1、黄艳甲型肝炎病毒IgM抗体的测定(捕获法)酶联免疫吸附试验（ELISA法）将抗体(抗原)包被在固相表面后，按不同的步骤加入待测抗原(抗体)和酶标抗体(抗原)，充分反应后用洗涤的方法，使固相上形成的抗原抗体复合物与其他物质分离，洗去游离的酶标抗体(抗原)，最后加入底物，根据酶对底物催化的显色反应程度，而对标本中的抗原(抗体)进行定性或定量。ELISA类型夹心法间接法测抗体竞争法捕获法捕获法测IgM抗体 血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗体多用捕获法 包被抗体：用抗人链抗体包被固相载体上,形成固相抗人链;加入病人的血清标本;加入特
2、异性抗原试剂;，加入针对特异性抗原的酶标抗体，加底物显色免疫球蛋白的结构（一）轻链和重链 轻链（L链）链 链 轻链决定型别 型 型 正常人：2 ：1捕获法主要用于 血清中某种抗体亚型成分（如IgM）的测定。实验原理 用抗人链抗体包被酶标板，用以捕获血清中IgM类抗体，然后用特异性HAVAg与IgM抗体结合，再加酶标抗HAV抗体，最后加底物显色，显色深浅与HAVIgM的含量成正相关。操作步骤1将微孔条固定在支架上，按顺序编号。2分别将待测标本，阴、阳性对照100l（2滴）加入相应的孔中，设空白对照孔。置3720分钟。3洗涤：甩去孔内液体，用洗涤液注满各孔，静置5秒，共三次，每次洗后均需扣干。4每
3、孔加HAAg50l，酶结合物50l（空白对照除外），振荡混匀，置3720分钟。5洗涤：重复上述36显色：每孔加显色剂A液50l，再加显色剂B液50l，振荡混匀，置3715分钟。7.每孔加终止液50lCut off value(临界值)Cut off value(临界值)：阴阳性判断值，简称CO值。夹心法：若S/CO值1，为阳性；S/CO值1，为阴性；竞争抑制法：若S/CO值1，为阴性。临床意义血清中抗HAVIgM出现于感染的早期(发病后数日)抗体的效价很快升到峰值并持续较长时间(2-4周),经1-2个月后抗体的效价和阳性率明显不降,于3个月后消失.因此抗HAVIgM阳性,尤其是效价较高时,表明处于感染的早期,被公认为早期诊断甲肝的依据,是区别是急性感染还是慢性感染的有力佐证。
