1、第 1 页 共 7 页河南师范大学 20202021 学年第 1 学期现代分子生物学考试试卷（现代分子生物学考试试卷（B 卷）卷）考试范围：现代分子生物学；满分：100 分；考试时间：120分钟院/系：_专业：_姓名：_ 考号：_题号一二三四五总分得分注意事项：1答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息2请将答案正确填写在答题卡上第第 I 卷（选择题）卷（选择题）评卷人得分一、选择题（共一、选择题（共 5 题，每题题，每题 2 分，共分，共 10 分）分）1（）是通常与其调控的基因具有一段距离的 DNA 顺式作用元件。A启动子B终止子C增强子D调节子2下列哪个操纵子可能不含有衰减子序列？（）A
2、trp 操纵子Blac 操纵子Chis操纵子Dphe 操纵子3下面哪项不属于原核生物操纵子的结构？（）A启动子B终止子C操纵基因D内含子4我国批准的第一个肿瘤基因治疗药物是针对下列哪一种基因的？（）Ap21Bp16Cp53第 2 页 共 7 页Dp395有关穿梭质粒载体的描述正确的是（）。A在不同的宿主中具有不同的复制机制B在不同的宿主细胞中运用不同的复制起点C在不同的宿主细胞中运用不同的复制酶D在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率第第 II 卷（非选择题）卷（非选择题）评卷人得分二、填空题（共二、填空题（共 5 题，每题题，每题 3 分，共分，共 15 分）分）6测定蛋白质分子质量的方法有_
3、、_和_。7DNA 复制时的 RNA 引物是由_的_活性切除的。8在 DNA 合成过程中改变 DNA 分子超螺旋构型的酶是_。9基因工程是_年代发展起来的遗传学的一个分支学科。基因工程技术的诞生，使人们从简单地运用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代，走向_的时代。10根据操纵子对能调节它们的小分子的应答反应的性质，可分为_操纵子和_操纵子。评卷人得分三、判断题（共三、判断题（共 5 题，每题题，每题 2 分，共分，共 10 分）分）11DNA 修复系统进行错配修复时，根据子链 DNA 甲基化而母链未甲基化来判断子链和母链，从而修复错配的碱基。（）12根据遗传连锁作
4、图把基因定位在基因组中是定位克隆的第一步，它为分离特定的人的基因提供了一个直接而快速的方法。（）13阻遏作用和诱导作用的解释都是以乳糖操纵子学说为基础。（）14SPO1 是枯草杆菌的噬菌体，它通过对 RNA pol因子的更换实现其早、中、晚基因表达的时序控制，这和 T7 噬菌体的表达方式非常类似。（）15蛋白质的磷酸化和去磷酸化是可逆反应，该可逆反应是由同一种酶催化完成的。（）评卷人得分四、名词解释（共四、名词解释（共 5 题，每题题，每题 5 分，共分，共 25 分）分）第 3 页 共 7 页16DNA 文库17基因表达调控18负调控19第二信使20酵母双杂交系统（yeast two-hyb
5、ird system）评卷人得分五、简答题（共五、简答题（共 5 题，每题题，每题 8 分，共分，共 40 分）分）21真核生物的初级转录产物必须经过哪些加工才能成为成熟 mRNA，以用做蛋白质合成的模板？22说出凝胶滞缓实验的原理与应用。23如何确定影响某表型的相关基因？24为什么真核生物中转录与翻译无法耦联？25简述染色体端粒的结构与功能。第 4 页 共 7 页【标准答案】第第 I 卷（选择题）卷（选择题）一、选择题（共一、选择题（共 5 题，每题题，每题 2 分，共分，共 10 分）分）1C2B3D4C5B第第 II 卷（非选择题）卷（非选择题）二、填空题（共二、填空题（共 5 题，每题
6、题，每题 3 分，共分，共 15 分）分）6凝胶过滤层析；SDS-PAGE；沉降分析法7DNA 聚合酶；53外切核酸酶8拓扑异构酶920 世纪 70；按照人们的需要定向地改造和创造有新的遗传性状的品种10可诱导的；可阻遏的第 5 页 共 7 页三、判断题（共三、判断题（共 5 题，每题题，每题 2 分，共分，共 10 分）分）11错12错13对14错15错四、名词解释（共四、名词解释（共 5 题，每题题，每题 5 分，共分，共 25 分）分）16DNA 文库是指某生物基因组中所有可表达的基因片段，经 mRNA 反转录后获得相应的 cDNA 的集合，将这些 cDNA的集合分别与克隆载体重组，贮存
7、在一种受体菌克隆子群体之中，这样群体称为 cDNA文库。由于 cDNA 文库包含了该生物所有的可表达基因片段，因此可随时筛选出需要的目的基因片段。不必再通过 PCR 制备，可以节省时间和成本，提高效率。17基因表达调控是指对从 DNA 到蛋白质或功能 RNA 的过程的调节。所有生物的信息，都是以基因的形式储存在细胞内的 DNA（或 RNA）分子中，随着个体的发育，DNA分子能有序地将其所承载的遗传信息，通过密码子-反密码子系统，转变成蛋白质或功能RNA 分子，执行各种生理生物化学功能。这个从 DNA 到蛋白质或功能 RNA 的过程被称之为基因表达，对这个过程的调节称之为基因表达调控。18负调控
8、是指阻遏蛋白与操纵基因的结合，阻止 RNA 聚合酶对操纵子结构基因的转录。原核生物基因的表达一般受到蛋白质的抑制，其转录被降低。抑制作用是通过阻遏蛋白与操纵序列的结合实现的。阻遏蛋白与操纵序列的结合受一些小分子物质的调节。19第二信使是指激素与受体结合后，靶细胞内有膜外激素信号转导的某些小分子化合物，如 cAMP、cGMP、IP3、DAG、Ca2等，在激素作用中起信息传递和放大作用。20酵母双杂交系统是指利用杂交基因通过激活报道基因的表达探测蛋白与蛋白的相互作用的一种方法。真核生物转录因子具有 DNA 结合结构域（BD）和转录激活结构域（AD），这两个结构域分开时仍分别具有功能，但不能激活转录
9、，只有它们以适当途径在空间上较为接近时，才能重新具有转录因子活性，并激活报道基因表达。五、简答题（共五、简答题（共 5 题，每题题，每题 8 分，共分，共 40 分）分）21真核生物的初级转录产物 RNA 转录后的加工有四种形式：（1）5端加帽转录产物的 5端通常要装上甲基化的帽子；有的转录产物 5端有多余的顺序，则需切除后再装上帽子。（2）3端加 poly（A）尾巴转录产物的 3端通常由 poly（A）聚合酶催化加上一段多聚 A；有的转录产物的 3端有多余顺序，则需切除后再加上尾巴。装 5端帽子和 3端尾巴均可能在剪接之前就已完成。第 6 页 共 7 页（3）修饰tRNA 分子中稀有核苷酸较
10、多，其修饰很频繁。例如对某些碱基进行甲基化等。（4）剪接将 mRNA 前体上的居间顺序切除，再将被隔开的蛋白质编码区连接起来。剪接过程是由细胞核小分子 RNA（如 U1 snRNA）参与完成的，被切除的居间顺序形成套索状。22（1）凝胶滞缓实验的原理蛋白质与 DNA 结合后将大大增加其相对分子质量，而凝胶电泳中 DNA 朝正电极移动的距离与其相对分子质量的对数成正比，因此，没有结合蛋白的 DNA 片段跑得快，而与蛋白质形成复合物的 DNA 由于受到阻滞而跑得慢。（2）应用用于研究与蛋白质相结合的 DNA 序列的特异性；用于 DNA 定性和定量分析；用于检测 RNA 结合蛋白，并可通过加入特异性
11、的抗体来检测特定的蛋白质，并可进行未知蛋白的鉴定。23可以采用基因图位克隆的方法来确定影响某表型的相关基因。图位克隆分离基因是根据目的基因在染色体上的位置进行，无需预先知道基因的 DNA 序列及其表达产物的有关信息，通过分析突变位点与已知分子标记的连锁关系来确定突变表型的遗传基础。操作步骤如下：（1）通过诱变获得表型并建立遗传分离群体。（2）筛选与目标基因紧密连锁的分子标记，利用目标基因的近等基因系或分离群体分组分析法（BSA）进行连锁分析，筛选出目标基因所在局部区域的分子标记。（3）采用遗传作图和物理作图法对目标基因部位精细定位和作图。（4）构建含有大插入片段的基因组文库。常用的载体有柯斯质
12、粒，酵母人工染色体（YAC）以及 BAC，PAC 等几种以细菌为寄主的载体系统。（5）用与目标基因连锁的分子标记为探针筛选基因组文库，得到阳性克隆。（6）构建目的基因区域的跨叠克隆群。以阳性克隆的末端作为探针基因组文库，并进行染色体步行或登陆，直到获得具有目标基因两侧分子标记的大片段跨叠群。（7）通过亚克隆获得含有目的基因的小片段克隆。（8）通过遗传转化和功能互补验证最终确定目标基因的碱基序列。24（1）真核生物中的 mRNA 开始合成时，是不成熟的 hnRNA，需要通过一系列加工过程才能成熟以后才能成为成熟的 mRNA。这些过程包括：内含子的剪接、5端加帽子结构、3端加尾等。（2）真核生物
13、mRNA 是在细胞核内合成的，而翻译是在细胞质中进行的，因此，mRNA 只有被运送到细胞质部分，才能翻译生成蛋白质。第 7 页 共 7 页因此，真核生物中转录与翻译无法偶联。25（1）染色体端粒的结构端粒是指真核细胞线形染色体末端的一种特殊结构，由 DNA 重复序列和端粒结合蛋白构成的一种核蛋白复合物。不同种类细胞的端粒 DNA 序列并不相同，大多数长 58bp；构成端粒序列的两条链中一条富含 G，另一条富含 C；富含 G的那条链 5-3指向染色体末端，且此链比富含 C 的链在其 3末端尾处可多出 1216 个核苷酸的长度，弯曲成帽状。富含 G 的链多出的十几个核苷酸能呈现分子内的简单折叠结构
14、，在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳时的移动非常快，且由于分子内折叠形式的不一致性而能出现多条电泳带型。这种分子内折叠以非 Watson-Crick 碱基配对的 G-G 配对方式连接而形成，从而可增加其稳定性。（2）染色体端粒的功能稳定染色体末端、避免染色体重组。真核细胞生物端粒与核膜及核基质中某些蛋白有密切关系。端粒 DNA 与核蛋白的相互作用以“TTAGGG”结构附着于细胞核基质，有效地保证染色体末端免于被化学修饰或被降解。防止染色体复制时缩短。防止染色体复制时末端丢失，使真正的遗传信息得到完整复制。细胞分裂、染色体半保留复制时，存在染色体末端缺失现象。而端粒的作用就是起到缓冲作用，从而防止染色体在复制过程中发生缺失或形成不稳定结构。在很多细胞中决定细胞染色体的位置、转录表达和异染色质的形成，端粒往往靠近核膜，并 180远离着丝粒，端粒介导了染色体同源或非同源区之间的短暂联系。可补偿滞后链 DNA 链。5端在复制过程中消除 RNA 引物后造成的空缺。端粒在决定细胞的寿命中起重要作用。组织培养的细胞证明，经过多代培养老化的细胞端粒变短，染色体也变得不稳定。
