1、第二章第二章 渔药的残留与监控渔药的残留与监控内内 容容一、渔药的残留及危害一、渔药的残留及危害二、渔药残留的检测二、渔药残留的检测三、渔药残留产生的原因三、渔药残留产生的原因四、渔药残留的控制四、渔药残留的控制一、渔药的残留及危害一、渔药的残留及危害 关于动物源性食品中药物残留的问题提出由关于动物源性食品中药物残留的问题提出由来已久。来已久。食品法典委员会食品法典委员会（CACCAC）是药物残留监管的主）是药物残留监管的主要国际组织，早在要国际组织，早在19841984年，在年，在CACCAC的倡导下，的倡导下，有有FAOFAO和和WHOWHO牵头提倡成立食品中兽药残留立牵头提倡成立食品中兽
2、药残留立法委员会（法委员会（CCRVDFCCRVDF），该组织于），该组织于19861986年正式年正式成立，此后每年在美国华盛顿召开一次全体成立，此后每年在美国华盛顿召开一次全体委员会，制定和修改动物组织以及其产品中委员会，制定和修改动物组织以及其产品中的兽药最高残留限量以及休药期等法规。的兽药最高残留限量以及休药期等法规。国外的一些机构如美国的食品药品管理局国外的一些机构如美国的食品药品管理局（FDAFDA）以及其下属的兽药中心（）以及其下属的兽药中心（CVMCVM）、新）、新加坡的农业食品和兽医机构（加坡的农业食品和兽医机构（AVAAVA）、欧盟）、欧盟药物评估办公室（药物评估办公室（A
3、MEAAMEA）以及下属的兽药产）以及下属的兽药产品委员会（品委员会（CVMPCVMP）和各成员国的兽医警戒机）和各成员国的兽医警戒机构、澳大利亚的国家农业及兽医化学注册管构、澳大利亚的国家农业及兽医化学注册管理部门（理部门（NRANRA）等对药物残留的监管发挥着）等对药物残留的监管发挥着重要的作用。重要的作用。由于我国水产养殖的迅猛发展，水产养殖动由于我国水产养殖的迅猛发展，水产养殖动植物的病害也日趋严重。为了控制水产动物植物的病害也日趋严重。为了控制水产动物病害的蔓延，投用了较多的抗生素等化学药病害的蔓延，投用了较多的抗生素等化学药物，如喹诺酮类、磺胺类等，对于其用量、物，如喹诺酮类、磺胺
4、类等，对于其用量、用药次数以及休药期的认识不够或忽视，造用药次数以及休药期的认识不够或忽视，造成药物在水产品中残留，进而对公众的健康成药物在水产品中残留，进而对公众的健康和水域环境造成了潜在的危害，也给我国水和水域环境造成了潜在的危害，也给我国水产品出口带来了一定的影响和损失。产品出口带来了一定的影响和损失。19971997年以来，我国农业部先后颁布了年以来，我国农业部先后颁布了动动物性食品中兽药残留最高残留限量的规物性食品中兽药残留最高残留限量的规定定、关于开展兽药残留检测工作的通关于开展兽药残留检测工作的通知知 20022002年农业部和国家质量监督检验检疫总年农业部和国家质量监督检验检疫
5、总局联合印发了局联合印发了水产品药物残留专项整治水产品药物残留专项整治计划计划，开展水产品药物残留专项整治活，开展水产品药物残留专项整治活动。动。我国水产品中药物残留的控制已朝着一个我国水产品中药物残留的控制已朝着一个好的方向发展。好的方向发展。1.1.残留的概念残留的概念 根据食品兽药残留立法委员会的定义，根据食品兽药残留立法委员会的定义，兽药残兽药残留留是指：动物性食品中的任何可食用部分所含是指：动物性食品中的任何可食用部分所含药物的母体化合物及其代谢物或二者的混合物，药物的母体化合物及其代谢物或二者的混合物，以及与药物有关的杂质的残留。以及与药物有关的杂质的残留。因此，药物的残留既包括因
6、此，药物的残留既包括原药原药，也包括药物在，也包括药物在体内的体内的代谢产物代谢产物。此外，药物或代谢产物还能与内源性大分子共此外，药物或代谢产物还能与内源性大分子共价结合，形成价结合，形成结合残留结合残留，它们对靶动物具有潜，它们对靶动物具有潜在的毒性作用。在的毒性作用。渔药残留渔药残留指：水产品中的任何可食用部分指：水产品中的任何可食用部分中渔药的原型化合物或（和）其代谢产物，中渔药的原型化合物或（和）其代谢产物，并包括与药物母体有关杂质在其组织、器并包括与药物母体有关杂质在其组织、器官等蓄积、贮存或以其他方式保留的现象。官等蓄积、贮存或以其他方式保留的现象。由于渔药的使用常与水环境密切相
7、关，因由于渔药的使用常与水环境密切相关，因此也有人将渔药残留扩大到水环境中的生此也有人将渔药残留扩大到水环境中的生态残留。态残留。但一般来说还是多指与人健康直接相关的但一般来说还是多指与人健康直接相关的水产品水产品。2.2.残留限量及其确定依据残留限量及其确定依据 渔药残留限量渔药残留限量一般地说是指存在于水产一般地说是指存在于水产品中的残留药量不会对人体健康造成危品中的残留药量不会对人体健康造成危害的含量。害的含量。它是确定水产品安全、保护人类健康的它是确定水产品安全、保护人类健康的一个重要标准。一个重要标准。根据残留的水平，可将残留限量分为三类：根据残留的水平，可将残留限量分为三类：零残留
8、或零容许量零残留或零容许量：指药物的残留等于或小于检测：指药物的残留等于或小于检测方法的检测限。方法的检测限。可忽略的容许量可忽略的容许量：即常说的微容许量，其残留量稍：即常说的微容许量，其残留量稍高于检测限而低于安全容许量。高于检测限而低于安全容许量。安全容许量安全容许量：又称为有限的容许量或法定的容许量，：又称为有限的容许量或法定的容许量，即即最高残留限量最高残留限量（Maximum Residue Limits,MRLsMaximum Residue Limits,MRLs或或MRLMRL）。指药物或其它化学物质允许在食品中残。指药物或其它化学物质允许在食品中残留的最高量。其残留量比较高
9、（甚至没有残留上留的最高量。其残留量比较高（甚至没有残留上限），但即使吃了含有此残留水平的水产品，也不限），但即使吃了含有此残留水平的水产品，也不会对人体健康造成危害。会对人体健康造成危害。MRLMRL属于国家公布的属于国家公布的强制强制标准，决定了水产品的安全标准，决定了水产品的安全性和渔药的休药期。性和渔药的休药期。MRLMRL确定的依据确定的依据是：确定残留组分，测定无作用剂量是：确定残留组分，测定无作用剂量（NOAELNOAEL），进行危害性评估（安全系数），确定日），进行危害性评估（安全系数），确定日许量（许量（ADIADI）和接触情况调查（食物系数）。如果组）和接触情况调查（食物系
10、数）。如果组织中含有多个残留组分，如原型药物和代谢产物，织中含有多个残留组分，如原型药物和代谢产物，则规定则规定MRLMRL时需考虑监控总残留。时需考虑监控总残留。MRLMRL可采用的公式计算：可采用的公式计算：MRL(mg/kg)=MRL(mg/kg)=ADI(mg/kg/d)ADI(mg/kg/d)平均体重平均体重 (kg)(kg)食物消费系数食物消费系数 (kg/d)(kg/d)制定制定MRLMRL还要考虑以下几点：还要考虑以下几点：药物对人类健康的危害程度，如有三致作用的药物，药物对人类健康的危害程度，如有三致作用的药物，最高残留限量要求就应比较苛刻，而一般毒性较小、最高残留限量要求就
11、应比较苛刻，而一般毒性较小、又不与人用药同源的药物，最高残留限量则可适当高又不与人用药同源的药物，最高残留限量则可适当高些；些；残留药物（或其代谢产物）不会对人体内的有益菌群残留药物（或其代谢产物）不会对人体内的有益菌群造成破坏，不会导致耐药菌株或耐药因子的产生；造成破坏，不会导致耐药菌株或耐药因子的产生；残留检测方法的灵敏度；残留检测方法的灵敏度；国际上有关国家和组织所制定的最高残留限量标准；国际上有关国家和组织所制定的最高残留限量标准；我国水产品生产和进出口的具体要求。我国水产品生产和进出口的具体要求。3.3.休药期及其制定休药期及其制定 休药期休药期（Withdrawal time WD
12、TWithdrawal time WDT），也称为），也称为停药期停药期，它是指从停止给药到允许动物宰，它是指从停止给药到允许动物宰杀或其产品上市的最短间隔时间。也可理杀或其产品上市的最短间隔时间。也可理解为从停止给药到保证所有食用组织中总解为从停止给药到保证所有食用组织中总残留浓度降至安全浓度以下所需要的最少残留浓度降至安全浓度以下所需要的最少时间。时间。休药期的制定一般是根据水生动物生长旺盛季节，休药期的制定一般是根据水生动物生长旺盛季节，口服给药时的药动学规律而制定的。口服给药时的药动学规律而制定的。制定休药期应考虑以下问题制定休药期应考虑以下问题：1 1）最高残留限量最高残留限量：休药
13、期终了时渔药在水生动物可食：休药期终了时渔药在水生动物可食部分的残留应低于其最高残留限量。部分的残留应低于其最高残留限量。2 2）检测方法的检测限检测方法的检测限：检测限应该低于或等于渔药在：检测限应该低于或等于渔药在水生动物体内的最高残留限量。水生动物体内的最高残留限量。3 3）消除速率方程和消除半衰期消除速率方程和消除半衰期：因为二者能反映渔药：因为二者能反映渔药在水生动物体内的消除情况，可据此计算出渔药消在水生动物体内的消除情况，可据此计算出渔药消除至最高残留限量或以下时所需要的时间。除至最高残留限量或以下时所需要的时间。4 4）养殖水环境状况养殖水环境状况：其中尤以：其中尤以温度温度最
14、为重要。最为重要。5 5）具有危害作用的）具有危害作用的代谢产物代谢产物的消除情况如的消除情况如恩诺沙星恩诺沙星类类（其代谢产物为环丙沙星）等，要根据他们在水生（其代谢产物为环丙沙星）等，要根据他们在水生动物组织中原型渔药及其活性代谢产物的总残留浓动物组织中原型渔药及其活性代谢产物的总残留浓度确定休药期。度确定休药期。6 6）结合残留结合残留：如某些渔药与血浆蛋白的结合后形成残：如某些渔药与血浆蛋白的结合后形成残留，可造成危害。留，可造成危害。此外，决定休药期还应满足以下条件：给养殖生产此外，决定休药期还应满足以下条件：给养殖生产者提供一个高保险系数，使水产品品质能适合现实者提供一个高保险系数
15、，使水产品品质能适合现实的法规；与国家法律法规如的法规；与国家法律法规如水产品无公害生产管水产品无公害生产管理规范理规范相一致；具有可操作性，能被生产者自觉相一致；具有可操作性，能被生产者自觉遵守。遵守。4.4.渔药残留的危害渔药残留的危害 一般来说，水产品中的渔药残留大部分不一般来说，水产品中的渔药残留大部分不会对人类产生急性毒性作用。会对人类产生急性毒性作用。但是如果人们经常摄入含有低剂量渔药残但是如果人们经常摄入含有低剂量渔药残留的水产品，残留的药物即可在人体内留的水产品，残留的药物即可在人体内慢慢性蓄积性蓄积而导致体内各器官功能紊乱或病变，而导致体内各器官功能紊乱或病变，严重危害人类的
16、健康。严重危害人类的健康。表表2-12-1：部分渔药残留的危害部分渔药残留的危害 大多数药物在机体作用下都会发生大多数药物在机体作用下都会发生生物转化生物转化，形，形成剂型较强、水溶性较大的代谢产物。成剂型较强、水溶性较大的代谢产物。然而，目前的研究多针对原型药物，对然而，目前的研究多针对原型药物，对代谢产物代谢产物的涉及较少，但其残留的危害，应引起足够的关的涉及较少，但其残留的危害，应引起足够的关注和重视。注和重视。如磺胺甲噁唑的代谢产物乙酰如磺胺甲噁唑的代谢产物乙酰-磺胺甲噁唑具有较磺胺甲噁唑具有较强的毒副作用，恩诺沙星的代谢产物环丙沙星现强的毒副作用，恩诺沙星的代谢产物环丙沙星现已被禁用
17、。已被禁用。一般来说渔药残留可造成以下危害一般来说渔药残留可造成以下危害：1 1）毒性作用）毒性作用 残留药物蓄积至一定浓度时，会对人体产生慢性、残留药物蓄积至一定浓度时，会对人体产生慢性、蓄积毒性作用。蓄积毒性作用。2 2）变态反应）变态反应 有些药物如青霉素、四环素、磺胺类及某些氨基有些药物如青霉素、四环素、磺胺类及某些氨基糖甙类抗生素等会使敏感人群产生过敏反应，严糖甙类抗生素等会使敏感人群产生过敏反应，严重者可引起休克等严重症状，过敏反应一般不呈重者可引起休克等严重症状，过敏反应一般不呈现剂量反应关系，主要与个体体质有关。现剂量反应关系，主要与个体体质有关。3 3）产生耐药菌株）产生耐药
18、菌株 残留会使细菌发生基因突变或转移，使部分病原体残留会使细菌发生基因突变或转移，使部分病原体产生抗药性。产生抗药性。如从患疖疮病的大西洋鲑分离的杀鲑气单胞菌如从患疖疮病的大西洋鲑分离的杀鲑气单胞菌55%55%的的菌株对土霉素有抗性，菌株对土霉素有抗性，37%37%的菌株对噁喹酸有抗药性。的菌株对噁喹酸有抗药性。一旦这些病原菌的耐药质粒传递给人类，将会给临一旦这些病原菌的耐药质粒传递给人类，将会给临床上细菌性感染传染性疾病的治疗带来很大的困难。床上细菌性感染传染性疾病的治疗带来很大的困难。耐药菌株感染往往会延误正常的治疗过程。耐药菌株感染往往会延误正常的治疗过程。4 4）“三致三致”作用作用
19、残留药物在人体内蓄积，当浓度达到一定量时会产残留药物在人体内蓄积，当浓度达到一定量时会产生生“三致三致”作用作用 ，如孔雀石绿、双甲脒等，如孔雀石绿、双甲脒等5 5）激素作用）激素作用 一些激素及其类似物，主要包括甾类同化激素和非一些激素及其类似物，主要包括甾类同化激素和非甾类同化激素，在肝、肾和注射或埋植部位常有大甾类同化激素，在肝、肾和注射或埋植部位常有大量同化激素残留存在，人们一旦食用含有其残留的量同化激素残留存在，人们一旦食用含有其残留的水产品，可产生一系列激素样作用，造成人类生理水产品，可产生一系列激素样作用，造成人类生理功能紊乱，如潜在的发育毒性（儿童早熟）及女性功能紊乱，如潜在的
20、发育毒性（儿童早熟）及女性男性化或男性女性化现象。男性化或男性女性化现象。6 6）水环境生态毒性）水环境生态毒性 药物以原型或代谢产物的形式随粪、尿等排泄物药物以原型或代谢产物的形式随粪、尿等排泄物排出或直接在水环境中泼洒药物均会造成水环境排出或直接在水环境中泼洒药物均会造成水环境中药物的残留，破坏养殖生态平衡。中药物的残留，破坏养殖生态平衡。残留会对低等水生动物有较高的毒性作用；使环残留会对低等水生动物有较高的毒性作用；使环境中对药敏感的种群减少或消失；造成敏感菌耐境中对药敏感的种群减少或消失；造成敏感菌耐药性增加；药性增加；在多因子的作用下，残留可产生转移、转化或在在多因子的作用下，残留可
21、产生转移、转化或在动植物中蓄积。动植物中蓄积。二、渔药残留的检测二、渔药残留的检测1.1.检测的原则检测的原则2.2.检测方法的选择检测方法的选择3.3.样品的前处理样品的前处理4.4.常用检测方法简介常用检测方法简介1.1.检测的原则检测的原则1 1）水产品渔药残留检测实验室的资格）水产品渔药残留检测实验室的资格 选择国家认可的、有资质的残留检测实验选择国家认可的、有资质的残留检测实验室。室。对未取得资质的，须对其人员、机构、管对未取得资质的，须对其人员、机构、管理水平、内外试验实际检测能力等方面进理水平、内外试验实际检测能力等方面进行考核，合格者方可获得残留检测实验室行考核，合格者方可获得
22、残留检测实验室资格。资格。2 2）残留检测技术规范和标准）残留检测技术规范和标准 严格按照国家的相关技术规范和标准，严格按照国家的相关技术规范和标准，选择正确的药物分析方法进行操作，这选择正确的药物分析方法进行操作，这样的检测结果才具有法律性。样的检测结果才具有法律性。农业部发布了一些水产品中药物残留检农业部发布了一些水产品中药物残留检测方法测方法。3 3）原创性等残留检测方法）原创性等残留检测方法 必须提交所有的残留检测资料，包括药动必须提交所有的残留检测资料，包括药动学、日许量、最高残留限量以及残留检测学、日许量、最高残留限量以及残留检测方法，最后确定休药期。方法，最后确定休药期。对于原创
23、性建立的检测方法，必须要有对于原创性建立的检测方法，必须要有3-3-5 5家同类单位进行比对。家同类单位进行比对。4 4）残留检测新方法的批准）残留检测新方法的批准 允许建立多种检测方法，对于等同采用允许建立多种检测方法，对于等同采用国外标准，将国外方法直接引进到国内国外标准，将国外方法直接引进到国内的，原则上只要有一家单位建立后，再的，原则上只要有一家单位建立后，再找另一家单位进行比对，并提供国外相找另一家单位进行比对，并提供国外相关文献的全面资料。关文献的全面资料。5 5）其他）其他 在检测时还应注意以下几点：在检测时还应注意以下几点：执行官方采样程序，注意取样科学性执行官方采样程序，注意
24、取样科学性与代表性；与代表性；采取适宜的样品前处理方法；采取适宜的样品前处理方法；根据抽样、检测、养殖用药和国家的根据抽样、检测、养殖用药和国家的需要，做出客观、公正、科学的结果需要，做出客观、公正、科学的结果判断。判断。2.2.检测方法的选择检测方法的选择 不同检测方法，对药物的敏感性，操作不同检测方法，对药物的敏感性，操作难易、检测费用等方面都不一样。难易、检测费用等方面都不一样。应寻求简便、快速、准确、敏感性高的应寻求简便、快速、准确、敏感性高的检测方法，以满足日趋严格的残留限量检测方法，以满足日趋严格的残留限量的要求，保障水产品的安全。的要求，保障水产品的安全。目前在药残检测上所采取的
25、主要方法有：目前在药残检测上所采取的主要方法有：1 1）高效液相色谱法）高效液相色谱法：该方法普遍使用，虽然设备造：该方法普遍使用，虽然设备造价高，但对样品的分离鉴定不受挥发度、热稳定性价高，但对样品的分离鉴定不受挥发度、热稳定性及分子量的影响，具有分离效果好，测定精度高的及分子量的影响，具有分离效果好，测定精度高的优点。优点。2 2）微生物测定法）微生物测定法：简单快速、便宜，但操作较繁琐，：简单快速、便宜，但操作较繁琐，其灵敏度也有一定的限制。其灵敏度也有一定的限制。3 3）气相色谱法）气相色谱法：使用具有一定的局限，对那些不易：使用具有一定的局限，对那些不易气化的物质测定不准确，而且设备
26、较昂贵，使用不气化的物质测定不准确，而且设备较昂贵，使用不普遍，但灵敏度高，对某些药物具有一定的特异性。普遍，但灵敏度高，对某些药物具有一定的特异性。4 4）分光光度法）分光光度法：应用分光光度计进行测定，比：应用分光光度计进行测定，比较简单、易操作、检测费用便宜，主要确定是较简单、易操作、检测费用便宜，主要确定是精度较低，特别是代谢物与原药结构相似，以精度较低，特别是代谢物与原药结构相似，以致吸光度产生叠加不易区分，生物样品中内源致吸光度产生叠加不易区分，生物样品中内源性杂志干扰大时，则会出现测定结果偏高的现性杂志干扰大时，则会出现测定结果偏高的现象。象。5 5）免疫学方法）免疫学方法：利用
27、抗原抗体的特异性结合反：利用抗原抗体的特异性结合反应的原理研制的诊断试剂盒，快速、灵敏、特应的原理研制的诊断试剂盒，快速、灵敏、特异性好，但须制备相应的抗原和抗体。异性好，但须制备相应的抗原和抗体。为能快速确定水产品中是否有残留，大致为能快速确定水产品中是否有残留，大致确定残留药物的类别，国外通常做法是遵确定残留药物的类别，国外通常做法是遵循一定的程序对被测水产品进行取样，循一定的程序对被测水产品进行取样，按规范要求对样品进行快速筛选检验。按规范要求对样品进行快速筛选检验。然后再用更精确的方法确证超标药物的品然后再用更精确的方法确证超标药物的品种和准确含量。种和准确含量。即首先利用免疫技术、生
28、物传感器、手提即首先利用免疫技术、生物传感器、手提式色谱或光谱仪进行现场监测，对呈阳性式色谱或光谱仪进行现场监测，对呈阳性的产品送实验室进一步确定。的产品送实验室进一步确定。3.3.样品的前处理样品的前处理 样品前处理的样品前处理的主要目的主要目的是将待测组分从样品是将待测组分从样品基质中分离出来，除去样品中的干扰杂质，基质中分离出来，除去样品中的干扰杂质，将待测组分转换为分析仪器可检测的形式。将待测组分转换为分析仪器可检测的形式。样品前处理通常包括提取、净化、浓缩和衍样品前处理通常包括提取、净化、浓缩和衍生化等过程，方法的设计需考虑到待测组分生化等过程，方法的设计需考虑到待测组分的理化性质、
29、存在状态、样品基质的化学组的理化性质、存在状态、样品基质的化学组成。可能的干扰物类型、处理方法对药物稳成。可能的干扰物类型、处理方法对药物稳定性的影响。定性的影响。1 1）选择提取溶剂）选择提取溶剂应遵循应遵循“相似相溶相似相溶”原理，并满足下列要求：原理，并满足下列要求：对待测组分溶解度大；对待测组分溶解度大；对干扰杂质溶解度小；对干扰杂质溶解度小；与样本基质有较好的相容性；与样本基质有较好的相容性；能有效的释放药物；能有效的释放药物；具有脱蛋白脱脂能力；具有脱蛋白脱脂能力；其他，如沸点适中（其他，如沸点适中（40-8040-80）、黏度小、毒性低）、黏度小、毒性低（尽量少用卤代试剂）、易纯
30、化、价格低廉和易（尽量少用卤代试剂）、易纯化、价格低廉和易于进一步净化。于进一步净化。2 2）常用的提取方法）常用的提取方法（1 1）组织捣碎法）组织捣碎法：又称匀浆提取法。：又称匀浆提取法。一般将样品（固体样品预绞碎）和一般将样品（固体样品预绞碎）和3-53-5倍样品体积倍样品体积的溶剂加入捣碎杯，通过高速搅拌或匀浆数分钟，的溶剂加入捣碎杯，通过高速搅拌或匀浆数分钟，使溶剂与样品的微细颗粒紧密接触、混合，使待使溶剂与样品的微细颗粒紧密接触、混合，使待测组分从固体样品中快速溶出。测组分从固体样品中快速溶出。将样品过滤或离心后收集提取液，残渣重复提取将样品过滤或离心后收集提取液，残渣重复提取1-
31、21-2次，合并提取液进行净化。次，合并提取液进行净化。该法不用加热，速度快，提取效果较好。该法不用加热，速度快，提取效果较好。（2 2）振荡法）振荡法 将样品（固体样品最好用匀浆）和适量将样品（固体样品最好用匀浆）和适量溶剂加入具塞锥形瓶（可加入玻璃珠），溶剂加入具塞锥形瓶（可加入玻璃珠），中速振荡中速振荡20-30min20-30min或更长时间，样品液或更长时间，样品液过滤或离心后移取提取液即可。过滤或离心后移取提取液即可。该法操作简便，可同时对多个样品进行该法操作简便，可同时对多个样品进行提取。提取。（3 3）超临界流体提取）超临界流体提取SFSF 是指在临界温度和临界压力以上，以流体
32、是指在临界温度和临界压力以上，以流体形式存在的物质，这种流体同时具有液体形式存在的物质，这种流体同时具有液体的高密度和气体的低黏度的双重特性，有的高密度和气体的低黏度的双重特性，有很大的扩散系数，高渗透能力和高溶解能很大的扩散系数，高渗透能力和高溶解能力，以其作为溶剂，在高于临界压力条件力，以其作为溶剂，在高于临界压力条件下，萃取分离出混合物，当压力和温度恢下，萃取分离出混合物，当压力和温度恢复到常压和常温时，溶解在复到常压和常温时，溶解在SFSF中的成分即中的成分即立刻以液体状态和气态立刻以液体状态和气态SFSF分开。分开。超临界流体提取超临界流体提取SFSF 国外很多实验室采用本方法进行样
33、品前处理，国外很多实验室采用本方法进行样品前处理，是当前发展最快的分析技术之一是当前发展最快的分析技术之一。其优点是基本上避免使用有机溶剂，简单快其优点是基本上避免使用有机溶剂，简单快速，能选择性的萃取待测组分并将干扰成分速，能选择性的萃取待测组分并将干扰成分减少到最小程度，减少一般提取方法所占用减少到最小程度，减少一般提取方法所占用的玻璃仪器及实验室，实现了操作自动化。的玻璃仪器及实验室，实现了操作自动化。4.4.常用检测方法简介常用检测方法简介1 1）高效液相色谱法（）高效液相色谱法（HPLCHPLC）是国内药物残留检测应用最普遍、最有效的分析方是国内药物残留检测应用最普遍、最有效的分析方
34、法。许多国家都将高效液相色谱法作为国家标准分法。许多国家都将高效液相色谱法作为国家标准分析方法。析方法。广泛用于测定青霉素类、四环素类等抗生素及呋喃广泛用于测定青霉素类、四环素类等抗生素及呋喃类、磺胺类、喹诺酮类等药物的残留检测，灵敏度类、磺胺类、喹诺酮类等药物的残留检测，灵敏度高，检测限低，方法稳定。高，检测限低，方法稳定。常用的是常用的是反相高效液相色谱法（反相高效液相色谱法（RP-HPLCRP-HPLC）绝大多数绝大多数渔药的检测通过渔药的检测通过RP-HPLCRP-HPLC操作方便，易获得尖锐的峰操作方便，易获得尖锐的峰形和良好的分离。根据待测物的极性或酸碱性，通形和良好的分离。根据待
35、测物的极性或酸碱性，通过优化流动相的有机溶剂比例、过优化流动相的有机溶剂比例、pHpH、离子强度、离、离子强度、离子对试剂和柱温可达到分离目的。子对试剂和柱温可达到分离目的。液相色谱液相色谱HP-1100HP-1100液相色谱仪液相色谱仪1.1.贮液罐贮液罐（滤棒，可滤去（滤棒，可滤去颗粒状物质）颗粒状物质）2.2.高压泵高压泵（输液泵）（输液泵）3.3.进样装置进样装置4.4.色谱柱色谱柱分离分离5.5.检测器检测器分析分析6.6.废液出口或组分收集器废液出口或组分收集器 7.7.记录装置记录装置高效液相色谱仪流程图高效液相色谱仪流程图高效液相色谱仪高效液相色谱仪1.1.泵泵：恒压泵：流量精
36、度不稳恒压泵：流量精度不稳 恒流泵：常用恒流泵：常用2.2.进样装置进样装置 1 1）隔膜进样（高分子有机硅胶垫）隔膜进样（高分子有机硅胶垫进样室）进样室）HPLCHPLC系统压力太大，必须停泵进样（早期）系统压力太大，必须停泵进样（早期）2 2）阀进样：不必停泵，六通阀）阀进样：不必停泵，六通阀3.3.色谱柱色谱柱：直径：直径4-6mm4-6mm，柱长，柱长10-30cm10-30cm 柱效评价：色谱系统适应性试验柱效评价：色谱系统适应性试验 柱再生：维护、保养、柱子的冲洗柱再生：维护、保养、柱子的冲洗4.4.检测器检测器 1 1）紫外检测器：适于吸收紫外光的物质。）紫外检测器：适于吸收紫外
37、光的物质。2 2）荧光检测器：只能分析自身发光的物质，灵敏度高。）荧光检测器：只能分析自身发光的物质，灵敏度高。3 3）示差折光检测器：利用折光率的差别，灵敏度低，）示差折光检测器：利用折光率的差别，灵敏度低，温度要求严格。温度要求严格。4 4）电化学检测器）电化学检测器 5 5）化学发光检测器）化学发光检测器反相键合相固定相反相键合相固定相1 1分离机制：疏溶剂理论分离机制：疏溶剂理论 反相反相流动相与溶质排斥力弱，流动相与溶质排斥力弱，2 2固定相：固定相：极性小的烷基键合相极性小的烷基键合相 C C8 8柱，柱，C C1818柱（柱（ODSODS柱）柱）3 3流动相：流动相：极性大的甲醇
38、极性大的甲醇-水或乙腈水或乙腈-水水 流动相极性流动相极性 固定相极性固定相极性 底剂底剂 +有机调节剂（极性调节剂）有机调节剂（极性调节剂）例：水例：水 +甲醇，乙腈，甲醇，乙腈，4 4出柱顺序：极性大的组分先出柱出柱顺序：极性大的组分先出柱 极性小的组分后出柱极性小的组分后出柱5 5适用：非极性适用：非极性-中等极性组分中等极性组分2 2）微生物检测法）微生物检测法3 3）气相色谱法）气相色谱法4 4）原子吸收光谱法）原子吸收光谱法5 5）色谱）色谱-质谱联用技术质谱联用技术6 6）免疫检测法）免疫检测法4.4.常用检测方法简介常用检测方法简介岛津气相色谱岛津气相色谱 GC-2010GC-
39、2010三、渔药残留产生的原因三、渔药残留产生的原因据美国食品与药品管理局据美国食品与药品管理局19701970年年对对本国兽药残留原因的调查结果分析：本国兽药残留原因的调查结果分析：未遵守休药期的占未遵守休药期的占76%76%饲料加工或运输错误的占饲料加工或运输错误的占12%12%盛过药物的贮藏器没有充分清洗干盛过药物的贮藏器没有充分清洗干净的占净的占6%6%使用未经批准的药物占使用未经批准的药物占6%6%19851985年年，美国兽医中心的，美国兽医中心的调查结果则是：调查结果则是：不遵守休药期的占不遵守休药期的占51%51%使用未经批准的药物占使用未经批准的药物占17%17%未作用药记录
40、的占未作用药记录的占12%12%由此可见，不遵守休药期等不规范、不合理由此可见，不遵守休药期等不规范、不合理的用药方法是渔药残留产生的一个重要原因。的用药方法是渔药残留产生的一个重要原因。根据根据我国我国的情况，引起渔药残留的主要原因有：的情况，引起渔药残留的主要原因有：1.1.渔药的不规范使用渔药的不规范使用1 1）不遵守休药期）不遵守休药期 目前水产养殖者目前水产养殖者“休药期休药期”意识比较薄弱意识比较薄弱 我国较多的渔药还缺乏休药期的规定，这也导致了人我国较多的渔药还缺乏休药期的规定，这也导致了人们对休药期的忽视们对休药期的忽视2 2）用药剂量、给药途径等不符合规定）用药剂量、给药途径
41、等不符合规定 如在水体中泼洒抗生素，在污染水体的同时也会使抗如在水体中泼洒抗生素，在污染水体的同时也会使抗生素通过其他生物蓄积后被水生动物摄食，造成药物生素通过其他生物蓄积后被水生动物摄食，造成药物残留。又如药物的超剂量使用，就会使药物代谢、消残留。又如药物的超剂量使用，就会使药物代谢、消除的时间延长，若按原休药期的规定操作，引起残留除的时间延长，若按原休药期的规定操作，引起残留的可能性大大增加。的可能性大大增加。3 3）饲料加工、运送或使用过程中受到药物的污染）饲料加工、运送或使用过程中受到药物的污染 将盛过药物的容器用于贮藏饲料或没清洗干净用于拌将盛过药物的容器用于贮藏饲料或没清洗干净用于
42、拌和饲料造成饲料药物污染和饲料造成饲料药物污染4 4）使用未经批准的药物）使用未经批准的药物 为了获得有效的治愈率和花费较少的成本，使用禁用为了获得有效的治愈率和花费较少的成本，使用禁用药，或原料药（容易导致吸收不完全）等药，或原料药（容易导致吸收不完全）等5 5）未做用药记录）未做用药记录 不做用药记录，往往造成用药混乱，导致使用过渔药不做用药记录，往往造成用药混乱，导致使用过渔药的水产品未满休药期就上市的水产品未满休药期就上市6 6）养殖用水中含有药物）养殖用水中含有药物 使用这种被污染的水，极易造成药物残留。使用这种被污染的水，极易造成药物残留。2.2.管理不完善管理不完善 渔药的生产、
43、使用和销售须受国家有关法律法规的渔药的生产、使用和销售须受国家有关法律法规的制约。如果审批或对上市的渔药监管不严，会出现制约。如果审批或对上市的渔药监管不严，会出现诸如产品不标明主要成分，夸大用途，用法与用量诸如产品不标明主要成分，夸大用途，用法与用量不准确，一药多名和一名多药的现象存在，有的商不准确，一药多名和一名多药的现象存在，有的商品甚至没有批准文号等，造成假劣渔药的使用。品甚至没有批准文号等，造成假劣渔药的使用。我国渔药管理一直归口于兽医部门，但水生生物与我国渔药管理一直归口于兽医部门，但水生生物与畜禽有很大不同，使得管理上出现较多漏洞和盲点。畜禽有很大不同，使得管理上出现较多漏洞和盲
44、点。3.3.技术规范和标准缺乏技术规范和标准缺乏 我国水生动物药动学的研究起步较晚，各方面的研究我国水生动物药动学的研究起步较晚，各方面的研究还较欠缺，使得部分水产品中药物残留限量及休药期还较欠缺，使得部分水产品中药物残留限量及休药期的标准在制定时较为困难，只能借鉴国外标准或其他的标准在制定时较为困难，只能借鉴国外标准或其他陆生动物的标准，未能充分考虑我国国情和水生动物陆生动物的标准，未能充分考虑我国国情和水生动物的特点。的特点。目前尚无较完善、合理的渔药临床应用技术规范，使目前尚无较完善、合理的渔药临床应用技术规范，使得养殖者缺乏渔药正确使用的依据，监控部门没有秉得养殖者缺乏渔药正确使用的依
45、据，监控部门没有秉公执法依据，较难规范养殖者的用药行为。公执法依据，较难规范养殖者的用药行为。由于残留检测对仪器的要求很高，设备投入很大，目由于残留检测对仪器的要求很高，设备投入很大，目前对渔药残留的检测方法尚不健全，较多的检测方法前对渔药残留的检测方法尚不健全，较多的检测方法是借鉴人、兽药的检测方法或参考其他方法，可比性、是借鉴人、兽药的检测方法或参考其他方法，可比性、可靠性均较差。可靠性均较差。4.4.未能形成有效的监控网络未能形成有效的监控网络 目前国家级及省级渔药残留检测机构已基本建成，并目前国家级及省级渔药残留检测机构已基本建成，并投入相应的工作，如国家水产品质量监督检验中心投入相应
46、的工作，如国家水产品质量监督检验中心（青岛）、农业部水产品质量监督检验测试中心（上（青岛）、农业部水产品质量监督检验测试中心（上海）、江苏省水产品质量监督检验测试中心等，在水海）、江苏省水产品质量监督检验测试中心等，在水产品的质量抽样检测中发挥了较大的作用。产品的质量抽样检测中发挥了较大的作用。然而，我国渔药残留监控大多还集中在对水产品质量然而，我国渔药残留监控大多还集中在对水产品质量的抽查方面，如何从源头抓起，从生产、销售及使用的抽查方面，如何从源头抓起，从生产、销售及使用上全方位的监控尚有很多工作要做，这也是渔药残留上全方位的监控尚有很多工作要做，这也是渔药残留产生的关键所在。产生的关键所
47、在。此外我国对水产品安全科学缜密的预警以及对突发事此外我国对水产品安全科学缜密的预警以及对突发事件作出快速有效的反应等方面还不够完善。件作出快速有效的反应等方面还不够完善。四、渔药残留的控制四、渔药残留的控制 我国渔药发展历史相对较短对渔药残留的控我国渔药发展历史相对较短对渔药残留的控制也处于起步阶段，直到上世纪制也处于起步阶段，直到上世纪9090年代才有较年代才有较大的发展。大的发展。19961996年农业部年农业部关于进一步加强渔药管理工作关于进一步加强渔药管理工作的通知的通知，对渔药的产品审批、生产监督、经，对渔药的产品审批、生产监督、经营和管理，进行了严格规范，对我国渔药的健营和管理，
48、进行了严格规范，对我国渔药的健康发展提出了更高的要求，标志着我国渔药的康发展提出了更高的要求，标志着我国渔药的管理进入了一个新的阶段。管理进入了一个新的阶段。19991999年年5 5月一月一20002000年年5 5月，农业部渔业局根据月，农业部渔业局根据中华人民共和国动物及动物源食品中残留物中华人民共和国动物及动物源食品中残留物质监控计划质监控计划的要求，针对我国水产养殖和渔的要求，针对我国水产养殖和渔药使用情况，以及欧盟关于中国水产品准入的药使用情况，以及欧盟关于中国水产品准入的有关要求，对养殖的水生动物进行药残抽样检有关要求，对养殖的水生动物进行药残抽样检查。查。20002000年和年
49、和20012001年水产养殖品渔药残留抽检的部年水产养殖品渔药残留抽检的部分情况表明，我国水产品渔药残留基本上得到分情况表明，我国水产品渔药残留基本上得到了控制。了控制。20022002年对来自江苏、上海等地的中华绒螯蟹、年对来自江苏、上海等地的中华绒螯蟹、鳗鲡等水产品中土霉素、四环素、氯霉素、呋鳗鲡等水产品中土霉素、四环素、氯霉素、呋喃唑酮、喹乙醇、己烯雌酚等残留进行检测，喃唑酮、喹乙醇、己烯雌酚等残留进行检测，其残留均在最高残留限量以下。其残留均在最高残留限量以下。渔药残留的监控是一个系统工程，需要多方面渔药残留的监控是一个系统工程，需要多方面的共同努力，最重要的是从源头抓起，加强渔的共同
50、努力，最重要的是从源头抓起，加强渔药的安全、规范、合理使用，实施渔药生产、药的安全、规范、合理使用，实施渔药生产、销售和使用的科学管理。销售和使用的科学管理。1 1规范用药规范用药 规范用药不仅司以保证养殖的成功，而且直接关系到渔规范用药不仅司以保证养殖的成功，而且直接关系到渔药残留水平和水产品的安全性问题。药残留水平和水产品的安全性问题。规范用药规范用药：就是要从渔药、病原、环境、水生动物和人：就是要从渔药、病原、环境、水生动物和人类健康等方面的因素考虑，有目的、有计划和有效果地类健康等方面的因素考虑，有目的、有计划和有效果地使用渔药，包括正确选药、适宜用药、合理给药和药效使用渔药，包括正确
