1、动物生理学实验动物生理学实验动物生理学常用器械 一.蛙类手术器械 1探针：用于破坏脑和脊髓。2粗剪刀：用于剪骨、肌肉、皮肤等较粗硬组织。3眼科剪；用于剪神经、血管等细软组织。4外科镊：用于夹捏组织和牵提切口处的皮肤。5.眼科镊：用于夹捏细软组织。6玻璃分针：用于分离神经和血管等。7蛙板：用于固定蛙类。二.哺乳类手术器械 8玻璃板：用于制备神经肌肉标本。1.注射器：用于注射药液。2剪毛翦：用于术部剪毛。3手术刀：用于切割皮肤、肌肉和脏器。4止血钳：除用于止血外，有齿的用于提起皮肤，无齿的用于分离皮下组织。5外科镊：用于夹捏较大或较厚的组织，牵拉皮肤切口。6外科剪：用于剪皮肤、皮下组织、肌肉等。7
2、眼科剪：用于剪血管、神经。8眼科镊：用于捏和分离神经、血管等。9，骨钳：用于咬切骨质。10.骨剪；用于剪切骨质。11.颅骨钻：用于钻孔开颅 12.持针钳：用于夹持缝合针。13.缝合针、线：用于缝合皮肤、肌肉脏器等。动物生理学实验动物常用酌麻醉药物动物生理学实验动物常用酌麻醉药物动物生理学实验动物常用酌麻醉药物常用的给药方法 1.经口投药法（口服、灌服）2.注射给药法（皮下、肌肉、腹腔、静脉）常用的动物麻醉方法及注意事项 1.全身麻醉：吸入、注射 2.局部麻醉：点眼、注射 麻醉注意事项 1、麻醉前应正确选用麻醉药品、用药剂量及给药途径。2、密切观察动物麻醉状态及反应，以便准确判断麻醉深度。3、如
3、麻醉较浅，动物出现挣扎或呼吸急促等，需补充麻醉药以维持适当的麻醉。一次补充药量不宜超过原总用药量的五分之一。4、麻醉过程中，应随时保持呼吸道通畅，并注意保温。5、在手术操作复杂、创伤大、实验时间较长或麻醉深度不理想等情况下，可配合局部浸润麻醉或基础麻醉。6、实验中注意液体的输入量及排出量，维持体液平衡，防止酸中毒及肺水肿的发生。实验一实验一 血液的组成血液的组成 实验目的实验目的 了解血液的组成，区别血浆、血清及纤维蛋白。了解血液的组成，区别血浆、血清及纤维蛋白。实验原理实验原理 血液是由液态的血浆和悬浮于血浆中的血细胞组血液是由液态的血浆和悬浮于血浆中的血细胞组成。在血液中加一定量的抗凝剂柠
4、檬酸钠或草酸钾，使血液抗成。在血液中加一定量的抗凝剂柠檬酸钠或草酸钾，使血液抗凝，由于血细胞比重略大于血浆，静置或经过离心，将出现分凝，由于血细胞比重略大于血浆，静置或经过离心，将出现分层。上面无色（或淡黄色）透明的部分为血浆，下面红色部分为层。上面无色（或淡黄色）透明的部分为血浆，下面红色部分为红细胞，在红细胞之上有一薄层灰白红细胞，在红细胞之上有一薄层灰白色部分为白细胞和血小板。下部压紧色部分为白细胞和血小板。下部压紧的血细胞占全血的体积比称为的血细胞占全血的体积比称为红细胞红细胞压积压积，又叫，又叫红细胞比容红细胞比容。若不加抗凝。若不加抗凝剂任血液自然凝固或去纤维蛋白，就剂任血液自然凝
5、固或去纤维蛋白，就可区别血清、血块及纤维蛋白。可区别血清、血块及纤维蛋白。材料及用具材料及用具 鸡，新鲜血，抗凝血，离心管，离心机，小试管刷，烧杯，鸡，新鲜血，抗凝血，离心管，离心机，小试管刷，烧杯，试管架，试管，天平。试管架，试管，天平。方法及步骤方法及步骤制备抗凝血制备抗凝血:常用的抗凝剂为常用的抗凝剂为3.8%柠檬酸钠柠檬酸钠，其用量：，其用量：1ml血需血需5mg柠檬酸柠檬酸钠钠10ml血血50mg柠檬酸钠。（计算柠檬酸钠。（计算50mg柠檬酸钠相当于多少毫升柠檬酸钠相当于多少毫升3.8%柠檬酸钠）柠檬酸钠）100：3.8g=x：50mg 100：3800mg=x：50mg x=(10
6、050)38001.32柠檬酸钠抗凝机理柠檬酸钠抗凝机理：柠檬酸钠与血中的钙离子结合，形成可溶化物而抗：柠檬酸钠与血中的钙离子结合，形成可溶化物而抗凝。其优点是毒性低。凝。其优点是毒性低。方法及步骤方法及步骤1取抗凝血（取抗凝血（1毫升血液加柠檬酸钠毫升血液加柠檬酸钠5毫克；或毫克；或1毫升血液加草酸毫升血液加草酸钾钾2毫克）毫克）10毫升（如抗凝血放置过久，还毫升（如抗凝血放置过久，还须将其充分摇匀），置于有刻度的离心管须将其充分摇匀），置于有刻度的离心管中。将离心管放入电动离心机中，以每分中。将离心管放入电动离心机中，以每分钟钟3000转的速度旋转转的速度旋转2030分钟，使血细分钟，使血
7、细胞完全沉于管底，然后取出离心管观察，胞完全沉于管底，然后取出离心管观察，其其上层为血浆上层为血浆，底层底层为压紧的深红色的为压紧的深红色的红红细胞细胞，中间中间一白色薄层为一白色薄层为白细胞和血小板白细胞和血小板。2 2取新鲜血取新鲜血5050毫升放在小烧杯中，用小试管刷搅动数分钟后，取出毫升放在小烧杯中，用小试管刷搅动数分钟后，取出试管刷，可见试管刷上有许多丝状物缠绕，此即为试管刷，可见试管刷上有许多丝状物缠绕，此即为纤维蛋白纤维蛋白。用水冲。用水冲洗后，观察其颜色及韧性。脱去纤维蛋白的血液称洗后，观察其颜色及韧性。脱去纤维蛋白的血液称“去纤维蛋白血去纤维蛋白血”。3 3取取“去纤维蛋白血
8、液去纤维蛋白血液”1010毫升，依毫升，依1 1法离心后，上层为血清，下层为法离心后，上层为血清，下层为血细胞。观察其颜色及透明度。血细胞。观察其颜色及透明度。4 4取新鲜血取新鲜血1010毫升置试管中，静置片刻。则见有凝固现象发生，浑毫升置试管中，静置片刻。则见有凝固现象发生，浑浊的血变为一条血凝块浊的血变为一条血凝块(凝块称血块凝块称血块)，血块回缩，周围有清亮的液体，血块回缩，周围有清亮的液体析出，该液体为血清。为加速此过程，可先离心几分钟或略加温。析出，该液体为血清。为加速此过程，可先离心几分钟或略加温。注意事项注意事项 使用离心机时，应用天平称量使离心机旋转轴两侧相应的两个套筒及其使
9、用离心机时，应用天平称量使离心机旋转轴两侧相应的两个套筒及其内容物的总重量相等。开动离心机应由慢而快，使转速逐渐达到内容物的总重量相等。开动离心机应由慢而快，使转速逐渐达到30003000转转/分，停止时应由快而慢逐渐停止。分，停止时应由快而慢逐渐停止。要求与思考题要求与思考题1.1.血浆与血清有哪些区别？血浆与血清有哪些区别？2 2写出实验报告，该实验报告采用画图法最直观。写出实验报告，该实验报告采用画图法最直观。渗溶液的抵抗力越大，红细胞在量效关系：先加12滴，观察效应，不明显可再用粗剪剪去膝关节以下部位，便制成了坐骨神经-腓肠肌标本（图B）。实验目的 学习生理学实验基本的组织分离技术；再
10、将标本背面向上，用镊子轻轻提起脊椎，自上而下剪去支配腓肠肌以外的神经分支，直至腘窝（图 A），并搭放在腓肠肌上。实验目的 了解胰岛素、肾上腺素对血糖的影响。兔的胃肠运动活跃且运动形式典用任氏液洗去心内外的余血后，注入新鲜任氏液备用。脊髓蟾蜍的制备：左手持蟾蜍，用食指分开其上下颌，右手用粗剪刀由两侧口裂沿口角至眼后方剪去蟾蜍脑部，保留下颌和脊髓，制备成去脑的脊髓蟾蜍。仔细观察实验动物，记录观标本在任氏液中浸泡的时间不够,兴奋性不稳定；使糖原合成酶的浓度增高，而且还使肝细胞内球磷酸腺苷（cAMP）减部分红细胞溶血的试管：液体下层为红细胞沉淀，上层出现透明淡红（淡用粗剪剪去膝关节以下部位，便制成了坐
11、骨神经-腓肠肌标本（图B）。平滑肌的运动受到神经和体液的调节。反射弧包括感受器、传入神经、反射中枢、传出神经和效应器五部分。实验目的 观察胃肠道的各种运动形式，以及神经和体液因素对胃肠运材料及设备 小白鼠，广口瓶（或干燥器），水检压计，钠石灰，10实验十二 胰岛素、肾上腺素对血糖的影响2、观察相对正常情况下胃肠运动的形式，注意胃肠的蠕动、逆蠕动和实验二实验二 血红蛋白的测定血红蛋白的测定 实验目的实验目的 熟悉用比色法测定血红蛋白的方法。熟悉用比色法测定血红蛋白的方法。实验原理实验原理 血红蛋白测定的方法有多种，最常用而最简单的是比色血红蛋白测定的方法有多种，最常用而最简单的是比色法。由于血红
12、蛋白的颜色，常随结合的氧量多少而改变，因而不利于比法。由于血红蛋白的颜色，常随结合的氧量多少而改变，因而不利于比色，但血红蛋白与稀盐酸作用后，能使亚铁血红素变成不易变色的棕色色，但血红蛋白与稀盐酸作用后，能使亚铁血红素变成不易变色的棕色的高铁血红蛋白，用水稀释后可与标准比色板比色，从而测得血红蛋白的高铁血红蛋白，用水稀释后可与标准比色板比色，从而测得血红蛋白含量。通常以每含量。通常以每100100毫升血液中血红蛋白的克数来表示。毫升血液中血红蛋白的克数来表示。材料及用具 血红蛋白计，抗凝血，吸血管，滤纸，1/10N1/10N盐酸，蒸馏水等。方法及步骤方法及步骤 1.1.实验前先检查血红蛋白计的
13、测定管是否清洁。实验前先检查血红蛋白计的测定管是否清洁。2.2.将将1/10N1/10N盐酸加入测定管中至刻度盐酸加入测定管中至刻度“2 2”或或“10%10%”处。处。3.3.用吸血管吸制备好的抗凝血至刻度用吸血管吸制备好的抗凝血至刻度2020立方毫米处。立方毫米处。4.4.将吸血管内的血液完全移入稀释管内，混合均匀，放置将吸血管内的血液完全移入稀释管内，混合均匀，放置1010分钟。分钟。5.5.把稀释管插入比色架中，使无刻度的两侧面位于空格的前后。把稀释管插入比色架中，使无刻度的两侧面位于空格的前后。6.6.用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水，边滴边抖动手腕摇匀边观察颜用滴管向稀释管内逐滴加入
14、蒸馏水，边滴边抖动手腕摇匀边观察颜色，直至颜色与标准比色柱相同为止。色，直至颜色与标准比色柱相同为止。7.7.从比色箱中取出测定管，读出其中液体表面（凹面）的刻度。稀释从比色箱中取出测定管，读出其中液体表面（凹面）的刻度。稀释管上液面的刻度读数即为每管上液面的刻度读数即为每100ml100ml血液中血红蛋白的克数。血液中血红蛋白的克数。注意事项注意事项 1.1.血液和盐酸作用的时间不可少于血液和盐酸作用的时间不可少于1010分钟，否则，血红蛋白分钟，否则，血红蛋白不能充分转变成高铁血红蛋白，使结果偏低。不能充分转变成高铁血红蛋白，使结果偏低。2.2.加蒸馏水时，开始可以稍多加几滴，随后则不能过
15、快，以加蒸馏水时，开始可以稍多加几滴，随后则不能过快，以防稀释过头。防稀释过头。3.3.比色时最好在自然光下，而不应在黄色光下进行，以免影比色时最好在自然光下，而不应在黄色光下进行，以免影响结果。响结果。4.4.整个实验过程中均应注意避免起泡。整个实验过程中均应注意避免起泡。实验三实验三 红细胞的脆性试验红细胞的脆性试验 实验目的实验目的 红细胞的理化特性及其变化受动物自身状况影响，在临红细胞的理化特性及其变化受动物自身状况影响，在临床上具有检验诊断价值。通过红细胞渗透脆性实验学习测定红细胞对床上具有检验诊断价值。通过红细胞渗透脆性实验学习测定红细胞对不同低渗溶液的渗透抵不同低渗溶液的渗透抵抗
16、力，即测定正常动抗力，即测定正常动物红细胞渗透脆性的物红细胞渗透脆性的方法，理解细胞外液方法，理解细胞外液渗透张力对维持细胞渗透张力对维持细胞正常形态与功能的重正常形态与功能的重要性。要性。实验原理实验原理 正常红细悬浮于等渗的血浆中，若置于正常红细悬浮于等渗的血浆中，若置于高渗溶液高渗溶液内，则红细内，则红细胞会因失水而胞会因失水而皱缩皱缩；反之，置于；反之，置于低渗溶液低渗溶液内，则水进入红细胞，使红细胞内，则水进入红细胞，使红细胞膨胀膨胀。如环境渗透压继续下降，红。如环境渗透压继续下降，红细胞会因继续膨胀而破裂，细胞会因继续膨胀而破裂，释放血红蛋白，称之为释放血红蛋白，称之为溶血溶血。红
17、细胞膜对低渗溶液具有红细胞膜对低渗溶液具有一一定的抵抗力定的抵抗力，红细胞膜对低，红细胞膜对低渗溶液的抵抗力越大，红细胞在渗溶液的抵抗力越大，红细胞在低渗溶液中越不容易发生溶血，低渗溶液中越不容易发生溶血，即红细胞渗透脆性越小。将血液即红细胞渗透脆性越小。将血液滴入不同的低渗溶液中，可检查红滴入不同的低渗溶液中，可检查红细胞膜对于低渗溶液抵抗力的大小。细胞膜对于低渗溶液抵抗力的大小。红细胞脆性试验就是测定红细胞对红细胞脆性试验就是测定红细胞对低于低于0.9%NaCl0.9%NaCl溶液的耐受能力。耐溶液的耐受能力。耐受力高者，红细胞不易破裂，即脆性低，反之，耐受力低者，红细胞易于受力高者，红细
18、胞不易破裂，即脆性低，反之，耐受力低者，红细胞易于破裂，即脆性高。破裂，即脆性高。凡上层溶液开始微呈淡红色，而极大部分红细胞下沉，称开始溶血或凡上层溶液开始微呈淡红色，而极大部分红细胞下沉，称开始溶血或最小最小抗力抗力（红细胞的最小抵抗力）。（红细胞的最小抵抗力）。凡液体呈均匀红色，管底无红细胞下沉，则称完全溶血或凡液体呈均匀红色，管底无红细胞下沉，则称完全溶血或最大抗力最大抗力（红细（红细胞的最大抵抗力）。胞的最大抵抗力）。材料及用具材料及用具 试管，试管架，吸管，试管，试管架，吸管，移液管，抗凝血，移液管，抗凝血，1%NaCl1%NaCl，蒸馏水。，蒸馏水。方法及步骤方法及步骤 1.1.先
19、将试管分别排列在试管架上，按下表把先将试管分别排列在试管架上，按下表把1%NaCl1%NaCl，稀释成不同浓度的低渗溶液，每管溶，稀释成不同浓度的低渗溶液，每管溶液均为液均为2ml2ml。试管号试管号123456789101%NaCl1.401.301.201.101.000.900.800.700.600.50蒸馏水蒸馏水0.600.700.800.901.001.101.201.301.401.50NaCl浓度浓度0.700.650.600.550.500.450.400.350.300.252.2.采取血液，并在上列各管中各加入大小相等的血液1 1滴，然后，用拇指堵住试管口，将试管慢慢倒
20、置一、二次，使血液与管内盐水混合均匀。3.3.在室温中静置在室温中静置1 1小时，观察结果：根据各管中液体颜色和浑浊度的不同，小时，观察结果：根据各管中液体颜色和浑浊度的不同，判断红细胞脆性。判断红细胞脆性。4.4.依上述说明，判定出开始溶血及开始完全溶血的氯化钠浓度百分率。前者依上述说明，判定出开始溶血及开始完全溶血的氯化钠浓度百分率。前者为红细胞的最小抗力，后者为红细胞的最大抗力。为红细胞的最小抗力，后者为红细胞的最大抗力。未发生溶血的试管：液体下层为大量红细胞沉淀，上层为无色透明，表明未发生溶血的试管：液体下层为大量红细胞沉淀，上层为无色透明，表明无红细胞破裂。无红细胞破裂。部分红细胞溶
21、血的试管：液体下层为红细胞沉淀，上层出现透明淡红（淡部分红细胞溶血的试管：液体下层为红细胞沉淀，上层出现透明淡红（淡红棕）色，表明部分红细胞已经破裂，称为不完全溶血。红棕）色，表明部分红细胞已经破裂，称为不完全溶血。红细胞全部溶血的试管：液体完全变成透明红色，管底无红细胞沉淀，表红细胞全部溶血的试管：液体完全变成透明红色，管底无红细胞沉淀，表明红细胞完全破裂，称为完全溶血。明红细胞完全破裂，称为完全溶血。注意事项注意事项 1.1.小试管要干燥，加血的量要一致，只加一滴。小试管要干燥，加血的量要一致，只加一滴。2.2.混匀时，轻轻倾倒混匀时，轻轻倾倒1 12 2次，减少机械震动，避免人为溶血。次
22、，减少机械震动，避免人为溶血。3.3.配制不同浓度的配制不同浓度的NaClNaCl溶液时应力求准确、无误。溶液时应力求准确、无误。实验原理 心脏的特殊传导系统具有自动节律性，但各部分的自动节将肾上腺素或乙酰胆碱分别滴在小肠上，观察小肠运动沿膝关节剪去股骨周围的肌肉，并将股骨刮净，用粗剪刀剪去股骨上端的1/3（保留2/3），制成坐骨神经-小腿的标本（2）完成坐骨神经腓肠肌标本 将脊椎和坐骨神经从腓肠肌上取下，提起腓肠肌的结扎 线剪断跟腱。固定胸套管或针头（用胶布）后，即可开始实验观察和记录。受力高者，红细胞不易破裂，即脆性低，反之，耐受力低者，红细胞易于标本在任氏液中浸泡的时间不够,兴奋性不稳定
23、；平滑肌的运动受到神经和体液的调节。住试管口，将试管慢慢倒置一、二次，使血液与管内盐水混合均匀。标本浸入盛有任氏液的培养皿中备用。4外科镊：用于夹捏组织和牵提切口处的皮肤。8%柠檬酸钠，其用量：1ml血需5mg柠檬酸蛙类手术器械1套，血管钳1把，铁支架和铁夹1个，玻璃杯，玻璃平皿，滤纸（约lcmlcm），小棉球，纱布块，0.每次硫酸刺激后，应及时用清水洗去皮肤上残余的硫酸以免烧伤蟾蜍皮肤，并用纱布擦干以免稀释硫酸溶液。穿透胸腔对胸内负压的影响：用粗针头穿透靠右侧胸腔，使胸膜腔与大气直接相通，形成气胸。凡上层溶液开始微呈淡红色，而极大部分红细胞下沉，称开始溶血或最小/分，停止时应由快而慢逐渐停止
24、。（一）实验准备操作：动物以20%乌拉坦溶液静脉注射，麻醉后俯卧固定于通常以每100毫升血液中血红蛋白的克数来表示。坐骨神经-腓肠肌分离步骤实验目的 了解小肠吸收与肠内容物渗透压间的关系。实验四实验四 红细胞沉降率（血沉）的测定红细胞沉降率（血沉）的测定 实验目的实验目的 了解正常动物红细胞沉降率并掌握其测定方法。了解正常动物红细胞沉降率并掌握其测定方法。实验原理实验原理 红细胞在循环血液中具有悬浮稳定性红细胞在循环血液中具有悬浮稳定性,但在血沉管中但在血沉管中,会因会因重力逐渐下沉。将加有抗凝剂的血液置于一特制的具有刻度的玻管内，重力逐渐下沉。将加有抗凝剂的血液置于一特制的具有刻度的玻管内，
25、置于血沉架上，红细胞因重力作用而逐渐下沉，上层留下一层黄色透明置于血沉架上，红细胞因重力作用而逐渐下沉，上层留下一层黄色透明的血浆。经一定时间的血浆。经一定时间(通常以第通常以第1 1小时末小时末红细胞下降的距离红细胞下降的距离,作为沉降率的指标，作为沉降率的指标，简称为血沉简称为血沉)沉降的红细胞上面的血浆沉降的红细胞上面的血浆柱的高度，即表示红细胞的沉降率。柱的高度，即表示红细胞的沉降率。血浆中的某些特性能改变红细胞的沉血浆中的某些特性能改变红细胞的沉降率降率,因此血沉可作为某些疾病检测的因此血沉可作为某些疾病检测的指标之一。指标之一。材料及用具材料及用具 血沉管，血沉管架，血沉管，血沉管
26、架，洗耳球，抗凝血，干棉球。洗耳球，抗凝血，干棉球。方法及步骤方法及步骤 1.1.制备抗凝血（鸡血）。制备抗凝血（鸡血）。2.2.用清洁、干燥的血沉管，小心地吸血至最高刻度用清洁、干燥的血沉管，小心地吸血至最高刻度“0 0”处，搽去血沉管处，搽去血沉管尖端外周的血液。在吸血之前，须将血液充分摇匀（但不可过份振荡以尖端外周的血液。在吸血之前，须将血液充分摇匀（但不可过份振荡以免红细胞破坏）。吸血时，要绝对避免产生气泡，否则须重做。将吸有免红细胞破坏）。吸血时，要绝对避免产生气泡，否则须重做。将吸有血液的血沉管垂直置于血沉管架上，分别在血液的血沉管垂直置于血沉管架上，分别在1515分钟、分钟、30
27、30分钟、分钟、4545分钟、分钟、1 1小时（小时（4 4只管），检查血沉管上部血浆的高度，以毫米表示之，并将所只管），检查血沉管上部血浆的高度，以毫米表示之，并将所得结果记录于下表：得结果记录于下表：时间时间15min15min30min30min45min 45min 1h1h血沉血沉 注意事项注意事项 1.1.采血后实验应在采血后实验应在2 2小时内完毕，否则血液放置过久，会影小时内完毕，否则血液放置过久，会影响实验结果的准确性。响实验结果的准确性。2.2.沉降管应垂直竖立，不能稍有倾斜，不得有气泡和漏血。沉降管应垂直竖立，不能稍有倾斜，不得有气泡和漏血。3.3.沉降率随温度的升高而加
28、快，故应在室温沉降率随温度的升高而加快，故应在室温18182727时测定时测定为宜。为宜。4.4.血沉管必须清结，如内壁不清洁可使血沉显著变慢。血沉管必须清结，如内壁不清洁可使血沉显著变慢。实验实验 ABO血型的鉴定血型的鉴定实验原理 ABO血型是根据红细胞表面存在的凝集原决定的。存在A凝集原的称为A血型，存在B凝集原的称为B血型。而血清中还存在凝集素。当A凝集原与抗A凝集素相遇或B凝集原与抗B凝集素相遇时，会发生红细胞凝集反应。一般A型标准血清中含有抗B凝集素，B型标准血清中含有抗A凝集素，因此可以用标准血清中的凝集素与被测者红细胞反应，以确定其血型。设计要求：已知甲某的血型为A A型（或B
29、 B型），现在又无标准血清,要求设计一实验来判断乙某的血型？材料及用具 正常人，双凹玻片，采血针，竹签，75%75%酒精棉球，干棉球，玻璃蜡笔（记号笔），尖头滴管。方法与步骤 1.1.在双凹玻片两端分别标上A A和B B，中央标记受试者的号码。2.2.在A A端和B B端的凹面中分别滴上相应的标准血清少许。3.75%3.75%酒精棉球消毒无名指端，用采血针刺破指端，用消毒后的尖头滴管吸取少量血，分别与A A端和B B端凹面中的标准血清混合，放置1 12 2 minmin后，肉眼观察有无凝血现象，肉眼不易分辨的用显微镜观察。4.4.根据凝集现象的有无判断血型。Type AType BType O
30、Type AB anti-Aanti-Banti-Aanti-Banti-Aanti-Banti-Aanti-B注意事项 1.指端、采血针和尖头滴管务必做好消毒准备。做到一人一针，不能混用。使用过的物品（包括竹签）均应放入污物桶，不得再到采血部位采血。2.消毒部位自然风干后再采血，血液容易聚集成滴，便于取血。取血不宜过少，以免影响观察。3.采血后要迅速与标准血清混匀，以防血液凝固。4.在进行交叉配血实验时，一定要防止将主侧配血和次侧配血搞混了。在A端和B端的凹面中分别滴上相应的标准血清少许。实验目的 用结扎的方法来观察蛙的心搏的起点，以及心脏不同部位方法及步骤 将兔麻醉固定后，剖开腹腔（亦可利
31、用实验三十五的胃通过红细胞渗透脆性实验学习测定红细胞对钾2毫克）10毫升（如抗凝血放置过久，还实验对象 蟾蜍或蛙在中枢神经系统的参与下，机体对各种刺激发生的反应过程称为反射。在A端和B端的凹面中分别滴上相应的标准血清少许。2写出实验报告，该实验报告采用画图法最直观。全身麻醉：吸入、注射蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，若将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，其兴奋性在几个小时内可保持不变。比色时最好在自然光下，而不应在黄色光下进行，以免影实验目的 了解胰岛素、肾上腺素对血糖的影响。100ml：20g=xml：3g x=15(ml)负压消失，肺组织萎缩。不能充分转变成高铁血红蛋白，使结
32、果偏低。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经,然后在标本的背侧于股二头肌与半膜肌的肌肉缝内将坐骨神经与周边的结缔组织分离直到腘窝，但不要伤及神经，其分支待以后用手术剪剪断。将兔麻醉仰卧固定于手术台上，剪去颈部和腹部的被毛，沿腹中线切小心剪断组织后，摘出心脏。夹住脊椎骨碎片将坐骨神经轻轻平搭在肌槽的刺激电极上。实验五实验五 蛙心起搏点的观察蛙心起搏点的观察 实验目的实验目的 用结扎的方法来观察蛙的心搏的起点，以及心脏不同部位用结扎的方法来观察蛙的心搏的起点，以及心脏不同部位传导系统的自动节律性高低。传导系统的自动节律性高低。实验原理实验原理 心脏的特殊传导系统具有自动节律性，但各部分的自动节心
33、脏的特殊传导系统具有自动节律性，但各部分的自动节律性高低不同。蛙心的起搏点是静脉窦（哺乳动物是窦房结），自动节律性高低不同。蛙心的起搏点是静脉窦（哺乳动物是窦房结），自动节律性也以静脉窦（窦房结）为最高。正常心脏的每次搏动都由静脉窦律性也以静脉窦（窦房结）为最高。正常心脏的每次搏动都由静脉窦（窦房结）发出，沿心房传至房室结，再由房室结经房室束传至心室肌（窦房结）发出，沿心房传至房室结，再由房室结经房室束传至心室肌肉。若阻断心脏的正常传导，则出现不同的收缩障碍。肉。若阻断心脏的正常传导，则出现不同的收缩障碍。方法及步骤方法及步骤 1.1.认识蛙心各部分的构造和名称：自心脏腹面认识心室、心房、动脉
34、圆锥认识蛙心各部分的构造和名称：自心脏腹面认识心室、心房、动脉圆锥（动脉球）和主动脉。然后用玻璃解剖针向前翻转蛙心，从心脏背面区别静（动脉球）和主动脉。然后用玻璃解剖针向前翻转蛙心，从心脏背面区别静脉窦和心房。脉窦和心房。2.2.观察蛙心各部分收缩的顺序：自心脏背面观察静脉窦、心房、心室三部观察蛙心各部分收缩的顺序：自心脏背面观察静脉窦、心房、心室三部分。观察他们的跳动次序，并记数每分钟的收缩次数。分。观察他们的跳动次序，并记数每分钟的收缩次数。3.3.用小镊子在用小镊子在静脉窦与心房之间静脉窦与心房之间穿一丝线，并进行结扎。此时心房与心室均穿一丝线，并进行结扎。此时心房与心室均停止于舒张状态
35、，而静脉窦依然搏动。停止于舒张状态，而静脉窦依然搏动。记数其频率。待心房和心室又开始收记数其频率。待心房和心室又开始收缩后，记数单位时间内静脉窦和心房、缩后，记数单位时间内静脉窦和心房、心室的收缩频率，两者是否一致？说心室的收缩频率，两者是否一致？说明什么问题？明什么问题？4.4.另取一线，在另取一线，在心房与心室之间心房与心室之间结扎，结扎，观察心脏跳动有何变化？观察心脏跳动有何变化？注意事项注意事项 1.1.结扎前要认真识别心脏各部分的界线。结扎前要认真识别心脏各部分的界线。2.2.结扎的部位要准确地落在相邻部位的交界处，结扎时用力结扎的部位要准确地落在相邻部位的交界处，结扎时用力逐渐增加
36、逐渐增加，直至心房、心室搏动停止。直至心房、心室搏动停止。3.3.蛙心正常起搏点在静脉窦，潜在起搏点在心房。蛙心正常起搏点在静脉窦，潜在起搏点在心房。回答问题：回答问题：1.1.正常蛙心起搏点是什么？传导顺序如何？正常蛙心起搏点是什么？传导顺序如何？2.2.结扎后静脉窦、心房、心室的搏动次数是多少？结扎后静脉窦、心房、心室的搏动次数是多少？实验六实验六 离体蛙心灌流离体蛙心灌流 实验目的实验目的 用离体灌流的方法，观察各理化因素对心脏活动的影响用离体灌流的方法，观察各理化因素对心脏活动的影响重要作用，了解肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经递质对心脏活动的重要作用，了解肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经
37、递质对心脏活动的调节意义。调节意义。实验原理实验原理 维持心脏正常收缩的节律和强度，需要有一个适当的理维持心脏正常收缩的节律和强度，需要有一个适当的理化环境（离子的浓度、比例、溶液的酸碱度、环境温度等），这种环化环境（离子的浓度、比例、溶液的酸碱度、环境温度等），这种环境条件稍有改变，便可影响心脏的正常活动。境条件稍有改变，便可影响心脏的正常活动。材料及设备材料及设备牛蛙，蛙心套管，任氏液，牛蛙，蛙心套管，任氏液，2%氯化钠，氯化钠，1%氯化钙，氯化钙，1%氯化钾，氯化钾，0.01%肾上腺素，肾上腺素，0.01%乙酰胆碱，滴管，细线，铁柱，试乙酰胆碱，滴管，细线，铁柱，试管夹，蛙心夹、生物信号
38、采集系统。管夹，蛙心夹、生物信号采集系统。斯式蛙心插管法手术过程（一）手术关键1.确保斯式蛙心插管前（尖）端进入心室腔2.确保蛙心插管内液体与心室内液体连接畅通3.千万不能损伤静脉窦4.防止漏液。（二）手术操作步骤：用刺蛙针找到枕骨大孔，对蛙行脑、脊髓双刺毁仰卧固定于蛙板上用剪刀剪去胸壁用眼科剪小心地剪开心包膜，暴露心脏把主动脉左支上端穿线红细胞膜对低渗溶液具有一紧张性收缩，以及小肠的分节运动等。描记速度要求每刺激一次神经，都应在记录纸或屏幕上记录（或显示）一次收缩曲线（应为一短线）。如蟾蜍仍有反射活动，表示脑和脊髓破坏不彻底，应重新破坏。度可以通过测定单位时间内二氧化碳的产生量或耗氧量以及呼
39、吸商来间材料和设备 兔，手术台，手术器械，注射（计算50mg柠檬酸钠相当于多少毫升3.实验十 小白鼠能量代谢的测定境条件稍有改变，便可影响心脏的正常活动。实验16 刺激频率对肌肉收缩的影响实验目的 观察胃肠道的各种运动形式，以及神经和体液因素对胃肠运动物表现出四肢伸直，头部后仰，尾巴竖立等现再将探针退回至枕骨大孔，使针尖转向尾端，捻动探针使其刺入椎管，捣毁脊髓。余线则扎于套管的玻璃小钩上，以免心脏滑脱。结扎的部位要准确地落在相邻部位的交界处，结扎时用力逐渐增加，手术台上，在右侧胸部剪毛。用单刺激作用于坐骨神经，可记录到肌肉的单收缩曲线。脊髓蟾蜍的制备：左手持蟾蜍，用食指分开其上下颌，右手用粗剪
40、刀由两侧口裂沿口角至眼后方剪去蟾蜍脑部，保留下颌和脊髓，制备成去脑的脊髓蟾蜍。蛙心正常起搏点在静脉窦，潜在起搏点在心房。使用单脉冲刺激方式,波宽调至并固定在1 ms，刺激强度从零开始逐渐增大；结扎于主动脉分支下预埋一条棉线做一个松结备用。剪口的位置应视蛙心插管前端细小部分的长度而定。轻提主动脉上的结扎线，用眼科剪剪在左 主 动 脉近动脉球结扎处下方一小“V”形向心斜切口，插管内事先装好干净的任氏液，可滴加若干滴肝素（抗凝剂）于其中。将注有任氏液的斯氏套管插入动脉干内，然后左手持左侧血管分支上的结扎线向外拉，右手将蛙心套管送入动脉球将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主动脉,至动脉圆锥时略“向后
41、向下”反复试插，当心室收缩时插入向心室后壁方向插入容易经主动脉瓣入心室腔内（插入过深可因室壁堵住插管下口不通，可稍退）。插管若成功进入心室，可见下列四者之一可确定：管内液面随心缩而升舒而降血若“喷泉”涌入插管用滴管吹之心室膨大手指压室壁可触及有插管抵触。此处一定要扎紧且不能松脱，以防漏液。即将已作虚结之丝线把血管和套管固定起来余线则扎于套管的玻璃小钩上，以免心脏滑脱。提起套管，剪断与心脏相连的血管和组织(注意勿损伤静脉窦及两心房)小心剪断组织后，摘出心脏。用任氏液洗去心内外的余血后，注入新鲜任氏液备用。通常以每100毫升血液中血红蛋白的克数来表示。去除感受器对反射的影响：围绕左侧小腿将皮肤作一
42、环形切口，由此将切口以下小腿皮肤剥去（即去除皮肤对酸刺激的感受器），再用1硫酸溶液浸沾没有皮肤的足趾，观察屈腿反射是否出现。刺穿胸腔家兔出现什么变化？在血液中加一定量的抗凝剂柠檬酸钠或草酸钾，使血液抗按图装置小白鼠代谢器。1/10N盐酸，蒸馏水等。避免蟾蜍体表毒液和血液污染标本，压挤、损伤和用力牵拉标本，不可用金属器械触碰神经干。观察他们的跳动次序，并记数每分钟的收缩次数。剪去其它不用的组织 操作从脊柱向小腿方向进行。小心剪断组织后，摘出心脏。另取一线，在心房与心室之间结扎，标记不同的收缩曲线，然后进行剪辑、粘贴（或打印）。假定小白鼠年食为混合食物，其呼吸商为0.实验目的 了解小肠吸收与肠内容
43、物渗透压间的关系。渗溶液的抵抗力越大，红细胞在由于皮肤感受器在环形切口之上仍然存在，这时可以观察到屈腿反射。材料及设备 兔（或小白鼠），胰岛素，0.用单刺激作用于坐骨神经，可记录到肌肉的单收缩曲线。用粗剪剪去膝关节以下部位，便制成了坐骨神经-腓肠肌标本（图B）。若两次刺激的间隔短于肌肉收缩的缩短期，使后一刺激落在前一次刺激引起收缩的缩短期内，则出现一次收缩正在进行接着又产生一次收缩，收缩的幅度高于单收缩的幅度（图1）。四、实验装置与连接(二二)实验项目实验项目1.1.正常心脏收缩的曲线：用滴管向蛙心套管中注入正常心脏收缩的曲线：用滴管向蛙心套管中注入1 13 3毫升任氏液（以后毫升任氏液（以后
44、的溶液量均应与第一次相同）。注意观察心跳频率和收缩强度。的溶液量均应与第一次相同）。注意观察心跳频率和收缩强度。2.2.钠离子的影响：向套管中加入钠离子的影响：向套管中加入1%1%氯化钠数滴，并与管中溶液混均，同时氯化钠数滴，并与管中溶液混均，同时做一记号。观察心脏活动有何变化？待心脏活动发生明显改变时，应迅速做一记号。观察心脏活动有何变化？待心脏活动发生明显改变时，应迅速吸出套管内的溶液，并添加新鲜的任氏液进行洗涤，反复数次，直至心脏吸出套管内的溶液，并添加新鲜的任氏液进行洗涤，反复数次，直至心脏恢复正常活动后，再加入其它溶液（以下实验皆同此）。恢复正常活动后，再加入其它溶液（以下实验皆同此
45、）。3.3.依照步骤依照步骤2 2的方法分别向套管中加入氯化钙、氯化钾、肾上腺素、乙酰胆的方法分别向套管中加入氯化钙、氯化钾、肾上腺素、乙酰胆碱，观察心脏活动有何变化？以冰块、碱，观察心脏活动有何变化？以冰块、4040热水接触静脉窦，观察心跳频热水接触静脉窦，观察心跳频率有何变化。率有何变化。4.4.用生物信号采集系统记录实验全过程，并保存打印附于实验报告上。用生物信号采集系统记录实验全过程，并保存打印附于实验报告上。1.成功插管：注意勿剪破心脏血管、勿结扎静脉窦。2.及 时 抢 救：如 加 入KCl 和Ach 后，要 及 时 冲 洗 避 免过度抑制而死亡。3.前后对照：每步加药前均应设有药前
46、“对照”。4.液面相同：末次冲洗时应调整液面相同，才具有 可比性。【注意事项】5.避免污染：吸干净液与脏液的两吸管不要混用避免残液影响。6.量效关系：先加12滴，观察效应，不明显可再补加。7.冲洗湿润：冲洗3次以上，常滴液于心脏表面使之湿润。8.指标标记：观察指标为心率和心收缩力;每步骤均应标记。讨论讨论 上述各种因素对心脏活动有什么影响？为什么？上述各种因素对心脏活动有什么影响？为什么？实验七 胸内负压测定胸内负压测定【实验目的实验目的】验证胸内负压的存在，了解胸内压产生的原理以及一些因素的影响，以加深对验证胸内负压的存在，了解胸内压产生的原理以及一些因素的影响，以加深对呼吸运动的产生及调节
47、的理解。呼吸运动的产生及调节的理解。实验原理实验原理 胸内压系指胸膜腔内的压力，通常低于大气压，故也称为胸内压系指胸膜腔内的压力，通常低于大气压，故也称为胸内负压。胸内负压主要由肺的弹性回缩力所产生，并随呼吸运动而变胸内负压。胸内负压主要由肺的弹性回缩力所产生，并随呼吸运动而变化，吸气时负压增大，呼气时负压减小。胸腔内负压的存在是保持持呼化，吸气时负压增大，呼气时负压减小。胸腔内负压的存在是保持持呼吸运动正常进行的必要条件，穿刺胸腔，破坏胸膜腔的密闭性，则胸内吸运动正常进行的必要条件，穿刺胸腔，破坏胸膜腔的密闭性，则胸内负压消失，肺组织萎缩。负压消失，肺组织萎缩。材料和设备材料和设备 兔，手术
48、台，手术器械，注射兔，手术台，手术器械，注射针头，橡皮管，水检压计，针头，橡皮管，水检压计，20%20%乌拉坦溶液。乌拉坦溶液。方法及步骤方法及步骤动物全身麻醉：麻醉药选择动物全身麻醉：麻醉药选择20%的乌拉坦；麻醉药剂量的乌拉坦；麻醉药剂量11.5g/Kg；麻醉方法：家兔耳缘静脉注射。若麻醉方法：家兔耳缘静脉注射。若2千克体重的家兔应注射千克体重的家兔应注射20%乌拉坦的乌拉坦的量为量为1015ml。100ml：20g=xml：2g x=10(ml)100ml：20g=xml：3g x=15(ml)（一）实验准备操作：（一）实验准备操作：动物以动物以20%乌拉坦溶液静脉注射，麻醉后俯卧固定于
49、乌拉坦溶液静脉注射，麻醉后俯卧固定于手术台上，在右侧胸部剪毛。再于右侧胸部第四肋间切开皮肤手术台上，在右侧胸部剪毛。再于右侧胸部第四肋间切开皮肤1.01.5厘厘米，。然后由第三与第四或第四与第五肋间插入以橡皮管连接水检压计（或压力换能器）的胸米，。然后由第三与第四或第四与第五肋间插入以橡皮管连接水检压计（或压力换能器）的胸套管或特制的粗注射针头，深度以水检压计浮标随呼吸明显波动为止；固定胸套管或针头套管或特制的粗注射针头，深度以水检压计浮标随呼吸明显波动为止；固定胸套管或针头（用胶布）后，即可开始实验观察和记录。（用胶布）后，即可开始实验观察和记录。（二）实验项目（二）实验项目1.1.胸内负压
50、的观察：当胸套管或注射针头插入胸膜腔时即可见水检压计与胸胸内负压的观察：当胸套管或注射针头插入胸膜腔时即可见水检压计与胸膜腔相通的一侧液面上升，而与空气相通的一侧液面下降，表明胸膜腔内的膜腔相通的一侧液面上升，而与空气相通的一侧液面下降，表明胸膜腔内的压力低于大气压，为负压。压力低于大气压，为负压。2.2.胸内负压随呼吸运动的变化：观察记录吸气和呼气时的胸内负压有什么变化。胸内负压随呼吸运动的变化：观察记录吸气和呼气时的胸内负压有什么变化。3.3.增大呼吸无效腔对胸内负压的影响：捏住家兔鼻孔造成呼吸运动加强，观增大呼吸无效腔对胸内负压的影响：捏住家兔鼻孔造成呼吸运动加强，观察对胸内负压有什么影
