老年往往存在动脉粥样硬化等退行性病变。凝血因子动脉粥
8、样硬化等退行性病变。凝血因子、vWF和纤维蛋白原均随年龄增和纤维蛋白原均随年龄增加而有不同程度增高，使血液黏度增加。加而有不同程度增高，使血液黏度增加。n（vWF：冯维勒布兰德因子，主要生理功能是促进血：冯维勒布兰德因子，主要生理功能是促进血小板在内皮下黏附及保护血浆因子小板在内皮下黏附及保护血浆因子不被降解。）不被降解。）4对血管痉挛性疾病的影响对血管痉挛性疾病的影响n偏头痛偏头痛 与脑血管痉挛有关，可能继发于中与脑血管痉挛有关，可能继发于中枢神经系统功能紊乱。有人发现偏头痛发枢神经系统功能紊乱。有人发现偏头痛发作期患者血液黏度和血小板聚集率均增加。作期患者血液黏度和血小板聚集率均增加。使用
9、活血化瘀中药有时可起到缓解作用。使用活血化瘀中药有时可起到缓解作用。如川芎即为治疗偏头痛的常用药物之一。如川芎即为治疗偏头痛的常用药物之一。n雷诺氏病雷诺氏病 患者表现为肢端微循环障碍。有患者表现为肢端微循环障碍。有报道，在活血化瘀治法基础上加用其他药报道，在活血化瘀治法基础上加用其他药物能使患者气血调畅，症状因此可得缓解。物能使患者气血调畅，症状因此可得缓解。5对慢性炎症的影响对慢性炎症的影响n上呼吸道慢性炎症、慢性胃炎、慢性阑尾炎、上呼吸道慢性炎症、慢性胃炎、慢性阑尾炎、盆腔炎等。盆腔炎等。n这些疾病的始发因素虽然不一定是血液循环这些疾病的始发因素虽然不一定是血液循环障碍，而多半是由于外邪
10、反复感染所致。但障碍，而多半是由于外邪反复感染所致。但由于致病过程较长，机体正气多有衰减，经由于致病过程较长，机体正气多有衰减，经脉气血瘀阻为常见，甚至炎症逐渐发展可伴脉气血瘀阻为常见，甚至炎症逐渐发展可伴有局部水肿、充血甚或可形成黏连、包块有局部水肿、充血甚或可形成黏连、包块（如盆腔炎）。（如盆腔炎）。n以活血化瘀为主，采用综合治疗，以促进组以活血化瘀为主，采用综合治疗，以促进组织血流通畅，改善组织营养，提高新陈代谢，织血流通畅，改善组织营养，提高新陈代谢，降低毛细血管通透性，有利于清除余邪，即降低毛细血管通透性，有利于清除余邪，即促进炎症感染过程的终止。促进炎症感染过程的终止。n许多活血化
11、瘀药具有抑制缺血组织许多活血化瘀药具有抑制缺血组织或炎症组织细胞间黏附分子表达上或炎症组织细胞间黏附分子表达上调、降低白细胞黏附率、抑制白细调、降低白细胞黏附率、抑制白细胞活化，抗氧自由基等作用，有利胞活化，抗氧自由基等作用，有利于改善炎症对组织器官的损害。于改善炎症对组织器官的损害。6对组织纤维化的影响对组织纤维化的影响n组织纤维化往往是慢性炎症反应的结果，组织纤维化往往是慢性炎症反应的结果，如肺纤维化、肝纤维化、动脉粥样硬化、如肺纤维化、肝纤维化、动脉粥样硬化、烧伤性角膜炎等。烧伤性角膜炎等。n血管内皮细胞和炎症细胞的激活可分泌血管内皮细胞和炎症细胞的激活可分泌大量的氧自由基以及大量的氧自
12、由基以及ET-1、TNF-、IL-1、IL-1、IL-6、TGF-等，并引等，并引起病灶内结缔组织细胞增殖，起病灶内结缔组织细胞增殖，、型胶原型胶原mRNA及蛋白表达水平增高。及蛋白表达水平增高。活血化瘀方药的研究思路概括活血化瘀方药的研究思路概括n1.改善高黏滞血症改善高黏滞血症n2改善组织器官缺血改善组织器官缺血n3对慢性器官功能减退性疾病的影响对慢性器官功能减退性疾病的影响n4对血管痉挛性疾病的影响对血管痉挛性疾病的影响n5对慢性炎症的影响对慢性炎症的影响n6对组织纤维化的影响对组织纤维化的影响二、活血化瘀的常用观察指标二、活血化瘀的常用观察指标n1血液流变性测定血液流变性测定 n 实验
13、观察药物能否改善血瘀模型动物血实验观察药物能否改善血瘀模型动物血液流变学异常。液流变学异常。n(1)红细胞压积测定：红细胞压积测定：一定体积的血液一定体积的血液中红细胞体积除以血液的体积称为红细中红细胞体积除以血液的体积称为红细胞压积或比积。红细胞压积增高，表示胞压积或比积。红细胞压积增高，表示血液浓度增高。血液浓度增高。n测定主要方法有文氏管压积管法。测定主要方法有文氏管压积管法。通脉活血灵胶囊对实验性高粘血症家兔通脉活血灵胶囊对实验性高粘血症家兔红细胞压积的影响（红细胞压积的影响（xs）组别组别剂量剂量（g/kg）动物动物(只只)红细胞压积红细胞压积正常对照正常对照80.330.01高粘模
14、型高粘模型80.430.02*通脉活血通脉活血灵灵2.41.2880.360.010.380.03与正常对照组比：与正常对照组比：*P0.001；与高粘模型组比：；与高粘模型组比：P0.05；P纤维蛋白原纤维蛋白原甘油三脂甘油三脂脂蛋白脂蛋白IgG，IgA白蛋白。白蛋白。n测定血浆、血清的黏度，分析血浆、血测定血浆、血清的黏度，分析血浆、血清中的各种蛋白成分变化，可分析、判清中的各种蛋白成分变化，可分析、判断患者血黏度异常的原因和药物影响血断患者血黏度异常的原因和药物影响血液黏度的环节。液黏度的环节。绞股蓝总皂甙对血液流变学的影响（绞股蓝总皂甙对血液流变学的影响（xs）组别组别动物数动物数（只
15、）（只）全 血 粘 度全 血 粘 度(mpas)（200/s）全 血 粘 度全 血 粘 度(mpas)（30/s）全血粘度全血粘度(mpas)（3/s）血浆粘度血浆粘度(mpas)水对照组水对照组102.620.21*3.420.39*7.681.20*1.430.22*模型组模型组113.490.334.650.5814.33.152.620.50绞股蓝总甙绞股蓝总甙200g/kg113.090.30*4.090.48*10.782.34*2.260.48绞股蓝总甙绞股蓝总甙100mg/kg113.320.454.330.6511.192.70*2.420.35绞股蓝总甙绞股蓝总甙50mg/
16、kg113.170.45*4.220.7011.702.57*2.130.32*川芎嗪注射川芎嗪注射液液113.300.424.370.6910.942.74*2.600.36注：注：模型组高分子右旋糖苷模型组高分子右旋糖苷0.5g/kg；与模型组比与模型组比*p0.001，*p0.01，*p700*藁本藁本35041551060681*N=8，*p0.01YLS-14B小动物血栓生成仪小动物血栓生成仪 直流电刺激，损毁颈动脉血管的内皮细胞，从而激活凝血因子，启动凝血机制。直流电刺激，损毁颈动脉血管的内皮细胞，从而激活凝血因子，启动凝血机制。红外检测血栓开始形成的时间，血栓阻塞血管的百分比的变
17、化以及全部栓死的红外检测血栓开始形成的时间，血栓阻塞血管的百分比的变化以及全部栓死的时间时间。2微循环功能测定微循环功能测定n大多采用活体观察法，如人体手指甲大多采用活体观察法，如人体手指甲襞、襞、眼球结膜、舌尖微循环观察眼球结膜、舌尖微循环观察;n家兔眼球结膜微循环，大鼠或家兔肠系家兔眼球结膜微循环，大鼠或家兔肠系膜、肝脏、肾脏、肺、软脑膜等脏器微膜、肝脏、肾脏、肺、软脑膜等脏器微循环，小鼠耳廓微循环观察等。通常循环，小鼠耳廓微循环观察等。通常在在冷光源下观察。冷光源下观察。n常见观察指标有常见观察指标有:（1）微血管形态）微血管形态n包括外形、管径、毛细血管网交点包括外形、管径、毛细血管网
18、交点数。病理情况下，微血管会出现痉数。病理情况下，微血管会出现痉挛、淤张、膨大和扭曲等畸形表现，挛、淤张、膨大和扭曲等畸形表现，同时管径缩小，单位面积毛细血管同时管径缩小，单位面积毛细血管网交点数减少网交点数减少。用方格型目镜用方格型目镜测微器在观察测微器在观察部位定出一定部位定出一定大小的正方格，大小的正方格，观察与其观察与其4边相边相交的毛细血管交的毛细血管数。数。（2）微血流状态）微血流状态：n包括微血管中的血色、流态、流速。在微循环包括微血管中的血色、流态、流速。在微循环中，血色反映含氧程度。红细胞流态最易观察，中，血色反映含氧程度。红细胞流态最易观察，并将它简称为流态。如应用先进的微
19、循环观察并将它简称为流态。如应用先进的微循环观察仪器或荧光微血管造影技术，则在微动脉和微仪器或荧光微血管造影技术，则在微动脉和微静脉中能看清血细胞轴流和血浆边流的变化。静脉中能看清血细胞轴流和血浆边流的变化。红细胞的流态分为四级：在正常情况下，呈红细胞的流态分为四级：在正常情况下，呈0级或级或0I级。在微循环障碍时，流态出现级。在微循环障碍时，流态出现IIII级，并可见白细胞贴壁翻滚、白色微小血栓。级，并可见白细胞贴壁翻滚、白色微小血栓。流速主要测定的是红细胞流速。流速主要测定的是红细胞流速。滴注丹参、生理盐水对微动脉口径、流速、流量的影响滴注丹参、生理盐水对微动脉口径、流速、流量的影响(s)
20、滴药后与滴滴药后与滴NA后后10min自身比较，自身比较，P0.05，P0.01；滴药后与滴生理盐水；滴药后与滴生理盐水同一时间比较，同一时间比较，*P0.05。时间时间(min)口径口径(m)流速流速(m/s)10-1流量流量(m3/s)104丹参丹参生理盐生理盐水水丹参丹参生理盐水生理盐水丹参丹参生理盐水生理盐水药前对照药前对照36 833 366 1365 1473 1654 13滴滴NA后后1015 1412 920 1710 1110 112 2滴药后滴药后130 9*14 833 16*12 925 19*3 2滴药后滴药后535 9*17 933 1413 1131 17*6 6
21、滴药后滴药后1034 9*19 6 44 17*14 11 43 27*6 7滴药后滴药后2031 8*30 5 48 1717 1237 20*13 11田鼠，先于颊囊局部滴注去甲肾上腺素田鼠，先于颊囊局部滴注去甲肾上腺素(NA)50 l(5 g100 l)，使微血管收缩，血流减，使微血管收缩，血流减慢。在滴慢。在滴NA前及后观察微循环变化。然后，于同一部位分别滴注丹参或生理盐水各前及后观察微循环变化。然后，于同一部位分别滴注丹参或生理盐水各50 l。在滴药后观察微循环变化。在滴药后观察微循环变化。（3 3）微血管周围变化：）微血管周围变化：n包括有无渗出、有无出血。微血管通包括有无渗出、有
22、无出血。微血管通透性正常时，周围无明显渗出现象；透性正常时，周围无明显渗出现象；在病理情况下，微血管壁通透性可升在病理情况下，微血管壁通透性可升高，导致血管内液体渗漏到组织间隙，高，导致血管内液体渗漏到组织间隙，从而使微血管轮廓变得模糊。如果微从而使微血管轮廓变得模糊。如果微血管壁完整性受到破坏，损伤较严重血管壁完整性受到破坏，损伤较严重可引起出血，在微血管周围可直接见可引起出血，在微血管周围可直接见到红细胞。到红细胞。荧光微血管造影荧光微血管造影(microangiography)技术技术n不仅能观察到普通显微术能看到的微循不仅能观察到普通显微术能看到的微循环表现，如微血管的形态、口径和长度
23、，环表现，如微血管的形态、口径和长度，血细胞的流态和流速等，而且能观察到血细胞的流态和流速等，而且能观察到普通显微术不易或不能看到的现象，如普通显微术不易或不能看到的现象，如血浆流态、微血管通透性、组织液流动血浆流态、微血管通透性、组织液流动和淋巴循环等。此外，荧光微血管造影和淋巴循环等。此外，荧光微血管造影还可间接判断局部组织或器官的血液灌还可间接判断局部组织或器官的血液灌流量。流量。3 3器官的血流量测定器官的血流量测定n（1）电磁流量计测定法：）电磁流量计测定法：器官的血流器官的血流量测定目前最常用的是电磁流量计。量测定目前最常用的是电磁流量计。通常，先要分离向器官供血的动脉，通常，先要
24、分离向器官供血的动脉，如向心肌供血的冠状动脉、向脑组织如向心肌供血的冠状动脉、向脑组织供血的颈总动脉（颈内动脉）或供血的颈总动脉（颈内动脉）或椎动椎动脉脉等。选择大小匹配的电磁流量计探等。选择大小匹配的电磁流量计探头，将其安在血管上。头，将其安在血管上。经动脉流入器经动脉流入器官的血液流量即会被记录下来。官的血液流量即会被记录下来。（2）氢清除技术测定法：）氢清除技术测定法：n利用无活性扩散性的利用无活性扩散性的H2，用呼吸或其他方法，将，用呼吸或其他方法，将H2（如在动脉内注入含（如在动脉内注入含H2溶液）输入体内。基于溶液）输入体内。基于血液的流动性，使体内各组织的血液的流动性，使体内各组
25、织的H2达一定浓度的达一定浓度的饱和状态，然后停止输入饱和状态，然后停止输入H2，组织中的，组织中的H2逐渐逐渐减减少。用探测电极连续记录、分析此廓清过程，可少。用探测电极连续记录、分析此廓清过程，可推算所在组织的血流量。用氢清除率法测定器官推算所在组织的血流量。用氢清除率法测定器官血流量的优点是不需分离动脉，测定部位的组织血流量的优点是不需分离动脉，测定部位的组织损害轻微，能用数量表示器管血流量在各层组织损害轻微，能用数量表示器管血流量在各层组织的分布。的分布。芸香苷口服对大鼠应激后胃黏膜血流量的影响芸香苷口服对大鼠应激后胃黏膜血流量的影响 组组别别剂量剂量动物数动物数胃黏膜血流量胃黏膜血流
26、量ml/minkg g1 1mg/kg（n）胃窦胃窦胃体胃体正正常常81112.9+110.2*818.0+99.9*模模型型8628.3+117.2395.4+122.1模型模型+芸香苷芸香苷58753.4+102.6*583.6+79.1*模型模型+芸香苷芸香苷208883.4+113.6*592.6+62.8*与正常组比较，与正常组比较，*P0.05,*P0.01。大鼠，分别灌胃给予芸香苷大鼠，分别灌胃给予芸香苷5mg/kg5mg/kg及及20mg/kg20mg/kg，对照组灌胃给予同体积生理盐水，连续给，对照组灌胃给予同体积生理盐水，连续给药药5 5日，每日日，每日2 2次，最后次，最
27、后1 1次给药后次给药后1h1h，放入，放入4 4o oC C冰箱内应激，冰箱内应激，3h3h后从冰箱取出，测定胃窦和后从冰箱取出，测定胃窦和胃体黏膜血流量。应激前，动物禁食胃体黏膜血流量。应激前，动物禁食24h24h。（3）激光多普勒血流量）激光多普勒血流量n有些脏器的血流量包括微循环血流量可有些脏器的血流量包括微循环血流量可采用激光多普勒血流量仪测定。如肝表采用激光多普勒血流量仪测定。如肝表面血流量测定，用激光多普勒仪的氦氖面血流量测定，用激光多普勒仪的氦氖光束透照到肝表面，从不动组织和活动光束透照到肝表面，从不动组织和活动的红细胞反射回来形成的参考光束和多的红细胞反射回来形成的参考光束和
28、多普勒转换光束，通过将两者频率的改变普勒转换光束，通过将两者频率的改变对比转换，可测出肝表面微循环血流量。对比转换，可测出肝表面微循环血流量。4 4抗动脉粥样硬化作用观察抗动脉粥样硬化作用观察n动脉粥样硬化（动脉粥样硬化（ASAS）模型的制备：）模型的制备：n（1 1）高脂膳食喂养法：）高脂膳食喂养法：n常以高脂膳食喂养家兔、鹌鹑、鸡而形成常以高脂膳食喂养家兔、鹌鹑、鸡而形成ASAS。n主动脉与冠状动脉的病变一般与血浆胆固醇主动脉与冠状动脉的病变一般与血浆胆固醇（Ch）浓度呈正相关，采用高脂膳食喂养动）浓度呈正相关，采用高脂膳食喂养动物或同时加入胆酸盐、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、物或同时加入胆酸盐
29、、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、烟碱等以促进外源性脂质吸收，使其超过机体烟碱等以促进外源性脂质吸收，使其超过机体需要和清除能力，造成动物脂质代谢紊乱。需要和清除能力，造成动物脂质代谢紊乱。（2 2）动脉内皮损伤：）动脉内皮损伤：n又分又分n化学性损伤法：家兔或大鼠灌服维生化学性损伤法：家兔或大鼠灌服维生素素D D，结合高脂膳食喂养，一般，结合高脂膳食喂养，一般21日后日后可快速诱发可快速诱发ASAS。n机械损伤法：家兔用充气导管进行主机械损伤法：家兔用充气导管进行主动脉内皮剥脱，结合高脂膳食喂养。动脉内皮剥脱，结合高脂膳食喂养。免疫性损伤法：免疫性损伤法：n机体对抗原物质，如生物性抗原、疫苗、机体对抗
30、原物质，如生物性抗原、疫苗、抗生素及组织自身抗原的免疫反应形成免抗生素及组织自身抗原的免疫反应形成免疫复合物在血管壁上沉积，引起补体系统疫复合物在血管壁上沉积，引起补体系统的激活，继而引起动脉内弹力膜的增殖性的激活，继而引起动脉内弹力膜的增殖性变化，在此病变的基础上，如果发生脂质变化，在此病变的基础上，如果发生脂质沉积，即可构成比较典型的沉积，即可构成比较典型的AS病变。病变。n方法：家兔注射马血清每次方法：家兔注射马血清每次10ml/kg，或，或家兔静脉注射牛血清白蛋白每次家兔静脉注射牛血清白蛋白每次250mg/kg，共，共4次，每次间隔次，每次间隔17日，结日，结合高脂膳食，可形成合高脂膳
31、食，可形成AS病变。病变。防治防治ASAS疗效的观察指标疗效的观察指标n通常涉及形态学检查和脂质代谢水平两方面。通常涉及形态学检查和脂质代谢水平两方面。形态学检查形态学检查：n主动脉粥样斑块病变分级程度，或用图像分主动脉粥样斑块病变分级程度，或用图像分析仪记录斑块面积及所占动脉壁的百分率；析仪记录斑块面积及所占动脉壁的百分率；n冠状动脉或肠系膜动脉等的病变分级可用光冠状动脉或肠系膜动脉等的病变分级可用光镜和电镜检测病变的形态学特点和定量观测血镜和电镜检测病变的形态学特点和定量观测血管内膜及中膜厚度的比值、内膜泡沫细胞数及管内膜及中膜厚度的比值、内膜泡沫细胞数及中膜完整平滑肌层数等。中膜完整平滑
32、肌层数等。形态学检查形态学检查 分级参考分级参考n0级级 内膜表面光滑，无斑块；内膜表面光滑，无斑块；0.5级内膜有级内膜有广泛奶油色或乳白色变化，但无凸出于表广泛奶油色或乳白色变化，但无凸出于表面的斑块；面的斑块；1级级 有明显的奶油色凸起斑块，有明显的奶油色凸起斑块，面积小于面积小于3mm2；2级级 斑块面积大于斑块面积大于3mm2；3级级 有许多大小不等的斑块，有有许多大小不等的斑块，有的融合，大斑块面积超过的融合，大斑块面积超过3mm2；4级级 动动脉内膜表面几乎全为融合斑块覆盖。脉内膜表面几乎全为融合斑块覆盖。n百分率法：百分率法：用图像分析仪记录斑块面积及用图像分析仪记录斑块面积及
33、所占动脉壁的百分率。所占动脉壁的百分率。冠状动脉冠状动脉内膜脂质浸润厚度内膜脂质浸润厚度新西兰兔一次性静注牛血清白蛋白新西兰兔一次性静注牛血清白蛋白250mg/kg，加每天喂高胆固醇饲料，造模，加每天喂高胆固醇饲料，造模60日后均停止高脂饲料，日后均停止高脂饲料，分别喂含分别喂含1号方、号方、2号方饲料，空白组喂普通饲料，号方饲料，空白组喂普通饲料，90日处死，取主动脉和冠状动脉染色后进行病变日处死，取主动脉和冠状动脉染色后进行病变程度分级程度分级与空白组比较与空白组比较,P0.05（下同）。（下同）。组别组别动物数动物数00.5级级1级级2级级3级级4级级空白组空白组6022111号方号方组
34、组8610102号方号方组组511210 脂质代谢测定：脂质代谢测定：n病变组织或血清中脂质（病变组织或血清中脂质（TC、TG）；）；脂蛋白（脂蛋白（HDL、LDL、VLDL）、）、n载脂蛋白（载脂蛋白（apoA、apoB）含量。）含量。n（免疫透射比浊法测定（免疫透射比浊法测定apoA，apoB试剂盒。）试剂盒。）ApoA与与ApoB n载脂蛋白载脂蛋白A（ApoA）:目前发现三种亚组分，目前发现三种亚组分，即即ApoA I、ApoA II和和ApoA IV。ApoA I是是ApoA族最多的一种组份，族最多的一种组份，ApoA族主要存在于族主要存在于HDL 中，研究表明它与冠心病呈负相关中，
35、研究表明它与冠心病呈负相关;nApoB 是是 LDL（低密度脂蛋白）（低密度脂蛋白）的主要蛋白的主要蛋白质，高质，高 ApoB 是冠心病的危险因素。是冠心病的危险因素。n理想的降脂治疗在降低血清胆固醇理想的降脂治疗在降低血清胆固醇(TC)和血清和血清甘油三酯甘油三酯(TG)的同时，也应降低的同时，也应降低ApoB，升高，升高ApoA、及、及ApoA/ApoB比值。比值。组组别别剂量（剂量（g/kg）TCTGLDL生理盐水生理盐水0.590.410.790.150.160.14模型对照模型对照13.051.111.670.3712.371.19保保心心丸丸85.130.740.770.394.6
36、60.70诺诺衡衡0.0811.771.350.880.2411.071.43保心丸对实验性保心丸对实验性AS家兔的作用家兔的作用 (xs，g/L)日本大耳兔，高脂饲料连续日本大耳兔，高脂饲料连续60日日制成制成AS模型并进行试验模型并进行试验。保心丸组给予保心。保心丸组给予保心丸丸8g（生药）（生药）/kg，正常组和模型组给予生理盐水，正常组和模型组给予生理盐水，与正常组比较，与正常组比较,P 0.01；与模型组比较；与模型组比较,P 0.05，P 0.01。鱼腥草素对模型大鼠血清鱼腥草素对模型大鼠血清ApoA1，ApoB,ApoA1/ApoB的影响（的影响（S）组别组别N剂量剂量（mg/k
37、g）ApoA1/g/LApoB/g/LApoA1/ApoB正常正常10NS0.280.040.620.220.480.12模型模型9NS0.460.172.120.760.220.05鱼腥草鱼腥草素素10450.390.100.730.17*0.540.12*鱼腥草鱼腥草素素10900.320.130.660.33*0.510.14*辛伐他辛伐他汀汀1050.560.161.000.18*0.550.10*注：与正常组比较，注：与正常组比较，p0.05，p0.01；与模型组比较，；与模型组比较，*p0.05，*p0.015与活血化瘀功效相关的体内与活血化瘀功效相关的体内主要活性物质测定主要活性
38、物质测定n血栓烷血栓烷(TAX2)：主要在血小板内合成，具有很主要在血小板内合成，具有很强的促进血小板聚集、血栓形成和收缩血管的强的促进血小板聚集、血栓形成和收缩血管的作用。作用。n血管内皮素血管内皮素(ET):又称内皮收缩因子，具有比又称内皮收缩因子，具有比TAX2更强的收缩血管作用。更强的收缩血管作用。nET：有有3种亚型，种亚型，ET1主要由内皮细胞和血管主要由内皮细胞和血管平滑肌细胞生成；平滑肌细胞生成；ET2主要在肾、肠生成；主要在肾、肠生成；ET3在大脑的浓度最高。在大脑的浓度最高。n前列环素（前列环素（PGI2）：）：在血管内皮合成，与在血管内皮合成，与TAX2作用相反，具有很强
39、的抑制血小板聚集、作用相反，具有很强的抑制血小板聚集、抗血栓形成和扩张血管的作用。抗血栓形成和扩张血管的作用。nET1、TAX2、PGI2可用放射免疫测试药可用放射免疫测试药盒或用盒或用ELISA试剂盒测定。试剂盒测定。总放射管总放射管空白管空白管零标准管零标准管标准管标准管样本管样本管试管号试管号12345672021缓冲液缓冲液0.40.30.20.20.5%r-球蛋白球蛋白0.20.20.20.2标准样品标准样品TXB20.1（2.5160pg/0.1ml）样品样品0.1示踪示踪TXB20.10.10.10.10.1抗体抗体0.10.10.140C过夜过夜 25%聚乙二醇聚乙二醇0.70
40、.70.70.7离心，取沉淀测定放射强度离心，取沉淀测定放射强度TXB2放射免疫分析操作方法：放射免疫分析操作方法：一氧化氮（一氧化氮（NO）：）：n血管内皮及其他多种细胞都能合成，具血管内皮及其他多种细胞都能合成，具有舒张血管、保护内皮细胞、抑制血小有舒张血管、保护内皮细胞、抑制血小板黏附和聚集、参与炎症反应及免疫调板黏附和聚集、参与炎症反应及免疫调节等作用。节等作用。NO长期合成不足可导致血栓长期合成不足可导致血栓形成、动脉粥样硬化等疾病的发生与发形成、动脉粥样硬化等疾病的发生与发展。但展。但NO可增加血管通透性，促进水肿可增加血管通透性，促进水肿等急性炎症过程，因此，局部浓度过高等急性炎症过程，因此，局部浓度过高会产生不利作用。会产生不利作用。
