红细胞体积分布宽度RDW课件.ppt

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资源描述

1、6 6 检测参数和结果显示检测参数和结果显示一、检测参数一、检测参数n 三分类血细胞分析仪的三分类血细胞分析仪的18项项参数参数n 五分类血细胞分析仪新增的一些五分类血细胞分析仪新增的一些参数参数(一)白细胞系列参数(一)白细胞系列参数序号序号英文缩写英文缩写中文全称中文全称1 1WBC白细胞数白细胞数2 2NEUT#中性粒细胞数中性粒细胞数3 3LYMPH#淋巴细胞数淋巴细胞数4 4MONO#单核细胞数单核细胞数5 5LYMPH%淋巴细胞百分率淋巴细胞百分率6 6MONO%单核细胞百分率单核细胞百分率7 7NEUT%中性粒细胞百分率中性粒细胞百分率(二)红细胞系列参数(二)红细胞系列参数序号

2、序号英文缩写英文缩写中文全称中文全称1 1RBCRBC红细胞数红细胞数2 2HGBHGB血红蛋白量血红蛋白量3 3HCTHCT红细胞压积红细胞压积4 4MCVMCV平均红细胞体积平均红细胞体积5 5MCHMCH平均红细胞血红蛋白量平均红细胞血红蛋白量6 6MCHCMCHC平均红细胞血红蛋白浓度平均红细胞血红蛋白浓度7 7RDWRDW红细胞体积分布宽度红细胞体积分布宽度(三)血小板系列(三)血小板系列参数参数序序号号英文缩写英文缩写中文全称中文全称1 1PLT血小板数血小板数2 2MPV平均血小板容积平均血小板容积3 3PDW血小板体积分布宽度血小板体积分布宽度4 4PCT血小板压积血小板压积(

3、一)新增分类参数(一)新增分类参数序序号号英文缩写英文缩写中文全称中文全称1 1EO#嗜酸性粒细胞数嗜酸性粒细胞数2 2BASO#嗜碱性粒细胞数嗜碱性粒细胞数3 3EO%嗜酸性粒细胞百分率嗜酸性粒细胞百分率4 4BASO%嗜碱性粒细胞百分率嗜碱性粒细胞百分率(二)新增网织红细胞参数(二)新增网织红细胞参数序号序号英文缩写英文缩写中文全称中文全称1Retic#网织红细胞数网织红细胞数2Retic%网织红细胞百分率网织红细胞百分率3LFR低荧光强度网织红细胞比率低荧光强度网织红细胞比率4MFR中荧光强度网织红细胞比率中荧光强度网织红细胞比率5HFR高荧光强度网织红细胞比率高荧光强度网织红细胞比率二

4、、二、检测参数的临床应用检测参数的临床应用l红细胞系列参数红细胞系列参数l血小板系列参数血小板系列参数l白细胞系列参数白细胞系列参数一)一)RBC系列参数系列参数1.鉴别缺铁性贫血和鉴别缺铁性贫血和-轻型海洋性贫血轻型海洋性贫血:1)共同点:小细胞性贫血,峰左移。2)鉴别点:aRDW增高,峰底宽 bRDW正常,峰底窄(一)(一):红细胞体积分布宽度(:红细胞体积分布宽度(RDW)bNfl100 200 a2诊断缺铁性贫血诊断缺铁性贫血为小细胞低色素性贫血,伴有为小细胞低色素性贫血,伴有RDW异常增异常增高者(高者(RDW正常可排除)正常可排除)3.进行贫血的新的形态学分类(进行贫血的新的形态学

5、分类(MCV/RDW)大细胞不均一性大细胞不均一性正细胞不均一性正细胞不均一性小细胞不均一性小细胞不均一性异常异常大细胞均一性大细胞均一性正细胞均一性正细胞均一性小细胞均一性小细胞均一性正常正常RDW增增 高高正正 常常减减 低低MCV(二)网织红细胞参数(二)网织红细胞参数1.未成熟网织红细胞比率(未成熟网织红细胞比率(IRF):用网织红用网织红细胞分析骨髓造血状态优于白细胞计数细胞分析骨髓造血状态优于白细胞计数和血小板计数。和血小板计数。(1)骨髓抑制)骨髓抑制:HFR和和MFR的减低早于中的减低早于中性粒细胞和血小板计数。骨髓恢复时,性粒细胞和血小板计数。骨髓恢复时,HFR和和MFR迅速

6、增高。迅速增高。(2)放疗和化疗时)放疗和化疗时:长期化疗,:长期化疗,HFR和和MFR减低早于减低早于LFR。而。而HFR和和MFR的迅的迅速增高是骨髓恢复的征象。速增高是骨髓恢复的征象。(3)IRF与与Ret的变化在不同的疾病中不的变化在不同的疾病中不同同:见:见P125的表的表319。2.网织红细胞血红蛋白量(网织红细胞血红蛋白量(Ret-He):反映反映Ret的质量变化,达的质量变化,达30.5 pg为患者需为患者需要补充铁的最佳临界值,与要补充铁的最佳临界值,与CHr有很好的有很好的相关性。相关性。3.网织红细胞平均血红蛋白量(网织红细胞平均血红蛋白量(CHr):):29pg/细胞是

7、患者补铁指标,为缺铁性细胞是患者补铁指标,为缺铁性贫血的灵敏指标,代表体内铁蛋白代谢贫血的灵敏指标,代表体内铁蛋白代谢的最新进展。的最新进展。4.网织红细胞平均体积(网织红细胞平均体积(MRV)和球形细)和球形细胞平均体积(胞平均体积(MSCV):正常人的正常人的MSCV比比MCV大,当大,当MSCV93.3%.MRV是观察是观察EPO疗效一个稳定且较灵敏的疗效一个稳定且较灵敏的指标。指标。HDW是反映周围血红细胞内血红蛋白是反映周围血红细胞内血红蛋白含量异质性参数。含量异质性参数。HDW和和RDW明显增明显增高:见于遗传性球红细胞增多症。另外,高:见于遗传性球红细胞增多症。另外,HDW对镰形

8、细胞贫血、对镰形细胞贫血、-轻型海洋性轻型海洋性贫血有一定诊断意义。贫血有一定诊断意义。(三)血红蛋白分布宽度(三)血红蛋白分布宽度(HDW)二)血小板系列参数二)血小板系列参数(1)鉴别鉴别PLT减低时的病因减低时的病因:MPV正常或增高:正常或增高:ITP、脾亢、脾亢、SLE MPV正常或减低:正常或减低:AA。MPV减低:减低:急性白血病、艾滋病。急性白血病、艾滋病。1.血小板平均体积(血小板平均体积(MPV)(2)评价骨髓造血功能恢复情况:评价骨髓造血功能恢复情况:局部炎症:局部炎症:MPV正常;败血症:正常;败血症:MPV减减低。低。白血病缓解:白血病缓解:MPV增高。增高。MPV和

9、和PLT持续减低:骨髓造血衰竭;骨持续减低:骨髓造血衰竭;骨髓功能恢复:髓功能恢复:MPV增高。增高。(3)MPV与血小板功能关系:与血小板功能关系:明显相关,明显相关,大血小板代谢活跃,粘附聚集力强。大血小板代谢活跃,粘附聚集力强。(4)MPV与与PLT:两者呈非线性负相关,两者呈非线性负相关,随随PLT计数增高,计数增高,MPV变小;骨髓受抑变小;骨髓受抑时,时,MPV减低早于减低早于PLT减少;骨髓受抑减少;骨髓受抑恢复时,恢复时,MPV增高又早于增高又早于PLT增高。增高。IPF反映骨髓增生状态,更新血小板的速度和细胞反映骨髓增生状态,更新血小板的速度和细胞动力学变化,在血小板减少症的

10、鉴别诊断中有重动力学变化,在血小板减少症的鉴别诊断中有重要意义。要意义。骨髓造血功能良好骨髓造血功能良好:IPF增高,可见于血栓性血小增高,可见于血栓性血小板减少性紫癜。板减少性紫癜。骨髓造血受抑骨髓造血受抑:IPF减低,可见于减低,可见于AA。2.未成熟血小板比率(未成熟血小板比率(IPF)3.血小板分布宽度(血小板分布宽度(PDW):):镰形红细胞性镰形红细胞性贫血时贫血时PDW升高。升高。4.血小板成分平均浓度(血小板成分平均浓度(MPC):):反映血小反映血小板内的密度,减低表示血小板激活,与反板内的密度,减低表示血小板激活,与反映血小板活化的表面抗原映血小板活化的表面抗原CD62P定

11、量(金定量(金标准检测)有很好的相关性。标准检测)有很好的相关性。三)白细胞系列参数三)白细胞系列参数1、中间细胞群(、中间细胞群(MID):包括正常时的包括正常时的M、E、B;病理时的各种原始幼稚细胞、异型淋巴;病理时的各种原始幼稚细胞、异型淋巴细胞、浆细胞等。细胞、浆细胞等。MID异常,必须进行复异常,必须进行复检。检。2、未成熟粒细胞(、未成熟粒细胞(IG):主要包括杆状核、主要包括杆状核、早幼、中幼和晚幼粒,但不包括原始粒细早幼、中幼和晚幼粒,但不包括原始粒细胞。胞。IG3,提示败血症。,提示败血症。三、结果显示三、结果显示数数 据据图图 形形报报 警警(一)数据(一)数据 化验单化验

12、单姓名姓名 :程实:程实 性别:男性别:男 年龄:年龄:30岁岁科室:内科科室:内科 结果结果临床诊断:肺炎?临床诊断:肺炎?RBC 4.51012/L送检标本:血送检标本:血 Hb 150g/L送检目的:血常规送检目的:血常规 WBC 12109/L DC:N 80%L 14%E 3%M 2%B 1%送检医师送检医师 罗春丽罗春丽 报告医师:吴明报告医师:吴明送检日期:送检日期:2007-8-2 报告日期:报告日期:2007-8-2 (二)图形(二)图形血细胞分析仪常用的图形有两类:直方图和血细胞分析仪常用的图形有两类:直方图和散点图,分别对应不同的原理。散点图,分别对应不同的原理。分析这些

13、图形的变化,不仅可以评估仪器的分析这些图形的变化,不仅可以评估仪器的工作状态或仪器是否受非检测成分的干扰,工作状态或仪器是否受非检测成分的干扰,而且可提示各类细胞比率的变化或血液内而且可提示各类细胞比率的变化或血液内出现非正常血细胞。出现非正常血细胞。1.电阻法细胞体积分布直方图分析电阻法细胞体积分布直方图分析 细胞分析仪根据各类细胞大小为横坐标,以细胞分析仪根据各类细胞大小为横坐标,以纵坐标表示一定体积细胞的相对频率,从而纵坐标表示一定体积细胞的相对频率,从而获得获得RBC、WBC和和PLT的直方图。相对数的直方图。相对数表示在表示在Y轴上,体积表示在轴上,体积表示在X轴上,以飞升轴上,以飞

14、升(fl)为单位。为单位。(1)白细胞直方图)白细胞直方图WBC通过计数小孔时,仪器计算机部分可通过计数小孔时,仪器计算机部分可以将以将WBC体积从体积从35450fL分为分为256个通道,个通道,每个通道为每个通道为1.64fL。细胞根据其大小被分。细胞根据其大小被分别放在不同的通道中,从而得到白细胞体别放在不同的通道中,从而得到白细胞体积分布直方图。积分布直方图。三分群:三分群:小细胞群:成熟淋巴细胞小细胞群:成熟淋巴细胞中间细胞群:中间细胞群:单核细胞单核细胞,嗜酸粒细胞,嗜碱,嗜酸粒细胞,嗜碱粒细胞粒细胞大细胞群:大细胞群:中性粒细胞,杆状核细胞,中性中性粒细胞,杆状核细胞,中性晚幼粒

15、细胞晚幼粒细胞两分群:两分群:小细胞群:淋巴细胞小细胞群:淋巴细胞 大细胞群:大细胞群:粒细胞粒细胞.正常正常WBC直方图直方图血液分析仪在血液分析仪在35450fL范围内分析白细胞,范围内分析白细胞,可以看到三个明显的细胞分区。可以看到三个明显的细胞分区。左侧又高又陡的峰,跨越在左侧又高又陡的峰,跨越在3590fL,为,为淋巴细胞峰,主要为成熟淋巴细胞。淋巴细胞峰,主要为成熟淋巴细胞。最右侧又低又宽的峰从最右侧又低又宽的峰从160450fL,定位,定位中性粒细胞峰,以中性粒细胞峰,以N为主要细胞,也包含为主要细胞,也包含杆状和晚幼粒细胞。杆状和晚幼粒细胞。两峰之间的平坦区:两峰之间的平坦区:

16、90160fL,定为单个,定为单个核细胞峰,以单核细胞为主,也含核细胞峰,以单核细胞为主,也含E、B等。等。.直方图分析应注意的问题直方图分析应注意的问题溶血剂处理的溶血剂处理的WBC体积与其自然体积无关,体积与其自然体积无关,仪器法仪器法M体积小于中性粒细胞体积小于中性粒细胞原因原因。各厂家血液分析仪所用的稀释液、溶血剂各厂家血液分析仪所用的稀释液、溶血剂成分不完全相同,对白细胞膜的作用程度不成分不完全相同,对白细胞膜的作用程度不同,同一份血液在不同仪器直方图形状有所同,同一份血液在不同仪器直方图形状有所不同,分群的设置点不同,因此必须使用配不同,分群的设置点不同,因此必须使用配套试剂套试剂

17、 影响体积出入的因素:影响体积出入的因素:溶血剂溶血剂 白细胞计数池除加入一定量的稀释液之外还要白细胞计数池除加入一定量的稀释液之外还要加入溶血剂,红细胞膜溶解同时白细胞膜通加入溶血剂,红细胞膜溶解同时白细胞膜通透性改变,白细胞质渗出,使细胞膜紧裹在透性改变,白细胞质渗出,使细胞膜紧裹在细胞核或存在的颗粒物质周围,所以经溶血细胞核或存在的颗粒物质周围,所以经溶血剂处理后含有颗粒的粒细胞比无颗粒的单核剂处理后含有颗粒的粒细胞比无颗粒的单核细胞和淋巴细胞体积大些。细胞和淋巴细胞体积大些。WBC体积直方图不完全相同,但电阻抗体积直方图不完全相同,但电阻抗法各类仪器白细胞直方图病理变化趋势是法各类仪器

18、白细胞直方图病理变化趋势是一致的,因此,在分析各种病理变化的图一致的,因此,在分析各种病理变化的图形之前,必须先掌握自己实验室所拥有的形之前,必须先掌握自己实验室所拥有的白细胞正常直方图。白细胞正常直方图。报警报警如果被检测的标本异常,不能满足实验室已如果被检测的标本异常,不能满足实验室已设定的各项规则,则仪器出现报警。此时,设定的各项规则,则仪器出现报警。此时,工作人员必须特别注意复核标本。工作人员必须特别注意复核标本。总之,检测结果出现报警,意味着仪器检测总之,检测结果出现报警,意味着仪器检测结果可靠性已经明显降低,需复核确认。结果可靠性已经明显降低,需复核确认。(1)报警来源)报警来源:

19、主要有检测结果超出实验:主要有检测结果超出实验室设定的检测项目参考值,复检标本,临室设定的检测项目参考值,复检标本,临床疾病标本异常和患者人群变异。床疾病标本异常和患者人群变异。(2)报警有效性)报警有效性:仪器以参考方法检测结:仪器以参考方法检测结果为标准,判断仪器的检测性能指标包括:果为标准,判断仪器的检测性能指标包括:灵敏度、特异性、阳性预测值、和阴性预灵敏度、特异性、阳性预测值、和阴性预测值总效率。测值总效率。(3)报警形式)报警形式:符号(:符号(表示增高,表示增高,表示表示降低),颜色(如红色表示增高,蓝色降低),颜色(如红色表示增高,蓝色表示降低),或直接用文字(在结果旁表示降低

20、),或直接用文字(在结果旁注明注明“增高增高”、“降低降低”,或标以,或标以R1、R2、R3、R4等)等)L峰左侧区域异常峰左侧区域异常(R1):可能有血小板聚可能有血小板聚集、巨大血小板、有核红细胞、未溶解红集、巨大血小板、有核红细胞、未溶解红细胞、白细胞碎片、蛋白质或脂类颗粒。细胞、白细胞碎片、蛋白质或脂类颗粒。L峰与单个核细胞峰之间区域异常峰与单个核细胞峰之间区域异常(R2):可能有异淋可能有异淋,浆细胞浆细胞,原始细胞,原始细胞,E、B增多。增多。单个核细胞区与单个核细胞区与N峰区之间区域异常峰区之间区域异常(R3):可能有未成熟:可能有未成熟N、异常细胞亚群,、异常细胞亚群,E、B增

21、多,核左移。增多,核左移。中性粒细胞峰右侧区域异常中性粒细胞峰右侧区域异常(R4):可能):可能中性粒细胞绝对增多。中性粒细胞绝对增多。(4)报警内容)报警内容红细胞系列红细胞系列:RBC大小不均、高大小不均、高/低色素低色素细胞、大细胞、大/小红细胞、有核红细胞、红细小红细胞、有核红细胞、红细胞碎片、红细胞异常分布、血红蛋白缺胞碎片、红细胞异常分布、血红蛋白缺乏等。乏等。白细胞系列白细胞系列:杆状核细胞、异型淋巴细:杆状核细胞、异型淋巴细胞、过氧化物酶染色异常、核左移、未成胞、过氧化物酶染色异常、核左移、未成熟粒细胞等。熟粒细胞等。血小板系列血小板系列:血小板聚集、大血小板、:血小板聚集、大

22、血小板、血小板分布异常、红细胞碎片等。血小板分布异常、红细胞碎片等。骨髓造血骨髓造血:原始细胞、幼稚细胞等。:原始细胞、幼稚细胞等。异常白细胞直方图举例异常白细胞直方图举例中性粒细胞比例增高中性粒细胞比例增高(L比例降低比例降低图图1):):特征是特征是N峰明显增大,峰明显增大,L峰明显减少。血峰明显减少。血涂片检查以涂片检查以N为主,可达为主,可达90,L只占只占510。图图1中性粒细胞比例增高中性粒细胞比例增高中性粒细胞比例减低中性粒细胞比例减低(L比例增高比例增高图图2):):特征是特征是L峰明显增大,峰明显增大,N峰明显减少。血峰明显减少。血涂片检查以涂片检查以L为主,可达为主,可达6

23、070,N只只占占30左右。左右。图图2中性粒细胞比例减低中性粒细胞比例减低单个核细胞增多单个核细胞增多特征:在直方图特征:在直方图90150fL区域出现一个明区域出现一个明显的细胞峰。显的细胞峰。原始、幼稚白细胞增多原始、幼稚白细胞增多特征:在直方图上单核细胞区出现一个高特征:在直方图上单核细胞区出现一个高大的细胞峰,并与淋巴细胞峰融合,粒细大的细胞峰,并与淋巴细胞峰融合,粒细胞峰变小。白总数明显增高。胞峰变小。白总数明显增高。原始、幼稚细胞增多原始、幼稚细胞增多 聚集血小板干扰聚集血小板干扰 P108,图图345特征:直方图左侧起点高,离横坐标约特征:直方图左侧起点高,离横坐标约0.8cm

24、,血小板计数值明显减低并伴有血,血小板计数值明显减低并伴有血小板直方图的图形异常。小板直方图的图形异常。(2)红细胞直方图)红细胞直方图 分析红细胞直方图时,要注意观察曲线峰分析红细胞直方图时,要注意观察曲线峰的增高降低、左移右移、单峰双峰,曲线的增高降低、左移右移、单峰双峰,曲线宽窄,曲线起始高低尾部抬高延伸等变化。宽窄,曲线起始高低尾部抬高延伸等变化。正常红细胞直方图是一个近似正态分布的单个峰的正常红细胞直方图是一个近似正态分布的单个峰的光滑曲线,通常位于光滑曲线,通常位于36360fL,X轴表示红细胞轴表示红细胞体积,体积,Y轴表示不同体积红细胞出现的频率。轴表示不同体积红细胞出现的频率

25、。.正常红细胞直方图正常红细胞直方图 异常红细胞直方图异常红细胞直方图小细胞不均一性小细胞不均一性 特征:直方图上波峰左移,峰底变宽。血特征:直方图上波峰左移,峰底变宽。血涂片镜检:红细胞大小不一,以小细胞涂片镜检:红细胞大小不一,以小细胞为主。为主。大细胞不均一性大细胞不均一性特征:直方图上波峰右移,峰底变宽。血涂特征:直方图上波峰右移,峰底变宽。血涂片镜检:红细胞大小不一,以大细胞为主片镜检:红细胞大小不一,以大细胞为主巨幼细胞性贫血治疗有效直方图巨幼细胞性贫血治疗有效直方图 双峰双峰图图特征:由于治疗以后,贫血的病情得到特征:由于治疗以后,贫血的病情得到了改善了改善,外周血中出现了较多的

26、正常,外周血中出现了较多的正常细胞,使血中存在两群红细胞,导致红细胞,使血中存在两群红细胞,导致红细胞直方图显示为双峰。波峰右移,峰细胞直方图显示为双峰。波峰右移,峰底变宽。底变宽。(3)血小板直方图)血小板直方图 血小板随红细胞一起在一个检测系统中检血小板随红细胞一起在一个检测系统中检测,根据不同的阈值,计算机可区分出血测,根据不同的阈值,计算机可区分出血小板和红细胞。血小板直方图范围在小板和红细胞。血小板直方图范围在230fL之间。分析之间。分析PLT直方图的变化对了解直方图的变化对了解PLT的体积变化、血液的抗凝情况及某些的体积变化、血液的抗凝情况及某些干扰因素具有一定的意义。干扰因素具

27、有一定的意义。.血小板正常直方图血小板正常直方图血液分析仪在血液分析仪在230fL范围内分析范围内分析PLT。直。直方图上正常血小板主要集中在方图上正常血小板主要集中在220fL范范围内,呈偏态分布。围内,呈偏态分布。l如果标本中存在较多的小红细胞、巨大如果标本中存在较多的小红细胞、巨大血小板或血小板聚集块等,血小板直方血小板或血小板聚集块等,血小板直方图会发生相应的变化,图会发生相应的变化,l例如:异常:右移例如:异常:右移-巨大血小板巨大血小板 窄峰窄峰-血小板减少血小板减少 血小板异常直方图血小板异常直方图大血小板增多大血小板增多 特征:直方图曲线右移,在特征:直方图曲线右移,在35fL

28、处接近处接近X轴,轴,血涂片上可见较多大血小板。血涂片上可见较多大血小板。2.散点图散点图 散点图对应的是应用光散射原理。通常,平散点图对应的是应用光散射原理。通常,平面散点图是二维的(面散点图是二维的(X、Y轴)图象,而三轴)图象,而三维(维(X、Y、Z轴)图则显示立体图象。在轴)图则显示立体图象。在二维坐标系,二维坐标系,X轴和轴和Y轴分别代表一种检测轴分别代表一种检测原理或检测角度的细胞信息。在坐标象限中原理或检测角度的细胞信息。在坐标象限中的任何一个散点反映的就是的任何一个散点反映的就是X轴和轴和Y轴的综轴的综合信息。合信息。观察和分析散点图时要注意坐标上的散点所观察和分析散点图时要注

29、意坐标上的散点所在象限平面图上的位置或散点群的疏密。在象限平面图上的位置或散点群的疏密。7 血液分析仪检测结果显微镜涂血液分析仪检测结果显微镜涂片及复检规则片及复检规则2005年,国际血液学组织提出了显微镜复年,国际血液学组织提出了显微镜复检的检的41条建议性标准。条建议性标准。注意防止两种倾向:一是过分相信仪器,注意防止两种倾向:一是过分相信仪器,不镜检;而是过分不信任仪器,高镜检不镜检;而是过分不信任仪器,高镜检率。率。8 质量保证、仪器较准和性质量保证、仪器较准和性能评价能评价一、质量保证一、质量保证(一)分析前质量保证(一)分析前质量保证1.做好操作人员岗前培训做好操作人员岗前培训 包

30、括包括(1)上岗前应仔细阅读仪器说明书或接受)上岗前应仔细阅读仪器说明书或接受良好的培训。良好的培训。(2)注意分析前、中、后每一个质控步骤。)注意分析前、中、后每一个质控步骤。(3)必须具有高度的责任和事业心,必须)必须具有高度的责任和事业心,必须抓好医德医风的建设。抓好医德医风的建设。2.按照仪器说明书的要求,选择合适的仪按照仪器说明书的要求,选择合适的仪器安装环境。器安装环境。血液分析仪系精密电子仪器,对安装环境血液分析仪系精密电子仪器,对安装环境有特殊要求,要满足对空间、温度有特殊要求,要满足对空间、温度(1525)、湿度()、湿度(80%)、电源、)、电源、抗电磁、抗热源、光线、通风

31、等基本条抗电磁、抗热源、光线、通风等基本条件。件。3.做好仪器的鉴定工作。做好仪器的鉴定工作。仪器安装或每次仪器安装或每次维修后,必须安照维修后,必须安照ICSH公布的血细胞分公布的血细胞分析仪的评价方案对仪器的技术性能进行析仪的评价方案对仪器的技术性能进行测试公布。测试公布。4.做好仪器的校正工作。做好仪器的校正工作。可参照公布的关于可参照公布的关于血液分析仪较准规范化的建议血液分析仪较准规范化的建议进行。进行。5.标本的采集和运送标本的采集和运送尽可能采用静脉血,不用皮肤穿刺血。尽可能采用静脉血,不用皮肤穿刺血。保证血液质量和充足用量。保证血液质量和充足用量。采血容器:尽可能用真空采血系统

32、。采血容器:尽可能用真空采血系统。抗凝剂:推荐用抗凝剂:推荐用EDTA-K2(1.52mg/mL)。)。血液贮存:血液贮存:血液的稀释:稀释血液后应尽快测定。血液的稀释:稀释血液后应尽快测定。6.注意受检者生理状态对实验结果的影响注意受检者生理状态对实验结果的影响1.试剂的合理使用试剂的合理使用 原则上应使用原仪器原则上应使用原仪器配套的试剂。注意测试时试剂的作用温配套的试剂。注意测试时试剂的作用温度和时间。度和时间。2.标本要求标本要求:血样要符合实验要求,采血:血样要符合实验要求,采血管清洁,标本要充分混匀。管清洁,标本要充分混匀。(二)分析中质量控制(二)分析中质量控制3.认真作好室内质

33、控认真作好室内质控4.注意仪器的半堵孔现象注意仪器的半堵孔现象(1)判断)判断:完全堵孔,不能计数,不出结:完全堵孔,不能计数,不出结果,有些仪器会提示果,有些仪器会提示“Clog”.不完全堵孔:不完全堵孔:观察计数时间:延长观察计数时间:延长看示波器波形:异常波形看示波器波形:异常波形听仪器声音:不规则间断声听仪器声音:不规则间断声看计数指示灯闪烁:不规律闪动。看计数指示灯闪烁:不规律闪动。(2)检测堵孔的原因及预防)检测堵孔的原因及预防原因原因:血细胞计数仪检测器的微孔,直径:血细胞计数仪检测器的微孔,直径100m,深,深70m,构成一个圆柱形孔道,构成一个圆柱形孔道,任何微小的赃物混入标

34、本中,均易造成堵任何微小的赃物混入标本中,均易造成堵孔。孔。采血时擦采血时擦Hb吸管的棉花纤维。吸管的棉花纤维。采血部位温度低或穿刺过浅,出血不畅,采血部位温度低或穿刺过浅,出血不畅,挤压造成纤维蛋白丝形成甚至是小血凝块。挤压造成纤维蛋白丝形成甚至是小血凝块。标本杯未盖好,落入灰尘。标本杯未盖好,落入灰尘。使用后小孔管清洗不够,节日期间,仪使用后小孔管清洗不够,节日期间,仪器长时间不用,试剂中水分蒸发,盐类结器长时间不用,试剂中水分蒸发,盐类结晶堵孔。晶堵孔。用专用小毛刷轻刷几次微孔。用专用小毛刷轻刷几次微孔。边按仪器的反冲装置边刷小孔。边按仪器的反冲装置边刷小孔。卸下检测器,装入水后用吸耳球

35、从顶端轻轻加压卸下检测器,装入水后用吸耳球从顶端轻轻加压冲洗。冲洗。将检测器内装入少量次氯酸钠(将检测器内装入少量次氯酸钠(3%5%)并浸)并浸泡泡5分钟左右,然后用吸耳球清洗,再用水把检分钟左右,然后用吸耳球清洗,再用水把检测器清洗干净。测器清洗干净。处理方法处理方法 采血:穿刺部位温度、深度应适宜。采血:穿刺部位温度、深度应适宜。用精细的卫生纸代替棉花擦用精细的卫生纸代替棉花擦Hb吸管。吸管。工作环境应无尘,标本杯应注意防尘。工作环境应无尘,标本杯应注意防尘。假日之前把仪器清洗干净。假日之前把仪器清洗干净。定期按不同方式清洗干净检测小孔。定期按不同方式清洗干净检测小孔。预防预防5.注意某些

36、病理因素对血液分析仪检测结注意某些病理因素对血液分析仪检测结果的影响果的影响多发性骨髓瘤、白血病、糖尿病等可导多发性骨髓瘤、白血病、糖尿病等可导致致WBC、PLT计数值假性增高。计数值假性增高。WBC显著增多会影响白细胞计数,有核显著增多会影响白细胞计数,有核红细胞出现影响白细胞计数。红细胞出现影响白细胞计数。高脂血症可使高脂血症可使Hb假性升高。假性升高。1.保留标本备查。保留标本备查。2.重视室内质控。重视室内质控。3.加强质控小组的责任。加强质控小组的责任。4.分析实验结果各参数间关系。分析实验结果各参数间关系。5.加强与临床联系。加强与临床联系。6.积极参加室内质控。积极参加室内质控。

37、(三)分析后质量控制(三)分析后质量控制二、二、仪器校准仪器校准n概述(校准物、质控物概念)概述(校准物、质控物概念)n血细胞分析仪校准的一般要求血细胞分析仪校准的一般要求n校准方法校准方法(一)概述(一)概述在血细胞分析仪全面质量控制过程中,校在血细胞分析仪全面质量控制过程中,校准物和质控物是两种必不可少的物质。准物和质控物是两种必不可少的物质。校准物校准物是指是指“一种用于校准、分度或修正一种用于校准、分度或修正测量值的物质或装置测量值的物质或装置”。这种物质或装置。这种物质或装置必须跟踪国家或国际的参考制剂或参考物。必须跟踪国家或国际的参考制剂或参考物。对于血液分析仪来说,对于血液分析仪

38、来说,校准物有两种校准物有两种:一种是标准的仪器,一种是标准的仪器,另一种是经用参考方法确定的血液或其另一种是经用参考方法确定的血液或其他人工微粒制品。他人工微粒制品。质控物质控物不同于校准物,它是不同于校准物,它是“一种用于常一种用于常规工作中核查分析过程(或仪器)准确规工作中核查分析过程(或仪器)准确性的物质。该物质在性质方面类似被分性的物质。该物质在性质方面类似被分析的标本并随病人样本一起进行分析析的标本并随病人样本一起进行分析”。(二)血液分析仪校准的一般要求(二)血液分析仪校准的一般要求1、仪器安装时必须由厂家进行校准并提供、仪器安装时必须由厂家进行校准并提供校准纪录,否则不能用于临

39、床。校准纪录,否则不能用于临床。2、更换部件进行维修后,可能对检测结果、更换部件进行维修后,可能对检测结果的准确性有影响时需校准。的准确性有影响时需校准。3、室内质控结果显示系统的检测结果有漂、室内质控结果显示系统的检测结果有漂移时(排除仪器故障和试剂的因素后)。移时(排除仪器故障和试剂的因素后)。4、对于开展常规检测的实验室,要求每、对于开展常规检测的实验室,要求每6个月至少进行一次校准。个月至少进行一次校准。5、实验室应按建议要求建立适合本实验室、实验室应按建议要求建立适合本实验室使用的血液分析仪校准程序并写成文件。使用的血液分析仪校准程序并写成文件。6、校准后的仪器,必须开展室内质控以监

40、、校准后的仪器,必须开展室内质控以监测仪器检测结果是否发生漂移。测仪器检测结果是否发生漂移。(三)校准方法(三)校准方法n 利用仪器配套校准物来校准利用仪器配套校准物来校准n利用定值的新鲜血作为校准物来校准。利用定值的新鲜血作为校准物来校准。1、利用该仪器配套校准物来校准、利用该仪器配套校准物来校准 使用药监局注册登记的国际公认质量可使用药监局注册登记的国际公认质量可靠的仪器检测系统,才能使用该仪器制靠的仪器检测系统,才能使用该仪器制造商规定的配套校准物,同时严格按仪造商规定的配套校准物,同时严格按仪器说明书规定操作。器说明书规定操作。(1)仪器的准备)仪器的准备 先用清洁剂对仪器内部各通道及

41、测试室处先用清洁剂对仪器内部各通道及测试室处理理30分钟。确认仪器的背景计数、精密分钟。确认仪器的背景计数、精密度及携带污染在说明书规定的范围内时,度及携带污染在说明书规定的范围内时,才可进行校准,否则须查找原因,必要才可进行校准,否则须查找原因,必要时请维修人员进行检修。时请维修人员进行检修。将校准物从冰箱内将校准物从冰箱内(28C)取出后,要求取出后,要求在室温在室温(1825)条件下放置条件下放置15分钟,使其分钟,使其温度恢复至室温。温度恢复至室温。检查校准物是否超出效期,是否有变质或检查校准物是否超出效期,是否有变质或污染。污染。(2)校准物的准备)校准物的准备轻轻地将校准物反复颠倒

42、混匀,并置于轻轻地将校准物反复颠倒混匀,并置于两手掌间慢慢搓动,使校准物充分混匀。两手掌间慢慢搓动,使校准物充分混匀。打开瓶塞时,应垫上纱布或软纸,使溅打开瓶塞时,应垫上纱布或软纸,使溅出的血液被吸收。出的血液被吸收。将两瓶校准物合在一起,混匀后再分装将两瓶校准物合在一起,混匀后再分装于于2个瓶内。个瓶内。取取1瓶校准物,连续检测瓶校准物,连续检测11次,第次,第1次检测结果不次检测结果不用,以防止携带污染。用,以防止携带污染。仪器若无自动校准的功能,则将第仪器若无自动校准的功能,则将第211次的各次的各项检测结果用手工记录在工作表格中,计算出均项检测结果用手工记录在工作表格中,计算出均值,均

43、值的小数点后数字保留位数较日常报告结值,均值的小数点后数字保留位数较日常报告结果多一位。有自动校准功能的仪器可直接得出均果多一位。有自动校准功能的仪器可直接得出均值。值。(3)用校准物进行仪器校准)用校准物进行仪器校准各参数均值与定值(说明书中提供)的各参数均值与定值(说明书中提供)的差异全部等于或小于表中的第一列数值差异全部等于或小于表中的第一列数值时,仪器不需进行调整,记录检测数据时,仪器不需进行调整,记录检测数据即可即可。计算公式:计算公式:(均值均值定值定值)定值定值100 表一表一 血细胞分析仪校准标准表血细胞分析仪校准标准表参数参数一列差异()一列差异()二列差异()二列差异()W

44、BC1.51.51010RBC1 11010Hb1 11010HCT2 21010MCV1 11010PLT3 31010若各参数均值与定值的差异大于表中的若各参数均值与定值的差异大于表中的第二列数值时,需请维修人员核查原因第二列数值时,需请维修人员核查原因并进行处理并进行处理。若各参数均值与定值的差异在表中第一若各参数均值与定值的差异在表中第一列与第二列数值之间时,需对仪器进行列与第二列数值之间时,需对仪器进行调整,调整方法可按说明书的要求进行。调整,调整方法可按说明书的要求进行。若仪器无自动校准功能,则将定值除以若仪器无自动校准功能,则将定值除以所测均值,求出校准系数,将仪器原来所测均值,

45、求出校准系数,将仪器原来的系数乘以校准系数即为校准后的系数,的系数乘以校准系数即为校准后的系数,将校准后的系数输人仪器更换原来的系将校准后的系数输人仪器更换原来的系数数。将第将第2管未用的校准物充分混匀,在仪器上重管未用的校准物充分混匀,在仪器上重复检测复检测11次,去除第次,去除第1次结果,计算第次结果,计算第211次检测结果的均值,再次与表中的数值次检测结果的均值,再次与表中的数值对照。对照。如各参数的差异全部等于或小于第一列数值,如各参数的差异全部等于或小于第一列数值,证明校准合格。如达不到要求,须请维修证明校准合格。如达不到要求,须请维修人员进行检修。人员进行检修。(4)校准结果的验证

46、)校准结果的验证2.利用定值的新鲜血作为校准物进利用定值的新鲜血作为校准物进行校准行校准(1)使用新鲜血作为校准物)使用新鲜血作为校准物 的要求的要求用用EDTAK2为抗凝剂的真空采血管取健为抗凝剂的真空采血管取健康人新鲜血康人新鲜血10ml,每,每ml血需抗凝剂的浓度血需抗凝剂的浓度为为1.52.2mg。要求新鲜血的。要求新鲜血的Hb、WBC、RBC、Hct和和Plt检测结果在参考范围内。检测结果在参考范围内。将新鲜血混匀后分装于将新鲜血混匀后分装于3个管内,每管的个管内,每管的血量为血量为3ml。取其中取其中1管,用二级标准检测系统管,用二级标准检测系统或规或规范操作的检测系统范操作的检测

47、系统连续检测连续检测11次,计次,计算第算第211次检测结果的均值,以此均值次检测结果的均值,以此均值为新鲜血的定值(为新鲜血的定值(解释解释)。)。其他其他2管新鲜血作为定值的校准物,用管新鲜血作为定值的校准物,用于仪器的校准。于仪器的校准。*二级标准检测系统:直接溯源至参考方法;二级标准检测系统:直接溯源至参考方法;具备较完善的质量保证措施;与国外具有具备较完善的质量保证措施;与国外具有权威性的参考实验室定期进行比对的检测权威性的参考实验室定期进行比对的检测系统。系统。*规范操作的检测系统:使用配套试剂规范操作的检测系统:使用配套试剂,用配套校准物定期进行仪器校准;规范地用配套校准物定期进

48、行仪器校准;规范地开展室内质量控制;参加室间质量评价成开展室内质量控制;参加室间质量评价成绩优良;人员经过培绩优良;人员经过培训训。(2)新鲜血如何定值:)新鲜血如何定值:直接溯源至国际标准的定值方法:可使直接溯源至国际标准的定值方法:可使用血细胞分析的参考方法定值,但要建用血细胞分析的参考方法定值,但要建立参考方法的难度较大,在临床实验室立参考方法的难度较大,在临床实验室难以实施。难以实施。间接溯源至国际标准的定值方法:取新间接溯源至国际标准的定值方法:取新鲜血用二级标准检测系统或规范操作的鲜血用二级标准检测系统或规范操作的检测系统对其进行定值,用定值的新鲜检测系统对其进行定值,用定值的新鲜

49、血作为常规校准物。要求在血作为常规校准物。要求在8小时内小时内(温度温度条件为条件为18C25)完成定值及仪器的校完成定值及仪器的校准。准。(3)利用定值新鲜血的校准步骤与上)利用定值新鲜血的校准步骤与上述利用该仪器配套校准物来校准的步述利用该仪器配套校准物来校准的步骤相同(略)。骤相同(略)。三三、性能评价、性能评价(一)血液分析仪总体评价(一)血液分析仪总体评价 新仪器安装后,或每次维修后,必须对新仪器安装后,或每次维修后,必须对仪器的性能进行测试、评价。仪器的性能进行测试、评价。评价内容包括评价内容包括:仪器基本情况,仪器手册,:仪器基本情况,仪器手册,方法学,评价步骤;方法学,评价步骤

50、;技术评价计划包括:校准、校准品和质控技术评价计划包括:校准、校准品和质控品概念,试剂,标本及处理(如颠倒混品概念,试剂,标本及处理(如颠倒混匀),常规血细胞计数研究参考值,记匀),常规血细胞计数研究参考值,记录原始结果,预评价、性能评价。录原始结果,预评价、性能评价。1.稀释效应稀释效应:指测定值与稀释倍数是否呈比:指测定值与稀释倍数是否呈比例关系。稀释度应覆盖生理和常见病理例关系。稀释度应覆盖生理和常见病理范围。线性关系范围越宽越理想。范围。线性关系范围越宽越理想。l P 0.01,非线性相关;非线性相关;l P 0.05,未偏离线性。,未偏离线性。(二)血液分析仪性能评价(二)血液分析仪

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