1、遗传学实验实验九实验九姊妹染色单体分染技术姊妹染色单体分染技术（学时）一、教学基本要求一、教学基本要求1、了解姊妹染色单体差别染色技术了解姊妹染色单体差别染色技术的原理的原理 2、掌握制作标本的方法。掌握制作标本的方法。二、教学内容二、教学内容 目的和要求目的和要求 通过这一实验，要求学生了解姊通过这一实验，要求学生了解姊妹染色单体差别染色技术的原理和妹染色单体差别染色技术的原理和制作标本的方法，并通过制作标本的方法，并通过标本的观察，掌握计数标本的观察，掌握计数方法。方法。实验原理 在复制过程中，核苷的类似物溴脱氧在复制过程中，核苷的类似物溴脱氧尿嘧啶核苷（尿嘧啶核苷（BrdU）能代替胸腺嘧
2、啶进入到新合成）能代替胸腺嘧啶进入到新合成的链中，植物根尖在含有适当的链中，植物根尖在含有适当BrdU的培养液的培养液中生长二个分裂周期后，中期染色体的两条染色单体中生长二个分裂周期后，中期染色体的两条染色单体在化学组成上有了差别，一条染色单体的两条在化学组成上有了差别，一条染色单体的两条链均为新合成的，因此位完全由链均为新合成的，因此位完全由BrdU代替，另一代替，另一条染色单体的一条链是新合成的，所以只有一条染色单体的一条链是新合成的，所以只有一条中含有条中含有BrdU，这样的细胞经染色后，一条，这样的细胞经染色后，一条为深染，一条为淡染，所以称之为姊妹染色单体的差为深染，一条为淡染，所以
3、称之为姊妹染色单体的差别染色。本实验运用这一原理，利用蚕豆根尖作为材别染色。本实验运用这一原理，利用蚕豆根尖作为材料，经过适当处理制片，可观察到姊妹染色单体分染料，经过适当处理制片，可观察到姊妹染色单体分染现象。现象。材料和方法 1、蚕豆发芽处理。、蚕豆发芽处理。2、BrdU、青霉素中黑暗培养。、青霉素中黑暗培养。3、秋水仙素溶液预处理，卡诺氏、秋水仙素溶液预处理，卡诺氏液固定，液固定，HCL溶液离解，溶液离解，Schiff 试剂染色。试剂染色。4、压片观察、压片观察 作 业 1、制所观察到的色差染色单体图制所观察到的色差染色单体图象。象。2、计算计算SCE的频率。的频率。3 3、思考：本实验的材料掺入思考：本实验的材料掺入BrdUBrdU时为什么要在全黑的条件下时为什么要在全黑的条件下培养？培养？
