1、遗传学实验遗传学实验实验七实验七 果蝇的三点测交实验果蝇的三点测交实验(2学时)一、一、教学基本要求教学基本要求 1、掌握实验果蝇的杂交技术,并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。2、掌握绘制遗传学图的原理和方法 二、教学内容二、教学内容 目的和要求目的和要求 通过这一实验要求学生掌握通过这一实验要求学生掌握绘制遗传学图的原理和方法,学绘制遗传学图的原理和方法,学会对实验结果的数据处理方法,会对实验结果的数据处理方法,进一步加深对重组值,遗传学图,进一步加深对重组值,遗传学图,双交换值,并发率和干涉等概念双交换值,并发率和干涉等概念理解。理解。实验原理 本实验通过对同一染色体上三个非等本实验通
2、过对同一染色体上三个非等位基因的交换行为来验证基因在染色体位基因的交换行为来验证基因在染色体上呈直线排列。先用野生型果蝇与三隐上呈直线排列。先用野生型果蝇与三隐性果蝇(白眼、小翅、焦刚毛)杂交,性果蝇(白眼、小翅、焦刚毛)杂交,制成三因子杂种,再把雌性杂种与三隐制成三因子杂种,再把雌性杂种与三隐性个体测交,在测交后代中由于基因间性个体测交,在测交后代中由于基因间的交换可得到种不同的表型,经过数的交换可得到种不同的表型,经过数据处理,一次实验便可测出三个连锁基据处理,一次实验便可测出三个连锁基因在染色体上的距离和顺序,绘制出连因在染色体上的距离和顺序,绘制出连锁图。锁图。材料和方法 野生型果蝇(
3、长翅、直刚毛、红眼,、)三隐性果蝇(小翅、焦刚毛、白眼,m、sn3、w)实验说明 1性状特征:三隐性果蝇(性状特征:三隐性果蝇(m sn3 w)个体)个体的动翅膀比野生型的翅短些,翅仅长至腹端,的动翅膀比野生型的翅短些,翅仅长至腹端,称小翅(称小翅(m),刚毛是卷曲的,称焦刚毛),刚毛是卷曲的,称焦刚毛(sn3)或卷刚毛,眼睛是白色的()或卷刚毛,眼睛是白色的(w)。这)。这三个基因都在三个基因都在X染色体上。染色体上。2交配方式:把三隐性雌蝇与野生型雄蝇杂交配方式:把三隐性雌蝇与野生型雄蝇杂交,所得子一代的雌蝇是三因子杂种,子一交,所得子一代的雌蝇是三因子杂种,子一代雌、雄果蝇相互交配,得测
4、交后代。子一代雌、雄果蝇相互交配,得测交后代。子一代的雌蝇表型是野生型,雄蝇是三隐性。得代的雌蝇表型是野生型,雄蝇是三隐性。得到的测交后代其中多数个体与原来亲本相同。到的测交后代其中多数个体与原来亲本相同。同时也会出现少量与亲本不同的个体,称重同时也会出现少量与亲本不同的个体,称重组型。组型。实验步骤 1收集三隐性个体的处女蝇,培养在培养瓶中,每瓶5-6只。2杂交:挑出野生型雄蝇放到处女蝇瓶中去杂交,每瓶5-6只。37-8天以后,出现蛹。倒出亲本。4再4-5天后,蛹孵化出子一代(F1)成蝇,可以观察到F1雌蝇全部是野生型表型,雄蝇都是三隐性。5从从F1代中选代中选20-30对果蝇,放到新的培养
5、瓶对果蝇,放到新的培养瓶中继续杂交。每瓶中继续杂交。每瓶5-6对。对。67-8天后,蛹出现,倒去亲本。天后,蛹出现,倒去亲本。7再再4-5天后,蛹孵化出子二代(天后,蛹孵化出子二代(F2)成蝇,)成蝇,开始观察。开始观察。8把把F2果蝇倒出麻醉,放在白瓷板上,用实体果蝇倒出麻醉,放在白瓷板上,用实体显微镜检查眼色、翅形、刚毛。各类果蝇分别显微镜检查眼色、翅形、刚毛。各类果蝇分别计数。检查过的果蝇倒掉。过计数。检查过的果蝇倒掉。过2天后再检查第二天后再检查第二批,连续检查批,连续检查8-10天,即天,即3-4次。在次。在25下,自下,自第一批果蝇孵化出第一批果蝇孵化出10天内是可靠的,再迟天内是可靠的,再迟F3代代可能会出现了。要求至少统计可能会出现了。要求至少统计250只果蝇。只果蝇。作 业 1、分别以个人、小组、大组为单位、分别以个人、小组、大组为单位整理数据,计算重组值、并发率,整理数据,计算重组值、并发率,作连锁图。作连锁图。2 2、分析总结影响试验结果的因素。、分析总结影响试验结果的因素。实验原理实验原理 野生型(直刚毛、红眼、长翅)(直刚毛、红眼、长翅)雌性雌性 雄性雄性三隐性果蝇(小翅、白眼、焦刚毛)(小翅、白眼、焦刚毛)雌性雌性 雄性雄性