大二生化实验张蕾实验十三 动物组织核酸的分离、鉴定和含量测定.pptx

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RNA的结构的结构组成核酸的戊糖有两种。组成核酸的戊糖有两种。DNA所含的糖为所含的糖为 -D-2-脱氧核糖;脱氧核糖;RNA所含的糖则为所含的糖则为-D-核糖。核糖。OHHOHHOHOHHHOCH2HOCH2OHHOHHHOHHD-核糖D-2-脱氧核糖加热条件下:加热条件下:D核糖浓盐酸苔黑酚核糖浓盐酸苔黑酚 绿色绿色D2脱氧核糖酸二苯胺脱氧核糖酸二苯胺 蓝紫色蓝紫色 DNA在酸性条件下加热,其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂,生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸,而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成-羟基-酮基戊糖,与二苯胺试剂反应生成蓝色物质,在595nm波长处有最大吸收。DNA在40400g范围内,光吸收与DNA的浓度成正比。在反应液中加入少量乙醛,可以提高反应灵敏度。注:注:待测溶液中的待测溶液中的DNA含量应调整至标准曲线的可读范围内。含量应调整至标准曲线的可读范围内。样品样品1和样品和样品2为不同稀释倍数的为不同稀释倍数的DNA溶液。溶液。按上表加完各试剂后,充分混匀。于60水浴中保温1h,冷却后于595nm波长处以0管为空白调零,测定各管光密度(OD595nm)。以DNA的含量为横坐标,光密度(吸收值)为纵坐标,绘制标准曲线。

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