1、食用菌栽培学2006年春食用菌栽培学课程组食用菌栽培学绪 论v一、本课程的主要内容、基本要求及考核办法一、本课程的主要内容、基本要求及考核办法 v二、食用菌的概念及分类地位二、食用菌的概念及分类地位v三、食用菌的分布及种类三、食用菌的分布及种类v四、食用菌的食用价值（营养、保健、药用）四、食用菌的食用价值（营养、保健、药用）v五、食用菌栽培的发展前景五、食用菌栽培的发展前景v六、复习思考题六、复习思考题 食用菌栽培学第一章 生物学基础第一节第一节 食用菌的形态结构食用菌的形态结构 第二节第二节 食用菌的生活史食用菌的生活史第三节第三节 食用菌的生活条件食用菌的生活条件 食用菌栽培学第二章第二章
2、 制种技术制种技术 概述概述第一节第一节 菌种生产类型及生产流程菌种生产类型及生产流程 第二节第二节 一级菌种的制作一级菌种的制作 第三节第三节 二、三级菌种的制作二、三级菌种的制作 食用菌栽培学第三章第三章 栽培技术栽培技术 第一节第一节 平菇栽培技术平菇栽培技术 第二节第二节 香菇栽培技术香菇栽培技术第三节第三节 金针菇栽培技术金针菇栽培技术第四节第四节 茶薪菇栽培技术茶薪菇栽培技术绪论绪论课程主要内容、基本要求及考核办法课程主要内容、基本要求及考核办法1 1、主要内容、主要内容 食用菌生物学基础;食用菌菌种制作技术;食用菌栽培管理技术。2 2、基本要求、基本要求 弄清基本理论、基本知识、
3、基本概念、基本环节及基本技能。3 3、考核办法、考核办法 考勤20%，作业及实验报告20%，操作技能30%，考试30%。返回绪论绪论食用菌的概念及分类地位食用菌的概念及分类地位 1 1、食用菌的概念、食用菌的概念 高等真菌中能形成大型肉质或胶质子实体或菌核类组织并能供食用的菌类总称，俗称菇、蕈、耳。2 2、分类地位、分类地位 食用菌中的绝大多数属于担子菌亚门，如香菇、平菇、木耳、银耳等，只有极少数属于子囊菌亚门，如羊肚菌等。3 3、食用菌与毒菌的区别、食用菌与毒菌的区别 食用菌：能食用，且具有较高的营养和药用价值。毒菌：不能食用（含有毒素），误食会引起中毒甚至死亡，应特别注意。绪论绪论食用菌的
4、概念及分类地位食用菌的概念及分类地位民间鉴别毒菌的方法有民间鉴别毒菌的方法有(并不绝对可靠)形状奇特，色泽鲜艳；气味恶臭，味道挺辣，极苦，汁液混浊；鸟不啄，虫不蛀，鼠兽不食；与葱、蒜、银器、大米共煮时呈乌黑色；生于阴暗潮湿和污秽的地方。防止毒菌中毒的方法防止毒菌中毒的方法 虚心向老农学习，认识自己周围可食用的野生菌和毒菌；食用时，即使是非常可口的，第一次应少吃，待证明该菇确实可食时方可食用；禁止食用变质的菇菌。返回绪论绪论食用菌的分布及种类食用菌的分布及种类v分布广泛，种类繁多分布广泛，种类繁多 中国疆域辽阔，在近中国疆域辽阔，在近10001000万万kmkm2 2的中华大地上，地形地貌复杂，
5、气的中华大地上，地形地貌复杂，气候类型繁多，森林、草原植被和土壤种类、生态类型多种多样，为野候类型繁多，森林、草原植被和土壤种类、生态类型多种多样，为野生食用菌的生长、繁衍创造了良好的生态环境。据卯晓岚先生估计，生食用菌的生长、繁衍创造了良好的生态环境。据卯晓岚先生估计，我国食用菌至少可达我国食用菌至少可达15001500种或接近种或接近20002000种，已知的最新统计为种，已知的最新统计为938938种，种，约占世界的约占世界的7%7%，是世界上野生食用菌种类资源最为丰富的国家之一。，是世界上野生食用菌种类资源最为丰富的国家之一。然而，我国目前已知的然而，我国目前已知的930930余种食用
6、菌当中，可培养出子实体的约余种食用菌当中，可培养出子实体的约9090多种，能进行大规模商业性栽培的仅仅多种，能进行大规模商业性栽培的仅仅20203030种，大量仍处于野生种，大量仍处于野生状态。这些野生食用菌以其独特的纯天然营养品质，以及与生态协调状态。这些野生食用菌以其独特的纯天然营养品质，以及与生态协调发展的生产过程，被国际公认为绿色食品中的珍宝。有待我们去研究、发展的生产过程，被国际公认为绿色食品中的珍宝。有待我们去研究、驯化和栽培、利用。驯化和栽培、利用。返回绪论绪论食用菌的食用价值（营养、保健、药用）营养价值营养价值 食用菌向有“植物肉”之称，是因为其营养价值介于动物性食品和植物性食
7、品之间。食用菌一般所含蛋白质占干重的30%45%，蛋白质中氨基酸的种类齐全，几乎所有的菇类都含有人体必需的8种氨基酸，其中对人体健康有益的蛋氨酸、胱氨酸等氨基酸的含量高于一般动物性食品。菌类食品含脂肪少，仅占干重的2%8%。还含有多种维生素、微量元素及抗生素、核苷酸、多糖等具有一定药效的特殊生理活性物质，能促进人体新陈代谢，增强体质。因此，人们赞誉食用菌是高蛋白、低脂肪、低热量、多药效的“保健食品”。绪论绪论食用菌的食用价值（营养、保健、药用）药用价值药用价值 随着近代药物化学研究的发展，自1957年以来，科学家们陆续发现了许多食用菌有明显的防癌、抗癌及抗病变的作用。香菇能降低血浆中胆固醇含量
8、，预防心肌梗塞、高血压、冠心病，香菇中含有的香菇多糖具有防癌抗癌的的作用，双链RNA可提高人体免疫力，增强人体抗病能力，还有助于抗艾滋病及延缓衰老。因此，作为食品多吃香菇，可预防多种疾病。黑木耳清胃、润肺、健脑、通便、治痔等。银耳滋补强身、提神生津、对慢性肾炎有一定疗效。蜜环菌具有与天麻类似的作用。猴菇菌片治疗胃及十二指肠溃疡。健肝片治疗肝炎的辅助药。此外，还有很多食用菌具有预防和治疗癌症的作用（举例说明：灵芝孢子粉等）。因此，食用菌是一种营养丰富、各种营养成分、含量比较均衡，具有一定食疗作用的保健食品。返回绪论绪论食用菌栽培的发展前景食用菌栽培的发展前景 1、食用菌产业是食用菌产业是21世纪
9、大有前途的产业世纪大有前途的产业 2食用菌栽培是广大农村脱贫致富的良好途径食用菌栽培是广大农村脱贫致富的良好途径 食用菌栽培具有以下几个特点：（1）投资少，成本低。（2）周期短，见效快。（3）转化率高，效益好。（4）食用菌栽培能促进多种事业同时发展，使自然界物质得到良性循环，能量合理流动，有益于农业生态系统平衡。3发展食用菌栽培有得天独厚的自然条件发展食用菌栽培有得天独厚的自然条件 绪论绪论复习思考题复习思考题v1、什么是食用菌？其分类地位如何？v2、如何鉴别食用菌与毒菌？v3、试述食用菌的食用价值和药用价值返回食用菌的形态结构食用菌的形态结构 食用菌的基本组成食用菌的基本组成 一、食用菌的基
10、本组成一、食用菌的基本组成 无论是野生的，还是人工栽培的食用菌，都是由菌丝体和子实体两部分组成的。菌丝体：是分枝的丝状物（菌丝）的集合体，生长于基质内部，是食用菌的营养器官。主要功能：分解基质，吸收营养和水分，供子实体生长发育需要。子实体：是能产生孢子的果实体，生长于基质表面，是食用菌的繁殖器官。主要功能：产生孢子，繁殖后代；供人们们食用。食用菌的形态结构食用菌的形态结构菌丝体的形态结构菌丝体的形态结构 二、菌丝体的形态结构二、菌丝体的形态结构（一）菌丝 都是多细胞的，细胞壁管状，薄而透明。凡是菌丝细胞中仅含一个核的称单核菌丝；含两个核的称双核菌丝；含多个核的称多核菌丝。双核菌丝的顶端细胞常发
11、生锁状联合：食用菌的形态结构食用菌的形态结构菌丝体的形态结构菌丝体的形态结构（二）菌丝体（三）特殊的菌丝体 1菌核 是由菌丝密集而成的块状或颗粒状的休眠体，质地坚硬，色深，大小不一，一般呈深褐色。菌核有很强的再生能力，可以作为菌种分离的材料或作菌种使用。食用菌的形态结构食用菌的形态结构菌丝体的形态结构菌丝体的形态结构（三）特殊的菌丝体 2子座 子座可以纯碎由菌丝体组成，也可以由菌丝体和部分营养基质相结合而形成。子座形态不一，食用菌的子座多为棒状 3菌索 是由菌丝组成的绳索状结构，与树根相似故又称根状菌索 食用菌的形态结构食用菌的形态结构菌丝体的形态结构菌丝体的形态结构食用菌的形态结构食用菌的形
12、态结构子实体的形态结构子实体的形态结构 三、子实体的形态结构三、子实体的形态结构 子实体是由结实性菌丝扭结形成的肥大多肉的组织器官，是能产生孢子的果实体（即食用菌的繁殖器官），也就是通常被人们称作“菇、菌、蘑、耳、蕈”的食用部分。食用菌子实体的形态、大小、质地因种类不同而异。食用菌的形态结构食用菌的形态结构子实体的形态结构子实体的形态结构（一）伞菌子实体的基本结构（一）伞菌子实体的基本结构 伞菌子实体的形态、大小、质地因种类不同而异，典型的伞菌子实体由菌盖、菌肉、菌褶、菌柄、菌环和菌托等组成。食用菌的形态结构食用菌的形态结构子实体的形态结构子实体的形态结构 （二）各部分的形态结构特点 1菌盖
13、菌盖是食用菌子实体的帽状部分，多位于菌柄之上。它是食用菌最明显的部分，是食用菌的主要繁殖器官，也是人们食用的主要部分。菌盖的形态、大小、颜色等因食用菌种类、发育时期和生长环境不同而异。食用菌的形态结构食用菌的形态结构子实体的形态结构子实体的形态结构 （二）各部分的形态结构特点 2菌肉 菌肉是食用菌最具有食用价值的部分。菌肉绝大多数为肉质，少数为蜡质、胶质或革质。大多数食用菌的菌肉为白色，受伤后不变色，少数菌肉受伤后变色。根据子实体的结构，可以将菌肉分为3种类型：丝状菌肉、泡囊状菌肉、胶质丝状菌肉。食用菌的形态结构食用菌的形态结构子实体的形态结构子实体的形态结构（二）各部分的形态结构特点 3菌褶
14、和菌管（1）菌褶 菌褶是生长在菌盖下面的片状物。由子实层、子实下层和菌髓三部分组成。食用菌的形态结构食用菌的形态结构子实体的形态结构子实体的形态结构（二）各部分的形态结构特点 3菌褶和菌管（1）菌褶：菌褶是伞菌产生担孢子的地方食用菌的形态结构食用菌的形态结构子实体的形态结构子实体的形态结构 （2）菌管 菌管就是管状的子实层。子实层分布于菌管的内壁。（3）子实层 子实层是着生有性孢子的栅栏组织，是真菌产生子囊孢子或担孢子的地方。它由平行排列的子囊或担子以及囊状体、侧丝组成。（4）孢子 孢子是真菌繁殖的基本单位，孢子可分成有性孢子和无性孢子两大类。不同种类的真菌其孢子的大小、形状、颜色以及孢子外表
15、饰纹都有较大的差异，这也是进行分类的重要特征和依据。食用菌的形态结构食用菌的形态结构子实体的形态结构子实体的形态结构食用菌的形态结构食用菌的形态结构子实体的形态结构子实体的形态结构 4菌柄 菌柄生长在菌盖下面，是子实体的支持部分，也是输送营养和水分的组织。菌柄的形状、长短、粗细、颜色、质地等因种类不同而各异。5菌幕、菌环和菌托（1）菌幕 菌幕：外菌幕和内菌幕。（2）菌环 盖缘附属物。菌环的大小、厚薄、单层或双层以及在菌柄上着生的位置，因种类不同而异。食用菌的形态结构食用菌的形态结构子实体的形态结构子实体的形态结构（3）菌托 由于外菌幕的撕裂方式不同，菌托的形状各异。食用菌的形态结构食用菌的形态
16、结构子实体的发育类型子实体的发育类型 四、子实体的发育类型四、子实体的发育类型 子实体的发育类型可分为子囊果的发育类型和担子果的发育类型两种。一般子囊果的发育类型可分为闭囊壳、子囊壳、子囊盘、子囊腔四种，担子果的发育类型可分为裸果型、被果型、假被果型、半被果型四种。1裸果型：子实层自始至终外露。2被果型：担子果一直被包裹着，直至孢子成熟。3假被果型：最初子实层的形成是外生的，裸果型的，随后子实层被包围，形似被果型，但担子果成熟时，菌柄伸长，子实层又外露。4半被果型：担子果自幼被封闭，但孢子成熟时子实层裸露。食用菌的形态结构食用菌的形态结构子实体的发育类型子实体的发育类型食用菌的形态结构食用菌的
17、形态结构复习思考题复习思考题五、复习思考题五、复习思考题1食用菌由哪两部分构成？各有什么功能？2简述菌丝和菌丝体的类型。3伞菌子实体主要由哪几部分组成？各部分有何特征？4试述担子菌子实体的发育类型。返回食用菌的生活史概念概念 一、生活史的概念一、生活史的概念 食用菌的生活史是指从孢子到孢子的整个生长发育过程。即从孢子在适宜的条件下萌发开始，先形成单核菌丝，单核菌丝融合形成双核菌丝，当双核菌丝发育到生理成熟阶段，菌丝扭结生长成子实体，子实体产生新一代孢子，至孢子散落而告终。生活史规定了食用菌个体发育的顺序和完成每个阶段的时间。食用菌的生活史伞菌类的典型生活史伞菌类的典型生活史 二、食用菌中伞菌类
18、的典型生活史二、食用菌中伞菌类的典型生活史 食用菌中伞菌类的典型生活史由以下九个阶段组成 担孢子萌发，生活史开始。单核菌丝（初生菌丝）开始发育。两条可亲和的单核菌丝融合(质配)。形成异核的双核菌丝(次生菌丝)。多数食用菌的双核菌丝具有锁状联合。双核菌丝能够独立地、无限地繁殖，有些种的双核菌丝能产生粉孢子、厚垣孢子等无性孢子。在适宜的环境条件下，双核菌丝发育成结实性菌丝(三生菌丝)并组织化，产生子实体。子实体菌褶表面或菌管内壁的双核菌丝的顶端细胞发育成担子，进入有性生殖阶段。来自两个亲本的一对交配型不同的单倍体细胞核在担子中融合(核配)，形成个双倍体细胞核。双倍体核立即进行成熟分裂，即减数分裂。
19、减数分裂使两个不同交配型的细胞核的遗传物质发生分离和重组，形成4个单倍体核。各个单倍体核分别移到担子小梗的顶端，形成担孢子。在一般情况下，每个担子形成4个单核的担孢子。至此，完成一个完整的生活史。担孢子弹射，待条件适宜时进入新的生活史。食用菌的生活史有代表性的生活史类型 三、食用菌中几种有代表性的生活史类型三、食用菌中几种有代表性的生活史类型 各种食用菌的生活史，由于控制有性过程的基因不同而有差异，下面是四个有代表性的食用菌生活史类型。1草菇的生活史：初级同宗结合 2双孢蘑菇的生活史：次级同宗结合，单因子控制、二极性 3滑菇的生活史：二极性异宗结合，单因子控制、二极型 4香菇的生活史：四极性异
20、宗结合，双因子控制、四极性 食用菌的生活史复习思考题 四、复习思考题四、复习思考题1什么是食用菌的生活史？2举例说明食用菌的生活史有哪些类型。返回食用菌的生活条件营养条件营养条件 食用菌的基本生活条件包括营养因子和环境因子两个方面 一、营养条件一、营养条件 （一）食用菌的营养类型（一）食用菌的营养类型 根据自然状态下食用菌营养物质的来源，可将食用菌分为三种不同的营养类型。1 1腐生性食用菌腐生性食用菌 是能够分泌各种胞外酶和胞内酶，分解已经死亡的有机体，从中吸收养料的食用菌。根据腐生性食用菌所适宜分解的植物尸体不同和生活环境的差异，可分为木腐型(木生型)、土生型和粪草生型三个生态类群。商业性栽
21、培的食用菌几乎都是腐生性菌类。食用菌的生活条件营养条件营养条件 （一）食用菌的营养类型（一）食用菌的营养类型 2 2寄生性食用菌寄生性食用菌 是生活在活的有机体上，从活的寄主细胞中吸收营养而生长发育的食用菌。食用菌中，整个生活史都是营寄生生活的情况十分罕见，多是在生活史的某一阶段营寄生生活，而其他时期则营腐生生活，为兼性寄生。3 3共生性食用菌共生性食用菌 能与高等植物、昆虫、原生动物或其他菌类相互依存、互利共生的食用菌。食用菌的生活条件营养条件营养条件（二）食用菌对营养物质的需求（二）食用菌对营养物质的需求 摄取营养的方式不同，营养物质的来源也不同，但对营养物质的需求却基本相同，大致包括碳源
22、、氮源、无机盐类及生长因素四大类营养物质。1 1碳源碳源 碳源是构成食用菌细胞和代谢产物中碳架来源的营养物质，也是食用菌生命活动所需要的能量来源。食用菌的碳源物质有纤维素、半纤维素、木质素、淀粉、果胶、戊聚糖类、有机酸、有机醇类、单糖、双糖及多糖类的物质。食用菌的生活条件营养条件营养条件 （二）食用菌对营养物质的需求（二）食用菌对营养物质的需求 2 2氮源氮源 氮源是指能被食用菌吸收利用的含氮化合物，是合成食用菌细胞蛋白质和核酸的主要原料。食用菌主要利用各种有机氮，也可以利用无机氮。生产上常用蛋白胨、氨基酸、酵母膏、尿素等作为母种培养基的氮源，而在原种和栽培种培养基中，多由含氮高的物质提供氮，
23、用小分子无机氮或者有机氮作为补充氮源。培养基中氮的浓度对食用菌的生长发育影响较大。不同的食用菌、不同的的生长发育阶段对碳氮比的要求有一定的差异。菌丝生长阶段要求含氮量较高，以碳氮比(1520):1为宜，含氮量过低，菌丝生长缓慢；子实体发育阶段要求培养基含氮量较低，以碳氮比(3040):1为宜，含氮量过高，则抑制子实体的发生和生长。食用菌的生活条件营养条件营养条件 （二）食用菌对营养物质的需求（二）食用菌对营养物质的需求 3 3矿质元素矿质元素 矿质元素是构成细胞的成分，酶的成分，并在调节细胞与环境的渗透压中起作用。可分为大量元素和微量元素。磷、钾、硫、钙、镁为大量元素，在食用菌生产中，可向培养
24、料中施加适量的磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、石膏、硫酸镁来满足食用菌的需求。微量元素包括铁、钴、锰、钼、硼等，培养基中的浓度在1ppm左右即可。一般不需要另行添加。木屑、作物秸秆及畜粪等生产用料中的矿质元素含量一般是可以满足食用菌生长发育要求的，但在生产中常添加石膏13，过磷酸钙15，碳酸钙1一2，硫酸镁051，草木灰等给予补充。食用菌的生活条件营养条件营养条件 （二）食用菌对营养物质的需求（二）食用菌对营养物质的需求 4 4生长因素生长因素 生长因素是一类微量有机物，包括维生素和核酸、碱基、氨基酸、植物激素等生长因子。这类物质用量甚微却作用很大，维生素类物质主要起辅酶作用，生长因子对食用菌的生长发
25、育有促进作用。食用菌般不能合成硫胺素(维生素B1)，这种维生素对食用菌碳的代谢起重要作用，缺乏时食用菌发育受阻，外源加入量为0.010.1mgL。许多食用菌还需要微量的核黄素(维生素B2)、吡哆醇(维生素B6)、生物素(维生素H)、烟酸(维生素PP)、叶酸等，由于天然培养基或半合成培养基使用的马铃薯、酵母粉、麦芽汁、麸皮、米糠等天然物质中各种维生素含量非常丰富，因此一般不需要另行添加。食用菌的生活条件环境条件环境条件 二、环境条件二、环境条件 1 1温度温度 温度是影响食用菌生长发育的重要环境因素，不同的食用菌因其野生环境不同而有其不同的温度适宜范围，都有其最适生长温度、最低生长温度和最高生长
26、温度。（1 1）食用菌对环境温度的反应规律）食用菌对环境温度的反应规律 在最适温度范围内，食用菌的营养吸收、物质代谢强度和细胞物质合成的速度都较快，生长速度最高，生长适温在2030之间。菌丝体生长的温度范围大于子实体分化的温度范围，子实体分化的温度范围大于子实体发育的温度范围。孢子产生的适温低于孢子萌发的适温。食用菌的生活条件环境条件环境条件 1 1温度温度 （2 2）食用菌的温度类型）食用菌的温度类型 根据子实体形成所需要的最适温度，将食用菌划分为三种温度类型：低温型子实体分化的最高温度在24以下，最适温度在20以下；中温型子实体分化的最高温度在28以下，最适温度在2024之间；高温型子实体
27、分化的最高温度在30以上，最适温度在24以上。根据食用菌子实体分化时对温度变化的反应不同，又可把食用菌分为两种类型：恒温型与变温型。食用菌的生活条件环境条件环境条件 2 2水分和湿度水分和湿度 水是食用菌的组成成分，水参与其新陈代谢，水分的控制包括基内水分和空气相对湿度。（1）培养料的含水量：适合食用菌菌丝生长的培养料的含水量在60左右。（2）空气相对湿度：空气相对湿度直接影响培养料水分的蒸发和子实体表面的水分蒸发。适当的空气相对湿度，能够促进子实体表面的水分蒸发，从而促进菌丝体中的营养向子实体转移，又不会使子实体表面干燥，导致子实体干缩。对于大多数食用菌来说，菌丝体生长阶段需要6070的空气
28、相对湿度，而在子实体发育阶段，则需要8590的空气相对湿度。食用菌的生活条件环境条件环境条件 3.3.光照光照 食用菌细胞内不含叶绿素，不能进行光合作用，因此不需要直射光。食用菌在菌丝生长阶段不需要光线，但大部分食用菌在子实体分化和发育阶段都需要一定的散射光。根据子实体形成时期对光线的要求，一般可以将食用菌分为喜光型、厌光型和中间型3种类型。4 4空气（空气（O O2 2与与COCO2 2）食用菌是好气性菌类，不同种类的食用菌对氧气的需求量是有差异的；同一种食用菌在不同生长阶段对氧气的需求量和对二氧化碳的敏感程度也不同。一般菌丝生长期对氧气的需求量较小，对二氧化碳也不敏感。子实体分化阶段，食用
29、菌从营养生长转入生殖生长，这时的氧气需求量较低。子实体形成之后，食用菌的呼吸作用旺盛，对氧气的需求量急剧增加。食用菌的生活条件环境条件环境条件 5 5酸碱度酸碱度(pH(pH值值)大多数菌类都适宜在偏酸的环境中生长。适合菌丝生长的pH值一般在38之间，以66.5为宜。6.6.生物因子生物因子 食用菌与其他不同种类的生物或微生物生存在同一环境中，彼此之间发生着复杂的关系，主要表现在种间共处、伴生、共生、竞争、拮抗、寄生和啃食等方面。（1）食用菌与微生物：许多微生物能为食用菌提供必要的营养物质。（2）食用菌与植物：有些食用菌能与植物共生，形成菌根，彼此受益。（3）食用菌与动物：依靠动物帮助才能完成
30、生活史循环的食用菌种类较少，典型的例证是白蚁“栽种”鸡纵。食用菌的生活条件复习思考题复习思考题 三、复习思考题三、复习思考题 1、请举例说明食用菌的几种营养类型。2、食用菌在生长发育过程中需要哪些营养物质？在生产中如何解决？3、食用菌在生长发育过程中需要哪些环境条件？在生产中如何控制？制种技术 食用菌一般是通过播种来菌种来栽培的，食用菌生产包括两个步骤：第一步第一步：培养菌种通过采收孢子或从菇体组织中分离来培养食用菌的纯菌丝体，并逐级扩大繁殖。也就是制种。第二步第二步：栽培将繁殖好的菌种接种于培养料（培养基质）上，以培植食用菌的子实体。两个基本概念：培养基、菌种两个基本概念：培养基、菌种（有广
31、义和狭义之分）（有广义和狭义之分）培养基培养基：根据食用菌对营养、水分、酸碱度的要求，人为配制成的供食用菌生长发育的基质。菌种（广义）菌种（广义）：是指以保藏、试验、栽培和其它用途为目的，具有繁衍能力，遗传特性相对稳定的孢子、组织或菌丝体及其营养性或非营养性的载体。菌种（狭义）菌种（狭义）：是指以适宜的营养培养基为载体进行纯培养的菌丝体，也就是培养基质和菌丝体的联合体。或者说是指人工培养，并供进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。返回菌种生产类型及生产流程菌种生产类型菌种生产类型 一、菌种生产类型一、菌种生产类型 食用菌菌种是通过三级逐步扩大培养的方式来生产的，所以通常把菌种分为一级菌种、二级菌种和三
32、级菌种。1一级菌种一级菌种 从孢子分离培养或组织分离培养获得的纯菌丝体，在生产上称一级菌种菌丝体或一级菌种或试管种或母种。一级菌种是在实验室内经分离提纯后获得的菌种，培育技术较复杂，对制种设备要求较高，通常由专门的育种单位来培养。菌种生产类型及生产流程菌种生产类型菌种生产类型 2 2二级菌种二级菌种 由一级菌种扩大繁殖成的菌丝体，有的称为原种，它是一级菌种和三级菌种之间的过度种。3 3、三级菌种、三级菌种 由二级菌种扩大繁殖成的菌丝体，是直接用于栽培的菌种，又称栽培种或生产种。二、三级菌种的培养基及其制种过程大同小异。菌种生产类型及生产流程菌种生产工艺流程 食用菌制种工艺流程图食用菌制种工艺流
33、程图 斜面一级种培养基制备高压灭菌接种 培养筛选提纯原始种中试后确定一级种保存孢子或组织分离一级种转管、扩大菌种瓶二级种培养基制备高压灭菌接种培养二级菌种罐头瓶菌种袋三级种培养基制备高压或常压灭菌接种三级菌种栽培培养菌种生产类型及生产流程制种设备、器材、药品 （一）制种设备（一）制种设备 1配制培养基设备：切片机、粉碎机、过筛机、拌料机、装瓶或装袋机 2灭菌设备：高压灭菌锅（手提式、立式、卧式）、常压灭菌灶 3接种设备：净化工作台、接种箱、接种室 4培养设备：培养箱（电热恒温、恒温恒湿）、培养室、培养架、空调 5菌种保藏设备：电冰箱菌种生产类型及生产流程制种设备、器材、药品 （二）基本器具（二
34、）基本器具 玻璃器皿：试管、三角瓶、培养皿、漏斗、烧杯、酒精灯、菌种瓶、试剂瓶等 衡量器具：天平、杆秤、磅秤、量杯、量筒、移液管等 基础设备：药品橱、玻璃器皿橱、一级种配料工作台 菌种生产类型及生产流程制种设备、器材、药品（三）基本药品（三）基本药品 一级菌种常用化学药剂：化学纯的葡萄糖、蔗糖、蛋白胨、KH2PO4、K2HPO4、MgSO4、NaOH、HCl、麦芽浸出膏、酵母浸出膏、广泛或精密pH试纸等。二、三级菌种常用化学药品：工业级的石膏、碳酸钙、石灰、MgSO4、过磷酸钙、KH2PO4、K2HPO4等。菌种生产类型及生产流程复习思考题1什么叫培养基？培养基可分为哪几种类型？2什么叫菌种？
35、菌种可分为哪几种类型？3菌种为什么要经过三级逐步扩大培养？4简述菌种生产的基本过程？返回一级菌种制作技术 概述概述 一、概述一、概述 1概念 一级菌种是第一次用孢子分离法、组织分离法或基内菌丝分离法获得的纯菌丝体及其经过转管扩大后的菌丝体。2用途及要求 一级菌种是菌种生产的基础，一级菌种质量的优劣，直接关系到二级菌种和三级菌种的质量，对食用菌生产产生根本的影响。3、制种过程 一级菌种的制作过程，主要包括下列几个程序：培养基的配制培养基的灭菌菌种的分离纯化（提纯）转管扩大培养一级菌种 一级菌种制作技术 一级菌种培养基的配制 （一）基本要求（一）基本要求 营养成分：必须营养全面且易于吸收。容器：一
36、级菌种培养基通常用玻璃试管作容器，按不同的配方加上琼脂凝固剂，制成琼脂斜面培养基，又叫斜面培养基，简称斜面。（二）一级菌种培养基常用的材料（二）一级菌种培养基常用的材料 在配制一级菌种培养基时，选用的原材料要具备以下二个条件：一是要能满足食用菌的营养需要；二是所用原材料来源广，成本低。琼脂（又称洋菜）是一级菌种培养基常用的凝固剂 一级菌种制作技术 一级菌种培养基的配制（三）一级菌种培养基常用的配方（三）一级菌种培养基常用的配方1 1常用配方常用配方 PDA培养基 PSA培养基马铃薯（去皮）200g 马铃薯（去皮）200g葡萄糖 20g 蔗糖 20g琼脂 1823g 琼脂 1823g水 1000
37、ml 水 1000ml一级菌种制作技术 一级菌种培养基的配制 （三）一级菌种培养基常用的配方（三）一级菌种培养基常用的配方 2 2一级菌种培养基配方设计一级菌种培养基配方设计 组成一级种培养基的材料大致可分为四种：天然的有机物：应选择新鲜、无霉味、无虫蛀、无变质的优质材料，经热浸提后取滤液入料，为食用菌生长提供全面的营养。可溶性的有机营养制剂：主要是为食用菌生长提供优质的碳源和氮源，要求纯度高，保藏良好。矿物质：多在改良培养基或综合培养基中作为食用菌对矿物质需求的补充剂，同时对培养基物理性状的改良起重要作用。其用量为0.01%0.5%。琼脂：是固化培养基最常用的凝固剂，一般用量为2%。一级菌种
38、制作技术 一级菌种培养基的配制 （四）（四）一级菌种培养基的配制一级菌种培养基的配制 一级菌种培养基配方较多，原料较多，但制作方法大致相同。平板培养基的制作平板培养基的制作 平板培养基常用于单孢分离，测定菌丝生长速度，观察菌落的形态，拮抗实验，测定接种空间杂菌数。制作方法制作方法：将培养皿洗净、干燥，使各培养皿盖方向一致，用牛皮纸包好，或放入特制铁罐内，注明皿盖的方向。高压灭菌或干燥灭菌后备用。取刚灭菌后尚未凝固的培养基置于无菌箱或超净工作台内，略打开灭菌过的培养皿盖（露一小缝），倒入培养基（厚度为0.5cm），封盖、冷凝，倒置备用。一级菌种制作技术 一级菌种培养基的灭菌 （一）消毒与灭菌的概
39、念（一）消毒与灭菌的概念 灭菌：灭菌：是应用物理和化学方法杀灭物品表面和内部所有的微生物，是一种彻底的灭菌方法。消毒消毒：是应用物理和化学方法使欲消毒的物品表面和孔隙内绝大部分微生物致死，是一种不彻底的灭菌方法。一级菌种制作技术 一级菌种培养基的灭菌（二）消毒与灭菌的方法消毒与灭菌的方法1 1、常用的灭菌方法、常用的灭菌方法火焰灭菌用于金属器具，火焰灼烧至红（在火焰2/3处烧）干燥箱灭菌用于玻璃器皿（培养皿、试管、三角瓶、吸管）等。洗净晾干包装放入干燥箱升温160170，保持12h 关闭电源，自然降温60以下打开干燥箱取出灭菌物品，尽快使用。干热灭菌湿热灭菌常压灭菌间歇灭菌第一次蒸，100保持
40、1 h 28-37下培养24 h 第二次蒸，100，保持1 h 培养24 h 第三次蒸，100，保持1 h。不常用的原因：灭菌一锅需要34天时间，且冬天需要保温。持续灭菌蒸，100保持1214 h（方法：攻头，控中间，保尾）。普遍采用，特别用于大规模塑料袋制种和塑料栽培筒的灭菌。注意：常压灭菌锅要设计合理，主要是灭菌彻底与否、燃料费用、周转速度、劳动强度、污染率的高低，直接影响经济效益。高压灭菌手提式高压灭菌锅：用于一级菌种培养基灭菌。卧式或立式高压灭菌锅：用于二、三级菌种培养基灭菌。一级菌种制作技术 一级菌种培养基的灭菌（二）消毒与灭菌的方法消毒与灭菌的方法 2 2、常用的消毒方法、常用的消
41、毒方法 空间消毒药液喷雾药剂薰蒸紫外线照射0.25%的新洁尔灭，5%的石碳酸，0.25%的多菌灵等。用量不小于30ml/m3；雾粒越细越好；适时更换药液（防止抗药性）。1020ml的甲醛+58g的高锰酸钾/m3；气雾消毒盒，26g/m3；照30min后，再过30min开照明灯器具消毒药液浸泡煮沸消毒75%的酒精；药物揩擦煮沸20min以上培养料消毒熟石灰拌料；杀菌剂拌料（0.1%0.2%的多菌灵）；巴氏消毒（发酵）分离材料消毒75%的酒精棉球擦拭；0.1%升汞浸泡0.51min无菌水冲洗3次无菌纸吸干一级菌种制作技术 一级菌种培养基的灭菌 （三）一级菌种培养基的灭菌（三）一级菌种培养基的灭菌
42、1灭菌设备：手提式高压灭菌锅 2具体灭菌要求：1.1kg/cm2，121，保持2030min。3操作过程 加水装锅盖盖加热当压力升为0.5kg/cm2时排放冷空气正式升压保压（1.1kg/cm2，121，保持20-30min）停止加热自然降压至零排放余汽开盖取出灭菌物品趁热摆斜面检验灭菌效果（32空白培养48h）。一级菌种制作技术 菌种分离 （一）菌种分离的概念 菌种分离：用无菌操作的方法将所需要的食用菌从混杂的微生物群体中单独分离出来的过程。通过菌种分离得到的纯菌丝体即为一级菌种。（二）菌种分离的关键 严格按无菌操作规程进行 无菌操作：任何一个操作过程都要注意避免把其它任何无关的菌体带入到培
43、养基中。注意二点：1严格树立无菌观念；2严格遵循无菌操作规程。一级菌种制作技术 菌种分离 （三）菌种分离的设备（三）菌种分离的设备 1接种箱：操作规程 2净化工作台：操作规程 3接种室：操作规程 （四）菌种分离的方法（四）菌种分离的方法 食用菌的分离方法很多，常用的有组织分离法、孢子分离法和基内菌丝分离法三种。一级菌种制作技术 菌种分离 （四）菌种分离的方法（四）菌种分离的方法 1组织分离法组织分离法 （1）概念 将食用菌的部分组织移接到斜面培养基上获得纯培养的方法。（2）特点：属于无性繁殖，能保持原有菌株的优良种性，是获得纯菌种的常用方法，且简单易行。适用于大型肉质子实体，适用于孢子不易萌发
44、的菌类。若种菇感染病毒，不易脱毒。（3）操作过程（以伞菌类为例）种菇选择种菇消毒切取组织块移接组织块至斜面中央培养（25左右）一级菌种制作技术 菌种分离（四）菌种分离的方法（四）菌种分离的方法 2 2孢子分离法孢子分离法（1）概念 利用子实体产生的成熟有性孢子分离培养获得纯菌种的方法。（2）特点 属于有性繁殖，后代易发生变异，可用此法培育新品种。分离过程较复杂，适用于胶质菌类和小型伞菌。（3）操作过程 孢子的采集 孢子的分离 孢子的萌发一级菌种制作技术 菌种分离（四）菌种分离的方法（四）菌种分离的方法 3 3基内菌丝分离法基内菌丝分离法(基质分离法基质分离法)概念：从生长子实体的培养基中分离菌
45、丝获得纯培养的方法。特点：易感染杂菌。基内菌丝分离法一般只在下列情况下采用：子实体已腐烂，但又必须保留该种菌种。有些子实体小而薄，用组织分离法和孢子分离法较困难。还有一些菌类如银耳菌丝，只有与香灰菌丝生长在一起才能产生子实体，如果要同时得到这两种菌丝的混合种，也只能采用基内菌丝分离法进行分离。一级菌种制作技术 菌种的纯化 一级菌种的纯化：是指对分离获得的菌种进行再提纯，成为生产所需要的菌种的方法。1 1菌丝的再提纯菌丝的再提纯 再提纯时，可选用菌落生长速度较为一致的菌丝体作为再提纯对象，用消毒的接种铲切取菌丝的前端部分（连同培养基一起），转移到新的培养基上培养。如果菌丝生长稀疏，也可采用单根菌
46、丝分离法。经过几次的切割移植，逐渐挑选生长良好的无杂菌菌株，从而获得纯菌种。一级菌种制作技术 菌种的纯化 2 2污染物的排除污染物的排除 在菌种分离后，细菌、霉菌的污染时有发生，必须加以排除。一般来讲，被杂菌污染的菌株不再使用。但有时由于菌种紧缺，并且污染物不多，也可用灭菌滤纸浸在1的多菌灵溶液中，然后取出覆盖于霉菌的生长点上，以防止分生孢子的扩散，然后用接种铲切取一小块远离杂菌的健壮菌丝移至新的斜面培养基上培养。如果是细菌污染，细菌的菌落比较局限，并不会出现细胞飞扬现象，因此，可以先用接种铲将细菌菌落连同培养基一起取出来，再从无菌部位取菌丝块转管一次，同样可以获得纯菌种。一级菌种制作技术 出
47、菇鉴定（试验）概念：是菌种投入生产前必须做的结实性鉴定试验。目的：进一步确定菌种，以避免菌种选育不当而造成不可估量的损失。内容：包括生产性状、商品性状、遗传性状三个方面。一级菌种制作技术 扩大培养（转管）一级菌种的扩大培养是在试管间进行的，因此又叫转管。转管原因：从外地购进或分离获得的母种数量有限，不能满足生产的需要时，要对初次获得的母种进行扩大繁殖，以增加母种数量。转管数量：一支母种可接1520支试管斜面，扩大的数量根据实际情况而定。注意事项：母种的扩大繁殖不可无限制地移代，移代过多菌种生活力减弱，从而影响大面积栽培的生产效益。操作过程：(1)左手拿两支试管，一支为经灭菌的斜面，另一支为已长
48、好的菌种。右手拿接种钩(已在火焰上灼烧灭菌又冷却)，并同时用右手轻轻拔下两支试管的棉塞或试管帽。(2)将试管口通过火焰数次，并稍转动，以防环境中的微生物落入。(3)首先将接种钩伸入有菌试管，连同培养基钩取直径为35mm的菌丝块，取出接种钩，迅速伸入另一灭菌斜面上并将菌丝块放在斜面的中央。(4)烧试管口，塞好棉塞或盖好试管帽，如用胶塞，则不要烧试管口。将接种钩烧一下，插到酒精瓶中。一级菌种制作技术 菌种的培养、保藏菌种的培养、保藏 （一（一)培养培养 培养条件：25左右、干净、干燥、黑暗、通风 培养设备：电热恒温培养箱 （二）保藏（二）保藏 1菌种保藏的目的：菌种由于传代次数过多，培养时间过长，
49、或因不利的外界环境条件的影响，常常会导致菌种衰退，丧失其优良性状。因此，在一定的时间范围内要使菌种的生活力、纯度和优良性状稳定地保存下来，就必须采用相应的措施，做好菌种保藏工作。2菌种保藏（概念）：是创造一个特定环境条件，降低菌种的代谢活动，使其处于休眠状态，在一定的保藏时间内保持原有的优良性状，防止菌种退化，降低菌种的衰亡速度，防止杂菌污染，而当使用时，提供合适的条件，能重新恢复正常生长繁殖。3菌种保藏的原理：是采用干燥、低温、冷冻或减少氧气供给等方法，降低菌种的代谢强度，终止其繁殖，并保证原来菌种的纯度。4传统的保藏方法：有继代培养低温保藏法，矿油保藏法，冷冻干燥保藏法，液态氨超低温保藏法
50、等。一级菌种制作技术 菌种的培养、保藏菌种的培养、保藏继代低温保藏法 食用菌在适宜的温度范围内，温度越高菌丝的代谢能力越强，菌种越容易衰老。低温保藏就是将培养好的菌株放在冰箱中低温保藏，降低其代谢强度，延长菌种的生活力。同时也防止空气中的杂菌污染。继代低温保藏的方法继代低温保藏的方法：冰箱中低温保藏(一般要求温度在46)。菌株用塑料纸包扎，23个月转管一次，选用营养丰富的培养基。注意事项:定期检查。如果发现保藏的菌种被污染应立即重新分离纯化。制种或转管时要贴好标签，以防搞乱。对不耐低温的菌种，如草菇在5时菌丝会死亡，应置于1015下保藏。继代低温保藏的缺点继代低温保藏的缺点:保藏时间较短，经常
